Riigi standarditest antibiootikumide määramiseks piimas. Kiirtestid antibiootikumide määramiseks Piima testimine antibiootikumide esinemise suhtes

57. Erinevate antibiootikumide rühmade tuvastamine piimatoodete tooraines.

See standard kehtestab instrumentaalse ekspressmeetodi antibiootikumide olemasolu määramiseks: penitsilliin, tetratsükliini rühm, klooramfenikool (klooramfenikool), streptomütsiin, sulfoonamiidid toor- ja kuumtöödeldud piimas. Antibiootikumide tuvastamise miinimumpiirid piimas, kasutades seda meetodit:

Meetod põhineb uuritavas piimaproovis leitud antibiootikumide jääkkoguste sidumisel antikehadega, mis põhjustavad värvuvat immunokromaatilist reaktsiooni, millele järgneb biokeemilise reaktsiooni saaduste värvuse intensiivsuse määramine visuaalsel meetodil või instrumentaalsel mõõtmisel lugemisseadme abil. , mis võimaldab optilise peegelduse meetodil määrata värvi intensiivsuse määra võrreldes antibiootikumi kontrollkoguse testribal sisalduvaga (minimaalne avastamispiir) ning kuvada identifitseerimisandmed määratava antibiootikumi tüübi ja selle olemasolu kohta. või puudumine 2-8 minuti jooksul, kui identifitseerimisandmed salvestatakse seadme mikroprotsessorisse ja lisatud välkmälukaardile.

Mõõtmistulemusi töödeldakse esmalt visuaalselt ja seejärel instrumentaalselt, et tulemust kinnitada, s.t. lugemisseadme või -seadme kasutamine, mis ühendab inkubaatori ja lugemisseadme funktsioonid.

58. Piima kogu bakteriaalse saastatuse määramine.

Piima bakteriaalne saastumine määratakse reduktaasi või resasuriini testi abil.

Reduktaasi testi kasutatakse piima mikroflooraga saastatuse määra määramiseks. Selle olemus põhineb mikroobide biokeemilise aktiivsuse tuvastamisel, mis toodavad ensüümi reduktaasi, mis võib muuta mõne värvi, eriti metüleensinise värvi. Seda võimet omavad ka leukotsüüdid, askorbiinhape ja mõned teised piimas sisalduvad ained. Meetod põhineb metüleensinise pleegitamiseks kuluva aja määramisel. Reduktaasi testi eeliseks võrreldes otsese bakterioloogilise meetodiga on tulemuste saamise kiirus (umbes 5,5 tunniga). Siiski ei ole kõigil mikroorganismidel redutseeriv toime. Suuremal määral omavad seda omadust piimhappe streptokokid, E. coli, võihape ja putrefaktiivsed bakterid, mõnevõrra vähem salmonella ja stafülokokk ning streptokoki etioloogiaga mastiidi tekitajad on sellest võimest ilma jäänud. Seetõttu võib piim sisaldada suurel hulgal mastiiti põhjustavaid streptokokke ja reduktaasi testi järgi klassifitseeritakse see esimesse klassi. Lisaks annab see test suvel ülepaisutatud tulemusi ja on talvel peaaegu kasutu. Ehk siis II ja III klassi piim annab pärast kahepäevast jahutamist 4-5 C juures reduktaasi testi järgi I klassi näitajad. Järelikult annab reduktaasi test metüleensinisega väga ebatäpse ettekujutuse piima bakteriaalse saastumise astmest ja selle sanitaarkvaliteedist. Seetõttu tuleb reduktaasi testi näitajaid arvesse võtta koos teiste uurimistulemustega.

Reduktaasi testi tegemiseks lisage 20 ml piimakatseklaasi 1 ml metüleensinise töölahust ja sulgege see tihedalt korgiga. Pärast segamist asetatakse katseklaas veevanni temperatuurile 37-40 C, jälgides metüleensinise värvuse muutumise aega 20 minuti, 2 ja 5,5 tunni pärast. Töölahuse valmistamiseks võetakse 5 ml küllastunud alkoholi metüleensinise lahusega ja lisage 195 ml destilleeritud vett.

Piim klassifitseeritakse I klassi, kui metüleensinine värvus muutub 2-5,5 tunni pärast katseklaasi sisu on näidatud ensüümi reduktaasi tootvate mikroorganismide ligikaudsel arvul uuritavas piimas.

Resazuriini test. Resasuriini eeliseks on see, et sellel on suurem redokspotentsiaal, mis kiirendab uurimistööd. Piimatemperatuuril ei ole resasuriini testi parameetritele märgatavat mõju. On väga oluline, et see test tuvastaks erineva etioloogiaga subkliinilise mastiidi all kannatavate lehmade piima. Resasuriini testi oluline puudus on resasuriini indikaatori valgustundlikkus. Selle puuduse kõrvaldamiseks I.S. Zagaevsky (1971) tegi ettepaneku valmistada resasuriini lahus kombinatsioonis formaldehüüdiga. Sel juhul lahustatakse 0,05 g resasuriini 100 ml destilleeritud vees ja lisatakse 0,5 ml formaldehüüdi. Uurimiseks lisatakse automaatnoka abil 10 ml piimale 1 ml indikaatorit ja asetatakse pärast segamist tunniks ajaks veevanni temperatuurile 44 C. Reaktsiooni võetakse arvesse hetkest, mil temperatuur on kontrollklaas saavutab temperatuuri 43 C. Kontrolli jaoks tehakse test keedetud piimaga . Reaktsioon registreeritakse tunni pärast. Kui tunni jooksul ei ole segu esialgne hallikassinine värvus muutunud, klassifitseeritakse piim I klassi; lilla värvus vastab II klassile ja roosa III klassile.

Resasuriini testi eeliseks selles modifikatsioonis on see, et see kiirendab analüüsi aega peaaegu 5 korda, on reduktaasi testiga võrreldes tundlikum mastiidi piima lisandite tuvastamisel, ei vaja perioodilist jälgimist ja on demonstratiivsem, kui võtta arvesse analüüsi tulemus.

Piimas sisalduvate antibiootikumide ohtude üle ei vaielda. Teema, nagu öeldakse, on enam kui asjakohane. Esiteks on see ohtlik tarbijale – see tähendab, et riik on kohustatud seda kontrollima. Teiseks mõjutavad antibiootikumid tehnoloogilist protsessi negatiivselt: nende olemasolu korral on võimatu saada kvaliteedistandarditele vastavaid tooteid. Ärgem unustagem skandaale, mis on seotud nende soovimatute külaliste avastamisega piimatoodetes: rahalised kahjud ja maine kaotus – tagajärjed, näete, on rohkem kui tõsised. Seetõttu analüüsime testimismeetodeid, hindame plusse ja miinuseid, valime parima ja kontrollime seda!

Kuidas nad toodetesse satuvad

Antibiootikume kasutatakse laialdaselt veterinaarmeditsiinis: reeglina ravivad või ennetavad nad veiste mastiiti, hingamisteede infektsioone ja nakkushaigusi. Antibiootikume kasutatakse ka subterapeutilistes kogustes söödalisanditena, et stimuleerida loomade kasvu. Ja nende jäänused võivad hiljem sattuda loomse päritoluga toiduainetesse.

Millised on ohud tarbijale?

Antibiootikumide olemasolu piimas võib põhjustada allergilisi reaktsioone. Ja kõige ohtlikum on see, et selliste toodete regulaarne tarbimine arendab inimkeha resistentsust (resistentsust) antibiootikumide suhtes.

Kuidas need tootmist kahjustavad?

Antibiootikumid pärsivad juuretise kasvu ja muudavad võimatuks kvaliteetse piimhappetoodete ja juustu saamise: teie jogurt ei saavuta soovitud konsistentsi, mis toob kaasa kõrvalekaldeid toote kvaliteedistandarditest. Samal ajal areneb toodetes aktiivsemalt patogeenne mikrofloora.

Seadusandlik regulatsioon

Kontrollitavate antibiootikumide ja nende minimaalsete lubatud kontsentratsioonide seaduslikult kinnitatud loetelu on olemas. Riigi nõuded selles küsimuses võivad erinevates riikides oluliselt erineda.

Näiteks Euroopas on tetratsükliini rühma antibiootikumide lubatud tase (EL MRL - ​​maksimaalne jääkpiir) 100 μg/kg (ppb). Ja Venemaal - ainult 10 mcg / kg. Nende tasemete ületamine on ebaseaduslik.

Tuvastamismeetodid

Antibiootikumide tuvastamiseks piimas on palju viise. Nende hulgas:

• kiirtestid;
• mikrobioloogilised meetodid;
• ensüümi immuunanalüüsi testimissüsteemid;
• analüüsi analüütilised meetodid (HPLC jne).

Igal neist meetoditest on oma eelised ja puudused. Nende võrdlemisel kasutatakse reeglina järgmisi näitajaid:

• analüüsi aeg;
• vajadus lisavarustuse järele;
• proovi ettevalmistamise keerukus;
• tuvastatavate antibiootikumide spekter;
• hind.

Farmides, piimakogumispunktides ja piimatöötlemisettevõtetes on enim kasutatavad testid kiirtestid ja inhibeerivad mikrobioloogilised testid. Peamine põhjus on see, et need ühendavad suhtelise lihtsuse, vastuvõetava analüüsiaja ja madala hinna.

Allpool käsitleme seda tüüpi teste, määrame nende positiivsed ja negatiivsed küljed ning uurime, kas need võivad üksteist asendada.

Ekspresstestid

Kiirtestides kasutatakse antigeeni (antibiootikumi) sidumiseks spetsiifilisi antikehi. Selle tulemusena muutub riba värv, mis näitab positiivset või negatiivset tulemust.

Nende testide eripära on see, et nad suudavad tuvastada korraga ainult ühte või mitut antibiootikumide rühma. Ukrainas kõige laialdasemalt kasutatavad testid on:

• klooramfenikoolile;
• B-laktaamid ja tetratsükliinid;
• testid 4 rühma antibiootikumide samaaegseks määramiseks: β-laktaamid, tetratsükliinid, streptomütsiin ja klooramfenikool.

Kiirtestide eelised

Kiirtestide peamine eelis on analüüsi kiire kiirus: testi läbiviimiseks kuluv aeg on 2–10 minutit.

Lisaks on viimasel ajal järjest populaarsemaks muutunud testid, mis ei vaja inkubeerimist (ei vaja lisavarustust), mistõttu on neid lihtne kasutada väljaspool laborit.

Kiirtestide puudused

Ühe piimaproovi üheaegne analüüsimine kõigi suuremate antibiootikumide rühmade jaoks – nagu beetalaktaamid, tetratsükliinid, makroliidid, sulfoonamiidid, aminoglükosiidid jne – nõuab aga mitme kiirtesti kasutamist. See tähendab, et analüüsi maksumus suureneb oluliselt.

Mikrobioloogilised inhibeerivad testid

Nende testide tööpõhimõte on üsna lihtne. Piim asetatakse eelnevalt ettevalmistatud katseviaalidesse ja inkubeeritakse optimaalsel temperatuuril 64⁰C teatud aja (enamasti 3 tundi, mistõttu neid teste nimetatakse mõnikord ka kolmetunnisteks).

Katseviaalid sisaldavad toitainekeskkonda tundliku bakteritüvega (Bacillus strearothermophius calidolactis eosed) ja happesuse indikaatorit, mis pH muutumisel muudab söötme värvi. Antibiootikumide olemasolu (või puudumine) piimas määratakse värvimuutusega:

• Kui piim ei sisalda antibiootikume ega muid inhibeerivaid aineid, hakkavad viaalidesse piima lisamisel ja temperatuuri tõusul aktiivselt arenema bakterid. Selle tulemusena muutub söötme happesus ja muutub ka selle värvus.
• Kui piimas on antibiootikume, siis need pärsivad (pärsivad) bakterite kasvu ja värvimuutust ei täheldata.

Inhibiitoritestide eelised

Erinevalt kiirtestidest, millega saab tuvastada vaid ühe või mõne antibiootikumirühma ühe testiga, mikrobioloogiliste testidega saab tuvastada väga erinevaid antibiootikume – beetalaktaame, tetratsükliine, sulfoonamiide, makroliide, asaliide, aminoglükosiide, kinoole, amfenikoole – aga ka teisi inhibeerivaid aineid. Seetõttu kasutatakse neid teste sageli piimatöötlemistehastes võrdlustestidena.

Inhibiitoritestide puudused

Nende testide ainsaks puuduseks on pikk testimisaeg. Samas on ühe inhibiitori testi maksumus võrreldes kiirtestidega madalam, mida muidugi miinuseks nimetada ei saa.

Peamised testinäitajad: võrrelge ja valige ise

Nagu näeme, kiirtestid ja mikrobioloogilised (inhibiitori)testid antibiootikumide jääkkoguste tuvastamiseks piimas ei asenda, vaid ainult täiendavad üksteist ning tagavad piimatoodete maksimaalse ohutuse tarbijale ja kindlustunde tootjatele.

Järgmistes artiklites räägime üksikasjalikumalt viisidest, kuidas testida piima antibiootikumide olemasolu. Värskenduste saamiseks jälgige ajaveebi.

Taras Netesa,

juhtiv spetsialist toidutehnoloogia rühmad

LLC "HIMLABORREACTIV"

Mõnede põllumajandustootjate hoolimatu suhtumine kariloomade söötmisse põhjustab toidu saastumist erinevate ravimite, sealhulgas antibiootikumide jääkidega. Viimaseid kasutatakse sageli mitte ainult loomade ravimiseks, vaid ka sööda säilitamiseks, nende kvaliteedi parandamiseks ja loomade kasvu kiirendamiseks.

Kuna ravimpreparaadid võivad loomsetes toodetes pikka aega püsida, satuvad need inimkehasse. Antibiootikumide suur kogunemine kutsub esile allergiliste reaktsioonide ilmnemise, millel on tõsised tagajärjed angioödeemi kujul, pärsib kasulike ensüümide aktiivsust, muudab seedetrakti mikrofloorat ning soodustab stabiilse mikrofloora tüübi teket ja paljunemist. Mis põhjustab kemikaalide sisalduse suurenemist toiduainetes?

Ravimite esinemine piimas suurendab tootmisriski

Kariloomade täiendtoidule lisatakse sünteetilist päritolu ravimeid, et stimuleerida biokeemilisi reaktsioone loomade kehas, tõsta tootlikkust, kiirendada kasvu ja parandada üldist seisundit.

On ilmne, et antibiootikumidel on negatiivne mõju mikrobioloogilistele protsessidele fermenteeritud piimatoodete valmistamisel. Seetõttu jõuavad lettidele tooted, mis on valmistatud tervisele ohtliku tehnoloogia abil.

Piimapõhiste toodete, näiteks keefiri või hapukoore kääritamise dünaamika uurimine võimaldab meil kindlaks teha proovides küpsemise puudumist või aeglustumist ja teha järelduse sisalduvate kemikaalide jääkide massi kohta. Kujutage vaid ette: ühelt lehmalt saadud piimatoode, mida antibiootikumidega raviti, muudab tonni piima edasiseks töötlemiseks kõlbmatuks!

Elanikkonna kaitsmiseks ohtlike hapendatud piimatoodete eest on riik kinnitanud alusdokumentatsiooni, mis reguleerib toidutoorme ja toidukaupade ohutusnäitajate standardit. Samuti on hoolikalt välja töötatud meetodid inhibeerivate komponentide jälgimiseks, mis võimaldavad õigeaegselt avastada ja ennetada müügile tulevate toodete võltsimist.

Mikrobioloogiline meetod

GOST R 51600-2000 kehtestab mikrobioloogiliste testide standardid antibiootikumide olemasolu ja kontsentratsiooni määramiseks. Efektiivse tulemuse saamiseks kasutatakse ka kiirteste, mis põhinevad tetratsükliinide ja beetalaktaamide rühma spetsiifiliste retseptorite uurimisel.

Ühe määramise lõpetamiseks peate kulutama mitte rohkem kui 5 minutit. Olenevalt kemikaali tüübist jääb testi tundlikkus vahemikku 2–80 μg/kg.

Vastavalt GOST-ile määratakse antibiootikumi olemasolu piimatootes inhibeerimiskoha läbimõõt. Meetod põhineb sünteetiliste komponentide võime testimisel keskkonnas koos testitavate mikroobide eostega ja takistada nende arengut.

Analüüsiks võetakse piimaproovid ja neid säilitatakse külmutusseadmetes mitte rohkem kui üks ööpäev määratud temperatuuril (5±1) °C. Eosed saadakse toitekeskkonnast, mis põhineb destilleeritud veel, glükoosil ja pärmiekstraktil.

Analüüsi käigus määratud minimaalne kontsentratsioon ulatub 0,05 μg/ml-ni. Selle meetodi ainsaks puuduseks on proovide lavastamise kestus ja laboriuuringute töömahukus.

Immunoensüümi meetod

GOST 32219-2013 reguleerib streptomütsiini ja klooramfenikooli kontsentratsiooni määramise korda steriliseeritud, pastöriseeritud ja toorlehmapiimas. Meetod põhineb immunoensüümi reaktsioonil, mille tulemusena püütakse kinni keemilised ained spetsiifilise valgu retseptori poolt. Selle tulemusena moodustub tugev kompleks, mis blokeerib tehnilise indikaatori võime muuta uuritava protsessi toote värvi.

Antibiootikumide olemasolu fermenteeritud piimatoodetes määratakse visuaalselt. Sel juhul võrdleb labor ala värviintensiivsust sünteetiliste ühendite juuresolekul kontrollala varjundiga.

Kõrgefektiivne vedelikkromatograafia

GOST 33526-2015 kehtib alates 2016. aastast ja võimaldab täpselt määrata antibiootikumide sisaldust piimatöötlemistoodetes. Määruste kohaselt on tetratsükliini ja penitsilliini rühma keemiliste komponentide massifraktsiooni analüüsivahemik kuni 1,0 ppm (mg/kg).

Meetod põhineb antibiootikumide ekstraheerimisel (ekstraheerimisel) piimaproovidest. Proovid läbivad ekstrakti puhastamise etapi, mille järel määratakse spektrofotomeetrilise tuvastamistehnoloogia abil sünteetiliste ainete täpne mass. Kõik laboratoorsed protsessid toimuvad suure mõõtevahemikuga kromatograafil.

Instrumentaalne meetod

GOST 32254-2013 töötati välja piimatööstuse ettevõtetele ja see reguleerib tehniliselt toodete sertifitseerimise ja standardimise korda koos nende sisu testimisega antibiootikumide olemasolu suhtes.

Seda meetodit kasutades saab teste teha vähemalt 95% täpsusega. Need põhinevad sünteetiliste ainete seondumisel antikehadega, mis põhjustavad immunokromaatilise värvimisreaktsiooni. Võttes arvesse värvi intensiivsust, teeb laborant järelduse antibiootikumi kontrollkoguse kohta.

GOST-ide muudatused aastatel 2017-2018

Mõnedes tehniliste eeskirjade reeglites on tehtud kohandusi. Nii asendati sõna "penitsilliin" sõnaga "penitsilliinid" ning lisati punkt, mis käsitleb manustamise korda ja uuringuks proovide valimise meetodeid. Täiustatud on ka analüüsitavate toodete loetelu: sulatatud juustutooted, piimapõhine või, juustud ja võided.

Ekspresstestid firmalt "ATL"

Kääritatud piimatoodete keemilise koostise kontrollimiseks on soovitatav neid kasutada, mis määrab täpselt antibiootikumide olemasolu ja massi. Mõõteliinidega ribad on lihtsad ja hõlpsasti kasutatavad, vastavad GOST nõuetele ning võimaldavad analüüsida väljaspool laboritingimusi. Uuringu tulemusi säilitatakse pikka aega ja neid saab edaspidi kasutada võrdlevaks hindamiseks.

“Antibiootikumid piimas” pole piimakarjakasvatuses uus teema, kuid see on tootjatele valus. Tõepoolest, lisaks lehmade ravile peab farm kandma olulisi kahjusid lehmade nn lüpsmisel, kui looma ei lüpsta üldsüsteemi ühe või teise rühma antibiootikumi olemasolu tõttu. piimas.

Veterinaarmeditsiin ei seisa paigal ja pidevalt tulevad turule uue põlvkonna ravimid, mis tootja sõnul piima jälgi ei jäta. Kuid kõik need tagatised kukuvad kokku, kui spetsiaalsete testimissüsteemide abil määratakse piimas antibiootikumid.

Antibiootikumide testid piimas

Mäletan, et kolm aastat tagasi olid testid kasutusel Beta Star Combo", kes töötas tetratsükliini antibiootikumide ja beetalaktaamide (penitsilliini) avastamisel.

Möödus väga vähe aega ja välja tulid tundlikumad testimissüsteemid, näiteks " 4 ANDUR", mis on võimelised tuvastama veel kahte antibiootikumide rühma; klooramfenikool ja streptomütsiin.

Testimissüsteem 4SENSOR

Pean märkima, et igaüks saab nende testide abil õppida antibiootikume piimas tuvastama.

Visuaalse dekodeerimise käigus võrreldakse kahe rea (test ja kontroll) intensiivsust. Kui testjoon on paremini nähtav kui kontrolljoon, siis võime järeldada, et antibiootikume pole. Kui testjoon on kontrolljoonest veidi nõrgem, võime rääkida antibiootikumide olemasolust.

Testsüsteemide visuaalne tõlgendamine

"... Piima võib toiduks kasutada mitte varem kui 96 tundi pärast viimast Mastiet Forte'i manustamist..."

"...Piima kasutamine toiduks on lubatud 96 tundi pärast Multibay IMM-i viimast manustamist lehmadele..."

Näib, et 4 päeva ja kõik, saame jälle oma lehma ühisesse süsteemi lüpsta. Aga seda seal polnud. Sageli tuvastame pärast piima antibiootikumide kontrollimist ühe või teise rühma olemasolu.

Seetõttu peate enne lehma üldsüsteemi lüpsma asumist veenduma, et piimas pole antibiootikume. Kui kahtlete testimissüsteemi tulemuses (triipude nähtavuses): tehke test uuesti või oodake veel paar päeva.

Põhimõtteliselt, kui leiate piimast ühe või teise rühma antibiootikume, peaks tavaline loomaarst teile alati ütlema, kas ravis kasutatakse teatud ravimeid.

Näiteks avastati beetalaktaamid, see on tõenäoliselt penitsilliin. Näiteks sisaldub see ravimis "Mamifort", tetratsükliin sisaldub "Mastitis Forte'is", streptomütsiin sisaldub "Multijectis" ja nii edasi...

Miks on piimas sisalduvad antibiootikumid ohtlikud?

See on kõige huvitavam küsimus. Mul on selle kohta oma arvamus, kuid tore oleks uurida lisateavet. Endalegi üllatuseks ei leidnud ma ühtegi ilmset põhjust, miks antibiootikumidega piima töödelda ei tohi. Kõik taandub tõsiasjale, et antibiootikumid hävitavad inimese luid ja vigastavad teatud organeid.

Jah, ma ei väida, et antibiootikume tarbides (võtame kasvõi tavalise gripihaige ravikuuri) sureb kahtlemata kogu soolestiku kasulik mikrofloora. Seetõttu soovitatakse väga sageli paralleelselt võtta biojogurtit või bioloogilisi tooteid, näiteks Linexit.

Kuid ma pole kuskilt lugenud inimese allergia ohust antibiootikumi suhtes. Ja allergia sümptomite ilming jaguneb üldiseks ja kohalikuks. Levinud hulka kuuluvad:

anafülaktiline šokk- vererõhu järsk langus, kõriturse, hingamisprobleemid, nahalööbed, naha sügelus ja punetus;

seerumitaoline sündroom– Allergia tekib mõne nädala pärast. Iseloomustab liigesevalu, nahaärritus ja palavik.

Samuti on sündroomid: ravimipalavik ja epidermaalne nekrolüüs. See tähendab, et surm on täiesti võimalik, kui abi ei osutata õigeaegselt.

Ja võib-olla peamine tegur: antibiootikumid häirivad starterkultuuride toimimist piimas.

Lõppude lõpuks, nagu me mäletame, tapavad nad kogu mikrofloora. Seetõttu on problemaatiline saada näiteks kodujuustu piimast, mis sisaldab antibiootikumi. Vähemalt samade kohupiimatoodete saagikus väheneb. Loomulikult ei võta piimatöötlejad sellist piima tootmisse.

Seetõttu olge piima valimisel valvas ja valige usaldusväärne tootja.

Joo kvaliteetset piima ja ole meiega!. See on huvitav.

Seonduvad postitused

:o");" src="http://milkfermer.ru/wp-content/plugins/qipsmiles/smiles/strong.gif" alt=">:o" title=">:o">.gif" alt="]:->" title="]:->">!}