النشاف المناعي في تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية. التطعيم المناعي (الكشف عن الأجسام المضادة في أمصال المريض لبعض مستضدات مسببات الأمراض) تهجين الحمض النووي
مقايسة الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)
مقايسة الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) تتم على مرحلتين: الأولى تفاعل الأجسام المضادة مع المستضد، والثانية هي الإشارة الأنزيمية لمركب المستضد-الجسم المضاد نتيجة لظهور اللون في خليط التفاعل وتسجيل اللون بصريا أو بالطريقة الطيفية. .
هناك خياران لـ ELISA: الطور الصلب والطور السائل، ويختلفان في طريقة فصل مكونات التفاعل الكيميائي المناعي. بالمقارنة مع الطرق الموصوفة مسبقًا للكشف عن المستضدات والأجسام المضادة، يتمتع ELISA بمزايا كبيرة:
حساسية عالية، مما يسمح باكتشاف ما يصل إلى 0.05 نانوغرام/مل من المادة؛
القدرة على استخدام كميات قليلة من مادة الاختبار (1-2 ميكرولتر)؛
إمكانية التسجيل الآلي أو المرئي للتفاعل؛
التعبير والقدرة على أتمتة جميع مراحل التفاعل.
يستخدم ELISA حاليًا على نطاق واسع في الممارسة العملية لتشخيص العديد من الأمراض المعدية ذات المسببات البكتيرية والفطرية والتهابات الأوالي والديدان الطفيلية، ولكن بشكل خاص الالتهابات الفيروسية، ولا سيما التهاب الكبد A، B، C، D، E، G، الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، فيروس الهربس، فيروس الروتا، الفيروس الغدي، الفيروس النجمي، الفيروس الصغير وأنواع العدوى الأخرى.
النشاف المناعي
مبدأ طريقة التطعيم المناعي هو اكتشاف الأجسام المضادة للمستضدات الفردية للعامل الممرض. باستخدام هذه الطريقة، يتم تحديد الأجسام المضادة لمستضدات فيروس نقص المناعة البشرية (البروتينات السكرية المغلف الفيروسية، والبروتينات الأساسية والإنزيمات الفيروسية). يتم تقييم نتائج التطعيم المناعي على أنها إيجابية ومشكوك فيها وسلبية اعتمادًا على المجموعة الكمية والنوعية من الأجسام المضادة المكتشفة.
تجدر الإشارة إلى أن النشاف المناعي أقل حساسية لـ ELISA، وفي بعض الحالات قد يتم تسجيل نتيجة سلبية إذا كان المريض مصاباً بفيروس نقص المناعة البشرية. ومع ذلك، فإن إمكانية تسجيل نتائج إيجابية كاذبة في ELISA للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية تتطلب اتباع نهج متكامل لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، مع الأخذ في الاعتبار، بالإضافة إلى نتائج التفاعلات المناعية (ELISA، المناعية) والبيانات الوبائية والسريرية.
تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR)
تم تطوير طريقة PCR من قبل عالم الكيمياء الحيوية الأمريكي كاري موليس في عام 1983 بناءً على استخدام بوليميراز الحمض النووي القابل للحرارة (Tag بوليميريز) الذي اكتشفه. مبدأ الطريقة هو زيادة عدد نسخ منطقة معينة من الحمض النووي للعامل الممرض بمقدار 10 6 – 10 8 مرات، ويتم تحفيزها في المختبر بواسطة بوليميراز الحمض النووي في الوضع التلقائي.
في ظل الظروف الاصطناعية، من الممكن إعادة إنتاج عملية النسخ لمنطقة الجينوم الخاصة بنوع أو جنس معين من مسببات الأمراض بشرط أن يكون تسلسل النيوكليوتيدات الخاص بها معروفًا. إن استخدام طرق الكشف عن منتجات النسخ المتماثل لهذه المناطق (الأمبليكونات) يسمح لنا بتحديد وجود العامل الممرض في عينة الاختبار.
يبدأ بناء السلسلة التكميلية الموصوف أعلاه فقط في كتل بداية معينة، وهي عبارة عن أقسام قصيرة مزدوجة الجديلة. عندما يتم ربط هذه الكتل بأجزاء محددة من الحمض النووي، يتم توجيه عملية تصنيع سلسلة جديدة فقط في القسم المحدد، وليس على طول سلسلة الحمض النووي بالكامل. لإنشاء كتل البداية في أقسام معينة من الحمض النووي، يتم استخدام اثنين من بادئات قليل النوكليوتيد، تسمى البادئات. تعتبر البادئات مكملة لتسلسلات الحمض النووي على الحدود اليسرى واليمنى لجزء معين ويتم توجيهها بحيث يتم إكمال شريط DNA الجديد بينهما فقط.
ل مميزات طريقة PCRيجب ان يتضمن:
حساسية عالية، مما يسمح بتحديد 10-1000 خلية في العينة؛
خصوصية عالية، حيث أن مادة الاختبار تكشف عن جزء من الحمض النووي فريد لمسبب مرض معين؛
عالمية الإجراء الخاص باكتشاف مسببات الأمراض المختلفة من عينة حيوية واحدة؛
سرعة التحليل العالية (4--4.5 ساعة)؛
إمكانية تشخيص ليس فقط الالتهابات الحادة، ولكن أيضا الكامنة.
يعد استخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل فعالاً في تشخيص مجموعة واسعة من الالتهابات البكتيرية والفيروسية.
في الآونة الأخيرة، تم تنفيذ الطرق الكمية لتحليل PCR بنجاح كبير، مما يجعل من الممكن تحديد تركيز العامل الممرض في المادة (الحمل الميكروبي أو الفيروسي)، على سبيل المثال، لتقييم النشاط التكاثري لفيروس التهاب الكبد B، وفيروس نقص المناعة البشرية C .
ومع ذلك، ينبغي أن يؤخذ في الاعتبار أن طريقة PCR لها أيضًا حدودها، على وجه الخصوص، في تشخيص الالتهابات الناجمة عن النباتات الذاتية الانتهازية.
تهجين الحمض النووي
تهجين الأحماض النووية، مثل PCR، فهو يسمح لك بتحديد العامل الممرض في العينة دون عزل مسبق. لإجراء التحليل، يتم تصنيع مسبار الحمض النووي الريبوزي (DNA) أو الحمض النووي الريبي (RNA) المفرد الذين تقطعت بهم السبل، وهو مكمل لتسلسلات النيوكليوتيدات المحددة للعامل الممرض. يتم وضع علامة على المسبار باستخدام النويدة المشعة أو الإنزيم أو أي علامة أخرى يمكن التعرف عليها بسهولة. تخضع المادة قيد الدراسة للمعالجة بغرض تحلل الكائنات الحية الدقيقة الموجودة في الاختبار الحيوي وعزل الحمض النووي وتمسخه. بعد ذلك، يتم احتضان المسبار مع عينة الاختبار ويتم قياس كمية الحمض النووي المسمى الذي دخل في التهجين مع الحمض النووي في عينة الاختبار. يمكن أن يحدث التفاعل على المواد الماصة ذات الطور الصلب وفي المحلول، ولكن الشرط الأساسي هو غسل كميات غير مرتبطة من المسبار المسمى. حساسية طريقة تهجين الحمض النووي أقل من حساسية PCR وتبلغ 10 3 خلايا ميكروبية في العينة.
عندما تم اختباري للأمراض المنقولة جنسيًا، قررت إجراء اختبار فيروس نقص المناعة البشرية. في اليوم التالي، تلقيت اختبارات جاهزة ل IFA باستثناء فيروس نقص المناعة البشرية، وفي النهاية تم تشخيص إصابتي بالكلاميديا. الهربس والميكروبلازموز. لكن فيروس نقص المناعة البشرية لم يأتِ قط. اتصلوا بي بعد 3 أيام وأخبروني أنك بحاجة إلى الحضور إلى مركز الإيدز لنقل دمك. لقد أخذت الكتلة المناعية وكانت النتيجة إيجابية. يمكن أن يكون imunablot إيجابيًا كاذبًا لأمراض الهربس الكلاميديا الميكربلازما وفيروس الورم الحليمي البشري
خبراء Woman.ru
تعرف على رأي أحد الخبراء في موضوعك
اناستازيا شيستيريكوفا
روسينا ايرينا فلاديميروفنا
طبيب نفساني، تخفيف التوتر. متخصص من موقع b17.ru
أولغا يوريفنا ديجانيفا
الطبيب النفسي. متخصص من موقع b17.ru
أولغا بوريسينكو
عالم نفسي، معالج الجشطالت. متخصص من موقع b17.ru
ديمتري فاليريفيتش تيشاكوف
أخصائي نفسي، مشرف، معالج أسري جهازي. متخصص من موقع b17.ru
شيان أولغا فاسيليفنا
اخصائي نفسي، استشاري نفسي. متخصص من موقع b17.ru
أوكسانا لوشانكينا
أخصائية نفسية، علاقات أسرية. متخصص من موقع b17.ru
آنا داشيفسكايا
طبيب نفساني، استشارات عبر سكايب. متخصص من موقع b17.ru
ايرينا بوكينا
الطبيب النفسي. متخصص من موقع b17.ru
أكسينوف آنا ميخائيلوفنا
عالم نفسي، مرشح لتحليلات المجموعة. متخصص من موقع b17.ru
لا أريد إخافتك، لكن عندما يتصلون بك إلى مركز الإيدز، يكون الأمر إيجابيًا دائمًا تقريبًا، لا تعيده، حظًا موفقًا لك، الشيء الرئيسي هو أن تأخذ العلاج وتعيش طويلاً
أحد الأصدقاء يعيش مع فيروس نقص المناعة البشرية منذ عشر سنوات ويعتني بنفسه.
يقولون أنه في غضون ثلاث سنوات قد يجدون علاجًا.
على كل حال لا تيأس ولا تنشر هذا، احصل على العلاج
لا، لا يمكن أن يكون IB إيجابيًا كاذبًا ولا تؤثر أي أمراض منقولة جنسيًا على هذا الاختبار؛ إذا كانت النتيجة إيجابية، فللأسف أنت مصاب بفيروس نقص المناعة البشرية، وتحتاج إلى مراقبة خلاياك المناعية وبدء العلاج في الوقت المحدد.
للأسف، لا ((إذا تم استدعاؤك إلى المركز، فهذا بالتأكيد فيروس نقص المناعة البشرية
بقدر ما أعرف، يمكن أن تكون نتائج اللطخة المناعية الأولى وحتى اللاحقة موضع شك. ليست إيجابية كاذبة، بل مشكوك فيها. ومن ثم يوصف تكرار التحليل. وأقتبس النص من الموقع:
"يستخدم النشاف المناعي في أغلب الأحيان لتأكيد تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. تعتبر منظمة الصحة العالمية الأمصال الإيجابية التي يتم فيها الكشف عن الأجسام المضادة لأي بروتينين مغلفين لفيروس نقص المناعة البشرية عن طريق التطعيم المناعي. وفقًا لهذه التوصيات، إذا كان هناك تفاعل مع بروتين واحد فقط من بروتينات الغلاف (gp160، gp120، gp41) مجتمعًا أو بدون تفاعل مع بروتينات أخرى، فإن النتيجة تعتبر مشكوك فيها ويوصى بإعادة الاختبار باستخدام مجموعة من سلسلة مختلفة أو من شركة مختلفة. وإذا ظلت النتيجة مشكوك فيها حتى بعد ذلك، تستمر الدراسات كل 3 أشهر.
يمكنك جوجل ذلك. إذا كان الأمر كذلك، آمل ألا يتم التأكد من إصابتك بفيروس نقص المناعة البشرية. ولكن إذا تم تأكيده، فاعلم أن الناس اليوم يعيشون مع هذا التشخيص ويعيشون مثل الأشخاص الأصحاء وينجبون الأطفال. الشرط الرئيسي هو الانضباط في العلاج. الصحة لك!
العلاج المضاد للفيروسات القهقرية على الإنترنت
الآلات الحاسبة
الموقع مخصص للعاملين في المجال الطبي والصيدلاني 18+
شرح التحليل - طخة مناعية
الرجاء مساعدتي في فك التحليل
إنف (GP160)+
إنف (GP110/120)+
إنف (GP41)+
هفوة(P55)+
هفوة(P40)+
هفوة(ص25)+
بول(P68)+
بول(P52)+
بول(P34)+
مرحبًا! منذ عامين ونصف أجريت اختبار فيروس نقص المناعة البشرية، وكانت هناك هذه البقعة المناعية:
جي بي-160+، جي بي-110/120+، جي بي-41+، بي17+، بي25+، بي31+، بي34+، بي52+، بي55+، بي68+. وهنا الكتلة المناعية من 30/05/18: Gp-160+، Gp-41+، GAG 1 -، poll+، env2-. ليس من الواضح ما يعنيه roll+؟ هل هو الوحيد هناك أم أنه لم يكشف عن نفسه؟ وأين ذهبت بقية السناجب؟
Pol و Env عبارة عن جينات تقوم بتشفير مجموعات من البروتينات. اعتبره مجرد تسجيل مختلف. السؤال مختلف. ما الذي ننتظره؟ لماذا نفكر في اللطخة؟ كل شيء واضح جدا. يجب القيام بشيء ما.
لقد اعتدت بالفعل على حقيقة أنني مصاب بفيروس نقص المناعة البشرية. وجاهز للعلاج .
مهتم فقط بسماع رأيك هل هذه عدوى حديثة أم أنني أفتقد شيئًا ما؟ أم أنه يحدث أحيانًا أن تنفتح الكتلة المناعية ببطء شديد؟
لقد ألقيت اليوم نظرة على اختباراتي في ملفي الشخصي (الذي تم إجراؤه في SC):
ELISA في نظام الاختبار الأول - إيجابي
ELISA على نظام الاختبار الثاني - سلبي (كيف ذلك؟)
التالي هو IB (تم إجراؤه في المختبر و SC قبل شهر):
طخة مناعية في نظام الاختبار الأول: gp 160+، gp 41+
طخة مناعية على نظام اختبار آخر: gp41+، p24+، p17+
طخة مناعية على نظام الاختبار الثالث: gp160+، gp120+، gp41+، p24+
وفقًا لتوقعاتي، كان من الممكن أن أصاب بالعدوى قبل عام (المرحلة الحادة كانت في أبريل في مكان ما)، أو قبل 9 أشهر، لكن بشكل عام لا أعرف متى) كنت دائمًا أستخدم وسائل الحماية ومارس الجنس بدون واقي ذكري مرة واحدة فقط في خريف عام 2017.
لقد اجتزت اليوم اختبارات VN وIS مرة أخرى. سأبدأ تيرا في غضون شهر، عندما يصل الطلب.
إضافة مواعيد للاختبارات المذكورة.
اللطخة الأولى قبل ELISA؟ لا تغلب. وليس هناك أي معنى هنا يسمح لنا بالقول إن الإصابة الجديدة، أو العكس، أمر مرجح للغاية.
سيبقى لغزا ما لم تعثر على المصدر عن طريق الخطأ وتقارنه.
للتوضيح إذن
أخذته إلى Invitro.
أول ELISA هو 11 مايو.
ثم تم مسح نفس المصل وظهر الاختبار إيجابيا، حيث تم الكشف عن بروتينين.
جي بي 160+، جي بي 41+
ثم أخذته إلى SC مرة أخرى.
لقد تبرعت بالدم في 29 مايو.
وهناك تم إخضاعه لعدة أنظمة اختبار، حيث أظهر الأول سلبيًا، والثاني إيجابيًا. ELISA السلبية لا تزال مضحكة.
بعد ذلك، يذهب نفس المصل إلى اللطخة، حيث جاءت البيانات:
نظام الاختبار الأول: gp41+، p24+، p17+
نظام الاختبار الثاني: gp160+، gp120+، gp41+، p24+
ولكن هذا ليس نقطة.
لقد وصل تحليل جديد للملكية الفكرية - 754. وهذا أمر مشجع. VN ليست جاهزة بعد. بمجرد وصوله، ربما سأبدأ في فركه بالفعل.
أنا متأكد بنسبة 80٪ أن العدوى حدثت قبل عام. لكن حقيقة أن اللطخة تفتح ببطء وأن اختبار ELISA سلبي هو أمر غريب. أم أن هذا ضمن الحدود الطبيعية؟
ELISA السلبية لا تزال مضحكة. أتمنى لو كنت أعرف اسم النظام حتى أتمكن من تدوينه في دفتر أسود. على الرغم من أن هذه اللحظة، إذا لم تأخذ النظرية مع الزواج، تؤيد بشدة الإصابة المبكرة.
أنا متأكد بنسبة 80٪ أن العدوى حدثت قبل عام. اللطخة سيئة إلى حد ما لتلك الفترة. ليس مستحيلاً، لكنه غير مرجح.
في مرحلة ما، بدأت أشك في نتائج اختبارات فيروس نقص المناعة البشرية - لذلك أنا في انتظار VN.
وهنا يتم وضع النقطة الأخيرة في السؤال.
هل حقيقة أن IP نما بمقدار 200 نسخة في شهر واحد دون تيرا يعتبر أيضًا ضمن المعدل الطبيعي؟ أنا الآن أتناول عقار أورسوسان لعلاج ورم في المرارة - تقول النشرة الداخلية على العبوة أن الدواء يحسن المناعة.
من الضروري تقييم كل من المحتوى النسبي ومراعاة بيانات مختبر واحد باستخدام طريقة حسابية واحدة. لأن الله يعلم ما يحدث مع CD4.
بشكل عام، CD4 هو 780 خلية / ميكرولتر. VN - 250 نسخة/مل.
وهذا بدون علاج. أي أن CD4 من 486 قفز إلى 780 في شهر واحد.
انخفض VN من 550 إلى 250 نسخة.
ومع ذلك، أليس هذا غريبا أم أن مثل هذه القفزات ضمن النطاق الطبيعي؟ هل حان الوقت لبدء Teru؟)
مرحبًا! أخذت IFA ثلاث مرات، في كل مرة +، جاءت الكتلة المناعية p24+ p18+ من SC. وكان الخطر المحتمل قبل أكثر من ستة أشهر. يشير ص 24 إلى أن هذا لا يزال فيروس نقص المناعة البشرية؟
اللطخة مشكوك فيها، كرر بعد 6-8 أسابيع. على الأرجح إنذار كاذب.
يوم جيد!
وصلت نتائج الاختبار، بما في ذلك اللطخة:
اتصال خطير: 24/04/2018
اختبار ELISA لفيروس نقص المناعة البشرية 23/05/2018 (4 أسابيع من الاتصال الخطير أو 29 يومًا) النتيجة "+"
اختبار ELISA لفيروس نقص المناعة البشرية 28/05/2018 (5 أسابيع من الاتصال الخطير أو 34 يومًا) نتيجة "إعادة الاختبار"
اختبار فيروس نقص المناعة البشرية ELISA 06/01/2018 (5 أسابيع من الاتصال الخطير أو 38 يومًا) النتيجة "+"
وصلت اللطخة من التحليل الأول (05.23.18):
GP160 س.
ص 24 ما يلي.
تم إجراء الفحوصات الجديدة بتاريخ 06/06/2018 ELISA وHIV RNA PCR في مركز الإيدز المحلي. وما زلنا ننتظر النتائج.
أسئلة حول البقعة:
1. في حالة وجود P24، فهل هو بالضرورة مستضد لفيروس نقص المناعة البشرية أم يمكن اكتشاف هذا البروتين في أمراض أخرى؟
2. ماذا يعني الاختصار "sl" بجوار البروتين؟ عادةً ما تحتوي البقع الموصوفة على + أو -
3. ما الذي يحدد نشر لطخة؟ هل يعتمد على الفترة أم على الخصائص الفردية للجسم؟
4. مع مثل هذه اللطخة في الأسبوع الرابع من جهة اتصال خطيرة، هل هناك احتمال ألا يكون فيروس نقص المناعة البشرية؟
أتمنى لك يوما سعيدا وشكرا لك.
1. لا، من الممكن أن يكون مجرد بروتين مماثل ذو طبيعة مختلفة. 2. ضعيف. أولئك. مشكوك فيه. 3. مصطلحات وتنفيذ الخصائص الفردية، ولكن في المتوسط، كل شيء قريب جدًا. 4. السؤال خاطئ، هناك دائما فرصة حتى يتم التشخيص.
مرحبًا!
الرجاء مساعدتي في التنقل بين نتائج الاختبار وفهم كيفية التصرف بشكل صحيح حتى تكون الاختبارات المتكررة صحيحة.
تم إجراء الاختبارات في 25 مايو 2018
فيروس نقص المناعة البشرية
NEW LAV BLOT 1 - غير محدد. من 29/05/2018
علامات فيروس نقص المناعة البشرية IB
جي بي 160+
جي بي 120 -
جي بي 41 -
ص55+
ص40 —
ص24+
ص18 —
ص 68 -
ص52-
ص 34 -
فيروس نقص المناعة البشرية إليسا
تفاعل ADVIA Centaur فيروس نقص المناعة البشرية Ag-Ab ELISA 12.00 إيجابي. (05/28/2018)
يوصى بتكرار التحليل بعد أسبوعين.
في نوفمبر 2017، كان هناك NPA، وبعد ذلك أجريت الاختبارات باستخدام نظام اختبار فيروس نقص المناعة البشرية Ag\Ab Combo Abbott Architect، وكانت النتيجة سلبية.
في نفس الوقت قمت بإجراء فحص دم عام. الخلايا الليمفاوية مرتفعة قليلاً، وعدد الحمضات هو 0 بالضبط (لكن كان لدي مستويات مماثلة من الحمضات من قبل.
السؤال الرئيسي هو:
ما هي الأدوية التي يمكن أو لا يمكن تناولها خلال هذين الأسبوعين؟ (لا أريد شيئًا "كريهًا")
أعاني بشكل دوري من نوبات الحساسية، وعادة ما أتناول Tavegil. هل يجب التخلي عنها؟
هل يمكنني تناول المضادات الحيوية قبل الاختبار؟ (إذا وصفه الطبيب لعلاج الالتهابات والأمراض الأخرى)
النشاف المناعي في تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية
اللطخة المناعية (اللطخة المناعية، اللطخة الغربية، اللطخة الغربية)- يجمع بين مقايسة الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) مع النقل الكهربي الأولي لمستضدات الفيروس على شريط النيتروسليلوز (الشريط).
في هذا الاسم العلمي الجميل، "اللطخة" على الأغلب تترجم بـ "لطخة"، و"غربية" بـ "غربي" تعكس اتجاه توزيع هذه "اللطخة" على الورقة من اليسار إلى اليمين، أي على منطقة جغرافية الخريطة تتوافق مع الاتجاه من الغرب إلى الشرق." جوهر طريقة "اللطخة المناعية" هو أن تفاعل الإنزيم المناعي لا يتم باستخدام خليط من المستضدات، ولكن مع مستضدات فيروس نقص المناعة البشرية، التي تم توزيعها مسبقًا عن طريق الرحلان المناعي إلى أجزاء تقع وفقًا للوزن الجزيئي على سطح غشاء النيتروسليلوز. ونتيجة لذلك، يتم توزيع بروتينات فيروس نقص المناعة البشرية الرئيسية، الحاملة للمحددات المستضدية، على السطح في شكل خطوط منفصلة، تظهر أثناء تفاعل الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم.
تتضمن Immunoblot عدة مراحل:
إعداد الشريط.يتعرض فيروس نقص المناعة البشرية (HIV)، الذي تم تنقيته مسبقًا وتدميره إلى مكوناته الأساسية، للرحلان الكهربائي، ويتم فصل المستضدات التي يتكون منها فيروس نقص المناعة البشرية بالوزن الجزيئي. بعد ذلك، باستخدام طريقة النشاف (المشابهة لضغط الحبر الزائد على وسادة النشاف)، يتم نقل المستضدات إلى شريط من النيتروسليلوز، والذي يحتوي الآن على طيف من نطاقات المستضد المميزة لفيروس نقص المناعة البشرية، والتي لا تزال غير مرئية للعين.
فحص العينة.يتم تطبيق مادة الاختبار (المصل، بلازما دم المريض، وما إلى ذلك) على شريط النيتروسليلوز، وإذا كانت هناك أجسام مضادة محددة في العينة، فإنها ترتبط بنطاقات مستضدية (مكملة) مقابلة تمامًا. نتيجة للتلاعبات اللاحقة، يتم تصور نتيجة هذا التفاعل - جعلها مرئية.
تفسير النتيجة.إن وجود أشرطة في مناطق معينة من صفيحة النيتروسليلوز يؤكد وجود أجسام مضادة لمستضدات فيروس نقص المناعة البشرية المحددة بدقة في المصل الذي تم اختباره.
في الوقت الحالي، تعد اللطخة المناعية (immunoblot) هي الطريقة الرئيسية لتأكيد وجود الأجسام المضادة الخاصة بالفيروس في مصل الاختبار. في بعض حالات الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، قبل حدوث الانقلاب المصلي، يتم الكشف عن أجسام مضادة محددة بشكل أكثر فعالية عن طريق التطعيم المناعي مقارنة بـ ELISA. عند الدراسة باستخدام طريقة التطعيم المناعي، وجد أنه في أغلب الأحيان يتم اكتشاف الأجسام المضادة لـ gp 41 في أمصال المرضى المصابين بالإيدز، ويتطلب اكتشاف p24 لدى الأشخاص الذين تم فحصهم لأغراض وقائية بحثًا إضافيًا لتحديد ما إذا كانوا مصابين بفيروس نقص المناعة البشرية. أثبتت أنظمة اختبار النشاف المناعي المستندة إلى البروتينات المؤتلفة المهندسة وراثيًا أنها أكثر تحديدًا من الأنظمة التقليدية المعتمدة على المحللة الفيروسية النقية. عند استخدام مستضد مؤتلف، لا يتم تشكيل شريط مستضد منتشر، ولكن شريط مستضد ضيق محدد بوضوح، والذي يمكن الوصول إليه بسهولة للتسجيل والتقييم.
تكشف أمصال الأفراد المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية-1 عن أجسام مضادة للبروتينات والبروتينات السكرية الرئيسية التالية - بروتينات الغلاف الهيكلي (env) - gp160، gp120، gp41؛ النواة (الكمامة) - p17، p24، p55، وكذلك الإنزيمات الفيروسية (pol) - p31، p51، p66. الأجسام المضادة للبيئة نموذجية بالنسبة لفيروس نقص المناعة البشرية-2 - gp140، gp105، gp36؛ الكمامة - ص16، ص25، ص56؛ بول - ص68.
من بين الطرق المختبرية اللازمة لتحديد خصوصية التفاعل، فإن الطريقة الأكثر شهرة هي اكتشاف الأجسام المضادة لبروتينات غلاف فيروس نقص المناعة البشرية-1 - gp41، gp120، gp160، وHIV-2 - gp36، gp105، gp140.
تعتبر منظمة الصحة العالمية الأمصال الإيجابية التي يتم فيها الكشف عن الأجسام المضادة لأي اثنين من البروتينات السكرية لفيروس نقص المناعة البشرية عن طريق التطعيم المناعي. وفقًا لهذه التوصيات، إذا كان هناك تفاعل مع بروتين واحد فقط من بروتينات الغلاف (gp 160، gp 120، gp 41) مجتمعًا أو بدون تفاعل مع بروتينات أخرى، فإن النتيجة تعتبر مشكوك فيها ويوصى بإعادة الاختبار باستخدام اختبار مجموعة من سلسلة مختلفة أو من شركة مختلفة. إذا ظلت النتيجة مشكوك فيها حتى بعد ذلك، يوصى بالمراقبة لمدة 6 أشهر (البحث بعد 3 أشهر).
قد يشير وجود تفاعل إيجابي مع المستضد p24 إلى فترة من الانقلاب المصلي، حيث تظهر الأجسام المضادة لهذا البروتين أولاً في بعض الأحيان. في هذه الحالة، يوصى، اعتمادًا على البيانات السريرية والوبائية، بتكرار الدراسة بعينة مصل مأخوذة بعد أسبوعين على الأقل، وهذا هو الحال بالضبط عندما يكون اختبار الأمصال المقترنة ضروريًا في الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية.
قد تعكس التفاعلات الإيجابية مع بروتينات gag وpol دون تفاعل مع بروتينات env الانقلاب المصلي المبكر وقد تشير أيضًا إلى الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية -2 أو تفاعل غير محدد. يتم إعادة اختبار الأفراد الذين حصلوا على هذه النتائج بعد اختبار فيروس نقص المناعة البشرية -2 بعد 3 أشهر (خلال 6 أشهر).
سؤال: اختبار فيروس نقص المناعة البشرية المتكرر؟
تم فحصي بحثًا عن الأمراض المنقولة جنسيًا (بدون أعراض - أردت الثقة في علاقتي مع المرأة). وكان اختبار فيروس نقص المناعة البشرية إيجابيا. بعد ذلك، أظهر الموجات فوق الصوتية وجود ورم في الكلى، والذي تمت إزالته (اتضح أنه خبيث).
قرأت كتاب I. M. Sazonova، يقول إن الورم الخبيث يمكن أن يعطي نتيجة اختبار إيجابية لفيروس نقص المناعة البشرية.
هل يمكن أن يكون هذا هو الحال بالضبط، أم أنه ليس هناك ما نأمل فيه؟
تحتاج إلى إجراء اختبار السيطرة على فيروس نقص المناعة البشرية. إذا تم تحديد اختبار فيروس نقص المناعة البشرية الأول بواسطة ELISA، فقد تكون النتيجة إيجابية كاذبة. يمكن التحقق من موثوقيتها من خلال طريقة تشخيصية أكثر حساسية - PCR (تفاعل البوليميراز المتسلسل)، الذي يكتشف الحمض النووي للفيروس في الدم.
يساعد. 16/12/10 ELISA (+) IB(+) ثم من 23/03/11 إلى 19/05/11 تسعة ELISA سلبية (-) و PCR كمي. لن يتم تحديدها. في عام 2002، أثناء الحمل، كان اختبار ELISA إما (+) أو (-) ولكن IB يكون دائمًا (-). من عام 2004 إلى عام 2008، أخذت ELISA (-) مرتين في السنة، ولكن في 30/04/2008 كان IFA (+) وIB غير محددين. ثم مرة أخرى كل شهرين أجريت اختبار ELISA دائمًا (-). وقد تم كتابته أعلاه منذ ديسمبر 2010. وفي الوقت نفسه، لم أقم بالحقن مطلقًا، وزوجي دائمًا لديه ELISA (-). CD4 980 خلية. وفحص الدم لمرض الزهري في 29 أبريل أعطى 3+++، ثم ثلاث مرات. سلبي كل 10 أيام. التهاب الكبد الكل (-). وقد كان أي شخص شيء مماثل؟ شكرًا لك.
يرجى توضيح ما إذا كنت قد خضعت لـ RIBT (رد فعل عدم حركة اللولبية الشاحبة)، وإذا كان الأمر كذلك، ما هي نتائج هذه الدراسة.
لا لم يقترح علي أحد أن أقوم بمثل هذا التحليل ماذا سيظهر؟ أتمنى أن تفهم أنني كنت أتحدث عن اختبارات فيروس نقص المناعة البشرية. شكرًا لك. هل كانت هناك حالات مماثلة في ممارستك؟ بالمناسبة، كان أمن المعلومات غير واضح في عام 2008 لأن... كان هناك بروتين p24/25. في عام 2010 بروتينات IB(+) gp160.41.120 p24.17.31. ثم عندما عاد IFA مرة أخرى 3 مرات (-) أرسلوني إلى البكالوريا الدولية في الرابع من أبريل. كانت النتيجة إيجابية، لكن البروتينات gp 120 و41. تم شطب الباقي بمعجون أحمر وأدناه باللون الأحمر IB REPEAT. لكن PCR سوف ينكر نفس الرقم. بعد 4 أبريل، قمت بإجراء اختبار ELISA وتم رفضه بالفعل 4 مرات. كل شيء في مركز السرعة بما في ذلك اختبارات المستضدات والأجسام المضادة. أنا الآن في انتظار تكرار IB وPCR عالي الجودة. هذا كل شيء. أنا متعب جدًا من التفكير والانتظار. على أمل الأفضل. شكرًا لك. أنا أتطلع حقًا إلى إجابتك.
إذا طرحت أي سؤال، فيرجى محاولة صياغته بشكل أكثر تحديدًا في المرة القادمة، وتوضيح التشخيص. يستخدم RIBT لتأكيد تشخيص مرض الزهري. لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية بدقة، يتم تحديد الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية في الدم عن طريق ELISA وimmunoblot. يتم تأكيد التشخيص فقط إذا كانت كلتا النتيجتين إيجابيتين.
آسف لصياغة السؤال بشكل غير دقيق. كتبت أنه في ديسمبر/كانون الأول، جاءت اختبارات ELISA وImunoblot لفيروس نقص المناعة البشرية إيجابية. ولكن منذ شهر مارس، كان اختبار IFA سلبيًا لفيروس نقص المناعة البشرية 9 مرات. إذا كنت مسجلاً في مركز السرعة فهل يحدث هذا بالفعل؟ فيروس نقص المناعة البشرية إما أن يكون دائمًا إيجابيًا أو سلبيًا. وكيف يمكن استخدام اللطخة المناعية إذا كانت نتيجة اختبار ELISA لفيروس نقص المناعة البشرية سلبية؟ ثم سينكرون الجميع ifa، فأنت بحاجة إلى التحقق من وجود طخة مناعية، فماذا يحدث؟ مركز السرعة لدينا لا يستطيع أن يجيبني على أي شيء. لذلك التفت إليك. شكرًا لك.
لسوء الحظ، يمكن لكل من ELISA وimmunoblot إعطاء نتائج إيجابية كاذبة. هذا هو السبب في أن تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية يعتبر نهائيًا فقط مع الكشف المتزامن عن فيروس نقص المناعة البشرية باستخدام ELISA وطريقة المناعية.
مرحبًا، تلقيت اليوم نتائج اختبار PCR عالي الجودة لفيروس نقص المناعة البشرية - لم يتم اكتشاف الفيروس وأدى تكرار اللطخة المناعية لفيروس نقص المناعة البشرية إلى عدم التحديد بسبب البروتين 41. وقال مركز الإيدز إنه على الأرجح لا يوجد فيروس نقص المناعة البشرية، ولكن في جسدي هناك أجسام مشابهة في بنيتها لفيروس نقص المناعة البشرية. ولكن ما رأيك، مع الأخذ في الاعتبار أسئلتي من 15 و 16 يونيو (انظر أعلاه)، هل يوجد فيروس نقص المناعة البشرية أم لا؟ شكرًا لك.
في هذه الحالة، تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية أمر مشكوك فيه.
تكتب أنه فقط مع الكشف المتزامن عن فيروس نقص المناعة البشرية باستخدام IFA وimmunoblot، يعتبر تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية نهائيا. ولكن ماذا بعد ذلك في حالتي؟ بعد كل شيء، الجميع سوف ينكر PCR. وblot وifa يقفزان في كل مكان طوال الوقت. لمدة 9 سنوات. أخبرني، إذا كان الفيروس موجودًا في دمي، فيمكن تحديد الحمض النووي الريبوزي (RNA) والحمض النووي (DNA) الخاص به بدقة بعد كل هذه السنوات. وهل يمكن أن تستمر فترة الحضانة أو "النافذة" لسنوات عديدة؟ هل هناك أي نتائج PCR سلبية كاذبة لفيروس نقص المناعة البشرية في مثل هذه الفترة الزمنية؟ نعم، نسيت أن أقول إن الاختبارات السريعة لفيروس نقص المناعة البشرية التي أجريها في مركز الأمراض القلبية الوعائية تكون دائمًا سلبية، أو لا يمكنك الاعتماد عليها أيضًا؟ شكرًا لك.
في هذه الحالة، لا يعد تشخيص PCR هو الطريقة الرئيسية لتحديد ديناميكيات العملية - فالطرق المصلية أكثر إفادة. وفي هذه الحالة، يكون احتمال الحصول على نتائج سلبية كاذبة مرتفعا. تتمتع الاختبارات السريعة لفيروس نقص المناعة البشرية بعتبة حساسية عالية، لذا يمكنها أيضًا إعطاء نتيجة سلبية كاذبة.
آسف. بالتأكيد كتبته في المكان الخطأ. يرجى الإجابة في موضوع فيروس نقص المناعة البشرية أم لا. شكرًا لك.
في حالة عدم تلقي بريدك الإلكتروني إشعارًا بأنك قد تلقيت ردًا، يمكنك عرض إجابة سؤالك على هذا العنوان http://tiensmed.ru/news/answers/vich-ili-ne-vich-. لغة البرمجة
مرحبًا! من فضلك قل لي كيف أسجل في شاشة LCD (أنا حامل في الأسبوع العاشر حاليًا)، لقد أجريت اختبارات فيروس نقص المناعة البشرية، قبل يومين اتصل بي الطبيب وقال إن الاختبارات الأولية لفيروس نقص المناعة البشرية كانت إيجابية (تم إجراء الاختبار الأول في كيروفوغراد، لكن لا توجد نتيجة رسمية من كييف حتى الآن)، في نفس اليوم في مختبر مدينتنا أجرينا اختبارين سريعين من شركة فارماكو CITO TEST فيروس نقص المناعة البشرية 1/2، وكانت النتيجتان سلبيتين، وقال مساعد المختبر إن هذه الاختبارات يمكن الاعتماد عليها ولا داعي للقلق، لأن هذا يحدث أثناء الحمل، وقد يتم الخلط بين هذه الاختبارات. طلب مني الطبيب أن أتبرع بالدم مرة أخرى وأجريت فحص دمي مرتين أخريين في مستشفيات مختلفة (ما زلت لا أحصل على أي من النتائج الثلاث). أنا قلقة للغاية، فأنا لست مدمنة مخدرات، ولم تكن لدي أي علاقات جنسية مشكوك فيها، وحتى لو مرضت، نادرًا ما أمرض، والفحوصات الأخرى كلها طبيعية. هل يمكن الوثوق بالاختبارات السريعة؟ هل يحدث هذا حقاً أثناء الحمل؟ لقد أخافني الطبيب كثيرًا. شكرًا لك
بادئ ذي بدء، عليك أن تهدأ ولا تفكر في السيء. في بعض الأحيان أثناء الحمل تكون هناك نتائج إيجابية كاذبة. من الضروري إعادة فحص الدم لفيروس نقص المناعة البشرية وانتظار نتائج الفحص.
مرحبًا! الحقيقة هي أنه منذ شهرين كان لدي اتصال جنسي مع فتاة (ما زلنا نتواعد). وبعد 1.5 أسبوع ارتفعت درجة الحرارة إلى 37.4. وسرعان ما كانت نائمة. ومن المؤكد أننا أجرينا اختبار IFA بعد أسبوعين ومرة أخرى بعد شهر ونصف. كلا الإجابتين سلبيتان. لكن ما زلت أعاني من الحمى والسعال، مع تحسن متفاوت. قل لي، من فضلك، هل هناك خطر؟ بالإضافة إلى ذلك، عملت لفترة طويلة دون أيام إجازة وقبل أسبوع كنت في إجازة مرضية (مع مرض السارس). اختبارات الدم والرئة طبيعية. شكرًا لك.
قد تكون درجة الحرارة هذه مرتبطة بمرض فيروسي، أو أن الجسم لم يتعاف بعد، أو بالتعب المزمن. في حالة استبعاد الأمراض العضوية، يكون اختبار الدم والبول العام ضمن الحدود الطبيعية، وكذلك بيانات الفحص الفلوري ضمن الحدود الطبيعية أيضًا، فمن الضروري استبعاد الأمراض المنقولة جنسيًا: الكلاميديا، وداء المفطورات، وداء اليوريابلازما، والتي يمكن أن تكون يسبب التهاب الأعضاء الصغيرة في الحوض والإحليل، ونتيجة لذلك، زيادة في درجة حرارة الجسم. اقرأ المزيد عن أسباب ارتفاع درجة حرارة الجسم بالضغط على الرابط: ارتفاع درجة الحرارة.
مرحبًا. هذا هو الأمر: منذ أكثر من عام، قمت باتصال جنسي غير محمي مع فتاة كانت تتجول. أصرت على أنها ليست مريضة، لكنني لم أستطع أن أثق بها بنسبة 100%. كما أكدت أنها خضعت لفحص طبي قبل التقدم لوظيفة (كانت تعمل مندوبة مبيعات) وكل شيء على ما يرام. وبعد 7 أشهر من الاتصال، مازلت أجري اختبار فيروس نقص المناعة البشرية في مختبر سيتي لاب، وكانت النتيجة سلبية. لكن في الآونة الأخيرة، كنت أمرض كثيرًا، وأعاني من احمرار والتهاب في الحلق منذ 3 أسابيع ولا أستطيع علاجه. لقد بدأت أشعر بالخوف مرة أخرى، ماذا لو أمسكت به بعد ذلك؟ أخبرني، هل هذا ممكن، وهل يجب أن نثق في تحليل CityLab؟ أخشى أن أقوم بالاختبار مرة أخرى، أعصابي لن تصمد..
إذا كانت النتيجة سلبية، فمن المرجح أنك لست مريضًا أو مصابًا بفيروس نقص المناعة البشرية/الإيدز. لكن لتوضيح التشخيص ينصح بإجراء فحص ثان في المختبرات المتخصصة في المؤسسات الحكومية، ويتم هذا الفحص دون الكشف عن هويتك. إذا لم يحقق العلاج الذاتي النتيجة المرجوة، فمن المستحسن استشارة طبيب الأنف والأذن والحنجرة لإجراء فحص مناسب ووصف العلاج المناسب. اقرأ المزيد عن اختبار فيروس نقص المناعة البشرية في سلسلة المقالات بالضغط على الرابط: فيروس نقص المناعة البشرية.
أخبرني، هل يمكنك إعطاء أي خصائص لمختبر سيتي لاب؟ ومع ذلك، ليس من الممكن دائمًا إجراء الاختبار في وكالة حكومية. وما هي النسبة المئوية لاحتمال إصابة الرجل بالعدوى من خلال الاتصال غير المحمي؟
لسوء الحظ، لا نقدم تقييمات مقارنة للمختبرات والمؤسسات الطبية الخاصة. إذا كنت تشك في موثوقية النتائج، قم بإجراء الفحص في مركز آخر واطلب أولاً الحصول على ترخيص لتقديم هذه الخدمات الطبية، وما إذا كان لهذا المركز الحق في إجراء هذا الفحص وما إذا كان كل شيء يتوافق مع المعايير المقبولة. خطر العدوى هو نفسه بالنسبة لكلا الجنسين من خلال الاتصال الجنسي غير المحمي. اقرأ المزيد عن اختبار فيروس نقص المناعة البشرية في سلسلة المقالات بالضغط على الرابط: فيروس نقص المناعة البشرية.
مساء الخير يبلغ عمر الطفل 8 أشهر، وتم اختبار فيروس نقص المناعة البشرية باستخدام ELISA، وتم العثور على gp160 + وp25 + في الدم، والباقي كله سلبي، والاستنتاج مشكوك فيه. وبالحكم على هذه الاختبارات يتبين أن الطفل +؟ GP160 + GP110/120 - ص 68 - ص 55 - ص 52 - GP41 - ص 34 - ص 25 + ص 18 -
لسوء الحظ، بناء على البيانات التي تم الحصول عليها، من المستحيل إجراء تشخيص باحتمال 100٪، لأنه لا يمكن استبعاد نتيجة إيجابية كاذبة. لإجراء تشخيص دقيق، ستحتاج إلى الخضوع لعدد من الفحوصات، بما في ذلك تكرار هذا التحليل باستخدام طريقة ELISA، وكذلك إجراء اختبار باستخدام طريقة PCR. بعد ذلك، يجب عليك الاتصال بمؤسسة طبية متخصصة، حيث سيتمكن أخصائي الأمراض المعدية من إجراء تقييم شامل للنتائج التي تم الحصول عليها. يمكنك معرفة المزيد عن مظاهر الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية في القسم المواضيعي بموقعنا على الإنترنت من خلال النقر على الرابط: فيروس نقص المناعة البشرية
هل يمكن أن تظهر نتيجة إيجابية كاذبة لالتهابات الجهاز التنفسي الحادة أو الأمراض المعدية الحادة؟ قرأت في مكان ما أنه بالنسبة لـ 58 مرضًا أو حتى أعلى، يمكن إظهار "+"، بما في ذلك التطعيم ضد التهاب الكبد B، إذا تأثرت الكلى وما إلى ذلك؟
هناك احتمالية للحصول على نتيجة إيجابية كاذبة، لذا أنصحك بالقيام بما يلي: إجراء الاختبار مرة أخرى - باستخدام طريقة ELISA وطريقة PCR، ثم زيارة أخصائي الأمراض المعدية مرة أخرى. يمكنك معرفة المزيد حول تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية من القسم المواضيعي: فيروس نقص المناعة البشرية
مساء الخير الكتلة المناعية غير محددة بسبب البروتين p25. ما هو احتمال الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية؟
في هذه الحالة، من الضروري دراسة بروتوكولات الدراسة بعناية مع المؤشرات الأخرى، لأنه ليس من الممكن وضع افتراض بناءً على هذه البيانات. من المفترض أن تعتبر النتيجة مشكوك فيها ويلزم إعادة الدراسة بعد 3 أشهر. اقرأ المزيد في قسم موقعنا: فيروس نقص المناعة البشرية
مساء الخير.
هل يمكنك التعليق على فيروس نقص المناعة البشرية ELISA؟
1 مصل +3.559 ك=13.3
+2.121 ك=4.9
ص 24 نيج
2 مصل +3.696 ك=13.9
+2.477 ك=5.7
في هذه الحالة، لا يمكن استبعاد النتيجة الإيجابية الكاذبة، نظرًا لأن طريقة ELISA غير مباشرة، لذلك أوصي بإجراء الاختبار باستخدام طريقة أخرى أكثر حساسية - التطعيم المناعي. يمكنك معرفة المزيد من المعلومات التفصيلية حول هذه المشكلة في القسم المقابل من موقعنا على الإنترنت من خلال النقر على الرابط التالي: فيروس نقص المناعة البشرية
مساء الخير، أخبرني ما الذي يجب ضبطه؟ قبل عام، عند التخطيط لطفل، خضعت أنا وزوجي لجميع الاختبارات، بما في ذلك فيروس نقص المناعة البشرية (أخذوها على محمل الجد وبشكل صحيح)، تم فحصي في كر روج، زوجي في كييف، وكانت إجابته سلبية، كنت أخبرتني أن بعض الكواشف لم تنجح، ولست بحاجة لتناوله مرة أخرى في مركز الإيدز في كييف. وبعد إجراء الاختبار في المركز، جاءت الإجابة سلبية بالنسبة لي أيضًا. الآن أنا في وضع الأسبوع الرابع عشر، أي. سجلت وعملت كل التحاليل ومرة أخرى رجعت الإجابة، اختبار فيروس نقص المناعة البشرية كان غير محدد، أخذته مرة أخرى في العيادة وعملت اختبار سريع في دوفير ليطمئنني، لكنهم لم يطمئنوني، السريع أظهر الاختبار نتيجة إيجابية (الخط الثاني كان أقل وضوحا)، مباشرة بعد كل هذا الإجراء، لم أضيع أي وقت في الاتصال بمركز الإيدز وأجريت الاختبار أيضا وأنا في انتظار النتيجة. (لا أستطيع أن أهدأ) من فضلك أخبرني إلى أي مدى يمكنك الوثوق في الاختبارات السريعة ولماذا لا توجد إجابة لاختبار فيروس نقص المناعة البشرية في المرة الأولى؟ (أنا وزوجي نعيش أسلوب حياة صحي ونحب بعضنا البعض). شكرًا لك.
لا داعي للذعر في وقت مبكر - فالتشخيص السريع ليس هو الأساس لتشخيص فيروس نقص المناعة البشرية، فهو يسمح لك بتحديد مجموعات من المرضى الذين يحتاجون إلى مزيد من البحث المتعمق. في مثل هذه الحالات، يوصى بإجراء النشاف المناعي والتشاور شخصيًا مع أخصائي الأمراض المعدية. يمكنك معرفة المزيد من المعلومات التفصيلية حول هذه المشكلة في القسم المواضيعي بموقعنا على الإنترنت من خلال النقر على الرابط التالي: فيروس نقص المناعة البشرية. يمكنك أيضًا الحصول على معلومات إضافية في القسم التالي من موقعنا: التشخيص المختبري
مرحبًا، كنت في جناح الأمراض المعدية، اليوم فقط خرجت من المستشفى، اتصل بي الطبيب وأوضح أن لدي اختبار IFA إيجابي، في البداية عندما دخلت المستشفى، كان سلبيًا، ثم عندما قمت بإعادة الاختبار أصبحت إيجابية، أرسلوا اختبارات للكتلة المناعية إلى جبل سوكولنيكي، قالوا إنها ستكون جاهزة الأسبوع المقبل، كنت في المستشفى مصابًا بالتهاب في الحلق وفيروسات نظير الأنفلونزا، وصلت إلى حالة من الصدمة، ما زلت لا أفهم كيف لتقييم ذلك، تم أيضًا إعداد مستخلص لعيادتي يشير إلى أنه تم اكتشاف ifa وأدناه أن الكتلة المناعية تعمل، إذا خرجت من عيادتك غدًا، فسيتم الإشارة في هذا المستخلص إلى مدى احتمالية ذلك هل فيروس نقص المناعة البشرية موجود؟هل يمكن أن يكون ذلك لأنني عولجت من التهاب الحلق بسبب فيروس نظير الأنفلونزا، وأظهر نتائج إيجابية لـ ifa؟
احتمال الحصول على نتيجة إيجابية كاذبة مرتفع للغاية. إن وجود نتيجة إيجابية واحدة لا يوفر حتى الآن أساسًا لتشخيص فيروس نقص المناعة البشرية، لذلك نوصي بانتظار نتيجة التطعيم المناعي، ثم التشاور شخصيًا مع طبيب الأمراض المعدية فيما يتعلق بمزيد من الفحص والمراقبة. التهاب الحلق ونظير الأنفلونزا ونزلات البرد الأخرى ليس لها تأثير كبير على نتائج التحليل.
أريد أن أصدق ذلك، ولكن في نهاية شهر أغسطس شعرت بتوعك، ارتفعت درجة الحرارة، 37.5-38، كان لدي براز سائل لمدة 4 أيام تقريبًا، كنت في إجازة حيث كان هناك الكثير من المراقص، وشربت ماء الصنبور مثل كثيرين البعض الآخر ، لأنه كان مكلفًا للغاية ، كان كوب الماء يكلف 300 روبل ، لقد ربطت برازًا رخوًا بمثل هذه درجة الحرارة مع نوع من العدوى المعوية التي تم اكتشافها في الماء ، لا أتذكر بالضبط ، ولكن كان هناك أيضًا طفح جلدي صغير في الجزء العلوي من الجسم، عندما وصلت إلى المنزل مع درجة حرارة اتصلت بالطبيب، كتبت عدوى فيروس الروتا، بعد 5 أيام من المرض، تطوعت لتركه والذهاب إلى العمل، حيث بعد أيام قليلة مرضت بالتهاب الجيوب الأنفية (في تلك الفترة، وبسبب واجبات عملي، كنت بحاجة إلى أن أكون بالخارج) وأرجعت ذلك إلى حقيقة أن الانخفاض الكبير في درجة الحرارة من الإجازة والتسمم أدى إلى انخفاض مناعتي، وبالتالي أصبت بنزلة برد مرة أخرى مع التهاب الجيوب الأنفية، لذلك هذا هو إجازة مرضية مرة أخرى، حسب تعليمات الأنف والأذن والحنجرة، أخذت Klacid 500 ريال لمدة 10 أيام، مرت، عدت إلى العمل بعد 3 أسابيع، كنت في رحلة عمل في بلد حار لمدة 3 أيام. مكيفات الهواء في وسائل النقل والفندق كانت لا ترحم وعند عودتي إلى المنزل كانت درجة حرارتي على متن الطائرة بالفعل 39.5 أنا هنا في المنزل مع درجة حرارة 40 اتصلت بالطبيب في المنزل وكتبت عدوى تنفسية حادة وقالت لي كان الحلق أحمر للغاية، ولدي التهاب اللوزتين المزمن وأخبرت أخصائي الأنف والأذن والحنجرة، وكتبت بنفسي لتناول المضاد الحيوي Levolet r. اتصلت بالإسعاف لأني كنت مصابًا بالحمى وكان المعدل 40 ولم ينخفض، ولم يعرضوا دخول المستشفى، في اليوم التالي نفس القصة - أعطتني سيارة الإسعاف حقنة خافضة للحرارة وغادرت، وفي المرة الثالثة أصررت على دخول المستشفى، بالكاد أخذوني إلى مستشفى الأمراض المعدية، حيث تم اكتشاف عدوى مختلطة من نظير الأنفلونزا والعدوى بالفيروسات الغدانية، ولكن عند الخروج من المستشفى قالت طبيبة رئيسة القسم أنه تم تشخيص إصابتي بفيروس نقص المناعة البشرية إذا كانت إيجابية وأنهم فعلوا ذلك مرتين، أنا في حالة صدمة، لا أعرف ماذا أفعل، لا أستطيع أن آكل أو أشرب. من الواضح أنني مصاب بفيروس نقص المناعة البشرية الحاد، وللتحقق من ذلك، أرسلوا اختبار مناعي لدمي إلى مركز الإيدز،
الآن، برسم تشبيه للأحداث التي حدثت لي خلال المرة الأخيرة، وكذلك 3 إجازات مرضية متتالية، جربت كل الأعراض وكنت مرعوبًا مما يمكن أن يكون، بعد خروجي من المستشفى في نفس اليوم الذي كنت فيه ذهبت لإجراء الاختبار في invitro بشكل مجهول وفي اليوم التالي كانت نتيجة IFA هي نفسها +
اسف على مثل هذه المعلومات التفصيلية ولكني في حيرة ومقتل اشرب المهدئات القوية وليس لدي شهية وعمليا لا آكل لقد فقدت الكثير من الوزن
لدي أيضًا سؤال: أشار الطبيب الذي خرج من المستشفى إلى نتيجة فيروس نقص المناعة البشرية المكتشف بواسطة IFA وأدناه أن الكتلة المناعية قيد العمل، ولكن كيف يمكنني إغلاق bl في عيادتي في المكان الذي سيتم فيه كتابة كل شيء هناك. ماذا علي أن أفعل؟هذا لن يكون سريا بعد الآن. طلبت من الطبيب المعالج عدم كتابة هذا التحليل في المستخرج، فرفضت ذلك، إلى أي مدى يتم احترام حقوقي فيما يتعلق بعدم الإفصاح عن المعلومات؟
لسوء الحظ، يتم تضمين نتائج الدراسات التي أجريت في المستشفى في المستخرج، حيث يجب أن يكون لدى الطبيب المحلي المعالج معلومات كاملة عن حالتك الصحية. في هذه الحالة، نحن لا نتحدث عن الكشف عن المعلومات، حيث يتم نقلها فقط إلى طبيب آخر يحضرك، والذي سيتابعك أكثر.
مرحبًا! لقد أجريت اختبارات فيروس نقص المناعة البشرية لأنني كنت بحاجة إلى شهادة FMS، ولم يعطوني الاختبارات لبضعة أسابيع، ثم دعوني إلى المدير وأعطوني نتيجة إيجابية، وأخذوا مجموعة من الإيصالات وأرسلوها إلى مركز الإيدز الإقليمي لمزيد من الفحص، كما هو مذكور في الشهادة. أريد أن آخذه في عيادة أخرى ثم أذهب إلى العيادة الإقليمية أم لا فائدة من إعادته؟ أنا لا أفهم لماذا لم يعطوهم لفترة طويلة، حسنًا، قال الطبيب إنهم من المفترض أنهم أجروا نوعًا من التحليل ومن المفترض أنني مدين لهم بـ 4 آلاف روبل أخرى، لأنه إذا فعلوا ذلك، فمن المحتمل بالإضافة إلى ذلك إلى الشهادة سيعطون معلومات مفصلة عن المرض؟
في هذه الحالة، ليس من الضروري الذعر في وقت مبكر - الحصول على نتيجة إيجابية واحدة لا يسمح لك بالحكم بشكل موثوق على العدوى المحتملة، حيث لا يمكن استبعاد النتائج الإيجابية الخاطئة. ننصحك بإجراء الاختبار مرة أخرى، وإذا كانت هناك نتيجة إيجابية، فستحتاج إلى الخضوع لفحص آخر - التطعيم المناعي. وكقاعدة عامة، لا يقدم المختبر معلومات مفصلة عن النتائج، وهو أمر طبيعي وشائع. يمكن أن يجيب طبيبك المعالج على أي أسئلة قد تكون لديك بعد الفحص أثناء الاستشارة الشخصية.
نسيت أن أضيف أنه من بداية يونيو وحتى منتصف سبتمبر أخذت دورة من الستيرويدات الابتنائية وهي سوستانون 250 وهو مزيج من هرمون التستوستيرون وستانوزولول مع بريمابولان، أردت أن أجهز نفسي للصيف والإجازة، هل يمكن أن يطرقوا الطريق؟ مناعتي وكل ما حدث لي.
يمكن أن يؤدي ضعف المناعة، بالإضافة إلى وجود أمراض المناعة الذاتية، إلى نتائج اختبار إيجابية كاذبة لفيروس نقص المناعة البشرية. لهذا السبب، في حالة الحصول على نتيجتين إيجابيتين باستخدام طريقة ELISA، يوصى بالمسح المناعي، مما سيسمح لنا بالإجابة بدقة على سؤال ما إذا كانت هناك عدوى أم لا.
ماذا يعني الإصابة بأمراض المناعة الذاتية، ما هي؟
بشكل عام، أستطيع أن أقول إنني كنت مريضًا في كثير من الأحيان منذ الطفولة المبكرة وحتى منذ عامين طلبت من الطبيب المعالج أن يعتني بمناعتي، لأنني كنت متعبًا باستمرار وكثيرًا ما مرضت، وخاصة الأذن والحنجرة والأنف ولكن طوال الوقت كانت هناك نتائج سلبية لفيروس نقص المناعة البشرية، لقد مررت بها بسهولة تامة دون تردد.
يمكن أن تحدث نتيجة اختبار إيجابية كاذبة لفيروس نقص المناعة البشرية بعد عدوى فيروسية حديثة، والتطعيم ضد التهاب الكبد B، والسل، والتهاب الكبد، والهربس، وكذلك على خلفية أمراض المناعة الذاتية مثل التهاب المفاصل الروماتويدي، والذئبة الحمامية الجهازية، والتهاب الجلد والعضلات، وتصلب الجلد، والنسيج الضام. الأمراض وغيرها.
أود أن أضيف إلى سؤالي، لقد عادت الكتلة المناعية الخاصة بي سلبية، لكن الطبيب قال إنه بما أن لدي اثنين من IFAs + عندما كنت في مستشفى الأمراض المعدية، ما زلت بحاجة إلى إعادة إجراء الاختبار، ولكن بعد ذلك بقليل
في هذه الحالة، تكون التكتيكات الطبية مبررة - نوصي بأخذ الكتلة المناعية مرة أخرى بعد 1.5 إلى شهرين.
ما هو الاحتمال: 2 IFA + الفرق بين سحب الدم حوالي يومين، كتلة مناعية - ; كنت في مستشفى للأمراض المعدية مصابًا بعدوى فيروس غدي ونظير الأنفلونزا، حيث تم سحب الدم، وتم إرسال الكتلة المناعية إلى مركز الإيدز
مساء الخير لقد قمت بالتسجيل في المجمع السكني، وقمت بإجراء جميع الفحوصات، يقول الطبيب أن لدي هربس في الدم، ثم يتصلون من مركز الإيدز ويقولون إنني بحاجة إلى إعادة الاختبار، سألت وأخبروني أنني مصاب بفيروس نقص المناعة البشرية ، في حالة من الذعر، ذهبت أنا وزوجي لإعادة الاختبار، وأجريت الاختبار وحصلت على IFA وimmunoblot + حصل عليه زوجي، وحصلت عليه مرة أخرى بعد شهر. لدي + زوجي – أنا الآن حامل في الأسبوع 23!
في هذه الحالة، لسوء الحظ، هناك احتمال للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، ولكن لا يمكن إجراء التشخيص النهائي حتى مع وجود كتلة مناعية إيجابية، بالنظر إلى حالة الحمل. في هذه الحالة، من الضروري استبعاد النتائج الإيجابية الكاذبة، لذلك نوصي بإجراء الاختبار مرة أخرى والتشاور شخصيًا مع أخصائي الأمراض المعدية.
إذا أظهرت اللطخة المناعية نتيجة إيجابية لفيروس نقص المناعة البشرية، لكن الفحص كان سلبيا، فما هي النتيجة التي يجب أن نصدقها؟
يعد Immunoblot اختبارًا أكثر دقة، لذلك، مع هذه الدراسة، إذا تم الحصول على نتيجة إيجابية، فأنت بحاجة إلى مواصلة الدراسة وزيارة أخصائي الأمراض المعدية شخصيًا.
ما هي الكتلة المناعية؟ هذه طريقة شائعة للتشخيص المختبري للعدوى الفيروسية البشرية. وتعتبر من أكثر الطرق دقة وموثوقية للكشف عن وجود فيروس نقص المناعة البشرية. ومن حيث موثوقيته، فهو يفوق حتى نتائج اللطخة المناعية التي تعتبر نهائية وغير قابلة للدحض.
معلومات عامة
الكتلة المناعية - ما هو؟ من أجل التعرف على الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية لدى الشخص، من الضروري الخضوع لفحص مختبري لمصل الدم لوجود الأجسام المضادة. وتسمى تقنية اللطخة المناعية أيضًا باللطخة الغربية. يتم استخدامه للكشف عن الالتهابات الفيروسية البشرية كطريقة احترافية إضافية. من الضروري تأكيد ELISA - وهو اختبار معملي يسمح لك بتحديد وجود الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية في الدم. يتم فحص اختبار ELISA الإيجابي مرتين عن طريق التطعيم المناعي. ويعتبر الأكثر حساسية وتعقيدا ومكلفة.
غاية
ما هي الكتلة المناعية؟ هذه طريقة مخبرية لفحص مصل الدم لوجود الأجسام المضادة للفيروس. أثناء الدراسة، يقوم المتخصص أولاً بفصل البروتينات الفيروسية في مادة هلامية ونقلها إلى غشاء النيتروسليلوز. يهدف إجراء التطعيم المناعي إلى اكتشاف فيروس نقص المناعة البشرية في مراحل مختلفة. في المرحلة الأولى، يتم إخضاع الفيروس المنقى من الأجزاء المكونة له للرحلان الكهربائي، ويتم فصل المستضدات التي تدخل في تركيبته بالوزن الجزيئي.
وهو يتكاثر في الخلية الحية، ويدمج معلوماته الوراثية فيها. وفي هذه المرحلة يصبح الشخص حاملاً لفيروس نقص المناعة البشرية إذا كان قد أصيب به. خصوصية المرض هو أنه قد لا يظهر نفسه لفترة طويلة. ويدمر الفيروس الخلايا الليمفاوية، فتقل مناعة الإنسان ويصبح الجسم غير قادر على مقاومة العدوى. إذا تم علاج فيروس نقص المناعة البشرية بشكل صحيح وفي الوقت المناسب، فسوف يعيش المريض حتى سن الشيخوخة. نقص العلاج يؤدي حتما إلى الموت. من لحظة الإصابة ولكن بدون علاج فإن الحد الأقصى للعمر لا يزيد عن عشر سنوات.
الخصائص
يعد تحليل Immunoblot طريقة موثوقة تسمح لك بتحديد وجود الأجسام المضادة لمستضدات فيروس نقص المناعة البشرية من النوعين الأول والثاني. إذا أصيب الشخص بالعدوى، تظهر الأجسام المضادة في غضون أسبوعين، ويمكن اكتشافها بعد ذلك بكثير. خصوصية فيروس نقص المناعة البشرية هي أن كمية الأجسام المضادة تتزايد بسرعة وتبقى في دم المريض. وحتى لو كانت موجودة، فقد لا يظهر المرض لمدة عامين أو أكثر. لا تحدد طريقة ELISA دائمًا وجود المرض بدقة، لذا يلزم تأكيد النتائج باستخدام التطعيم المناعي وتفاعل البوليميراز المتسلسل إذا أظهرت المقايسة المناعية الإنزيمية نتيجة إيجابية.
مؤشرات للاستخدام
ما هي "البقعة المناعية" التي تم اكتشافها بالفعل، ولكن لمن توصف هذه الدراسة؟ سبب إجراء الاختبار باستخدام التطعيم المناعي هو نتيجة ELISA إيجابية. من الضروري الخضوع للمقايسة المناعية الإنزيمية للمرضى الذين سيخضعون لعملية جراحية. بالإضافة إلى ذلك، يجب إجراء اختبار للنساء اللاتي يخططن للحمل، وكذلك أي شخص غير شرعي. يوصف التطعيم المناعي للمرضى المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية إذا كانت نتائج ELISA موضع شك. قد تكون الأعراض المزعجة التالية سببًا لاستشارة الطبيب:
- فقدان الوزن المفاجئ.
- الضعف وفقدان الأداء.
- اضطراب معوي (إسهال) يستمر لمدة ثلاثة أسابيع.
- جفاف الجسم.
- حمى؛
- تضخم الغدد الليمفاوية في الجسم.
- تطور داء المبيضات والسل والالتهاب الرئوي وداء المقوسات وتفاقم الهربس.
لا يحتاج المريض إلى الاستعداد قبل التبرع بالدم الوريدي. يجب عدم تناول الطعام قبل 8-10 ساعات من الاختبار. في اليوم السابق للتبرع بالدم، لا يُنصح بشرب المشروبات الكحولية أو القهوة أو ممارسة التمارين البدنية الشاقة أو الشعور بالقلق.
أين يتم إجراء التحليل؟
أين يمكنني إجراء اختبار فيروس نقص المناعة البشرية؟ يتم إجراء دراسات ELISA وimmunoblot في العيادات الخاصة بالمدينة، ويتم تقديم النتائج خلال 24 ساعة. التشخيص العاجل ممكن أيضا. في المؤسسات الطبية العامة، يتم إجراء اختبارات ELISA والمسح المناعي مجانًا، وفقًا لتشريعات الاتحاد الروسي. يُطلب من النساء الحوامل، وكذلك المرضى الذين يخضعون للعلاج في المستشفى أو الجراحة، الخضوع لاختبارات الأمراض المعدية.
كيف يتم إجراء البحث؟
كيف يتم إجراء تحليل ELISA؟ تؤكد الكتلة المناعية الإيجابية / السلبية أو تدحض نتائج المقايسة المناعية الإنزيمية. إجراءات البحث بسيطة للغاية. يأخذ الأخصائي الدم الوريدي، والذي لا يستغرق أكثر من خمس دقائق. بعد أخذ العينات، يجب تطهير موقع الحقن وتغطيته بضمادة لاصقة. يتم إجراء أخذ العينات على معدة فارغة، لذلك بعد الإجراء لن يضر تناول قطعة من الشوكولاتة الداكنة أو شرب مشروب ساخن حلو.
من أجل الحصول على تحويلة لإجراء فحص مجاني في مؤسسة طبية عامة، يجب عليك زيارة طبيب عام. بشكل عام، لا يختلف النشاف المناعي عن اختبارات الدم الأخرى من حيث طريقة أخذ العينات. منهجية البحث بسيطة. إذا كان هناك فيروس في دم الشخص، يبدأ الجسم في إنتاج أجسام مضادة لتدميره. كل فيروس لديه مجموعته الخاصة من بروتينات المستضد. إن الكشف عن هذه الأجسام المضادة هو أساس تقنية التطعيم المناعي.
سعر
كم تكلفة التحليل؟ إن اختبار Immunoblot لفيروس نقص المناعة البشرية ليس اختبارًا رخيصًا. في المتوسط، يكلف فحص الفحص باستخدام طرق المقايسة المناعية الإنزيمية من 500 إلى 900 روبل. Immunoblotting هي دراسة التحقق، وتتراوح تكلفتها من ثلاثة إلى خمسة آلاف روبل. الأساليب الأكثر تعقيدًا هي أكثر تكلفة بكثير. على سبيل المثال، سوف تحتاج إلى دفع حوالي 12000 روبل.
تفسير النتيجة
الطرق الأكثر شيوعًا لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية هي فحوصات الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم والبقع المناعية. يتم استخدامها لتحديد الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة في مصل الدم. عادة ما يتم تأكيد وجود العدوى عن طريق اختبارين: الفحص والتأكيد. يجب أن يتم تفسير نتائج الدراسة من قبل الطبيب، الذي يقوم أيضًا بالتشخيص ووصف العلاج. إذا كانت البقعة المناعية إيجابية، فهذا يعني وجود فيروس في جسم الإنسان.
لا ينبغي أن تكون النتيجة الإيجابية سببا للعلاج المستقل، لأن كل مريض قد يكون لديه صورة مختلفة للمرض. يشمل التحليل النوعي الفحص والتحقق. وإذا لم يكن المريض مصاباً بالفيروس، فإن النتيجة تشير إلى أنها "سلبية". إذا تم اكتشافه عن طريق الفحص، يتم إجراء دراسة تحقق إضافية. الكتلة المناعية هي اختبار يؤكد أو يدحض الفحص. إذا ظهر لون داكن على شريط الاختبار في مناطق معينة (مواقع البروتينات)، يتم تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. إذا كانت النتائج موضع شك، يتم إجراء الاختبارات في غضون ثلاثة أشهر.
يمكنك الوقاية من الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية إذا اتبعت قواعد معينة: تجنب ممارسة الجنس العرضي، واستخدام الواقي الذكري أثناء الاتصال، وعدم تناول المخدرات. إذا تم اكتشاف المرض لدى امرأة حامل، فمن المهم اتباع توصيات الطبيب المعالج بدقة ولا تنس الخضوع لفحوصات لوجود الفيروس.
طخة مناعية(لطخة غربية) - طريقة للاختبار المعملي لمصل الدم لوجود الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية؛ إنه اختبار أكثر دقة من اختبار ELISA ويستخدم لتأكيد نتائج ELISA. ELISA - مقايسة الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) - اختبار معملي يسمح لك بتحديد وجود الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية في الدم؛ اختبار الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية.
وفقا لتوصيات منظمة الصحة العالمية، يتم استخدام اللطخة المناعية (لطخة غربية) في تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية كطريقة خبيرة إضافية، والتي ينبغي أن تؤكد نتائج ELISA. عادةً ما تقوم هذه الطريقة بالتحقق مرة أخرى من نتيجة ELISA الإيجابية، نظرًا لأنها تعتبر أكثر حساسية وتحديدًا، على الرغم من أنها أكثر تعقيدًا وتكلفة.
يجمع Immunoblotting بين مقايسة الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) مع الفصل الكهربي الأولي للبروتينات الفيروسية في هلام ونقلها إلى غشاء النيتروسليلوز. يتكون الإجراء المناعي من عدة مراحل (). أولاً، يخضع فيروس نقص المناعة البشرية، الذي تم تنقيته مسبقًا وتدميره إلى مكوناته الأساسية، للرحلان الكهربائي، ويتم فصل جميع المستضدات الموجودة في الفيروس بالوزن الجزيئي. بعد ذلك، وباستخدام طريقة النشاف، يتم نقل المستضدات من الجل إلى شريط من مرشح النيتروسليلوز أو النايلون، والذي يحتوي الآن على طيف من البروتينات المميزة لفيروس نقص المناعة البشرية، غير مرئية للعين. بعد ذلك، يتم تطبيق مادة الاختبار (المصل، بلازما دم المريض، وما إلى ذلك) على الشريط، وإذا كانت هناك أجسام مضادة محددة في العينة، فإنها ترتبط بشرائط بروتين المستضد التي تتوافق معها تمامًا. ونتيجة للتلاعبات اللاحقة (على غرار ELISA)، يتم تصور نتيجة هذا التفاعل - جعلها مرئية. يؤكد وجود العصابات في مناطق معينة من الشريط وجود أجسام مضادة لمستضدات فيروس نقص المناعة البشرية المحددة بدقة في المصل الذي تم اختباره.
غالبًا ما يتم استخدام اللطخة المناعية لتأكيد تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. تعتبر منظمة الصحة العالمية الأمصال الإيجابية التي يتم فيها الكشف عن الأجسام المضادة لأي بروتينين مغلفين لفيروس نقص المناعة البشرية عن طريق التطعيم المناعي. وفقًا لهذه التوصيات، إذا كان هناك تفاعل مع بروتين واحد فقط من بروتينات الغلاف (gp160، gp120، gp41) مجتمعًا أو بدون تفاعل مع بروتينات أخرى، فإن النتيجة تعتبر مشكوك فيها ويوصى بإعادة الاختبار باستخدام مجموعة من سلسلة مختلفة أو من شركة مختلفة. إذا ظلت النتيجة مشكوك فيها حتى بعد ذلك، تستمر الدراسات كل 3 أشهر.
لتنفيذ النشاف المناعي، تتمثل الخطوة الأولى في فصل البروتينات الموجودة في مصل الدم في مادة هلامية وفقًا لوزنها الجزيئي وشحنتها باستخدام مجال كهربائي (الرحلان الكهربائي للهلام). ثم يتم وضع غشاء النيتروسليلوز أو النايلون على الجل و"نشفه" (هذا نشاف). ويتم ذلك في غرفة خاصة تسمح بالنقل الكامل للمادة من الجل إلى الغشاء. ونتيجة لذلك، يتم إعادة إنتاج نمط ترتيب البروتين الذي كان على الجل على الغشاء (اللطخة)، والذي يمكن بعد ذلك التلاعب به بسهولة. في البداية، تتم معالجة الغشاء بأجسام مضادة للمستضد المطلوب، وبعد غسل المادة غير المرتبطة، تتم إضافة اتحاد ذو علامة إشعاعية يرتبط على وجه التحديد بالأجسام المضادة (كما هو الحال في ELISA). يتم تحديد موقع المجمع المترافق الناتج عن المستضد والجسم المضاد عن طريق التصوير الشعاعي الذاتي باستخدام فيلم الأشعة السينية. بعد ظهوره يصبح واضحا ما إذا كانت هناك مستضدات في الدم أم لا.
اللطخة المناعية –(من "لطخة" الإنجليزية - بقعة) - طريقة لتحديد المستضدات (أو الأجسام المضادة) باستخدام الأمصال (أو المستضدات) المعروفة. وهو عبارة عن مزيج من الرحلان الكهربائي الهلامي وELISA. في البداية، يتم تدمير الخلايا البكتيرية أو الفيروسات باستخدام الموجات فوق الصوتية، ثم يتم فصل جميع مستضدات الفيروس أو الخلايا البكتيرية عن طريق الرحلان الكهربائي ويتم الحصول على كاشف تجاري على فيلم خاص من النيتروسليلوز. عند إجراء التطعيم المناعي، يتم تطبيق مصل المريض قيد الدراسة على فيلم يحتوي على مستضدات معروفة. بعد الحضانة وغسل الأجسام المضادة غير المرتبطة، انتقل إلى ELISA - يتم تطبيق مصل مضاد للجلوبيولين المناعي البشري المسمى بإنزيم وركيزة مولدة للون يتغير لونها عند التفاعل مع الإنزيم على الفيلم. في وجود مستضد-جسم مضاد-مصل مضاد لمجمعات إنزيم الغلوبولين المناعي، تظهر بقع ملونة على الناقل. تتيح لك طريقة التطعيم المناعي اكتشاف الأجسام المضادة بشكل منفصل لمستضدات مسببات الأمراض المختلفة (على سبيل المثال، في الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، يكتشف التطعيم المناعي الأجسام المضادة لـ gp120 وgp24 والمستضدات الفيروسية الأخرى).
المقايسة المناعية الإشعاعية (RIA)
تعتمد الطريقة على تفاعل مولد الضد مع الجسم المضاد باستخدام النويدات المشعة الموسومة بمستضد أو جسم مضاد. يتم استخدام 125I، 14C، 3H، 51Cr وغيرها من النويدات المشعة كتسميات. يتم عزل المجمعات المناعية الناتجة عن النظام ويتم تحديد نشاطها الإشعاعي على عدادات (إشعاع بيتا). تتناسب شدة الإشعاع بشكل مباشر مع عدد جزيئات المستضد والجسم المضاد المرتبطة.
إن نسخة الطور الصلب من RIA التي تستخدم الأجسام المضادة الموسومة أو المستضدات الممتصة في آبار ألواح البوليسترين منتشرة على نطاق واسع.
يستخدم RIA للكشف عن مستضدات الميكروبات والفيروسات والهرمونات المختلفة والإنزيمات والأدوية والجلوبيولين المناعي، بالإضافة إلى المواد الأخرى الموجودة في مادة الاختبار بتركيزات بسيطة تبلغ 10-12-10-15 جم / لتر.
أسئلة التحكم
رد فعل التحلل الجرثومي المناعي: ما هو نوع التفاعل؟ ما هو المستضد، ما هو الجسم المضاد، آلية التفاعل، طرق الإنتاج، التطبيق العملي. رد فعل انحلال الدم المناعي: المكونات اللازمة، الإجراء . الضوابط والتطبيق العملي. تفاعل انحلال الدم الموضعي في هلام (تفاعل جيرني): مبدأ التفاعل، طريقة الصياغة، التطبيق العملي. رد فعل التثبيت المكمل: مبدأ التفاعل؛ ما يتشكل عندما يتفاعل المصل المناعي مع مستضد معين؛ ماذا يحدث للمكمل إذا كان موجودا خلال هذا التفاعل؟ ما هو مصير المتمم إذا لم يكن هناك ألفة محددة بين المستضد والأجسام المضادة؟ ما هو رد الفعل الذي يمكن استخدامه لتحديد ما حدث للمكمل؟ لماذا يتم استخدام هذا التفاعل بالذات؟ ما هي النتيجة الإيجابية المرئية لـ RSC؟ لماذا؟ ما خاصية المتممة المستخدمة في المرحلة الأولى من RSC؟ في المرحلة الثانية؟ إذا كانت النتيجة النهائية لـ RSC هي انحلال الدم، فهل يعني ذلك نتيجة إيجابية أم سلبية؟ اشرح النتائج: RSK+ + + +، RSK+ + +، RSK+ +، RSK+. قم بتسمية مكونات نظام RSK الأول ومكونات نظام RSK الثاني. لماذا يجب تعطيل مصل الاختبار؟ كيف تتم معايرة المكمل؟ المصل الانحلالي: ماذا يحتوي وكيف يتم الحصول عليه وما هو العيار وكيف يتم تحديده؟ ما هي الحيوانات المستخدمة للحصول على مكونات RSC؟ منهجية إعداد RSC في البرد. عند تنظيم أي من التفاعلات التالية يتطلب مشاركة المكمل: هطول الأمطار، التلبد، التراص، الكشف عن الأجسام المضادة غير المكتملة، التحلل الجرثومي المناعي، انحلال الدم المناعي، Jerne، RSC؟ تفاعل التألق المناعي (RIF) - يشير إلى تسلسل الأحداث في تفاعل كونز المباشر؛ المكونات الضرورية. ما هو المستضد، ما هو الجسم المضاد، ما هي الأجسام المضادة الموسومة، كيف يتم أخذ نتيجة التفاعل في الاعتبار، كيف تبدو النتيجة الإيجابية؟ التطبيق العملي - ما الذي يمكن تحديده باستخدام هذا التفاعل؟ تفاعل التألق المناعي غير المباشر - يشير إلى تسلسل الأحداث خلال هذا التفاعل، والمكونات الضرورية، وما هو المستضد، وما هي الأمصال المناعية المستخدمة؛ الاستخدام العملي؛ الاستفادة من RIF غير المباشر مقارنة برد الفعل المباشر. مقايسة الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) - مبدأ التفاعل؛ المكونات الضرورية الإشارة إلى تسلسل الأحداث عند إجراء تفاعل للكشف عن المستضد في المادة التي يتم اختبارها؛ المكونات الضرورية ماذا يحدث عندما تكون النتيجة إيجابية، كيف تبدو؟ الإشارة إلى تسلسل الإجراءات عند إجراء ELISA للكشف عن الأجسام المضادة في مصل الاختبار؛ المكونات الضرورية ماذا يحدث إذا كانت النتيجة إيجابية؟ اللطخة المناعية – مبدأ التفاعل؛ المراحل الرئيسية؛ المكونات الضرورية كيف يتم أخذ النتيجة بعين الاعتبار؛ فوائد رد الفعل. المقايسة المناعية الإشعاعية (RIA) - ما هي المراحل الرئيسية للتفاعل؟ ما هي الأجسام المضادة أو المستضدات الموسومة، وكيف يتم أخذ النتيجة بعين الاعتبار؟ المجهر الإلكتروني المناعي - مبدأ الطريقة؛ المراحل الرئيسية؛ المكونات الضرورية ما هي الأجسام المضادة المسمى؟ كيف يتم أخذ نتيجة التفاعل في الاعتبار. تفاعلات التثبيت – مبدأ الطريقة، تقنية الإعداد، المكونات، تسجيل النتائج.
المهام التي يجب إكمالها أثناء عملية الدراسة الذاتية.
املأ جدول "التفاعلات المناعية" فيما يتعلق بالتفاعلات التي تمت مناقشتها في هذا الموضوع.
ردود الفعل المناعية
عمل الطالب أثناء الدرس العملي
ابدأ العمل فورًا بإعداد المرحلة الأولى من RSK، ولكن دون ذلك في دفتر ملاحظاتك لاحقًا (انظر أدناه).
1. تفاعل انحلال الدم المناعي. عرض تفاعل توضيحي لانحلال الدم المناعي، ورسمه على شكل رسم تخطيطي، وشرح النتيجة في الأنابيب التجريبية والضابطة.
2. رد فعل التثبيت المكمل
أ) تحليل RSK وفقا للجدول؛
ب) ارسم في دفتر ملاحظات رسمًا تخطيطيًا لإعداد RSC على شكل جدول؛
ج) وضع المرحلة الثانية من RSK (يتم وضع المرحلة الأولى في بداية الدرس)؛
د) تحليل الاستعدادات التشخيصية اللازمة لـ RSC؛
د) تأخذ في الاعتبار النتيجة. قم بصياغة استنتاج حول وجود أجسام مضادة محددة في مصل الاختبار.
3. رد فعل المناعي. ادرس الجدول، وقم بعمل رسم تخطيطي للتفاعل في دفتر ملاحظاتك؛ انظر إلى الأمصال التشخيصية؛ تحديد ما يحتوي عليه المصل، وكيفية تحضيره، ولأي تفاعل (مباشر أو غير مباشر) يتم استخدامه. انظر إلى نتيجة العرض التوضيحي لـ RIF في مجهر مضان.
4. مقايسة الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA). في دفتر ملاحظاتك، قم بوضع مخطط لإعداد التفاعل في نسختين: للكشف عن المستضد في المادة قيد الدراسة وللكشف عن الأجسام المضادة في المصل. قم بمراجعة مجموعة مكونات فيروس نقص المناعة البشرية والتهاب الكبد الوبائي B. وحدد ما يحتوي عليه كل مكون والغرض من استخدامه.
5. اللطخة المناعية. قم بعمل رسم تخطيطي للتفاعل في دفتر الملاحظات الخاص بك؛ شاهد المظاهرة - نتيجة رد الفعل.
6. المقايسة المناعية الإشعاعية (RIA). قم بعمل رسم تخطيطي للتفاعل في دفتر الملاحظات الخاص بك.
7. المجهر الإلكتروني المناعي (IEM). شاهد العرض التوضيحي - نتيجة التفاعل، ارسم مخططًا للتفاعل في دفتر ملاحظاتك، وأشر بالأسهم إلى المستضد (الفيروس) والأجسام المضادة المميزة.
اللطخة المناعية هي طريقة حساسة للغاية للكشف عن البروتينات، تعتمد على مزيج من الرحلان الكهربائي وELISA أو RIA. يتم استخدام اللطخة المناعية كوسيلة لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، وما إلى ذلك.
بشكل عام، يشير النشاف المناعي إلى تحليل خليط من البروتينات المنقولة إلى دعامة غشائية صلبة، والتي ترتبط بها بروابط تساهمية، يليها الكشف المناعي.
يمكنك تحليل خليط من البروتينات المطبقة مباشرة على الركيزة - تحليل اللطخة النقطية - أو بعد تجزئةها الأولية عن طريق التركيز الكهربائي، أو الرحلان الكهربي للقرص أو الرحلان الكهربي ثنائي الأبعاد - تحليل اللطخة الغربية.
يتم فصل مستضدات مسببات الأمراض باستخدام الفصل الكهربائي لهلام بولي أكريلاميد، ثم يتم نقلها من الهلام إلى الورق المنشط أو غشاء النيتروسليلوز وتطويرها باستخدام ELISA.
تنتج الشركات مثل هذه الشرائط مع "بقع" من المستضدات. يتم وضع مصل المريض على هذه الشرائط. . بعد ذلك، بعد الحضانة، يتم غسل المريض من الأجسام المضادة غير المرتبطة ويتم تطبيق مصل ضد الغلوبولين المناعي البشري الموسوم بالإنزيم . يتم الكشف عن المجمع المتكون على الشريط (المستضد + الجسم المضاد للمريض + الجسم المضاد ضد Ig البشري) عن طريق إضافة ركيزة مولدة للضوء والتي تغير لونها تحت تأثير الإنزيم.
تُستخدم هذه المنهجية أيضًا لاختيار مستنسخات من البكتيريا أو العاثيات أو الفيروسات التي تعبر عن منتجات الجينات المستنسخة المستهدفة.
يتم نقل البروتينات إلى الغشاء إما بشكل سلبي أو باستخدام معدات النقل الكهربائي. تتأثر كفاءة نقل البروتين إلى الغشاء بعدة عوامل، مثل الوزن الجزيئي للبروتينات، ومسامية الهلام، ووقت النقل، وتكوين المحلول المنظم (العازل العابر) المستخدم.
اعتمادا على أهداف وشروط التجربة، يتم اختيار شروط النقل التي توفر أفضل النتائج. يشيع استخدام النيتروسليلوز أو البولي فينيلدين ثنائي فلوريد (PVDF) أو أغشية النايلون المشحونة إيجابياً كركائز. يمكن أن يرتبط النيتروسليلوز بما يصل إلى 80 - 100 ميكروجرام من البروتين لكل 1 سم2.
يمكن فقدان البروتينات ذات الوزن الجزيئي المنخفض (ذات الوزن الجزيئي أقل من 20 كيلو دالتون) نتيجة لعمليات الغسيل. وهذا يجعل من الممكن إجراء دراسة أولية لتعدد أشكال بعض المواقع الجينية على أساس أطوال أجزاء تقييد الحمض النووي المقابلة.
بالإضافة إلى ذلك، باستخدام التهجين الجنوبي، يمكنك بسهولة معرفة ما إذا كان الجين المستهدف يحتوي على موقع للتحلل المائي بواسطة إنزيم تقييد معين في الجزء الداخلي منه، مما يسمح لك باختيار الإستراتيجية المثلى لاستنساخ منطقة الجينوم المدروسة.
باستخدام مخطط مماثل، يمكن نقل جزيئات الحمض النووي الريبي (RNA) من هلام الاغاروز إلى مرشح النيتروسليلوز. سُميت هذه الطريقة بالنشاف الشمالي، على عكس النشاف الجنوبي، لأن اسم Southern يعني "جنوبي" باللغة الإنجليزية.
وبالتالي فإن نقل البروتينات إلى المرشحات من الجل كان يسمى بالنشاف الغربي. قد يتم نقل البروتينات الكبيرة (> 100 كيلو دالتون) المشوهة في محلول كبريتات دوديسيل الصوديوم (SDS) بشكل سيئ إلى الغشاء في حالة وجود الإيثانول في المخزن المؤقت العابر. يحسن الكحول بشكل كبير نقل البروتينات من هلام بولي أكريلاميد SDS، ولكنه يضيق المسام في الجل، مما يؤدي إلى الاحتفاظ بالبروتينات الكبيرة.
تم تحسين غشاء PVDF للكشف المناعي وهو قادر على الاحتفاظ بما يصل إلى 160 ميكروجرام/سم2 من البروتينات المرتبطة بشكل خاص مع مستويات منخفضة جدًا من الارتباط غير المحدد.
اللطخة المناعية
من الخصائص المهمة لهذا الغشاء إمكانية استخدامه المتكرر. تعمل أغشية النايلون Zeta-Probe على ربط بروتينات SDS بشكل فعال في غياب الكحول، وهذا الارتباط مقاوم للعلاجات اللاحقة. يتم أيضًا الاحتفاظ بالبروتينات ذات الوزن الجزيئي المنخفض بشكل فعال. بفضل قدرة الارتباط العالية التي تبلغ حوالي 480 ميكروغرام من البروتين لكل سم2، تتيح أغشية Zeta-Probe اكتشاف كميات ضئيلة من البروتين في مخاليط الاختبار.
بمجرد تثبيت المستضد على الغشاء، يتم إغلاق مواقع الارتباط المتبقية بمحلول الجيلاتين أو ألبومين المصل البقري أو الحليب الخالي من الدسم.
ثم يتم تحضين الغشاء في محلول من الأجسام المضادة متعددة النسيلة أو وحيدة النسيلة للمستضد قيد الدراسة. بعد غسل الأجسام المضادة غير المرتبطة، يتم تحضين الغشاء في محلول من الأجسام المضادة الثانوية، وهي عبارة عن اتحاد إنزيمات الفوسفاتيز القلوي (AP) أو بيروكسيداز الفجل الحار (HRP) مع الأجسام المضادة للأنواع (الأجسام المضادة للماعز للأرانب أو الفأر أو الجلوبيولين المناعي البشري). ) أو البروتينات A (بروتين المكورات العنقودية الذهبية) أو G (بروتين المكورات العقدية sp.)، ذات درجة تقارب عالية لمنطقة Fc من الغلوبولين المناعي.
يتم الكشف عن المجمعات المناعية المتكونة كيميائيًا أو كيميائيًا. ركائز التفاعل الكيميائي عند استخدام اتحادات الفوسفاتيز القلوية هي 5-برومو-4-كلورو-3-إيندوليل فوسفات (BCIP) أو التترازوليوم الأزرق (NBT)، وعند استخدام اتحادات بيروكسيداز الفجل - 4-كلورو-1-نفثول وبيروكسيد الهيدروجين .
نتيجة للتفاعلات الأنزيمية، يتم تشكيل شريط ملون أو بقعة على الغشاء في موقع توطين مجمع الأجسام المضادة للمستضد.
حساسية هذه الطريقة هي 100 بيكوغرام من البروتين عند استخدام اتحادات AP و100-500 بيكوغرام عند استخدام اتحادات HRP. يسمح الكشف الكيميائي للمجمعات المناعية باكتشاف أقل من 5 بيكوغرام من المستضد. مبدأ هذه الطريقة هو أنه عندما يتفاعل HRP مع بيروكسيد الهيدروجين وثنائي أسيل هيدرازين لومينول الحلقي، ينبعث الضوء عند طول موجي قدره 428 نانومتر، والذي يمكن تسجيله على فيلم حساس للضوء.
تم تطوير تفاعل التطعيم المناعي (IB) على أساس ELISA. إنها الطريقة الأكثر تحديدًا وحساسية للتحليل الكيميائي المناعي. يجمع التطعيم المناعي (من اللطخة الإنجليزية - لطخة، وصمة عار) بين ELISA والرحلان الكهربائي. يتم استخدامه للكشف عن الأجسام المضادة غير المعقدة لفيروس نقص المناعة البشرية، ولكن الأجسام المضادة لبروتيناته الهيكلية الفردية (البروتينات p24، البروتينات السكرية gp120، gp 41، وما إلى ذلك). يشير إلى ردود أفعال الخبراء (المؤكدة) لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية.
يتم التفاعل على عدة مراحل:
يتم تدمير الفيروس إلى مكونات - المستضدات (p24، gp120، gp 41، وما إلى ذلك)، والتي تخضع للرحلان الكهربائي في هلام بولي أكريلاميد، أي فصل المستضدات إلى أجزاء حسب الوزن الجزيئي.
2. يتم تغطية الجل بغشاء من النيتروسليلوز ويتم نقل أجزاء المستضد إليه باستخدام الرحلان الكهربائي. يتصرف النيتروسليلوز مثل الورق النشاف. يتم قطع الغشاء إلى شرائح. تنتج الشركات مثل هذه الشرائط مع "بقع" من المستضدات.
Immunoblotting - طريقة إضافية غير مباشرة
يتم غمر الشرائط المغلفة بمستضدات فيروس نقص المناعة البشرية في مصل الشخص ثم يتم غسلها لإزالة المواد غير المرتبطة.
4. يتم تحضين الشرائط بمصل مضاد الجلوبيولين الموسوم بالبيروكسيداز وغسلها.
تتم إضافة الركيزة ويتم ملاحظة عدد الكسور الملونة (البقع) التي تتوافق مع منطقة التوطين لمجمع AG-AT.
يؤكد وجود العصابات في مناطق معينة من الشريط وجود أجسام مضادة لمستضدات فيروس نقص المناعة البشرية المحددة بدقة في المصل الذي تم اختباره. تعتبر نتيجة النشاف المناعي إيجابية إذا كانت النطاقات المقابلة لأي اثنين من مستضدات فيروس نقص المناعة البشرية الثلاثة - p24 و gp41 و gp 120 مرئية على الغشاء (الشكل 37).
الرسومات
قائمة المراجع المستخدمة
الأدب الرئيسي
علم الأحياء الدقيقة الطبية وعلم الفيروسات والمناعة: كتاب مدرسي لطلاب الطب. الجامعات الطبعة الثانية، مراجعة. وإضافية — 702 ص. إد. أ.أ. فوروبيوفا. م: متحف الفن الإسلامي، 2012.
2. علم الأحياء الدقيقة وعلم الفيروسات والمناعة: دليل لفصول المختبر: كتاب مدرسي/(V.B. Sboychakov وآخرون)؛ حررت بواسطة V. B. Sboychakova، M. M. كاراباتس. – م: جيوتار-ميديا، 2014.- 320 ص: غير ذلك.
3. علم الأحياء الدقيقة الطبية والمناعة وعلم الفيروسات [مصدر إلكتروني]: كتاب مدرسي عن العسل.
الجامعات - 760 ص. — وضع الوصول: http://www.studmedlib.ru/book/ISBN9785299004250.html Korotyaev A.I., Babichev S.A. سانت بطرسبرغ: سبيتسليت، 2010.
4. علم الأحياء الدقيقة الطبية وعلم الفيروسات والمناعة [مصدر إلكتروني]: كتاب مدرسي: في مجلدين / المجلد 1. - 448 ص. - وضع الوصول: http://www.studmedlib.ru/book/ISBN97859704142241.html Zverev V.V.، Boychenko M.N.
م: جيوتار ميديا، 2010. .
5. علم الأحياء الدقيقة الطبية وعلم الفيروسات والمناعة [المصدر الإلكتروني]: كتاب مدرسي: في مجلدين ت 2. - 480 ص. وضع الوصول: http://www.studmedlib.ru/book/ISBN97859704142242.html Zverev V.V.، Boychenko M.N. م: جيوتار ميديا، 2010.
الأدب الإضافي
1. التفاعلات التشخيصية المناعية: كتاب مدرسي / شركات: G.K.Davletshina، Z.G.Gabidullin، A.A.Akhtarieva، M.M.Tuigunov، A.K.Bulgakov، T.A.Savchenko، R.F .
Khusnarizanova، Yu.Z.Gabidullin، M. M. Alsynbaev - Ufa: دار النشر التابعة لمؤسسة ميزانية الدولة التعليمية للتعليم المهني العالي BSMU التابعة لوزارة الصحة الروسية، 2016. - 86 ص.
2. ميزات بعض الخصائص التي تحدد القدرة المسببة للأمراض للاختلافات المزروعة في البكتيريا Enterobacter، Citrobacter، Serratia، E.coli، Proteus: منشور علمي / Yu. Z. Gabidullin، R. S. Sufiyarov، I. I. Dolgushin - Ufa، 2015. - 250 ثانية.
الصفحة الرئيسية » الكتلة المناعية – ما هو؟ اللطخة المناعية في تشخيص الأمراض المعدية
الكتلة المناعية - ما هو؟ اللطخة المناعية في تشخيص الأمراض المعدية
ما هي الكتلة المناعية؟ هذه طريقة شائعة للتشخيص المختبري للعدوى الفيروسية البشرية. إنها واحدة من أكثر الطرق دقة وموثوقية للكشف عن وجود فيروس نقص المناعة البشرية.
ومن حيث الموثوقية، فهو أكبر من مقايسة الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (إليزا). تعتبر نتائج Immunoblot قاطعة وحاسمة معلومات عامة
الكتلة المناعية - ما هو؟ من أجل التعرف على إصابة الشخص بفيروس نقص المناعة البشرية، يجب عليك الخضوع لفحص معملي لفحص مصل الدم لديك بحثًا عن وجود الأجسام المضادة.
تسمى أقسام اللطخة الغربية أيضًا بالبقع الغربية. يتم استخدامه للكشف عن الالتهابات الفيروسية البشرية كطريقة احترافية إضافية. يعد ذلك ضروريًا لتأكيد ELISA - وهو اختبار معملي يسمح لك بتحديد وجود الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية في الدم. إعادة فحص Immunoblot إيجابي ELISA.
ويعتبر الأكثر حساسية وتعقيدا ومكلفة.
هدف
ما هي الكتلة المناعية؟ تقوم هذه الطريقة بإجراء فحص مختبري لمصل الدم لوجود الأجسام المضادة للفيروس.
خلال دراسات خاصة، تم العثور على إجمالي البروتينات الفيروسية في الجل وعلى أغشية النيتروسليلوز.
اللطخة المناعية (الكشف عن الأجسام المضادة في أمصال المريض لبعض مستضدات مسببات الأمراض)
يهدف إجراء قسم اللطخة الغربية إلى تحديد الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية في مراحل مختلفة. في المرحلة الأولى، يتم إخضاع الفيروس المنقى من الأجزاء المكونة له للرحلان الكهربائي ويتم تقسيم المستضدات الموجودة فيه حسب الوزن الجزيئي.
يتكاثر فيروس نقص المناعة البشرية في الخلايا الحية المدمجة في معلوماته الوراثية. في هذه المرحلة، يصبح الشخص حاملاً لفيروس نقص المناعة البشرية إذا كنت مصاباً به.
خصوصية هذا المرض هو أنه لا يظهر نفسه لفترة طويلة. ويدمر الفيروس الخلايا الليمفاوية، وبالتالي تنخفض مناعة الإنسان ويصبح الجسم غير قادر على مقاومة العدوى.
إذا تم علاج فيروس نقص المناعة البشرية بشكل صحيح وسريع، فسوف يعيش المريض حتى سن الشيخوخة. عدم العلاج يؤدي حتما إلى الموت. ومن لحظة الإصابة ولكن بدون علاج فإن المدة القصوى لا تزيد عن عشر سنوات.
الخصائص
يعد تحليل Immunoblot طريقة موثوقة تسمح لك بتحديد وجود الأجسام المضادة لمستضدات فيروس نقص المناعة البشرية من النوعين الأول والثاني.
إذا أصيب شخص ما، فقد يتم اكتشاف الأجسام المضادة بعد أسبوعين في وقت لاحق. ومن السمات الخاصة لفيروس نقص المناعة البشرية أن كمية الأجسام المضادة تتزايد بسرعة وتبقى في دم المريض. وحتى لو كانت موجودة، فقد لا يظهر المرض لمدة عامين أو أكثر. لا تشير طريقة ELISA دائمًا بدقة إلى وجود المرض، مما يتطلب تأكيد النتائج من PCR ومقاطع اللطخة الغربية إذا أظهر الاختبار المناعي الإنزيمي نتيجة إيجابية.
مؤشرات ل
ما هو نوع "البقعة المناعية" التي تم اكتشافها بالفعل، ولكن ما هي تلك التي يتم تقديمها في الدراسة؟
سيكون سبب اختبار فيروس نقص المناعة البشرية (HIV) هو نتيجة ELISA إيجابية. من الضروري الخضوع لفحص الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم لدى المرضى الذين هم على وشك الخضوع لعملية جراحية. بالإضافة إلى ذلك، يجب عليك إجراء تحليل للنساء اللاتي يخططن للحمل، وكذلك أولئك الذين هم غير شرعيين. توصف أقسام اللطخة الغربية للمرضى المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية إذا كانت نتائج إليسا ملتبسة.
قد تكون الأعراض المزعجة التالية سببًا للاتصال بالطبيب: فقدان سريع للوزن، ضعف، فقدان الوظيفة، اضطرابات معوية (إسهال) يستمر ثلاثة أسابيع، جفاف، حمى، تضخم الغدد الليمفاوية في الجسم، تطور داء المبيضات، السل. ، الالتهاب الرئوي، داء المقوسات، تفاقم الهربس.
لا يحتاج المريض إلى الاستعداد قبل التبرع بالدم الوريدي.
لا تأكل قبل 8-10 ساعات من الاختبار. في اليوم السابق للتبرع بالدم، لا يُنصح بشرب الكحول أو مشروبات القهوة أو ممارسة التمارين البدنية الثقيلة أو الشعور بالقلق.
أين يتم إجراء التحليل؟
أين يمكنني إجراء اختبار فيروس نقص المناعة البشرية؟
ELISA، تحليل اللطخة المناعية، الذي يتم إجراؤه في العيادات الخاصة بالمدينة، يعطي نتائج خلال يوم واحد. التشخيص العاجل ممكن أيضا. في المؤسسات العامة، الاختبارات الطبية إليسا وأقسام اللطخة الغربية مجانية، وفقًا لتشريعات الاتحاد الروسي.
الفحص الإلزامي للأمراض المعدية لدى النساء الحوامل والمرضى الذين يحتاجون إلى دخول المستشفى أو الجراحة، كيف يتم إجراء هذا الاختبار؟
كيفية إجراء إليسا؟ Immunoblot إيجابية / سلبية تؤكد أو تدحض نتائج إليسا. الاجراء سهل للغاية. يقوم الأخصائي بجمع الدم الوريدي، وهو ما يستغرق أقل من خمس دقائق.
بعد أخذ العينة، يجب تطهير موقع الحقن وتغطيته بضمادة. يتم إجراء أخذ العينات على معدة فارغة، لذلك بعد الإجراء لن يضر تناول قطعة من الشوكولاتة الداكنة أو مشروب ساخن حلو.
للحصول على تحويلة لإجراء فحص مجاني في مؤسسة طبية عامة، يجب عليك زيارة الطبيب المعالج.
بشكل عام، لا تختلف البقعة المناعية عن اختبارات الدم الأخرى من خلال جمعها. منهجية البحث بسيطة. في حالة وجود فيروس في دم الشخص، يبدأ الجسم في إنتاج أجسام مضادة لتدميره. لكل فيروس هناك العديد من المستضدات البروتينية. إن اكتشاف هذه الأجسام المضادة هو أساس طريقة قسم اللطخة الغربية. سعر
كم مدة التحليل؟ يعد اختبار المناعة المناعية لفيروس نقص المناعة البشرية (HIV) أحد أرخص الاختبارات.
في المتوسط، تتراوح طرق الفحص المناعي من 500 إلى 900 روبل. أقسام اللطخة الغربية هي دراسة الاختبارات التي تتراوح تكلفتها من ثلاثة إلى خمسة آلاف روبل. الأساليب الأكثر تعقيدًا هي أكثر تكلفة بكثير. على سبيل المثال، لتحليل تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، سوف تحتاج إلى دفع حوالي 12000 روبل.
تفسير النتائج
الطرق الأكثر شيوعًا لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية هي مقايسة الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم واللطخة المناعية.
يتم استخدامها لتحديد الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية في المصل. عادة ما يتم تأكيد الإصابة عن طريق اختبارين: الفحص والتأكيد. يجب أن يتم تفسير النتائج من قبل الطبيب الذي يقوم بالتشخيص ووصف العلاج. إذا كانت البقعة المناعية إيجابية، فهذا يعني وجود فيروس في جسم الإنسان.
لا ينبغي أن تكون النتيجة الإيجابية سببا للعلاج المستقل، حيث قد يكون لكل مريض صورته الخاصة للمرض.
يشمل التحليل النوعي الفحص وإصدار الشهادات. وإذا لم يتم اكتشاف الفيروس لدى المريض تكون النتيجة “سلبية”. عندما يتم الكشف عن هذه الشهادة، يتم إجراء دراسات فحص إضافية. تحليل المناعي، الذي يؤكد أو يدحض الفحص. إذا ظهرت شرائط الاختبار في مناطق مظلمة معينة (توضع البروتينات)، يتم تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية.
إذا كانت النتائج مشكوك فيها، يتم إجراء الاختبارات خلال ثلاثة أشهر.
من الممكن الوقاية من الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية إذا اتبعت قواعد معينة: تجنب الاتصال الجنسي العرضي، واستخدام الواقي الذكري أثناء الاتصال، وعدم استخدام المخدرات.
إذا تم اكتشاف المرض لدى المرأة الحامل فمن المهم اتباع توصيات الطبيب المعالج ولا تنس إجراء اختبار وجود الفيروس.
ما هو النشاف الغربي؟
يعد تحديد البروتين في المخاليط المعقدة أو المستخلصات من الأنسجة المختلفة أحد المشكلات التي يتم مواجهتها بشكل متكرر. وباستخدام أداة مثل الأجسام المضادة المحددة، من الممكن تحديد البروتين قيد الدراسة بأقل وقت وتكاليف مالية.
في طريقة النشاف الغربي، في المرحلة الأولى، يتم فصل خليط البروتينات عن طريق الرحلان الكهربائي في وجود كبريتات دوديسيل الصوديوم (SDS)، ثم يتم نقله إلى غشاء النيتروسليلوز عن طريق النشاف الكهربائي.
جوهر هذه الطريقة هو أنه بعد الرحلان الكهربائي، يتم وضع الجل على غشاء النيتروسليلوز بين طبقات ورق الترشيح. يتم وضع "الساندويتش" المجمع بهذه الطريقة في مجال كهربائي بحيث تتحرك مجمعات البروتين SDS عبر الصفيحة الهلامية ويتم تثبيتها (نتيجة لامتصاص غير محدد) على سطح غشاء النيتروسليلوز.
يرتبط ارتباط مركب البروتين-SDS بغشاء النيتروسليلوز بشكل أساسي بقوى ذات طبيعة كهربائية، وهذا التفاعل متعدد النقاط ويؤدي إلى "انتشار" البروتينات على سطح الغشاء. وهكذا، بعد النقل الكهربائي، نحصل على نسخة طبق الأصل من هلام على النيتروسليلوز مع البروتينات الموجودة بنفس الطريقة كما هو الحال في هلام بولي أكريلاميد.
بعد الرحلان الكهربي SDS، والنقل الكهربي وامتصاص البروتينات من الجل إلى غشاء النيتروسليلوز، يتغير الشكل الثالث للبروتين بشكل كبير، إذا كان من الصحيح عمومًا الحديث عن وجود بنية ثلاثية للبروتين بعد هذه المعالجة القاسية. ولذلك، للكشف الكيميائي المناعي للبروتين قيد الدراسة، عادة ما يتم استخدام فقط الأجسام المضادة أحادية أو متعددة النسيلة الخاصة بالمناطق الخطية لجزيء البروتين.
51. المقايسة المناعية الإنزيمية، اللطخة المناعية. الآلية والمكونات والتطبيق.
الأجسام المضادة الخاصة بالحواتم المطابقة (أو المناطق التي تتضمن اتصالات بين الوحدات الفرعية) ليست مناسبة للاستخدام في النشاف الغربي بشكل عام.
بعد نقل البروتين، يتم تحضين الغشاء بالتتابع بأجسام مضادة خاصة بالبروتين قيد الدراسة، ثم بأجسام مضادة ثانوية خاصة بأجزاء Fc من الأجسام المضادة الأولية، مترافقة مع ملصق إنزيم (أو أي نوع آخر) (الشكل 1).
1 أ). في الحالة التي تكون فيها الأجسام المضادة الأولية الخاصة بالمستضد قيد الدراسة مرتبطة مباشرة بالملصق، فإن الأجسام المضادة الثانوية ليست مطلوبة (الشكل 1 ب). يتم "تجلى" المجمعات المناعية المتكونة في موقع توطين البروتين قيد الدراسة باستخدام ركيزة مولدة للضوء (اعتمادًا على نوع الملصق).
تعتمد حساسية وخصوصية الطريقة بشكل كبير على الأجسام المضادة المستخدمة في البحث.
يجب أن تكون الأجسام المضادة المستخدمة خاصة بتسلسل حمض أميني فريد مميز فقط للبروتين الذي تتم دراسته. وبخلاف ذلك، من الممكن تفاعل (خاصة في حالة مستخلصات البروتين الخام) للأجسام المضادة مع العديد من جزيئات البروتين، الأمر الذي سيؤدي بدوره إلى ظهور عدة أشرطة ملونة على الغشاء.
غالباً ما يكون تحديد البروتين قيد الدراسة في هذه الحالة صعباً أو حتى مستحيلاً.
العامل المهم الثاني الذي يجب أخذه في الاعتبار عند اختيار الأجسام المضادة هو التقارب. كلما زاد تقارب الأجسام المضادة المستخدمة، كلما كانت نطاقات البروتين أكثر إشراقًا ووضوحًا، وكلما زادت حساسية الطريقة. عند استخدام الأجسام المضادة عالية الألفة، يمكن تحقيق حساسية تبلغ 1 نانوجرام أو أعلى.
لتصور نتيجة التفاعل بين المستضد المرتبط بالغشاء والأجسام المضادة، يتم استخدام الأجسام المضادة الثانوية، مترافقة مع عوامل قادرة على إنتاج إشارة معينة في ظل ظروف معينة.
عادة، يتم استخدام إنزيم (بيروكسيداز أو فوسفاتيز) كعامل، حيث يكون منتج التفاعل ملونًا ويترسب على الغشاء في شكل راسب غير قابل للذوبان.
من الممكن أيضًا استخدام ملصقات الفلورسنت بهذه الطريقة.
أرز. 1. مخطط التلوين الكيميائي المناعي للبروتين قيد الدراسة: أ - استخدام الأجسام المضادة الثانوية المرتبطة بملصق الإنزيم؛ ب - يرتبط الجسم المضاد الأولي مباشرة بعلامة إنزيمية.
بروتوكول:
I. تحضير الجل والغشاء والنقل الكهربائي للبروتين
بعد الكهربائي، يتم وضع هلام بولي أكريلاميد في الحمام مع النشاف العازلة (25 ملم تريس، ودرجة الحموضة 8.3، 192 ملم جليكاين، 10٪ إيثانول).
يتم وضع ورقتين من ورق الترشيح، مقطعتين على شكل شريط النشاف ومرطبتين بمحلول نشاف، على جزء الكاسيت الذي سيواجه الأنود. ثم يتم وضع غشاء النيتروسليلوز المبلل مسبقًا بنفس المخزن المؤقت على ورق الترشيح، مع التأكد من عدم وجود فقاعات هواء بين الغشاء والورق.
يجب بعد ذلك وضع الجل بعناية على الغشاء، مع إيلاء اهتمام خاص مرة أخرى لضمان عدم وجود فقاعات هواء بين الجل والغشاء. يتم الانتهاء من تشكيل الساندويتش بواسطة طبقتين من ورق الترشيح المبلل، والتي يتم وضعها على سطح الجل (الشكل 2). يتم تثبيت الساندويتش الناتج في كاسيت ووضعه بين الأقطاب الكهربائية بحيث يواجه الغشاء القطب الموجب.
أرز. 2. مخطط النقل الكهربائي للبروتينات إلى الغشاء.
ثانيا. نقل كهربائي
يتم إجراء النقل الكهربائي للبروتينات إلى غشاء النيتروسليلوز في مخزن مؤقت يحتوي على 25 ملي مولار تريس، درجة الحموضة 8.3، 192 ملي مولار جلايسين، 10٪ إيثانول لمدة 30-50 دقيقة عند جهد ثابت قدره 100 فولت.
يعتمد وقت النقل الكهربي على حجم البروتينات التي يتم نقلها؛ فكلما زاد حجم البروتين، كلما استغرق النقل الكهربي وقتًا أطول. يتم تقييم جودة النقل الكهربي وموقع نطاقات البروتين عن طريق تلوين غشاء النيتروسليلوز بمحلول 0.3% من Ponceau S في 1% من حمض الأسيتيك. قبل التلوين الكيميائي المناعي، يجب غسل الغشاء عدة مرات بمحلول تريس مائي ضعيف القلوية لإزالة الصبغة المرتبطة بالبروتينات.
ثالثا. تلطيخ المناعي الكيميائي للبروتينات المجمدة على غشاء النيتروسليلوز
لمنع مواقع ربط الأجسام المضادة غير المحددة، يتم تحضين الغشاء مع التحريك المستمر في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة في PBST (لحجب أفضل، يمكن استخدام محلول PBST يحتوي على 10٪ من مسحوق الحليب الخالي من الدسم).
بعد الحجب، يتم تحضين الغشاء لمدة ساعة عند درجة حرارة الغرفة مع التحريك المستمر في PBST الذي يحتوي على 1-10 ميكروجرام/مل من الأجسام المضادة المحددة.
يتم تحديد التركيز الأمثل للأجسام المضادة تجريبيًا ويعتمد على تقارب تفاعل الأجسام المضادة مع المستضد.
في نهاية الحضانة، اغسل الغشاء 5 مرات باستخدام PBST ونقله إلى محلول من الأجسام المضادة الثانوية المرتبطة ببيروكسيداز الفجل. عادةً ما تتم الإشارة إلى تخفيف المترافق من قبل الشركة المصنعة على العبوة، أو يتم اختياره تجريبيًا بواسطة الباحث. احتضان الغشاء في محلول الأجسام المضادة الثانوية لمدة 1 ساعة مع التحريك المستمر.
بعد الغسيل الشامل (تغيير المخزن المؤقت 5-6 مرات على الأقل)، يتم نقل غشاء PBST إلى محلول ركيزة ملون يحتوي على 3 ملغ من ثنائي أمينوبنزيدين (DAB) و10 ميكرولتر من بيروكسيد الهيدروجين 30٪ في 10 مل من 0.1 مولار تريس-حمض الهيدروكلوريك. ، الرقم الهيدروجيني 7.6.
تتم الحضانة مع التحريك لمدة 5 - 10 دقائق. بعد اكتمال الحضانة مع الركيزة، يجب غسل الغشاء باستخدام PBST، وتجفيفه عن طريق النشاف باستخدام ورق الترشيح، ويجب عمل نسخة إلكترونية على الفور عن طريق المسح الضوئي بالألوان. إذا جف الغشاء تمامًا، فإن خطوط البروتين المطلية تتلاشى وتبدو الصورة أقل سطوعًا وتباينًا.
ملاحظة: DAB مادة سامة ومسرطنة محتملة. العمل فقط بالقفازات المطاطية!