Bestemmelse af proteinuri ved analyse af urin. Varianter af proteinuri, deres karakteristiske egenskaber Selektiv proteinuri bestemmes for at vurdere den funktionelle tilstand

Proteinuri er udskillelse af protein i urinen ud over normale værdier. Dette er det mest almindelige tegn på nyreskade. Normalt udskilles der ikke mere end 50 mg protein i urinen om dagen, bestående af filtrerede plasmaproteiner med lav molekylvægt.

• Nederlaget for nyretubuli (interstitiel nefritis, tubulopatier) fører til en krænkelse af reabsorptionen af ​​det filtrerede protein og dets udseende i urinen.
• Hæmodynamiske faktorer - hastigheden og volumen af ​​kapillær blodgennemstrømning, balancen mellem hydrostatisk og onkotisk tryk er også vigtige for udseendet af proteinuri. Permeabiliteten af ​​kapillærvæggen øges, hvilket bidrager til proteinuri, både med et fald i blodgennemstrømningshastigheden i kapillærerne og med glomerulær hyperperfusion og intraglomerulær hypertension. Den mulige rolle af hæmodynamiske ændringer bør tages i betragtning ved evaluering af proteinuri, især forbigående, og hos patienter med kredsløbssvigt.

Symptomer og diagnose af proteinuri

Forbundet med sygdomme proteinuri er opdelt i funktionel og patologisk.

Funktionel proteinuri observeret hos patienter med raske nyrer. Funktionel proteinuri er lav (op til 1 g / dag), normalt forbigående, isoleret (der er ingen andre tegn på nyreskade), sjældent kombineret med erytrocyturi, leukocyturi, cylindruri. Der er flere typer funktionel proteinuri:

• Ortostatisk. Det forekommer hos unge 13-20 år gamle, overstiger ikke 1 g / dag, forsvinder i liggende stilling. Denne type proteinuri diagnosticeres ved hjælp af en ortostatisk test - patienten samler den første morgenportion urin uden at komme ud af sengen og udfører derefter en lille fysisk aktivitet (at gå op ad trappen), hvorefter han samler den anden portion urin til analyse . Fraværet af protein i den første og tilstedeværelsen i den anden portion urin indikerer ortostatisk proteinuri.
• Feberagtig (op til 1-2 g / dag). Det observeres i febrile forhold, oftere hos børn og ældre, forsvinder med normalisering af kropstemperaturen, det er baseret på en stigning i glomerulær filtration.
• Spændingsproteinuri (marcherende). Opstår efter alvorlig fysisk anstrengelse, opdages i den første portion urin, forsvinder under normal fysisk anstrengelse. Det er baseret på omfordelingen af ​​blodgennemstrømningen med relativ iskæmi af de proksimale tubuli.
• Proteinuri ved fedme. Forbundet med udviklingen af ​​intraglomerulær hypertension og hyperfiltration på baggrund af øgede koncentrationer af renin og angiotensin. Ved vægttab og behandling med ACE-hæmmere kan det falde og endda forsvinde.
• fysiologisk proteinuri. Graviditet kan føre til dets udseende, da det er ledsaget af en stigning i glomerulær filtration uden en stigning i tubulær reabsorption. Niveauet bør ikke overstige 0,3 g/dag.
• Idiopatisk forbigående. Det opdages hos raske personer under en lægeundersøgelse og er fraværende i efterfølgende urinprøver.

Patologisk proteinuri opdages ved sygdomme i nyrerne, urinvejene, samt ved udsættelse for ekstrarenale faktorer.

Efter kilde Proteinuri kan være prærenal, renal eller postrenal.

prærenal, eller proteinuri "overløb" observeret ved multipelt myelom (Bence-Jones proteinuri), rabdomyolyse, Waldenstroms makroglobulinæmi, massiv intravaskulær hæmolyse. Congestion proteinuri kan variere fra 0,1 til 20 g/dag. Høj proteinuri (mere end 3,5 g / dag.) i dette tilfælde er ikke et tegn på nefrotisk syndrom, da det ikke er ledsaget af hypoalbuminæmi og dets andre tegn. For at identificere myelom nefropati skal patienten undersøge urinen for Bence-Jones-protein.

Renal proteinuri ifølge forekomstmekanismen kan det være glomerulært og rørformet.

Glomerulær proteinuri observeres i de fleste nyresygdomme - glomerulonefritis (primære og systemiske sygdomme), nyreamyloidose, diabetisk glomerulosklerose, såvel som ved hypertension, "kongestiv" nyre.

Tubulær proteinuri observeres ved interstitiel nefritis, pyelonefritis, medfødte tubulopatier (Fanconi syndrom) og andre nyresygdomme med en overvejende læsion af tubuli.

Glomerulær og tubulær proteinuri er differentieret ved tilstedeværelsen af ​​α1-mikroglobulin og kvantitativ sammenligning af albumin og β2-mikroglobulin i urinen, som normalt varierer fra 50:1 til 200:1. Forholdet mellem albumin og β2-mikroglobulin er 10:1, og α1-mikroglobulin er tegn på tubulær proteinuri. Med glomerulær proteinuri vil dette forhold overstige 1000:1.

Postrenal proteinuri har en ekstrarenal oprindelse, udvikler sig i nærværelse af en bakteriel inflammatorisk proces i urinsystemet (pyelonefritis) på grund af en stigning i udsivningen af ​​plasmaproteiner i urinen.

Sammensætning allokere selektiv og ikke-selektiv proteinuri.

Selektiv proteinuri kendetegnet ved frigivelsen af ​​et lavmolekylært protein, hovedsageligt albumin. Prognostisk anses det for at være mere gunstigt end ikke-selektivt.

På ikke-selektiv proteinuri protein frigives med middel og høj molekylvægt (α2-makroglobuliner, β-lipoproteiner, γ-globuliner). Et bredt proteinspektrum af ikke-selektiv proteinuri indikerer alvorlig nyreskade, karakteristisk for postrenal proteinuri.

Efter sværhedsgrad (værdi) allokere mikroalbuminuri, lav, moderat, høj (nefrotisk) proteinuri.

mikroalbuminuri- urinudskillelse af minimal, kun lidt over den fysiologiske norm, albumin (fra 30 til 300-500 mg / dag). Mikroalbuminuri er det første tidlige symptom på diabetisk nefropati, nyreskade ved arteriel hypertension, nyretransplantationsafstødning. Derfor er det for kategorier af patienter med sådanne indikatorer nødvendigt at ordinere en undersøgelse af daglig urin for mikroalbuminuri i fravær af ændringer i den generelle analyse af urin.

Lav(op til 1 g/dag) og moderat(fra 1 til 3 g / dag) observeres i forskellige sygdomme i nyrerne og urinvejene (glomerulonephritis, pyelonephritis, nefrolithiasis, nyretumorer, tuberkulose osv.). Mængden af ​​proteinuri afhænger af graden af ​​nyreskade og af sværhedsgraden af ​​den inflammatoriske proces i urinvejene.

På høj (nefrotisk) proteinuri proteintab er mere end 3,5 g/dag. Tilstedeværelsen af ​​høj proteinuri i kombination med hypoalbuminæmi er et tegn på nefrotisk syndrom.

Det skal huskes, at koncentrationen af ​​protein i enkelte portioner urin i løbet af dagen varierer. For en mere præcis idé om sværhedsgraden af ​​proteinuri undersøges daglig urin (daglig proteinuri).

Normalt i urinen fra raske mennesker er protein til stede i minimale mængder - i form af spor (ikke mere end 0,033 g / l.), som ikke kan påvises ved hjælp af kvalitative metoder. Et højere proteinindhold i urinen vurderes som proteinuri.

Proteinuri er forekomsten af ​​protein i urinen i mængder, hvor kvalitative reaktioner på protein bliver positive.

Afhængigt af proteinindholdet i urinen er der:

• mild proteinuri - op til 1 g / l;
• moderat udtrykt proteinuri - 2-4 g/l;
• betydelig proteinuri - mere end 4 g / l.

Proteinuri opstår, når protein filtreres fra blodet til nyrerne, eller når protein tilsættes urin i urinvejene. Afhængigt af årsagen skelnes følgende typer af proteinuri:

1. Nyre (nyre):

• funktionel;
• økologisk.

1. Ekstrarenal (ekstrarenal).

Renal (renal) proteinuri opstår som et resultat af en stigning i permeabiliteten af ​​nyrefilteret på grund af beskadigelse (organisk) og uden skade (funktionel) af nyrerne.

Funktionel proteinuri opstår på grund af en stigning i permeabiliteten af ​​nyrefilteret som reaktion på en stærk ekstern irritation eller sænkning af passagen af ​​blod i de vaskulære glomeruli.

Blandt dem er:

1. Fysiologisk proteinuri hos nyfødte - det sker - ret ofte i de første 4-10 dage efter fødslen og skyldes tilstedeværelsen af ​​et funktionelt umodent nyrefilter hos den nyfødte, og sandsynligvis også fødselstraumer;
2. Alimentær proteinuri - opstår efter at have spist proteinfødevarer (æggehvide);
3. Ortostatisk proteinuri - oftere observeret hos unge, underernærede mennesker, asteni med lordose af den nedre thoraxrygsøjle. Protein i urinen kan forekomme i betydelige mængder ved længerevarende stående, kraftig krumning af rygsøjlen (lordose), samt ved en skarp ændring i kropsstilling fra liggende til stående;
4. Feberagtig proteinuri - forekommer ved forhøjet kropstemperatur op til 39-40 ° C ved infektionssygdomme. Det forårsagende middel til infektion og forhøjet temperatur irriterer nyrefilteret, hvilket fører til en stigning i dets permeabilitet;
5. Proteinuri forårsaget af nervøse (følelsesmæssige) og fysiske (marcherende) overbelastninger af kroppen;
6. Proteinuri hos gravide kvinder;
7. Kongestiv proteinuri - observeret hos patienter med kardiovaskulære sygdomme, med ascites, abdominale tumorer (op til 10 g / l). Når blodgennemstrømningen bremses i nefronets vaskulære glomeruli, udvikles glomerulær hypoxi, hvilket fører til en stigning i permeabiliteten af ​​nyrefilteret. Langvarig stagnation af blod kan forårsage organisk nyreskade og føre til organisk proteinuri.

Så årsagen til funktionel nyreproteinuri er en stigning i permeabiliteten af ​​nyrefilteret (især væggene i glomerulus-karrene), skader på nyrefilteret forekommer ikke. Derfor funktionel proteinuri, som regel: mild (op til 1 g/l); er repræsenteret af lavmolekylære proteiner (albuminer), kortsigtede (forsvinder efter afslutningen af ​​stimulusens virkning på nyrefilteret).

Organisk proteinuri opstår på grund af en stigning i permeabiliteten af ​​nyrefilteret som følge af skade på nyreparenkymet. Denne type nyreproteinuri observeres ved akut og kronisk nefritis, nefrose, nefrosklerose, infektiøse og toksiske læsioner i nyrerne såvel som hos personer med medfødte anatomiske nyrernes anomalier, for eksempel i tilfælde af polycystisk sygdom, når anatomisk ændringer forårsager betydelig organisk skade på nyrevævet.

Sværhedsgraden af ​​proteinuri indikerer ikke altid sværhedsgraden af ​​skaden på nyreparenkymet. Ind imellem kan akut glomerulonefritis med høj proteinuri forsvinde hurtigt, og kronisk glomerulonefrit med lavt proteinindhold i urinen kan vare længe og endda forårsage død. Et fald i proteinuri i tilfælde af akut glomerulonefritis er grundlæggende et godt tegn, og i kroniske former er et sådant fald meget ofte ledsaget af en forværring af patientens tilstand, da det kan skyldes funktionelt nyresvigt med et fald i deres filtration kapacitet, på grund af døden af ​​et stort antal renal glomeruli. Moderat udtrykt proteinuri er registreret ved akut og kronisk glomerulonephritis, systemisk lupus erythematosus, renal amyloidose. Signifikant proteinuri er karakteristisk for nefrotisk syndrom.

Akut og kronisk glomerulonefritis. Proteinuri skyldes beskadigelse af nyrefilteret. Ved glomerulonefritis angriber antistoffer nyrefilteret, hvilket fører til en forøgelse af dets filtreringskapacitet, men da den tubulære reabsorption ikke forringes, reabsorberes det meste af det filtrerede protein i blodet under urinens passage gennem det tubulære system. Således med glomerulonephritis er proteinuri et konstant fænomen, dets niveau er moderat (op til 5 g / l).

nefrotisk syndrom. Proteinuri opstår på grund af nedsat tubulær reabsorption af filtreret protein som følge af beskadigelse af nyretubuli. Derfor er proteinuri i nefrotisk syndrom et konstant fænomen, niveauet af proteinuri er signifikant (10-30 g / l). Det er repræsenteret af albuminer og globuliner.

Så patogenesen af ​​organisk nyreproteinuri er baseret på en stigning i permeabiliteten af ​​nyrefilteret på grund af organisk skade på nyreparenkymet. Derfor er organisk proteinuri normalt moderat eller udtalt; langsigtet; kombineret med andre patologiske ændringer i urinen (hæmaturi, cylindruri, dysfoliation af epitelet i nyretubuli).

Ekstrarenal (ekstrarenal) proteinuri er forårsaget af proteinurenheder (inflammatorisk ekssudat, ødelagte celler), som udskilles gennem urinvejene og kønsorganerne. Det forekommer med blærebetændelse, urethritis, prostatitis, vulvovaginitis, urolithiasis og tumorer i urinvejene. Mængden af ​​protein i ekstrarenal proteinuri er ubetydelig (op til 1 g / l.).

Ekstrarenal proteinuri er som regel kombineret med andre patologiske ændringer i urinen (leukocyturi eller pyuri og bakteriuri).

Proteinuri - urinudskillelse af protein over normale værdier (50 mg / dag). Dette er det mest almindelige tegn på nyreskade.

I klinisk praksis anvendes sædvanligvis standardstrimler og proteinudfældning med sulfasalicylic eller trichloreddikesyre, efterfulgt af nefelometri eller refraktometri, som bestemmer protein på over 20 mg/dag. Noget mere præcise er biuret-metoden og Kjeldahl-metoden, som bestemmer mængden af ​​protein i væv og væsker ved nitrogen (azotometrisk metode). Ved anvendelse af sådanne metoder til proteinkemi og radioimmunoassays kan forskellige lavmolekylære proteiner (præalbumin, albumin, α1-syre glycoprotein, β2-mikroglobulin, α2-antitrypsin, α-lipoprotein, siderophilin, ceruloplasmin, haptogoglobulin, transferrinobulin) let påvist i urin. , såvel som højmolekylære (a2-makroglobulin, y-globulin) proteiner.

Frigivelsen af ​​protein i mængden af ​​30-50 mg / dag betragtes som den fysiologiske norm for en voksen. Denne mængde er 10-12 gange mindre, end hvad der normalt filtreres fra blodplasma gennem glomeruli (hos raske personer filtreres ca. 0,5 g albumin om dagen), da det meste af det filtrerede protein normalt reabsorberes i de proksimale tubuli. Tubulær reabsorption sker ved endocytose af proteiner ved børstegrænsemembranen af ​​tubulære celler. Samtidig udskilles nogle proteiner i urinen af ​​celler i det tubulære epitel (f.eks. Tamm-Horsfall uroproteinet, et komplekst glykoprotein med en meget høj molekylvægt, syntetiseret og udskilt af cellerne i Henles ascenderende sløjfe og de distale tubuli), og kommer også ud af de døde celler i urinvejene.

Ved nyrepatologi (mindre ofte ved ekstrarenal patologi) opstår tilstande, der bidrager til forekomsten af ​​en stor mængde protein i urinen, primært på grund af øget filtrering af proteiner gennem det glomerulære kapillarfilter, samt et fald i tubulær reabsorption af filtrerede proteiner.

Filtrering af blodplasmaproteiner gennem væggen af ​​glomerulære kapillærer afhænger af den strukturelle og funktionelle tilstand af den glomerulære kapillærvæg, dens elektriske ladning, egenskaberne af proteinmolekyler, hydrostatisk tryk og blodgennemstrømningshastighed, som bestemmer den glomerulære filtrationshastighed.

Normalt forhindres indtrængning af plasmaproteiner i urinrummet af den anatomiske barriere (strukturen af ​​det glomerulære filter), den elektrostatiske ladning af kapillærvæggen og hæmodynamiske kræfter.

Væggen af ​​de glomerulære kapillærer består af endotelceller (med afrundede huller mellem cellerne - fenestra), en trelags basalmembran (hydreret gel) og epitelceller (podocytter) med et plexus af pedunkulerede processer og porer imellem dem med en diameter på ca. 4 nm (spaltelignende membran). På grund af denne komplekse struktur kan den glomerulære kapillarvæg "sigte" plasmamolekyler fra kapillærerne ind i rummet af den glomerulære kapsel, og denne funktion af "molekylsigten" er i høj grad afhængig af størrelsen og formen af ​​makromolekylerne.

Små plasmaproteiner (lysozym, β2-mikroglobulin, ribonuklease, frie lette kæder af immunoglobuliner, retinolbindende protein) passerer let gennem disse porer ind i rummet af den glomerulære kapsel (Bowmans kapsel) og reabsorberes derefter fuldstændigt af epitelet. af de snoede tubuli. Under patologiske forhold øges porestørrelser, aflejringer af immunkomplekser forårsager lokale ændringer i kapillærvæggen, hvilket øger dens permeabilitet for makromolekyler.

Albuminmolekyler har en diameter på 3,6 nm (mindre end porestørrelsen), men under fysiologiske forhold når de, ligesom de fleste andre makromolekyler, praktisk talt ikke den spaltelignende mellemgulv i BMC og dvæler i niveau med fenestra.

Her skabes en funktionel barriere, hvis integritet sikres af en negativ ladning og normal kapillær blodgennemstrømning. Den glomerulære basalmembran og pedunkulære processer af podocytter er også negativt ladede.

Sialoglycoprotein og glycosaminoglycaner rige på heparansulfat er ansvarlige for den negative ladning af det glomerulære filter. Under normale forhold afviser den negative ladning af det glomerulære filter anioner - negativt ladede molekyler (inklusive albuminmolekyler). Tabet af den negative ladning hjælper med filtreringen af ​​albumin, som derefter frit passerer gennem porerne i den spaltelignende membran.

Albuminudskillelse er således primært forbundet med tabet af negativ ladning af det glomerulære filter; udskillelse af større molekyler sker kun, når basalmembranen er beskadiget.

Ud over den negative ladning inkluderer den funktionelle barriere hæmodynamiske faktorer - normal kapillær blodgennemstrømning, balancen mellem hydrostatisk og onkotisk tryk, forskellen i transkapillært hydrostatisk tryk og den glomerulære ultrafiltreringskoefficient.

Permeabiliteten af ​​kapillærvæggen øges, hvilket bidrager til proteinuri, både med et fald i strømningshastigheden i kapillærerne og ved tilstande med glomerulær hyperperfusion og angiotensin II-medieret intraglomerulær hypertension. Introduktionen af ​​angiotensin II eller noradrenalin, som ændrer intraglomerulær hæmodynamik, øger proteinudskillelsen i urinen. Den mulige rolle af hæmodynamiske ændringer bør tages i betragtning ved vurdering af unormal proteinuri, især forbigående eller forekommende hos patienter med kredsløbssvigt. Reduktion af intraglomerulær hypertension ved foranstaltninger, der forårsager dilatation af den efferente arteriole (ACE-hæmmere) eller konstriktion af den afferente arteriole (NSAID'er, cyclosporin, lavproteindiæt) kan reducere proteinuri betydeligt.

Glomerulær proteinuri- den mest almindelige form for proteinuri forbundet med en krænkelse af permeabiliteten af ​​det glomerulære filter. Det observeres i de fleste nyresygdomme - glomerulonefritis (primære og systemiske sygdomme), amyloidose i nyrerne, diabetisk glomerulosklerose, trombose af nyrekar, såvel som ved hypertension, aterosklerotisk nefrosklerose, kongestiv nyre.

Afhængigt af indholdet af visse proteiner i blodplasmaet og i urinen isoleres selektiv og ikke-selektiv proteinuri (udtrykket er betinget, det er mere korrekt at tale om selektiviteten af ​​isoleringen af ​​proteinfraktioner, selektiviteten af ​​deres godkendelse). Selektiv proteinuri kaldes proteinuri, repræsenteret af proteiner med en lav molekylvægt - ikke mere end 65.000 (hovedsageligt albumin). Ikke-selektiv proteinuri er karakteriseret ved en stigning i clearance af mellem- og højmolekylære proteiner (a2-makroglobulin, B-lipoproteiner og y-globuliner dominerer i sammensætningen af ​​urinryg). For at bestemme det glomerulære selektivitetsindeks sammenlignes clearance af immunoglobulin G med clearance af albumin eller transferrin. Selektiv proteinuri har en bedre prognose end ikke-selektiv proteinuri. I øjeblikket anvendes vurderingen af ​​selektivitetsindekset sjældent i klinisk praksis, hovedsageligt hos børn.

For nylig er forskernes opmærksomhed blevet tiltrukket af mikroalbuminuri - udskillelsen af ​​en minimal mængde albumin i urinen, der kun overstiger den fysiologiske. Mikroalbuminuri, hvis definition kræver brug af meget følsomme metoder, er det første symptom på diabetisk nefropati, afstødning af nyretransplantationer, nyreskade ved hypertension; forbundet med intraglomerulær hypertension.

tubulær proteinuri. Med et fald i de proksimale tubulis evne til at reabsorbere plasmaproteiner med lav molekylvægt filtreret i normale glomeruli, udvikles tubulær proteinuri. Mængden af ​​frigivet protein overstiger 2 g/dag, proteinet er repræsenteret af fraktioner med lav molekylvægt (lysozym, β2-mikrohyobulin, ribonuklease, frie lette kæder af immunoglobuliner).

Derudover bestemmes (og er normalt) et særligt Tamm-Horsfall-protein i urinen, udskilt i en mængde på 20-30 mg/dag af intakte tubuli - det tykke opadgående knæ i Henles løkke og de indledende sektioner af opsamlingskanaler.

Tubulær proteinuri observeres ved interstitiel nefritis, pyelonefritis, kaliumnyre, akut tubulær nekrose, kronisk nyretransplantatafstødning, medfødte tubulopatier (Fanconis syndrom).

For at bestemme tubulær proteinuri undersøges sædvanligvis indholdet af β-mikroglobulin i urinen (normalt ikke over 0,4 μg / l), sjældnere - lysozym; i de senere år er definitionen af ​​a1-mikroglobulin blevet foreslået som en markør for tubulær skade.

Proteinuri overløb.Øget proteinudskillelse kan også observeres under påvirkning af ekstrarenale faktorer. Således udvikles overløbsproteinuri med øget dannelse af plasmaproteiner med lav molekylvægt (lette kæder af immunglobuliner, hæmoglobin, myoglobin), som filtreres af normale glomeruli i en mængde, der overstiger tubulis evne til at reabsorbere. Dette er mekanismen for proteinuri ved myelomatose (Bene-Jones proteinuri), myoglobinuri, lysocymuri, beskrevet hos patienter med leukæmi. Måske er ændringer i de fysisk-kemiske egenskaber, konfigurationen af ​​normale plasmaproteiner også vigtige. For eksempel kan flere infusioner af blodplasma på grund af blødningsforstyrrelser forårsage forbigående proteinuri op til 5-7 g/dag. Administration af albumin til patienter med nefrotisk syndrom kan også føre til en stigning i proteinuri (selvom ændringer i nyrernes hæmodynamik kan forekomme ved massive infusioner).

Funktionel proteinuri. Funktionel proteinuri, hvis nøjagtige mekanismer for patogenese ikke er blevet etableret, omfatter ortostatisk, idiopatisk forbigående, stressproteinuri, febril proteinuri og proteinuri ved fedme.

Ortostatisk proteinuri er kendetegnet ved forekomsten af ​​protein i urinen under længerevarende stående eller gående med dets hurtige forsvinden, når kropsstillingen ændres til vandret. Proteinuri overstiger normalt ikke 1 g / dag, er glomerulær og ikke-selektiv, mekanismen for dens forekomst er uklar. Oftere observeres det i ungdomsårene, hos halvdelen af ​​patienterne forsvinder det efter 5-10 år. Udviklingsmekanismen kan være forbundet med en utilstrækkeligt forbedret respons af intrarenal hæmodynamik på ændringer i kropsposition.

Diagnosen ortostatisk proteinuri stilles, når følgende tilstande kombineres:

Alder af patienter 13-20 år;

Den isolerede karakter af proteinuri, fraværet af andre tegn på nyreskade (ændringer i urinsediment, øget blodtryk, ændringer i funduskarrene);

Den udelukkende ortostatiske karakter af proteinuri, når der ikke er noget protein i urinprøver taget efter patienten har været i vandret stilling (inklusive om morgenen før han står ud af sengen).

For at bevise denne diagnose er det nødvendigt at udføre en ortostatisk test. For at gøre dette opsamles urin om morgenen, før du står ud af sengen, derefter efter et 1-2-timers ophold i oprejst stilling (gå med en pind bag ryggen for at rette din rygsøjle). Testen giver endnu mere præcise resultater, hvis morgen (nat) portion urin hældes ud (da der kan være resturin i blæren), og den første portion opsamles efter 1-2 timer med patienten i vandret stilling.

I teenageårene kan der også observeres idiopatisk forbigående proteinuri, fundet hos raske personer under en lægeundersøgelse og fraværende fra efterfølgende urinprøver.

Spændingsproteinuri opdages hos 20 % af raske personer (inklusive atleter) efter en kraftig fysisk anstrengelse. Protein påvises i den første opsamlede portion urin. Proteinuri er rørformet i naturen. Det antages, at mekanismen for proteinuri er forbundet med omfordelingen af ​​blodgennemstrømningen og relativ iskæmi af de proksimale tubuli.

Feberagtig proteinuri observeret ved akutte febertilstande, især hos børn og ældre. Det er overvejende glomerulært i naturen. Mekanismerne for denne type proteinuri er dårligt forstået, og den mulige rolle af øget glomerulær filtration sammen med forbigående beskadigelse af det glomerulære filter af immunkomplekser diskuteres.

proteinuri ved fedme. Proteinuri ses ofte ved sygelig fedme (kropsvægt over 120 kg). Ifølge J.P.Domfeld (1989) havde 410 blandt 1000 overvægtige patienter proteinuri uden ændringer i urinsediment; tilfælde af nefrotisk syndrom er også beskrevet. Det antages, at udviklingen af ​​sådan proteinuri er baseret på ændringer i glomerulær hæmodynamik (intraglomerulær hypertension, hyperfiltration) forbundet med en stigning i koncentrationen af ​​renin og angiotensin ved fedme, som falder under faste. Ved vægttab samt behandling med ACE-hæmmere kan proteinuri falde og endda forsvinde.

Derudover kan proteinuri være af ikke-renal oprindelse. I nærvær af svær leukocyturi og især hæmaturi kan en positiv reaktion på protein være resultatet af nedbrydning af blodceller under langvarig stående urin; i denne situation er proteinuri på mere end 0,3 g / dag patologisk. Sedimentære proteinprøver kan give falske positive resultater ved tilstedeværelse af jodkontrastmidler, et stort antal penicillin- eller cephalosporinanaloger, sulfonamidmetabolitter i urinen.

Massiv proteinuri har utvivlsomt en glomerulær natur, og læsionerne af tubuli, der gentagne gange er beskrevet i den, er sekundære (dette fjerner ikke spørgsmålet om tubulis rolle i dets oprindelse i forbindelse med nedsat proteinreabsorption og spaltning af makromolekyler i dem ). Lysmikroskopi gør det ikke muligt at beskrive morfologiske ændringer, der er strengt specifikke for massiv proteinuri, da fokal og diffus fortykkelse af basalmembranen og fortykkelse af kapillærløkker forekommer i den; massiv proteinuri forekommer også ved diabetisk glomerulosklerose og amyloidose. Strengt specifikke ændringer detekteres ikke ved elektronmikroskopi. Vakuolisering, hævelse og fortykkelse af endotelceller er beskrevet. I integumentære celler påvises som regel fusion og forsvinden af ​​celleprocesser. Kældermembranen er ændret, dårligt defineret, rynket, lamellære strukturer er nogle gange forstyrrede og fremstår som "mølædte" (Churg et al., 1962; Dalgaard, 1958; Farquhar, 1957; Holle, 1960; Meriel et al., 1963; Miller, Bohle, 1956; Thoenes, 1961). Massiv proteinuri er således forbundet med morfologiske ændringer i nefronet og fører til ændringer i serumets proteinspektrum og til den vigtigste konsekvens af proteintab - hypoproteinæmi. Man skal huske på, at når basalmembranen kommer i kontakt med proteinmolekylets elementer, kan sidstnævnte påvirkes enzymatisk (Dubach og Regan, 1960, 1962, 1963). I sig selv bestemmer massiv proteinuri endnu ikke den kvalitative sammensætning af de udskilte proteiner, da der ikke er nogen direkte sammenhæng mellem mængden af ​​tabt protein pr. dag og uroproteinogrammet. Et stort dagligt tab af protein (over 2,5-3,5 g) er den vigtigste patogenetiske faktor ved nefrotisk syndrom. Med massiv proteinuri ændres uroproteinogrammet som regel, og forholdet mellem albumin / globuliner i urinen stiger, når eller overstiger forholdet i serum; ifølge Kühn (1966) er det lig med 2,7 for glomerulonefritis, dvs. hovedparten af ​​det tabte protein er albumin (66% for amyloidose, 60% for glomerulonefritis og 65% for diabetisk glomerulosklerose). Ved immunelektroforese viste Kühn (1966), at afhængig af graden af ​​beskadigelse af "molekylsigten" ved massiv proteinuri, kan der være forskellige proteiner i urinen [præalbuminer, albuminer, α1-lavmolekylært surt protein - uromucoid, α2 -glycoprotein (antitrypsin), α1-lipoprotein (tvivlsomt), haptoglobin, ceruloplasmin, α2-makroglobulin (meget sjældent), siderophilin, BA, 1c-globulin, β2-lipoprotein (tvivlsomt); үа-glycoprotein, үм-globulin, үа-globulin og endda fibrinogen (? )sch.

Årsagerne til massiv proteinuri er forskellige og ligner årsagerne til nefrotisk syndrom (se kapitel VI).

Myelomnyre kan også føre til massiv proteinuri (G.A. Alekseev, N.E. Andreeva, 1966). Frigivelsen af ​​et lavmolekylært uroprotein (oftest γ-protein) i det rejser et teoretisk problem: hvis tubuli reabsorberer proteiner selektivt, og det normale glomerulære filtrat indeholder 40 mg! 100 ml protein, dvs. ca. 60 g pr. så er det uklart, hvorfor dette protein ikke frigives i signifikant koncentration, når tubuli er mættet med myelomprotein. Vi må derfor antage, at den vilkårlige reabsorptionsklausul har en undtagelse for det myelomatøse protein.

47924 0

Små mængder protein findes i den daglige urin hos raske personer. Så små koncentrationer kan dog ikke påvises ved hjælp af konventionelle forskningsmetoder. Udskillelsen af ​​større mængder protein, hvorved de sædvanlige kvalitative tests for protein i urinen bliver positive, kaldes proteinuri. Der er renal (sand) og ekstrarenal (falsk) proteinuri. Ved nyreproteinuri kommer protein direkte ind i urinen fra blodet på grund af en stigning i dets filtrering af nyrernes glomeruli eller et fald i tubulær reabsorption.

Renal (ægte) proteinuri

Fysiologisk proteinuri hos nyfødte, som forsvinder på den 4. - 10. dag efter fødslen, og hos for tidligt fødte børn lidt senere;
- ortostatisk albuminuri, som er typisk for børn i alderen 7-18 år og kun vises i oprejst stilling af kroppen;
- forbigående (slagtilfælde) albuminuri, som kan være forårsaget af forskellige sygdomme i fordøjelsessystemet, svær anæmi, forbrændinger, skader eller fysiologiske faktorer: tung fysisk anstrengelse, hypotermi, stærke følelser, rigelig, proteinrig mad osv.

Organisk (renal) proteinuri observeres på grund af passage af protein fra blodet gennem beskadigede områder af endotelet i renal glomeruli ved nyresygdomme (glomerulonephritis, nefrose, nefrosklerose, amyloidose, nefropati under graviditet), lidelser i renal venøs dynamik (renal venøs dynamik). hypertension, hypoxi), trofiske og toksiske (inklusive medicinske) virkninger på væggene i glomerulære kapillærer.

Ekstrarenal (falsk) proteinuri

Bestemmelse af protein i urinen

Blandt de kvalitative metoder til bestemmelse af bedka i urin er den forenede test med sulfosalicylsyre og Heller-ringtesten mest udbredt.

En standardiseret prøve med sulfasalicylic syre udføres som følger. 3 ml filtreret urin hældes i 2 rør. I en af ​​dem tilsættes 6-8 dråber af en 20% opløsning af sulfasalicylsyre. Begge rør sammenlignes mod en mørk baggrund. Turbiditet af urin i et reagensglas med sulfasalicylic syre indikerer tilstedeværelsen af ​​protein. Før undersøgelsen er det nødvendigt at bestemme reaktionen af ​​urin, og hvis den er alkalisk, skal du syrne med 2-3 dråber af en 10% opløsning af eddikesyre.

Geller-testen er baseret på det faktum, at ved tilstedeværelse af protein i urinen på grænsen mellem salpetersyre og urin, koagulerer det, og en hvid ring fremkommer. 1-2 ml af en 30% opløsning af salpetersyre hældes i et reagensglas, og nøjagtig den samme mængde filtreret urin lægges forsigtigt langs væggen af ​​reagensglasset. Udseendet af en hvid ring ved grænsefladen mellem to væsker indikerer tilstedeværelsen af ​​protein i urinen. Det skal huskes, at der nogle gange dannes en hvid ring i nærværelse af en stor mængde urater, men i modsætning til proteinringen vises den lidt over grænsen mellem to væsker og opløses ved opvarmning [Pletneva N.G., 1987].

De mest almindeligt anvendte kvantitative metoder er:

1) den forenede Brandberg-Roberts-Stolnikov-metode, som er baseret på Heller-ringtesten;
2) fotoelektrokolorimetrisk metode til kvantitativ bestemmelse af protein i urinen ved den turbiditet, der dannes ved tilsætning af sulfasalicylsyre;
3) biuret metode.

Proteinpåvisning i urin ved en forenklet accelereret metode udføres ved en kolorimetrisk metode ved brug af indikatorpapir, som er produceret af Lachema (Slovakiet), Albuphan, Ames (England), Albustix, Boehringer (Tyskland), Comburtest etc. Metoden består bl.a. nedsænkning af en speciel papirstrimmel imprægneret med tetrabromphenolblåt og citratbuffer i urinen, som skifter farve fra gul til blå afhængig af proteinindholdet i urinen. Foreløbigt bestemmes koncentrationen af ​​protein i testurinen ved hjælp af en standardskala. For at opnå korrekte resultater skal følgende betingelser være opfyldt. urin pH skal være i området 3,0-3,5; for alkalisk urin (pH 6,5) vil give et falsk positivt resultat, og for sur urin (pH 3,0) et falsk negativt.

Papiret bør ikke være i kontakt med testurinen i længere tid end angivet i instruktionerne, ellers vil testen give en falsk positiv reaktion. Sidstnævnte ses også, når der er en stor mængde slim i urinen. Følsomheden af ​​forskellige typer og serier af papir kan være forskellig, så den kvantitative vurdering af protein i urinen ved denne metode bør behandles med forsigtighed. Det er umuligt at bestemme dens mængde i daglig urin ved hjælp af indikatorpapir [Pletneva N.G., 1987]

Definition af daglig proteinuri

Metode. 5-10 ml grundigt blandet daglig urin hældes i et reagensglas, og en 30% opløsning af salpetersyre tilsættes forsigtigt langs dets vægge. Ved tilstedeværelse af protein i urinen i en mængde på 0,033% (dvs. 33 mg pr. 1 liter urin), vises en tynd, men tydeligt synlig hvid ring efter 2-3 minutter. Ved en lavere koncentration er testen negativ. Med et højere proteinindhold i urinen bestemmes dets mængde ved gentagne fortyndinger af urin med destilleret vand, indtil ringen ophører med at dannes. I det sidste reagensglas, hvor ringen stadig er synlig, vil proteinkoncentrationen være 0,033%. Ved at gange 0,033 med graden af ​​urinfortynding bestemmes proteinindholdet i 1 liter ufortyndet urin i gram. Derefter beregnes proteinindholdet i den daglige urin ved formlen:

K \u003d (x V) / 1000

Hvor K er mængden af ​​protein i daglig urin (g); x er mængden af ​​protein i 1 liter urin (g); V er mængden af ​​urin, der udskilles pr. dag (ml).

Normalt udskilles fra 27 til 150 mg (gennemsnit 40-80 mg) protein i urinen i løbet af dagen.

Denne test giver dig mulighed for at bestemme i urinen kun fine proteiner (albumin). Mere præcise kvantitative metoder (kolorimetrisk Kjeldahl-metode osv.) er ret komplekse og kræver særligt udstyr.

Ved nyreproteinuri udskilles ikke kun albuminer, men også andre typer proteiner i urinen. Et normalt proteinogram (ifølge Seitz et al., 1953) har følgende procent: albuminer - 20%, α 1 -globuliner - 12%, α 2 -globuliner - 17%, γ-globuliner - 43% og β-globuliner - 8 %. Forholdet mellem albuminer og globuliner ændres ved forskellige nyresygdomme, dvs. det kvantitative forhold mellem proteinfraktioner er brudt.

De mest almindelige metoder til fraktionering af uroproteiner er følgende: udsaltning med neutrale salte, elektroforetisk fraktionering, immunologiske metoder (radial immundiffusionsreaktion ifølge Mancini, immunelektroforetisk analyse, præcipitationsimmunoelektroforese), kromatografi, gelfiltrering og ultracentrifugering.

I forbindelse med introduktionen af ​​uroproteinfraktioneringsmetoder baseret på studiet af elektroforetisk mobilitet, molekylvægtvariabilitet, størrelse og form af uroproteinmolekyler, blev det muligt at isolere de typer af proteinuri, der er karakteristiske for en bestemt sygdom, for at studere clearance af individuelt plasma proteiner. Til dato er mere end 40 plasmaproteiner blevet identificeret i urin, herunder 31 plasmaproteiner i normal urin.

Selektiv proteinuri

Påvisningen af ​​proteiner med en relativt stor molekylvægt i urinen indikerer fraværet af selektivitet af nyrefilteret og dets udtalte skade. I disse tilfælde taler man om en lav selektivitet af proteinuri. Derfor er bestemmelsen af ​​proteinfraktioner af urin ved hjælp af metoderne til elektroforese i stivelse og polyacrylamidgeler blevet udbredt. Baseret på resultaterne af disse forskningsmetoder kan man bedømme selektiviteten af ​​proteinuri.

Ifølge V.S. Makhlina (1975) er den mest berettigede bestemmelse af selektiviteten af ​​proteinuri ved at sammenligne clearance af 6-7 individuelle blodplasmaproteiner (albumin, traneferrin, α 2 - makroglobulin, IgA, IgG, IgM) ved hjælp af nøjagtige og specifikke kvantitative immunologiske metoder til reaktion af radial immundiffusion ifølge Mancini, immunelektroforetisk analyse og præcipitationsimmunoelektroforese. Graden af ​​proteinuri-selektivitet bestemmes af selektivitetsindekset, som er forholdet mellem de sammenlignede og referenceproteiner (albumin).

Undersøgelsen af ​​clearance af individuelle plasmaproteiner gør det muligt at opnå pålidelig information om tilstanden af ​​filtreringsbasalmembranerne i nyrernes glomeruli. Forholdet mellem arten af ​​proteiner, der udskilles i urinen, og ændringer i glomerulis basalmembraner er så udtalt og konstant, at uroproteinogrammet indirekte kan bedømme patofysiologiske ændringer i nyrernes glomeruli. Normalt er den gennemsnitlige porestørrelse af den glomerulære basalmembran 2,9-4 A ° NM, som kan passere proteiner med en molekylvægt på op til 10 4 (myoglobulin, syre α 1 - glycoprotein, immunoglobulin lette kæder, Fc og Fab - IgG fragmenter, albumin og transferrin).

Ved glomerulonefritis, nefrotisk syndrom, øges porestørrelserne i glomerulis basalmembraner, og derfor bliver basalmembranen permeabel for proteinmolekyler af stor størrelse og masse (ceruloplasmin, haptoglobin, IgG, IgA osv.). Med en ekstrem grad af beskadigelse af nyrernes glomeruli opstår gigantiske molekyler af blodplasmaproteiner (α 2 -makroglobulin, IgM og β 2 -lipoprotein) i urinen.

Ved at bestemme urinens proteinspektrum kan man konkludere, at visse dele af nefronet er overvejende påvirket. For glomerulonephritis med en overvejende læsion af glomerulære basalmembraner er tilstedeværelsen af ​​store og mellemmolekylære proteiner i urinen karakteristisk. For pyelonefritis med en overvejende læsion af de basale membraner i tubuli er fraværet af store molekylære proteiner og tilstedeværelsen af ​​øgede mængder af mellem- og lavmolekylære proteiner karakteristisk.

β2-mikroglobulin

Koncentrationen af ​​dette protein i blodplasma og urin bestemmes ved radioimmunoassay under anvendelse af et standardsæt "Phade-bas β 2 -mikroiest" (Pharmacia, Sverige). Blodserum fra raske mennesker indeholder i gennemsnit 1,7 mg/l (fra 0,6 til 3 mg/l), i urinen - i gennemsnit 81 μg/l (maksimalt 250 μg/l) β 2 -mikroglobulin. Dets overskud i urin over 1000 mcg/l er et patologisk fænomen. Indholdet af β2-mikroglobulin i blodet stiger ved sygdomme ledsaget af nedsat glomerulær filtration, især ved akut og kronisk glomerulonephritis, polycystisk nyresygdom, nefrosklerose, diabetisk nefropati, akut nyresvigt.

Koncentrationen af ​​β 2 -mikroglobulin i urinen stiger med sygdomme ledsaget af en krænkelse af reabsorptionsfunktionen af ​​tubuli, hvilket fører til en stigning i dets udskillelse i urinen med 10-50 gange, især med pyelonefritis, kronisk nyrebetændelse svigt, purulent forgiftning osv. Det er karakteristisk, at der ved blærebetændelse i modsætning til pyelonefritis ikke er nogen stigning i koncentrationen af ​​β 2 -mikroglobulin i urinen, som kan bruges til differentialdiagnose af disse sygdomme. Ved fortolkning af resultaterne af undersøgelsen skal det dog tages i betragtning, at enhver temperaturstigning altid ledsages af en stigning i udskillelsen af ​​β 2 -mikroglobulin i urinen.

Gennemsnitlige blod- og urinmolekyler

Niveauet af SM i blod og urin bestemmes ved en screeningstest, samt ved spektrofotometri i den ultraviolette zone ved en bølgelængde på 254 og 280 mm på et DI-8B spektrofotometer, samt dynamisk spektrofotometri med computerbehandling i bølgelængden område på 220-335 nm på det samme Beckman-spektrometer. Indholdet af SM i blodet tages som normen, svarende til 0,24 ± 0,02 arb. enheder, og i urin - 0,312 ± 0,09 arb. enheder
Da de er normale affaldsprodukter fra kroppen, fjernes de normalt fra den om natten ved glomerulær filtrering med 0,5 %; 5 % af dem bortskaffes på anden måde. Alle SM-fraktioner gennemgår tubulær reabsorption.

Ikke-plasma (væv) uroproteiner

Vævsproteiner i urin påvises ved hjælp af konventionelle metoder inden for proteinkemi (ultracentrifugering, gelkromatografi, forskellige typer elektroforese), specifikke reaktioner på enzymer og hormoner og immunologiske metoder. Sidstnævnte gør det også muligt at bestemme koncentrationen af ​​ikke-plasma uroprotein i urinen og i nogle tilfælde at bestemme de vævsstrukturer, der er blevet kilden til dets udseende. Hovedmetoden til påvisning af ikke-plasmaprotein i urin er immundiffusionsanalyse med antiserum opnået ved immunisering af forsøgsdyr med human urin og efterfølgende udtømt (adsorberet) af blodplasmaproteiner.

Undersøgelse af enzymer i blod og urin

Cellerne i nyretubuli, især de proksimale, indeholder den maksimale mængde enzymer. Deres høje aktivitet observeres i løkken af ​​Henle, direkte tubuli og opsamlingskanaler. Ændringer i aktiviteten af ​​individuelle enzymer i forskellige nyresygdomme afhænger af processens art, sværhedsgrad og lokalisering. De observeres før udseendet af morfologiske ændringer i nyrerne. Da indholdet af forskellige enzymer er tydeligt lokaliseret i nefronen, kan bestemmelsen af ​​et eller andet enzym i urinen bidrage til den topiske diagnose af den patologiske proces i nyrerne (glomeruli, tubuli, corticale eller medulla), differentialdiagnosen af nyresygdomme og bestemmelse af dynamikken (dæmpning og forværring) af processen i det renale parenkym.

Til differentialdiagnose af sygdomme i det genitourinære system anvendes bestemmelsen af ​​aktiviteten i blodet og urinen af ​​følgende enzymer: laktatdehydrogenase (LDH), leucinaminopeptidase (LAP), sur fosfatase (AP), alkalisk fosfatase (AP) , β-glucuronidase, glutamin-oxaloeddikesyretransaminase (GST), aldolase, transamidinase osv. Aktiviteten af ​​enzymer i blodserum og urin bestemmes ved anvendelse af biokemiske, spektrofotometriske, kromatografiske, fluorimetriske og kemiluminescerende metoder.

Enzymuri ved nyresygdom er mere udtalt og regelmæssig end enzymatiske. Det er især udtalt i det akutte stadium af sygdommen (akut pyelonefritis, traumer, tumorhenfald, nyreinfarkt osv.). I disse sygdomme findes høj aktivitet af transamidinase, LDH, alkalisk phosphatase og CP, hyaluronidase, LAP, såvel som sådanne ikke-specifikke enzymer som GST, katalase [Polyantseva LR, 1972].

Selektiv lokalisering af enzymer i nefronet ved påvisning af LAP og alkalisk fosfatase i urinen giver os mulighed for at tale med tillid om akutte og kroniske nyresygdomme (akut nyresvigt, renal tubulær nekrose, kronisk glomerulonefritis) [Shemetov V.D., 1968]. Ifølge A.A. Karelin og L.R. Polyantseva (1965) findes transamidinase kun i to organer - nyren og bugspytkirtlen. Det er et mitokondrielt enzym i nyrerne og er normalt fraværende i blodet og urinen. Med forskellige sygdomme i nyrerne vises transamidinase i blodet og urinen og med skader på bugspytkirtlen - kun i blodet.

Differentialtesten til diagnosticering af glomerulonefritis og pyelonefritis Krotkiewski (1963) overvejer aktiviteten af ​​alkalisk fosfatase i urinen, hvis stigning er mere typisk for pyelonefritis og diabetisk glomerulosklerose end for akut og kronisk nefritis. Stigning i amylases dynamik med et samtidig fald i amylasuri kan indikere nefrosklerose og rynker i nyren, LAP er vigtigst for patologiske ændringer i glomeruli og indviklede tubuli i nyren, da indholdet i disse dele af nefronen er højere [ Shepotinovsky V.P. et al., 1980]. Til diagnosticering af lupus nefritis anbefales bestemmelse af β-glucuronidase og CF [Privalenko M.N. et al., 1974].

Ved evaluering af enzymuriens rolle i diagnosticering af nyresygdom bør følgende bestemmelser tages i betragtning. Enzymer, som i sagens natur er proteiner, med en lille molekylvægt kan passere gennem intakte glomeruli, hvilket bestemmer det såkaldte fysiologiske enzym. Blandt disse enzymer påvises konstant α-amylase (relativ molekylvægt 45.000) og uropepsin (relativ molekylvægt 38.000) i urinen.

Sammen med lavmolekylære enzymer i urinen hos raske individer kan andre enzymer også findes i små koncentrationer: LDH, aspartat- og alaninaminotransferaser, alkalisk fosfatase og CP, maltase, aldolase, lipase, forskellige proteaser og peptidaser, sulfatase, katalase, ribonuklease, peroxidase.

Højmolekylære enzymer med en relativ molekylvægt på mere end 70.000-100.000 kan ifølge Richterich (1958) og Hess (1962) kun komme ind i urinen, hvis permeabiliteten af ​​det glomerulære filter er forringet. Det normale indhold af enzymer i urinen tillader ikke at udelukke den patologiske proces i nyren med ureteral okklusion. Med epimuri kan enzymer frigives ikke kun fra nyrerne selv, men også fra andre parenkymale organer, celler i slimhinderne i urinvejene, prostatakirtlen såvel som dannede elementer af urin med hæmaturi eller leukocyturi.

De fleste enzymer er uspecifikke for nyrerne, så det er svært at afgøre, hvor de enzymer, der findes i urinen hos raske og syge mennesker, kommer fra. Graden af ​​enzymuri, selv for ikke-specifikke enzymer ved nyreskade, er dog højere end normalt eller det, der observeres ved sygdomme i andre organer. Mere værdifuld information kan tilvejebringes af en omfattende undersøgelse af dynamikken i en række enzymer, især organspecifikke, såsom transaminase.

For at løse problemet med den renale oprindelse af enzymet i urinen hjælper undersøgelsen af ​​isoenzymer med at identificere fraktioner, der er typiske for det organ, der undersøges. Isoenzymer er enzymer, der er isogene i virkning (katalyserer den samme reaktion), men heterogene i kemisk struktur og andre egenskaber. Hvert væv har sit eget isoenzymspektrum. Værdifulde metoder til adskillelse af isoenzymer er elektroforese i stivelse og polyacrylamidgeler samt ionbytterkromatografi.

Bence Jones protein

Mere pålidelig påvisning af dette paraprotein ved dets udfældning ved en temperatur på 40-60 °C. Men selv under disse forhold forekommer nedbør muligvis ikke i for sure (pH< 3,0—3,5) или слишком щелочной (рН >6,5) urin, med lav OPM og lav Bence-Jones proteinkoncentration. De mest gunstige betingelser for dets udfældning er tilvejebragt ved metoden foreslået af Patnem: 4 ml filtreret urin blandes med 1 ml 2 M acetatbuffer pH 4,9 og opvarmes i 15 minutter i et vandbad ved en temperatur på 56 °C. I nærvær af Bence-Jones-protein fremkommer et udtalt bundfald i løbet af de første 2 minutter.

Ved en Bence-Jones proteinkoncentration på mindre end 3 g/l kan testen være negativ, men i praksis er dette yderst sjældent, da dets koncentration i urinen normalt er mere signifikant. Kogprøver kan ikke stoles fuldt ud på. Med fuld sikkerhed kan det påvises i urinen ved immunelektroforetisk metode ved anvendelse af specifikke sera mod tunge og lette kæder af immunglobuliner.