За државните стандарди за определување на антибиотици во млекото. Брзи тестови за одредување антибиотици Тестирање на млеко за присуство на антибиотици

57. Идентификација на различни групи на антибиотици во млечните суровини.

Овој стандард воспоставува инструментален експрес метод за одредување на присуство на антибиотици: пеницилин, тетрациклинска група, хлорамфеникол (хлорамфеникол), стрептомицин, сулфонамиди во сурово и термички обработено млеко. Минимални ограничувања за откривање на антибиотици во млекото користејќи го овој метод:

Методот се заснова на врзување на преостанатите количини на антибиотици пронајдени во примерокот на млеко за тестирање со антитела кои предизвикуваат обојлива имунохроматска реакција, проследено со одредување на интензитетот на бојата на производите на биохемиската реакција со визуелен метод или инструментално мерење со помош на уред за читање. , што овозможува да се одреди степенот на интензитетот на бојата со помош на методот на оптичка рефлексија во однос на оној вклучен во тест лента на контролна количина на антибиотик (минимална граница за откривање) и прикажување податоци за идентификација за типот на антибиотик што се одредува и неговото присуство или отсуство во рок од 2-8 минути со зачувување на податоците за идентификација од микропроцесорот на уредот и на приложената флеш картичка.

Резултатите од мерењето прво се обработуваат визуелно, а потоа инструментално за да се потврди резултатот, т.е. користење на уред за читање или опрема што ги комбинира функциите на инкубатор и уред за читање.

58. Определување на вкупната бактериска контаминација на млекото.

Бактериската контаминација на млекото се одредува со користење на редуктаза или резазурин тест.

Тестот за редуктаза се користи за да се одреди степенот на контаминација на млекото со микрофлора. Нејзината суштина се заснова на воспоставување на биохемиската активност на микробите кои произведуваат ензим редуктаза, кој може да обезбојува некои бои, особено метиленско сино. Оваа способност ја поседуваат и леукоцитите, аскорбинската киселина и некои други супстанции содржани во млекото. Методот се заснова на одредување на времето потребно за метиленско сино да се избели. Предноста на тестот за редуктаза во споредба со директната бактериолошка метода е брзината на добивање резултати (за приближно 5,5 часа). Сепак, не сите микроорганизми имаат намалувачка активност. Стрептококите од млечна киселина, E. coli, маслената киселина и гнилостните бактерии го имаат ова својство во поголема мера, салмонелата и стафилококите имаат нешто помалку, а предизвикувачите на маститис од стрептококна етиологија се лишени од оваа способност. Затоа, млекото може да содржи голем број на стрептококи кои предизвикуваат маститис, а според тестот за редуктаза ќе биде класифициран како прва класа. Покрај тоа, овој тест дава надуени резултати во лето и е речиси бескорисен во зима. Со други зборови, млекото од класа II и III по два дена ладење на 4-5 C според тестот за редуктаза дава индикатори од класа I. Следствено, тестот за редуктаза со метиленско сино дава многу неточна идеја за степенот на бактериска контаминација на млекото и неговиот санитарен квалитет. Затоа, индикаторите на тестот за редуктаза мора да се земат предвид заедно со другите резултати од истражувањето.

За да извршите тест на редуктаза, додадете 1 ml метиленско сино работен раствор во епрувета за тестирање млеко од 20 ml и цврсто затворете ја со затворач. По мешањето, епрувета се става во водена бања на температура од 37-40 C, со набљудување на времето на промена на бојата на метиленско сино по 20 минути, 2 и 5,5 часа.За подготовка на работниот раствор се земаат 5 ml заситен алкохол. раствор од метиленско сино и додадете 195 ml дестилирана вода.

Млекото се класифицира во класа I ако промената на бојата на метиленско синото се појави по 5,5 часа.Кај млекото од класа II промената на бојата се јавува за 2-5,5 часа.Млекото од класа III се обезбојува во периодот од 20 минути до 2 часа.Времето на почетокот на промената на бојата на содржината на епрувета е означена на приближниот број на микроорганизми во млекото што се тестира и кои произведуваат ензим редуктаза.

Резазурин тест. Предноста на резазуринот е тоа што има поголем редокс потенцијал, што го забрзува истражувањето. Температурата на млекото нема забележлив ефект врз параметрите на тестот за резазурин. Многу е важно овој тест да го открие млекото на кравите кои страдаат од субклинички маститис од различна етиологија. Значаен недостаток на тестот за резазурин е фотосензитивноста на индикаторот за резазурин. За да се отстрани овој недостаток И.С. Загаевски (1971) предложи подготовка на раствор на резазурин во комбинација со формалдехид. Во овој случај, 0,05 g резазурин се раствора во 100 ml дестилирана вода и се додава 0,5 ml формалдехид. За истражување, 1 ml индикатор се додава на 10 ml млеко со помош на автоматски клун и, по мешањето, се става еден час во водена бања на температура од 44 C. Реакцијата се зема предвид од моментот кога температурата во контролната цевка достигнува 43 C. За контрола се прави тест со варено млеко. Реакцијата се снима по еден час. Ако во рок од еден час почетната сиво-сина боја на смесата не се промени, тогаш млекото се класифицира како класа I; виолетова боја одговара на класа II и розова со класа III.

Предноста на тестот за резазурин во оваа модификација е што го забрзува времето на анализа за речиси 5 пати, е почувствителен на идентификување на нечистотиите од млеко од маститис во споредба со тестот за редуктаза, не бара периодично следење и е подемонстративен кога се зема предвид резултатот од анализата.

Нема дебата за опасностите од антибиотиците во млекото. Темата, како што велат, е повеќе од актуелна. Прво, тоа е опасно за потрошувачот - што значи дека државата е обврзана да го контролира. Второ, антибиотиците негативно влијаат на технолошкиот процес: доколку се присутни, невозможно е да се добијат производи кои ги исполнуваат стандардите за квалитет. Да не заборавиме на скандалите поврзани со откривањето на овие несакани гости во млечните производи: финансиски загуби и губење на угледот - последиците, гледате, се повеќе од сериозни. Затоа, ги анализираме методите на тестирање, ги проценуваме предностите и недостатоците, го избираме најдоброто и го контролираме!

Како тие влегуваат во производите

Антибиотиците се широко користени во ветеринарната медицина: тие по правило третираат или спречуваат маститис, респираторни инфекции и заразни болести кај говедата. Антибиотиците исто така се користат во суптерапевтски количини како адитиви за добиточна храна за да се стимулира растот на животните. И нивните остатоци последователно може да завршат во прехранбени производи од животинско потекло.

Кои се опасностите за потрошувачот?

Присуството на антибиотици во млекото може да предизвика алергиски реакции. А најопасно е што редовното консумирање на такви производи развива отпорност (отпорност) на човечкото тело на антибиотици.

Како тие му штетат на производството?

Антибиотиците го инхибираат растот на стартерот и го оневозможуваат добивањето квалитетни производи и сирења со млечна киселина: вашиот јогурт нема да може да ја достигне посакуваната конзистентност, што ќе доведе до отстапување од стандардите за квалитет на производот. Во исто време, патогената микрофлора се развива поактивно во производите.

Законодавно уредување

Постои законски одобрен список на контролирани антибиотици и нивните минимални дозволени концентрации. Државните барања за ова прашање може значително да се разликуваат во различни земји.

На пример, во Европа, дозволеното ниво (EU MRL - ​​максимална резидуална граница) на антибиотици од групата тетрациклини е 100 μg/kg (ppb). А во Русија – само 10 mcg/kg. Надминувањето на овие нивоа е нелегално.

Методи за откривање

Постојат многу начини за откривање на антибиотици во млекото. Меѓу нив:

• брзи тестови;
• микробиолошки методи;
• системи за тестирање на ензимски имуноесеј;
• аналитички методи на анализа (HPLC и др.).

Секој од овие методи има свои предности и недостатоци. Кога се споредуваат, обично се користат следниве индикатори:

• време на анализа;
• потребата од дополнителна опрема;
• сложеност на подготовката на примерокот;
• спектар на откриени антибиотици;
• цена.

Најмногу користени тестови на фарми, места за собирање млеко и погони за преработка на млеко се брзите тестови и инхибиторните микробиолошки тестови. Главната причина е што тие комбинираат релативна едноставност, прифатливо време за анализа и ниска цена.

Подолу ќе ги разгледаме овие типови на тестови, ќе ги утврдиме нивните позитивни и негативни аспекти и ќе откриеме дали тие можат да се заменат еден со друг.

Експрес тестови

Брзите тестови користат специфични антитела за врзување на антиген (антибиотик). Ова резултира со промена на бојата на лентата, што укажува на позитивен или негативен резултат.

Особеноста на овие тестови е тоа што тие се способни да детектираат само една или неколку групи на антибиотици во исто време. Најшироко користени тестови во Украина се:

• до хлорамфеникол;
• Б-лактами и тетрациклини;
• тестови за истовремено определување на 4 групи антибиотици: β-лактами, тетрациклини, стрептомицин и хлорамфеникол.

Предности на брзите тестови

Главната предност на брзите тестови е големата брзина на анализа: времето потребно за спроведување на тестот се движи од 2 до 10 минути.

Покрај тоа, тестовите без потреба од инкубација (не бараат дополнителна опрема) неодамна станаа сè попопуларни, што ги прави лесни за употреба надвор од лабораторијата.

Недостатоци на брзите тестови

Сепак, симултаната анализа на еден примерок од млеко за сите главни групи антибиотици - како што се бета-лактами, тетрациклини, макролиди, сулфонамиди, аминогликозиди итн. - бара употреба на неколку брзи тестови. Ова значи дека цената на анализата значително се зголемува.

Микробиолошки инхибиторни тестови

Принципот на работа на овие тестови е прилично едноставен. Млекото се става во претходно подготвени тест ампули и се инкубира на оптимална температура од 64⁰C одредено време (најчесто 3 часа, поради што овие тестови понекогаш се нарекуваат и тричасовни тестови).

Тест ампулите содржат хранлив медиум со чувствителен вид на бактерии (спори на Bacillus strearothermophius calidolactis) и индикатор за киселост што ја менува бојата на медиумот кога се менува pH вредноста. Со промената на бојата се одредува присуството (или отсуството) на антибиотици во млекото:

• Ако млекото не содржи антибиотици или други инхибиторни супстанции, кога млекото се додава во ампулите и температурата се зголемува, бактериите почнуваат активно да се развиваат. Како резултат на тоа, киселоста на медиумот се менува, а се менува и нејзината боја.
• Доколку антибиотиците се присутни во млекото, тие го инхибираат (потиснуваат) растот на бактериите и не се забележува промена на бојата.

Предности на инхибиторните тестови

За разлика од брзите тестови, кои можат да откријат само една или неколку групи на антибиотици со еден тест, микробиолошките тестови можат да откријат широк спектар на антибиотици - бета-лактами, тетрациклини, сулфонамиди, макролиди, азалиди, аминогликозиди, хиноли, амфениколи - како и други инхибиторни супстанции. Затоа, овие тестови често се користат како референтни тестови во погоните за преработка на млечни производи.

Недостатоци на инхибиторните тестови

Единствениот недостаток на овие тестови е долгото време на тестирање. Во исто време, цената на еден тест за инхибитор е помала во споредба со брзите тестови, што, се разбира, не може да се нарече недостаток.

Клучни индикатори за тестирање: споредете и изберете сами

Како што можеме да видиме, брзите тестови и микробиолошките (инхибиторни) тестови за откривање на резидуални количини на антибиотици во млекото не се заменуваат, туку само се надополнуваат и обезбедуваат максимална безбедност на млечните производи за потрошувачите и доверба за производителите.

Во идните написи ќе зборуваме подетално за начините за тестирање на млекото за присуство на антибиотици. Следете го блогот за ажурирања.

Тарас Нетеса,

водечки специјалистгрупи за прехранбена технологија

ДОО „ХИМЛАБОРЕАКТИВ“

Бескрупулозниот пристап на некои фармери кон хранењето на добитокот доведува до контаминација на храната со остатоци од разни лекови, вклучително и антибиотици. Вторите често се користат не само за лекување на животните, туку и за зачувување на добиточната храна, подобрување на нивниот квалитет и забрзување на растот на животните.

Поради фактот што лековите можат да останат во производите од животинско потекло долго време, тие влегуваат во човечкото тело. Голема акумулација на антибиотици предизвикува појава на алергиски реакции со сериозни последици во форма на ангиоедем, ја инхибира активноста на корисни ензими, ја менува микрофлората на гастроинтестиналниот тракт и промовира формирање и репродукција на стабилен тип на микрофлора. Што предизвикува зголемена содржина на хемикалии во прехранбените производи?

Присуството на лекови во млекото е зголемен ризик за производство

Лековите од синтетичко потекло се додаваат во комплементарната храна на добитокот за да се стимулираат биохемиските реакции во телото на животните, да се зголеми продуктивноста, да се забрза растот и да се подобри општата состојба.

Очигледно е дека антибиотиците имаат негативно влијание врз микробиолошките процеси во производството на ферментирани млечни производи. Како резултат на тоа, производите направени со технологија што е опасна по здравјето се појавуваат на полиците.

Проучувањето на динамиката на ферментација на производи базирани на млеко, на пример, кефир или павлака, ни овозможува да го утврдиме отсуството или забавувањето на зреењето во примероците и да извлечеме заклучок за масата на содржани преостанати хемикалии. Замислете само: млечен производ од една крава која била третирана со антибиотици ќе направи еден тон млеко несоодветно за понатамошна обработка!

За заштита на населението од опасните ферментирани млечни производи, државата одобри основна документација со која се регулира стандардот на безбедносните индикатори за прехранбените суровини и прехранбените производи. Внимателно се развиени и методи за следење на инхибиторните компоненти, што овозможува навремено откривање и спречување на фалсификување на производите што се продаваат.

Микробиолошки метод

ГОСТ Р 51600-2000 воспоставува стандарди за микробиолошки тестови за да се утврди присуството и концентрацијата на антибиотици. За да се добие ефективен резултат, се користат и брзи тестови, кои се засноваат на проучување на специфични рецептори од групата тетрациклини и бета-лактами.

За да завршите едно определување, треба да потрошите не повеќе од 5 минути. Во зависност од типот на хемикалија, чувствителноста на тестот се движи од 2 до 80 μg/kg.

Во согласност со ГОСТ, присуството на антибиотик во млечен производ се одредува според дијаметарот на местото на инхибиција. Методот се заснова на тестирање на способноста на синтетичките компоненти да се комбинираат во средина со спори на тест микроби и да го спречат нивниот развој.

За анализа, примероците од млеко се земаат и се чуваат во опрема за ладење не повеќе од еден ден на одредена температура (5±1) °C. Спорите се добиваат од хранлив медиум базиран на дестилирана вода, гликоза и екстракт од квасец.

Минималната концентрација утврдена при анализата достигнува 0,05 μg/ml. Единствениот недостаток на овој метод е времетраењето на стадиумот на примерокот и интензитетот на трудот на лабораториските истражувања.

Имуноензимски метод

ГОСТ 32219-2013 ја регулира постапката за определување на концентрацијата на стрептомицин и хлорамфеникол во стерилизирано, пастеризирано и сурово кравјо млеко. Методот се заснова на имуноензимска реакција, како резултат на која хемиските супстанции се заробени од специфичен протеински рецептор. Како резултат на тоа, се формира силен комплекс кој ја блокира способноста на техничкиот индикатор да ја промени бојата на производот од процесот што се проучува.

Присуството на антибиотици во ферментирани млечни производи се одредува визуелно. Во овој случај, лабораторијата го споредува интензитетот на бојата на областа во присуство на синтетички соединенија со сенката на контролната област.

Течна хроматографија со високи перформанси

ГОСТ 33526-2015 е на сила од 2016 година и ви овозможува прецизно да ја одредите содржината на антибиотици во производите за преработка на млеко. Според прописите, опсегот на анализа на масениот удел на хемиски компоненти за групата тетрациклин и пеницилин е до 1,0 ppm (mg/kg).

Методот се базира на екстракција (екстракција) на антибиотици од примероци од млеко. Примероците се подложени на фаза на прочистување на екстрактот, по што се одредува точната маса на синтетичките супстанции со помош на технологија за спектрофотометриско откривање. Сите лабораториски процеси се одвиваат на хроматограф со висок опсег на мерење.

Инструментална метода

ГОСТ 32254-2013 е развиен за претпријатија од млечната индустрија и технички ја регулира постапката за сертификација и стандардизација на производите со тестирање на нивната содржина за присуство на антибиотици.

Користејќи го овој метод, тестовите може да се извршат со точност од најмалку 95%. Тие се засноваат на врзување на синтетички супстанции за антитела, кои предизвикуваат реакција на имунохроматско боење. Земајќи го во предвид интензитетот на бојата, лабораторискиот техничар донесува заклучок за контролната количина на антибиотикот.

Промени во ГОСТ во 2017-2018 година

Воведени се прилагодувања на некои правила за техничко регулирање. Така, зборот „пеницилин“ беше заменет со „пеницилини“, а додаден е и делот за постапката за администрација и методите на избор на примероци за истражување. Проширена е и листата на производи кои се предмет на анализа: преработки од сирење, путер на база на млеко, сирења и намази.

Експрес тестови од компанијата ATL

За контрола на хемискиот состав на ферментираните млечни производи, препорачливо е да се користат, со што точно ќе се утврди присуството и масата на антибиотици. Лентите со мерни линии се едноставни и лесни за употреба, се во согласност со барањата на ГОСТ и овозможуваат анализа надвор од лабораториските услови. Резултатите од студијата се чуваат долго време и можат да се користат во иднина за компаративна проценка.

„Антибиотиците во млекото“ не е нова тема во млекарството, но е болна за производителите. Навистина, покрај третманот на кравите, фармата треба да претрпи значителни загуби за време на таканареченото „молзење“ на кравите, кога животното не се молзе во општиот систем поради присуството на антибиотик од една или друга група. во млекото.

Ветеринарната медицина не мирува и постојано на пазарот излегуваат лекови од новата генерација кои, според производителот, не оставаат траги во млекото. Но, сите овие гаранции пропаѓаат кога антибиотиците се одредуваат во млекото со помош на специјални системи за тестирање.

Тестови за антибиотици во млекото

Се сеќавам дека пред три години се користеа тестови “ Комбинација на бета ѕвезди", кој работел на откривање на тетрациклински антибиотици и бета-лактами (пеницилин).

Помина многу малку време и излегоа почувствителни системи за тестирање, на пример, “ 4 СЕНЗОР“, кои се способни да детектираат уште две групи антибиотици; хлорамфеникол и стрептомицин.

Тест систем 4SENSOR

Треба да забележам дека секој може да научи да идентификува антибиотици во млекото користејќи ги овие тестови.

За време на визуелното декодирање, се споредува интензитетот на две линии (тест и контрола). Ако линијата за тестирање е подобро видлива од контролната линија, тогаш можеме да заклучиме дека нема антибиотици. Ако линијата за тестирање е малку послаба од контролната линија, можеме да зборуваме за присуство на антибиотици.

Визуелна интерпретација на тест системи

„... Млекото може да се користи за прехранбени цели не порано од 96 часа по последната администрација на Мастиет Форте...“

„...Употребата на млеко за прехранбени цели е дозволена 96 часа по последната администрација на Multibay IMM на крави...“

Се чини дека 4 дена и толку, можеме повторно да ја измолзиме нашата крава во заедничкиот систем. Но, тоа не беше таму. Често, по тестирањето на млекото за антибиотици, идентификуваме присуство на една или друга група.

Затоа, пред да започнете со молзење крава во општиот систем, треба да бидете сигурни дека нема антибиотици во млекото. Ако се сомневате во резултатот (видливоста на лентите) на системот за тестирање: направете го тестот повторно или почекајте уште неколку дена.

Во принцип, ако најдете една или друга група на антибиотици во млекото, редовен ветеринар секогаш треба да ви каже дали одредени лекови се користат во третманот.

На пример, откриени се бета-лактами; ова е најверојатно пеницилин. На пример, тој е содржан во лекот „Мамифорт“, тетрациклин е содржан во „Маситис Форте“, стрептомицин во „Мултиџект“ и така натаму...

Зошто антибиотиците во млекото се опасни?

Ова е најинтересното прашање. Имам свое мислење за ова, но би било убаво да проучам дополнителни информации. На мое изненадување, не најдов очигледни причини зошто млекото со антибиотици не смее да се преработува. Сè се сведува на фактот дека антибиотиците ги уништуваат човечките коски и повредуваат одредени органи.

Да, не тврдам дека при конзумирање антибиотици (да го земеме вообичаениот курс за лекување на лице со грип), целата корисна микрофлора во цревата несомнено умира. Затоа, многу често се препорачува паралелно да се зема био-јогурт или биолошки производи, како што е Линекс.

Но, никаде не сум прочитал за опасноста од алергија на некоја личност на антибиотик. И манифестацијата на симптоми на алергија е поделена на општи и локални. Вообичаените вклучуваат:

анафилактичен шок– ненадеен пад на крвниот притисок, отекување на гркланот, проблеми со дишењето, осип на кожата, чешање и црвенило на кожата;

синдром сличен на серум– Алергија се развива по неколку недели. Се карактеризира со болки во зглобовите, иритација на кожата и треска.

Постојат и синдроми: треска со лекови и епидермална некролиза. Тоа е, смртта е сосема можна ако не се обезбеди помош навремено.

И, можеби, главниот фактор: антибиотиците го попречуваат функционирањето на стартерните култури во млекото.

На крајот на краиштата, како што се сеќаваме, тие ја убиваат целата микрофлора. Затоа, проблематично е да се добие, на пример, урда од млеко што содржи антибиотик. Во најмала рака, приносот на истите производи од урда ќе се намали. Нормално, млечните преработувачи не внесуваат такво млеко во производство.

Затоа, при изборот на млеко, бидете внимателни и изберете доверлив производител.

Пијте квалитетно млеко и останете со нас!. Ова е интересно.

Поврзани Мислења

:o");" src="http://milkfermer.ru/wp-content/plugins/qipsmiles/smiles/strong.gif" alt=">:o" title=">:о">.gif" alt="]:->" title="]:->">!}