Ferment immunoassay necə aparılır və bu nəyi göstərir? ELISA nədir? Enzim immunoassay metodu: mahiyyəti, prinsipi, çatışmazlıqları Ifa metodu nə deməkdir?

Mövcud diaqnostika üsullarının siyahısı son onilliklərdə sürətlə genişlənir, diaqnostiklər bütün əvvəlki mənfi cəhətlərdən xilas olaraq, bütün əvvəlki testlərin üstünlüklərini yeni üsullarda birləşdirməyə çalışırlar.

Bu yaxınlarda diaqnostik prosedurların siyahısına getdikcə daha çox fermentlə əlaqəli immunosorbent analizi daxildir - tibblə məşğul olmayan adi insana çox az məlum olan müasir və kifayət qədər yeni bir test. Buna baxmayaraq, bu texnika ixtisaslı tibb işçiləri arasında sürətlə öz tərəfdarlarının sıralarını qazanır. Onun xüsusiyyətləri və əsas xüsusiyyətləri ilə tanış olaraq bunun nə olduğunu və hansı hallarda istifadə edilməli olduğunu anlamağa cəhd edə bilərsiniz.

Ferment immunoanalizi bioloji materiallarda (tədqiqat üçün nümunələr) xüsusi zülalları aşkar etməyə imkan verən molekulyar “antigen-antikor” reaksiyasına əsaslanan instrumental laboratoriya üsuludur. Belə zülallar fermentlər, müxtəlif mikroorqanizmlər (viruslar, bakteriyalar, göbələklər), protozoa və s. ola bilər.

Metodun kəşfindən sonra ona kəşf edənlərin adı ilə heç bir əlaqəsi olmayan, lakin ingilis dilində tam adın abreviaturası olan ELISA testi adı verildi - fermentlə əlaqəli immunosorbent analizi. Bütün dünyada həkimlər bu addan istifadə edirlər; rusdilli ölkələrdə bəzi həkimlər də bu cür tədqiqatları belə adlandırırlar.

Metodun əsas prinsipi molekulyar “antigen-antikor” reaksiyasıdır.

Antigen, xəstəliyə səbəb olan mikrobun bir hissəsi kimi insan bədəninə daxil olan hər hansı bir yad molekuldur. Antigenlər adətən protein molekullarıdır. Mikroorqanizmlərə əlavə olaraq, belə bir "qərib" qrupa və ya Rh faktoruna uyğun gəlməyən xarici qan hüceyrələri ola bilər.

Belə bir antigenin bədənə daxil olmasına cavab olaraq, hər hansı bir xarici molekuldan qorunmağa yönəlmiş bir immun reaksiya başlayır. Bu, immunitet sisteminin xüsusi agentlərinin - antikorların (immunoqlobulinlərin) sintezi səbəbindən baş verir. Hər bir antikor yalnız müəyyən bir antigen üçün uyğundur və patogen "qəribi" vahid kompleksə bağlayaraq zərərsizləşdirir. Məhz belə bağlanma prosesi “antigen-antikor” reaksiyası adlanır.

Antikorların növləri

Bütün antikorlar (immunoqlobulinlər) immun reaksiyanın hansı mərhələsində meydana çıxmasından asılı olaraq 5 növə bölünür:

ELISA diaqnostikası üçün immunoqlobulinlərin IgG, IgM və IgA səviyyələri çox vaxt vacibdir. Onların titrlərinə görə, bir insanın əvvəllər xəstələndiyini və ya bu yaxınlarda yoluxduğunu, toxunulmazlığı inkişaf etdirdiyini və ya bədəninin patologiyaya qarşı müdafiəsiz olub olmadığını öyrənə bilərsiniz.

Ferment immunoassayının üstünlükləri və mənfi cəhətləri

Hal-hazırda ELISA ən dəqiq və həssas üsullardan biridir. O, tibbin müxtəlif sahələrində mütəxəssislər tərəfindən qəbul edilib və tətbiq dairəsini genişləndirməkdə davam edir.

Metodun üstünlükləri

  • Alınan məlumatların yüksək dəqiqliyi.
  • Həssaslıq (nümunədə patogenin minimal olması ilə belə tələb olunan maddəni aşkar etməyə imkan verir).
  • Xəstəliyin ilk günlərində və ya inkubasiya dövründə diaqnozun mümkünlüyü.
  • Bənzər dəqiqliyin digər üsulları ilə müqayisədə məlumat əldə etmə sürəti.
  • Prosesin yüksək avtomatlaşdırılması və insanın minimal iştirakı, bu da ifaçının səhvini azaldır.
  • Patoloji prosesin mərhələsi və seçilmiş terapiyanın effektivliyi haqqında məlumatların əldə edilməsi.
  • Material toplayarkən ağrısız və minimal invaziv.

Metodun çatışmazlıqları

  • Əksər hallarda, patogenin özü deyil, bədənin patogen agentə reaksiyasını təyin etməyə imkan verir.
  • Testdən əvvəl şübhəli xəstəlik dəqiq bilinməlidir, çünki test yüksək spesifikdir.
  • Texniki problemlər, dərman qəbul etmək, xəstənin bədənində bir neçə xroniki xəstəliyin və ya metabolik pozğunluqların eyni vaxtda olması ilə bağlı yanlış göstəricilərin olma ehtimalı.
  • Nəticələrin təfsiri yalnız yüksək ixtisaslı mütəxəssis tərəfindən aparılmalıdır, çünki əldə edilən məlumatları şərh etmək üçün müəyyən bir sahədə xüsusi təlim və böyük tibbi bilik ehtiyatına sahib olmaq lazımdır.
  • ELISA kifayət qədər nadir bir testdir, buna görə də bütün diaqnostik laboratoriyalarda aparılmır.
  • Metod kifayət qədər bahadır, çünki laboratoriyada reagentlərdən əlavə, xüsusi institutlarda istehsal olunan çoxsaylı bahalı avadanlıq və antigen nümunələri olmalıdır.

Ferment immunoassay hansı hallarda istifadə olunur?

Ferment immunoassay üçün göstərişlərin tam siyahısı çox genişdir, demək olar ki, bütün tibb sahələrini əhatə edir.

Çox vaxt ELISA aşağıdakı məqsədlər üçün istifadə olunur:

  • yoluxucu xəstəliklərin aşkarlanması;
  • cinsi yolla keçən xəstəliklərin diaqnozu;
  • immun statusunun və ya fərdi otoimmün xəstəliklərin müəyyən edilməsi;
  • şiş markerlərinin müəyyən edilməsi;
  • hormonların təyini.

Yoluxucu və viral xəstəliklər halında, texnika aşağıdakı patologiyaları müəyyən etməyə imkan verir:

Bundan əlavə, ELISA infarkt vəziyyətini tez və effektiv şəkildə müəyyən etməyə, bədənin reproduktiv potensialını qiymətləndirməyə, allergiyanı, onların mənbəyini və s.

İmmunoferment texnikası yeni dərmanların hazırlanması zamanı və onların insan orqanizminə təsirinin qiymətləndirilməsində klinik tədqiqatlar aparmaq üçün istifadə olunur.

Nümunələrin növləri və onların tədqiqat üçün seçilməsi üsulları

Çox vaxt ferment immunoassay üçün test materialı xəstənin antekubital venasından alınan qandır. Nümunələrin toplanması boş bir mədədə, əsasən səhər saatlarında aparılır. Nümunə götürdükdən sonra tədqiqata mane olan formalaşmış hüceyrələr ayrılır və qandan çıxarılır, yalnız serum qalır.

Genitouriya infeksiyalarına diaqnoz qoyulduqda, material tez-tez cinsiyyət orqanlarının selikli toxumalarından, uretradan və ya uşaqlıq boynundan gələn selikdən, düz bağırsaqdan nümunələrdən, qasıq nahiyəsində və bədənin digər hissələrindən eroziya və ya xoralardan qırıntılara çevrilir. Swablar ağız boşluğundan, həmçinin nazofarenksdən götürülə bilər.

Bəzən amniotik mayenin vəziyyətini təyin etmək üçün hamiləlik dövründə mamalıq və ginekoloji praktikada ferment immunoassay istifadə olunur. Bu vəziyyətdə amniotik maye nümunəyə çevrilir. Bunun üçün uzun iynə ilə amnion kisəsini deşərək az miqdarda maye alınır. Bütün manipulyasiyalar mümkün riskləri minimuma endirmək üçün steril alətlərlə aparılır.

Tez-tez material serebrospinal və ya seroz maye olur. Bu, inyeksiya ilə idarə olunan lokal anesteziya ilə baş verir.

Tədqiqata göndərən mütəxəssis ferment immunoassay üçün hansı növ materialların lazım olduğunu aydınlaşdırmalıdır. Çox vaxt bir neçə növdən və ya müxtəlif yerlərdən nümunələr götürülür. Bu növ müayinə üçün göndəriş verən həkim də xəstəyə biomaterialın verilməsi üçün hazırlıqlar barədə məlumat verməlidir.

Enzim immunoassay üçün hazırlıq

Ferment immunoassaydan sonra əldə edilən məlumatların dəqiqliyini artırmaq üçün materialın seçilməsinə hazırlıq aşağıdakı kimi olmalıdır:

  • Tədqiqatdan 10 gün əvvəl antibiotikləri, antiviral və antimikotik dərmanları istisna edin;
  • bir gün ərzində alkoqol, siqaret və narkotik maddələrin qəbulunu istisna etmək lazımdır;
  • eyni dövrdə fiziki həddindən artıq yüklənmədən qaçınmaq lazımdır;
  • Xəstənin qəbul etdiyi bütün dərmanlar barədə həkimə xəbərdarlıq edin;
  • Əgər hamiləsinizsə və ya hamilə olduğunuzdan şübhələnirsinizsə, həkiminizə məlumat verin.

Sınaq materialları səhər acqarına yığılsa yaxşıdır.

Diaqnoz hormonal səviyyələrin vəziyyətini təyin etmək məqsədi daşıyırsa, o zaman bir gün əvvəl sakit bir vəziyyətdə olduğunuzu və sinir gərginliyindən qaçınmağınızı təmin etmək vacibdir. Qadınlar üçün hormonlar üçün qan bağışlamaq, təyinat zamanı həkim tərəfindən müzakirə ediləcək aylıq dövrün müddəti ilə aydın şəkildə müəyyən edilir.

Nümunə götürmədən 2-3 gün əvvəl menyudan qızardılmış və yağlı qidaları xaric etməlisiniz və hepatit üçün test etməzdən əvvəl sitrus meyvələri və ya hər hansı digər narıncı və ya sarı meyvə və tərəvəzləri yeməyin.

Enzim immunoassay nəticələrinin şərhi

Keyfiyyətli tədqiqatın nəticəsi adətən "+" (aşkar edildi) və ya "-" (tapılmadı) işarələri ilə göstərilir.

Müəyyən immunoqlobulin qruplarının mövcudluğuna və ya olmamasına əsaslanaraq, aşağıdakı nəticələr çıxarıla bilər:

  • JgM (-), JgG (-), JgA (-) - xəstəliyə qarşı immunitet tamamilə yoxdur (orqanizm əvvəllər bu tip antigenlə qarşılaşmamışdır);
  • JgM (-), JgG (+), JgA (-) - bu antigen və ya peyvəndlə əvvəllər toqquşma olub;
  • JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) - kəskin patoloji proses (çox güman ki, birincil);
  • JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) - xroniki proses;
  • JgM (+), JgG (+), JgA (+) - residiv;
  • JgM (-) - bərpa mərhələsi.

Kəmiyyət dəyərləri böyük bir məlumat yükü daşıyır, lakin yalnız iştirak edən həkim onları əvvəlki göstəricilərə, xəstənin yaşına və hər bir xüsusi xəstəlik üçün normalara əsaslanaraq şərh edə bilər. Bu səbəbdən nəticələri özünüz qiymətləndirə bilməzsiniz.

Nəticələri nə qədər gözləmək lazımdır?

Bu texnikanın bir çox çeşidi var, bunlardan asılı olaraq əldə edilən məlumatların əldə edilməsi müddəti müəyyən edilir. ELISA diaqnostikasının orta müddəti 4-6 saatdır ki, bu da ertəsi gün nəticələri təqdim etməyə imkan verir.

Ən uzun üsullar, məsələn, HİV infeksiyası halında, 10 günə qədər davam edir.

Təcili ehtiyac yarandıqda 1-2 saat ərzində cavabın alındığı ekspress üsullardan istifadə etmək mümkündür.

ELISA testini haradan ala bilərəm?

Bu tip diaqnostika üçün avadanlıq olduqca bahalı olduğundan, bütün laboratoriyalar onu ala bilmir. Bundan əlavə, xüsusi antigenləri ehtiva edən testlər məhdud raf ömrünə malikdir (adətən təxminən 1 il) və buna görə də daimi yenilənmə tələb olunur.

Bu səbəblərdən dövlət tibb müəssisələrində həmişə ELISA laboratoriyaları olmur. Çox vaxt böyük özəl tibb və ya böyük diaqnostika mərkəzlərinə müraciət etmək lazımdır.

ELISA testini keçirmək üçün laboratoriyanın xüsusi lisenziyası olmalıdır, işçilər və laborantlar xüsusi təlim keçməlidirlər.

Çox vaxt xəstəni müayinə üçün göndərən həkim tərəfindən müəyyən bir diaqnostika mərkəzi və ya laboratoriya tövsiyə olunur.

Enzim immunoassayının qiyməti

Bu tədqiqatın qiyməti ölkənin regionundan və xidmət göstərən klinikanın səviyyəsindən asılıdır. Moskvada bir antigeni təyin etmək üçün minimum qiymət 700 rubldan başlayır. Bir anda bir neçə immunoqlobulini müəyyən etmək lazımdırsa, qiymət əlavə olunacaq.

Təcili təhlil halında, xərc 150-200 rubl artır. hər bir antigen üçün.

Kifayət qədər yüksək qiymətə baxmayaraq, ferment immunoassay xəstənin müayinəsini mümkün qədər məlumatlı və sürətli etməyə imkan verir ki, bu da müalicəyə başlamazdan əvvəl vaxtı azaldır və insanın vəziyyətini daha sürətli sabitləşdirməyə imkan verir.

Bu video “Ferment immunoassayının əsasları” filmini təqdim edir.

Zaman zaman həkimlər ELISA testlərini təyin edirlər, hamı bunun nə olduğunu bilmir. ELISA aşağıdakı dekodlaşdırmaya malikdir - qanın ferment immunoassay. Belə bir qan testi bədənin yoluxucu xəstəliklərlə necə mübarizə apardığını və xəstəliyin mərhələsini nümayiş etdirdiyini anlamağa kömək edir. Enzim immunoassay qanın qoruyucu fəaliyyətini qiymətləndirməyə, infeksiyalar, hormonal problemlər və s. ilə əlaqəli patologiyalarda immun çatışmazlığını müəyyən etməyə kömək edir.

ELISA qan testi damardan alınan materialla işləyir. Bundan əlavə, vitreus gövdəsinin tərkibi, onurğa beynindən maye və uretradan və ya uşaqlıq boynu kanalından yayılan ləkələr müayinə üçün mövcuddur. ELISA ferment immunoassay üçün, dölün ətrafını əhatə edən maye hamilə qadınlardan götürülə bilər.

Bu vəziyyətdə, müxtəlif üsullardan istifadə edərək, qan birbaşa ELISA üçün yoxlanıla bilər. Birbaşa, dolayı, rəqabət və bloklama var. Bədən antigen adlanan bəzi patogen agentlə yoluxduqda, immunitet sistemi spesifik antikorlar istehsal etməyə başlayır, məsələn, hepatitə. Bu antikorlar xarici agentlərlə "mübarizə" aparmaq məqsədi daşıyır. Antikorlar nədir? Bunlar antigenlərlə qarşılıqlı əlaqədə ola bilən və antigen-antikor adlanan immunoloji komplekslər əmələ gətirə bilən xüsusi zülallardır. Məhz bu komplekslərin aşkarlanması üçün ELISA diaqnostikası cavabdehdir. Bir antigeni aşkar etmək üçün ortaya çıxan qan nümunəsinə antikorlar əlavə edilir və ya əks prosedur həyata keçirilir.

ELISA-nın müsbət nəticəsi immunitet sisteminin və fermentlərin reaksiyasına əsaslanır. Birincinin təsiri altında yoluxucu agentlər və hüceyrə elementləri bağlanır, ikincisi birincinin nəticəsini vizuallaşdırmağa kömək edir. İmmunitet reaksiyası antikor və antigen birləşməsini əhatə edir. Bu proses nəticəsində immun kompleks formalaşır. Bütün hüceyrələrin səthində antigen var. İmmunitet hüceyrəsi şübhəli olanı tutur və səthdə sabitlənmiş antigen yaddaşa “yüklənmiş” məlumatla müqayisə prosedurundan keçir. Təsvirdə uyğunluq varsa, hüceyrə evə qayıdır, amma yoxsa, səthə yapışan antikordan məsul olan bir əlaqə yaranır.

Enzimatik reaksiya isə maddələrin yenilərinə çevrilməsinə imkan verir. Material bir fermentə məruz qalır. Bu zaman enzimatik fərq müxtəlif substratlarla təmin edilir. Bu reaksiya nəticəsində yaranan məhsul patogenin miqdarını təyin etmək üçün göndərilir, onun təyini məhlulun rənginin sıxlığına əsaslanır.

Metodun xüsusiyyətləri

Allergiya və virus mənşəli xəstəliklərin diaqnozu üçün lazım olduqda ferment immunoassay qan testi təyin edilir. Sifilis və qorunmayan cinsi əlaqə yolu ilə ötürülən bir sıra digər infeksiyalar üçün ELISA testi də var. Bu diaqnoz PCR ilə müqayisədə getdikcə populyarlaşır. Fakt budur ki, PCR yaxmalarla işləməyi nəzərdə tutur. PCR-dən fərqli olaraq, ELISA nəticələri qan testlərindən əldə edilə bilər.

Bundan əlavə, immun çatışmazlığının mövcudluğunu müəyyən etmək, onkoloji diaqnoz qoymaq, müalicənin nə qədər effektiv olduğunu qiymətləndirmək, hormonal səviyyələri müəyyən etmək və bütövlükdə əməliyyatdan əvvəl müayinədən keçmək lazım olduqda, ELISA metodundan istifadə edərək qan testi təyin edilə bilər.

ELISA tədqiqatlarını, məsələn, PCR ilə müqayisə etsəniz, bir sıra üstünlüklər tapa bilərsiniz. Əsas odur ki, inkişafın ən erkən mərhələlərində belə tam diaqnozun mümkünlüyü. Bundan əlavə, ELISA nəticələri xəstəliyin spesifik mərhələsini və onun inkişaf səviyyəsini təyin etməyə kömək edir.

ELISA testi PCR ilə müqayisədə daha yüksək effektivliyə malikdir; əlavə olaraq, CYBH-ləri aşkar etmək üçün hamiləlik zamanı götürülə bilər. Bu testdən keçən hər kəs qan zərdabında TSH konsentrasiyasını öyrənə bilər. Bu, tiroid bezinin reaksiyasının nə olduğunu, işində hər hansı bir nasazlıq olub olmadığını yoxlamaq üçün çox vacibdir.

Bununla belə, polimeraza zəncirvari reaksiyanın əlavə üstünlükləri də tədqiqatın sürətidir ki, bu da sürətli nəticələr deməkdir. Həkimlər də nəticələrin düzgünlüyünü yüksək qiymətləndirirlər. Əgər STD-lərdən danışırıqsa, o zaman səviyyə TSH konsentrasiyasında olduğu kimi 98 faizə çatır.

Əlbəttə, bəzi çatışmazlıqlar var. Ancaq bu halda testin dolayı xüsusiyyətlərindən danışırıq. Xüsusilə, standartların müəyyən edilməsində mümkün səhvləri istisna etməyin mümkün olmadığından danışırıq. Bəzən tamamilə sağlam bir qız tərəfindən edilən bir test yanlış müsbət nəticə və ya əks halda mənfi nəticə göstərə bilər. Bununla belə, psixoloji tədqiqat metodlarının təsnifatı əksər hallarda bu cür çatışmazlıqları düzgün hazırlanmaması və ya materialın toplandığı texnikanın pozulması ilə əlaqələndirir.

İcra Xüsusiyyətləri

ELISA analizi üçün əksər hallarda qan verilir. Qan vermədən əvvəl ən azı səkkiz saat oruc tutmaq və testin nəticəsini təsir edən bir sıra dərman qəbul etməkdən çəkinmək vacibdir. Söhbət tiroid bezinin işinə təsir edən antihistaminiklər və hormonal dərmanlardan gedir. Bundan əlavə, spirt ən azı 24 saat istisna edilməlidir. Qan vermədən ən azı bir saat əvvəl siqaret çəkmədiyinizə əmin olun. Nəticənin təhrif edilməsi narkotik maddələr qəbul edərkən də mümkündür.

Transkriptə keçməzdən əvvəl, belə bir test üçün hansı ölçmə üsullarından istifadə edildiyini qeyd etmək lazımdır. Test nəticəsi antikorları və ya immunoglobulinləri Ig göstərəcək. Daha əvvəl müzakirə edilən çox spesifik zülalları nəzərdə tuturlar. B-limfositlər viruslar, bakteriyalar və ya göbələklər bədənə daxil olan kimi onların istehsalına cavabdehdirlər. Latın əlifbası ilə təyin olunan beş növ immunoqlobulin var.

Onların fərqləri müxtəlif molekulyar formalar və kütlələrlə əlaqələndirilir. Onların müxtəlif yarım ömrü var və müxtəlif yollarla yoluxucu proseslərdə iştirak edir və ya iştirak etmirlər. İnfeksiyanın baş verdiyi andan onların aşkar oluna biləcəyi vaxt çərçivəsi də dəyişir.

Molekulyar çəkidən istifadə edərək immunoglobulinləri əsas kimi təsnif etsəniz, IgM ən yüksək göstəricilərə malikdir. Bu tip immunoqlobulinlərin bir xüsusiyyəti plasental maneədən keçə bilməməsidir. Yenidoğulmuş bir uşaqda testdə IgM aşkar edilərsə, döldə infeksiyanın olmasından danışırıq.

İnsan qanının böyük əksəriyyətində IgG immunoqlobulinləri var, onlardan ən azı IgE-dir. Yoluxucu proseslər çərçivəsində iş haqqında danışarkən, A, M, G variantlarına xüsusi diqqət yetirilməlidir. IgE allergik reaksiyanın markeri kimi çıxış edir. IgD yalnız limfa düyünlərinin və badamcıqların toxumalarında olur. Bu, yerli toxunulmazlığın yaradılması baxımından vacibdir.

Bundan əlavə, analiz antigenləri təyin edir. Onlar üzvi mənşəyi ilə tanınan yüksək molekulyar ağırlıqlı maddələr kimi başa düşülür. Xüsusilə, söhbət yoluxucu və digər spektrli xəstəliklərin patogenlərindən gedir. Bundan əlavə, bir sıra xəstəliklərdə qaçılmaz olan müxtəlif hüceyrə dəyişikliklərinə siqnal verən maddələri də nəzərdə tuturuq. İmmunitet prosesində iştirak edən antigen-antikor kompleksini nümayiş etdirən immun kompleksi də göstərilir.

Tipik olaraq, istehsal müddətləri əlaqə saxladığınız xüsusi laboratoriyadan asılıdır. Bəzi laboratoriyalar bir-iki gün ərzində nəticə verə bilir, bəziləri isə bir həftə çəkir. Gecikmələr müəyyən miqdarda zərdab toplamaq ehtiyacı ilə bağlı ola bilər.

Nəticələrə və şərhə təsir

ELISA-nın ən dəqiq test üsullarından biri hesab edilməsinə baxmayaraq, səhvlər hələ də baş verir. Materialın götürülməsi proseduru, materialın düzgün daşınmaması və saxlanması nəticələrin düzgünlüyünə təsir göstərə bilər. Dərman qəbul etmək, yuxarıda qeyd edildiyi kimi, gizli xəstəliklərin olması. Metabolik pozğunluqlar və ya immun çatışmazlığı da düzgün göstəriciləri əldə etməyə imkan verməyəcəkdir. Bir ilədək həyat dövründə yeni doğulmuş körpələrdə də qeyri-dəqiq göstəricilər ola bilər. Bu, ananın antikorlarının bədəndə olması ilə əlaqədardır.

Deşifrədən danışarkən, analiz formaları immunoqlobulin siniflərinin hər biri üçün hesablama nəticələrini göstərmək üçün müsbət və ya mənfi işarədən istifadə edir. Aşağıdakılar ehtimal olunan variantlardır.

Aşkar edilmiş IgG, IgA və IgM-nin olmaması tam sağalmanı göstərir. IgM, IgA, IgG kimi komponentlər üçün mənfi nəticə infeksiyaya qarşı toxunulmazlığın olmaması deməkdir.

IgG, IgA üçün müsbət və mənfi nəticənin müsbət IgM ilə birlikdə birləşməsi bədəndə kəskin infeksiyanın mövcudluğunu göstərir. IgA və IgM üçün mənfi göstəricilərlə birlikdə müsbət IgG nəticəsi peyvənddən sonrakı dövrə və ya infeksiya nəticəsində toxunulmazlığın əldə edilməsinə uyğundur.

IgG, IgA üçün müsbət və ya mənfi nəticənin və IgM üçün mənfi nəticənin birləşməsi onun xroniki gedişində infeksiyanın mövcudluğunu göstərir. Üç komponent üçün müsbət nəticə: IgG, IgM, IgA, xroniki formada olan bir infeksiyanın kəskinləşməsini göstərir. Antikor siniflərini birbaşa aydınlaşdırmaqla yanaşı, ELISA analizinin deşifr edilməsinin bir hissəsi olaraq, həkim onların kəmiyyət göstəriciləri haqqında məlumat alır. İştirak edən həkimin şifrənin açılmasına cavabdeh olması lazım olduğunu vurğulamaq vacibdir. Fakt budur ki, bəzi komponentlərin birləşməsi onu əldə edilən yanlış nəticə haqqında düşünməyə vadar edə bilər ki, bu da testin təkrarlanmasına səbəb olacaq. Bu vəziyyətdə müstəqil şifrənin açılması faydasızdır.

Sifilis üçün qan testinin məqsədi bədənin onun törədicisi olan Treponema pallidum ilə mübarizə aparmaq üçün istehsal edə biləcəyi antikorları müəyyən etməkdir.

Sifilis üçün yanlış müsbət test, antigenlərin istehsalının digər səbəblərdən meydana gəldiyi hallarda baş verə bilər.

10% hallarda yalançı müsbət sifilis diaqnozu qoyulur.

Sifilis üçün bir test yalnız xəstənin şikayətləri olduqda deyil, tibbi müayinə zamanı, işə başlamazdan əvvəl, hamiləlik dövründə, xəstəxanaya yerləşdirmədən əvvəl təyin olunduğundan, belə bir xəstəliyin olmasından şübhələnməyən insanlarda infeksiyanın yüksək faizi var. .

Səhvləri aradan qaldırmaq üçün əldə edilən nəticələrin etibarlılığını təmin etmək lazımdır.

Sifilis üçün müsbət nəticələr iki qrupa bölünür: kəskin və xroniki. Kəskin yanlış müsbət nəticə müntəzəm testdən sonra 6 ay ərzində baş verir.

  • kəskin yoluxucu xəstəliklər;
  • zədələr;
  • nümunə götürmədən 1-7 gün əvvəl hər hansı bir peyvənd;
  • kəskin zəhərlənmə.

Bədəndə hər hansı bir faktorun olması halında, antikor istehsalı prosesi aktivləşir ki, bu da test nəticələrində əks olunur.

Xroniki problemlər varsa, test 6 ay və ya daha çox müddətdə səhv nəticələr göstərə bilər.

  • birləşdirici toxuma pozğunluqları;
  • vərəmin hər hansı forması;
  • xroniki qaraciyər pozğunluqları;
  • HİV, hepatit B, C, D və digər viral xəstəliklər;
  • bədəndəki otoimmün proseslər.

Sadalanan pozğunluqlardan birinə cavab olaraq qeyri-spesifik antikorların sistematik istehsalı səbəbindən nəticə səhv olur.

Yalançı sifilis aşkar edilərsə nə etməli

Sifilis üçün bir testin səhv ola biləcəyini müəyyən etmək üçün xəstəliyin təzahüründə digər amillərin mövcudluğunu və infeksiya ehtimalını qiymətləndirmək lazımdır.

Treponema pallidum yoluxmuş şəxslə təmasda olduqda cinsiyyət orqanlarının, ağızın və düz bağırsağın selikli qişaları vasitəsilə cinsi yolla ötürülən patogendir. Yoluxmuş anadan uşağına ötürülməsi də mümkündür.

Xəstəliyin özünü hiss etdirmədiyi inkubasiya dövrü 2-6 həftədir. Bundan sonra mümkün infeksiya yerlərində sıx əsaslı sifilitik xoralar əmələ gəlir.

1-2 həftədən sonra zədələnmə yerinə ən yaxın olan limfa düyünləri böyüyür və ağrılı olur.

Yanlış müsbət sifilis diaqnozu qoyulduqda, bir tibb müəssisəsinə qayıtmalısınız. Eyni zamanda, test ərəfəsində qəbul etdiyiniz bütün dərmanlar, xroniki və kəskin xəstəliklər haqqında məlumat verin.

Əgər sınaqdan keçməmiş tərəfdaşla qorunmamış cinsi əlaqədə olmusunuzsa və ya xəstəliyin ilk əlamətlərini aşkar etmisinizsə, bu barədə həkiminizə məlumat verməlisiniz.

Anamnez toplayıb müayinə apardıqdan sonra həkim sizə 1%-dən az səhvlə dəqiq nəticəni müəyyən etməyə imkan verəcək bir sıra testlər təyin edəcək.

Sifilis üçün testlərin növləri

İki növ test var: treponemal olmayan və treponemal. Birinci seçim Treponema pallidumun süni analoqlarının istifadəsini nəzərdə tutur, ikinci halda isə real treponemlərdən istifadə olunur.

Qeyri-treponemal üsullar

Bu cür üsullar geniş yayılmışdır və ən çox adi tibbi müayinələrdə istifadə olunur.

Üstünlük aşağı qiymət, tez nəticələr və standart laboratoriya avadanlıqlarından istifadə edərək tədqiqat aparmaq imkanıdır.

RW-də təhlil

Bunu həyata keçirmək üçün xəstədən qan, daha az tez-tez isə serebrospinal maye alınır. Qan barmaqdan və ya damardan götürülə bilər. Belə bir araşdırmanın aparılmasında səhv 7%-ə qədər ola bilər.

Yağış mikroreaksiyası (MR və ya RMP)

RPR və VDRL iki növ sifilis testini ehtiva edə bilər. Treponemanın təsiri altında hüceyrələrin parçalanması nəticəsində antilipid anticisimləri əmələ gəlir.

Lipidlər digər pozğunluqların təsiri altında məhv edilə bilər, buna görə də VDRL və RPR həyata keçirərkən səhv dərəcəsi 1-3% -dir.

Treponemal testlər

Belə tədqiqatlar bütün klinikalarda aparılmır və bahalı avadanlıq tələb edir.

Buna görə də, qeyri-treponemal testlərin nəticələrinə əsasən xəstəliyin mövcudluğundan şübhələndikdə istifadə olunur. Belə tədqiqatların səhvi 1%-dən azdır.

Antigenləri və antikorları təyin etməyə imkan verir. Nəticəni müəyyən etmək üçün xəstə barmağından və ya damarından qan verir. Nəticədə, müayinə də xəstəliyin mərhələsini təyin etməyə kömək edir.

Sifilis üçün RPGA testi qırmızı qan hüceyrələrinin yapışma faizini təyin etməyə imkan verir. Passiv hemaqlütinasiya reaksiyasının dəqiq nəticəsi infeksiyadan sonra 28-ci gündə əldə edilə bilər.

Enzim immunoassay müxtəlif növ immunoqlobulinlərin səviyyəsinə əsasən xəstəliyin mövcudluğunu və mərhələsini müəyyən edir.

Patogen DNT-ni aşkar etmək üçün ən dəqiq test. Nadir hallarda istifadə olunur, çünki mürəkkəb reagentlər tələb olunur.

RIF, RPGA, ELISA testlərinin səhv ehtimalı 1%-dən azdır. PCR ilə səhv 0-1% ola bilər.

Hamilə qadınlarda sifilis üçün müsbət nəticə

Hamilə qadınlarda qeyri-treponemal testlər apararkən 1,5% hallarda səhv nəticə müşahidə edilə bilər. Bu tip xəstəliyin təhlili hamiləlik boyu məcburidir.

Sifilis üçün ilk test 12 həftədə, sonra 30 həftədə və doğumdan əvvəl aparılır. Nəticə bədəndəki təbii dəyişikliklərə və xüsusən də böyüyən dölün qorunması üçün toxunulmazlığa görə yalan ola bilər.

Buna görə hamiləlik dövründə təkrar test təyin edilə bilər, ilk nəticələr mənfi olsa da, risk faktoru varsa, tez-tez təyin edilir.

Treponemal testlər də təyin edilə bilər, çünki diaqnoz təsdiqlənərsə, xəstəliyin uşağın bədəninə təsiri antibiotik müalicəsindən daha dağıdıcıdır.

Zəif müsbət test

Aldığınız nəticə forması 1-2 artıdan ibarətdirsə, bu, az miqdarda antikorların mövcudluğunu göstərə bilər. Bu nəticələr bir neçə halda baş verə bilər:

  • tamamlanmamış inkubasiya dövrü;
  • gec forma, 2-4 ildən sonra;
  • xəstəliyin müalicəsindən sonra qalıq antikorlar.

Bu vəziyyətdə, 2 həftədən sonra təkrar yoxlama tələb olunur.

Testlərə necə düzgün hazırlaşmaq olar

Sifilis üçün səhv bir test aparılıbsa, sizə təkrar test veriləcək. Onun nəticələrinin mümkün qədər dəqiq olması üçün düzgün hazırlamaq lazımdır.

  • Analizdən əvvəl yalnız su içməyə icazə verilir, yemək qadağandır;
  • 24 saatdan 1 saat əvvəl spirt və siqaretdən imtina edin;
  • bir damardan qan verirsinizsə, bunu etməzdən əvvəl 10 dəqiqə istirahət edin;
  • Yoluxucu xəstəliklər pisləşibsə, menstruasiya baş verirsə və ya xəstə bir gün əvvəl rentgen şüalarına məruz qalırsa, sifilis üçün qan testi aparılmır.

Kontrendikasyonlar siyahısında bir sıra dərmanlar da var, buna görə də müalicə alırsınızsa, qəbul etdiyiniz dərmanlar barədə həkiminizə məlumat verin.

Xəstəlik təsdiqlənərsə

Treponemal testlər də daxil olmaqla bir neçə yoxlamadan sonra nəticə müsbət olarsa, bir sıra tədbirlər görməyə dəyər:

  • cinsi partnyorunuza bu barədə məlumat verin, onun da müayinədən keçməsi lazımdır;
  • yaxın qohumlar müayinədən keçməlidir;
  • yaxınlarınızın profilaktik müalicəsini həyata keçirmək lazımdır;
  • Müalicənin bütün kursu ərzində xəstəliyə dair arayış vermək və infeksiyanın ötürülməməsi üçün digər insanlarla yaxın təmasdan qaçmaq lazımdır;
  • Müalicənin sonunda, diaqnostiklərin nəticələrdə antigenlərin görünüşü ilə bağlı sualları olmaması üçün tibbi kitabçaya əlavə edilməli və antikorlar üçün testlər aparılarkən təqdim edilməli olan bir sertifikat verilir.

Diaqnoz qoyarkən məlumat məxfidir. Xəstəlik məzuniyyəti alarkən açıqlanmır, xəstəxananın verdiyi bütün sənədlərdə xəstəliyin adı şifrələnir, xəstə ilə yaxın təmasda olmayan insanlara bu diaqnoz barədə məlumat verilmir.

Müalicədən sonra xəstə tamamilə təhlükəsizdir, keçmişdə sifilis olması işə qəbuldan və ya digər insan hüquqlarının həyata keçirilməsindən imtina üçün səbəb ola bilməz.

Diaqnoz erkən mərhələlərdə təsdiqlənərsə, tam sağalma ehtimalı 100% -dir. Treponema pallidum, uzun illər ərzində penisilinlə müalicə olunan, ondan qorunma inkişaf etdirməyən bir neçə xəstələrdən biridir.

Buna görə xəstələr penisilin törəmələrinə əsaslanan dərmanlarla müalicə olunur. Xəstəliyin ilkin forması baş verərsə, 3 ay ərzində yoluxmuş şəxsin sahib olduğu bütün cinsi partnyorları diaqnoz etmək və müalicə etmək lazımdır.

İlkin mərhələnin müalicəsindən sonra sifilis ağırlaşmaları tərk etmir. Xəstəlik xroniki olarsa və ya ana bətnində infeksiya varsa, əlilliyə səbəb ola bilər.

sifilis üçün müsbətdir

Suallar və cavablar: sifilis üçün müsbətdirsə

Doktor Suxova sual Yu.A.
Salam. Mən sizə Ukraynanın Səhiyyə saytında çox qısa bir sual verdim. Hekayəmi tamamilə yazacam. Zəhmət olmasa məsləhətləşin. Başqa hansı testlərdən keçmək lazımdır?
2 il əvvəl təsadüfi cinsi əlaqə var idi.
1,5 aydan sonra bir növ dəhşət başladı: uzun sürən qızdırma, qalxanabənzər nahiyədə elə bil iş gedirdi, nəsə vızıldayırdı, sonra baş ağrıları, boğaz ağrıları, sümüklərdə və əzələlərdə şiddətli ağrılar, əvvəlcə bıçaqlanma. təbiətdə, sonra əzələlərdən axan qaynar su kimi, ürəkbulanma, birdəfəlik səpkilər, uzun müddət müalicəyə cavab verməyən tez-tez kəskin respirator virus infeksiyaları, nəfəs darlığı, nəfəs darlığı, ağız qoxusu, nevralji, gecə tərləmələri, ağır zəiflik, performansın azalması. Mən az qala meyitə çevrildim. Ondan əvvəl mən sağlam və inkişaf edən qız idim, peşəkar şəkildə rəqs edirdim, fiziki cəhətdən kifayət qədər möhkəm və aktiv idim. Mən praktiki olaraq heç vaxt soyuqdəymədən əziyyət çəkməmişəm, praktiki olaraq sağlam idim.
Müdafiəsiz cinsi əlaqədən 1 il 10 ay sonra 2 müxtəlif ELISA laboratoriyasında HİV üçün mənfi test etdim.
Hepatit B və C mənfi.
EBV PCR mənfi
CMV PCR mənfi
Herpes virusu 6 mənfi
Toksoplazmoz PCR mənfi
Sifilis mənfi
STI mənfi.

Ümumi qan testi: ESR 30; qalanı normaldır.
Biokimya müsbət CRP, qalanları normaldır.

Mən nə etməliyəm? Ümidsizliyəm.Artıq hər şeyi,bütün infeksiyaları yoxlamışam,amma səbəbi tapılmayıb.Yenidən HİV testi etməliyəmmi?Əlaqədən artıq 2 il keçib. Bəzi simptomlar keçib getdi amma özümü çox pis hiss edirəm, şiddətli zəiflik, daimi nevralgiya, gecələr döş qəfəsində tərləmə.Nə xəstə olduğumu başa düşmürəm.Bəlkə daha bir neçə test edib baxmağa gəlməliyəm. sən?Mən əminəm ki, bu gənc mənə yoluxdurub, mən onu bir daha görmədim. Kömək edin. Zəhmət olmasa nə etməli məsləhət verin?

Salam!
31 yasim 35 heftelik hamileyem. 2 ay əvvəl mən ELISA metodundan istifadə edərək infeksiyalar üçün qan verdim (çünki yoluxucu xəstəliklər şöbəsində qusma ilə nəticələndim, orada test etdilər), ginekoloqum məni hamiləliyin erkən mərhələlərində infeksiyalar üçün qan verməyə yönəltmədi. (bu mənə qəribə görünür, baxmayaraq ki, qan QİÇS və sifilis üçün hamiləlik zamanı üç dəfə götürülür, hamısı mənfidir). İndi nəticələr barədə mənə məlumat verilib. Zəhmət olmasa rəy bildirin. Bəzi göstəricilər həyəcan vericidir, məsələn, qızılca virusu, CMV, herpes HSV 1/2, Epstein-Barr virus infeksiyası (EBV):

Rubella Ig G K=2.0
CMV Ig G K=4.1
Herpes HSV Ig G tip 1 K=3,4, tip 2 mənfi.
Epstein-Barr VCA K=4.7 NA —
xlamidiya və mikoplazma - mənfi.

İstiqamətim aşağıdakıları bildirir:
Müsbətlik əmsalı K = nümunənin optik sıxlığı. K 0,9-dan azdırsa, nəticə mənfi, K 0,9-dan 1,1-ə qədərdirsə, şübhəlidir, K 1,1-dən çox olarsa, müsbətdir.
Ig G, EBV, NA dəyərləri 55 vahid/ml-ə qədər normal ola bilər, bu dəyərdən yuxarı nəticə müsbətdir.
Zəhmət olmasa şərh verin! Diqqətiniz üçün təşəkkürlər!

Sifilis üçün test nəticələrinin dekodlanması

Sifilis ciddi, yüksək yoluxucu xəstəlikdir. Xəstəliyi müəyyən etmək üçün qan testləri (venoz və kapilyar) istifadə olunur, bəzi hallarda onurğa beyni mayesinin müayinəsi aparılır. Sifilis testinin təfsiri iştirak edən həkim tərəfindən həyata keçirilir. Xəstə təhlildə bəzi simvolları müstəqil olaraq görə və başa düşə bilər, lakin xəstəliyin olması və ya olmaması ilə bağlı son nəticəni ixtisaslı həkim verməlidir. Sifilis üçün yanlış müsbət və ya yanlış mənfi test mümkündür.

Nə vaxt həkimə müraciət etmək lazımdır

Uzun müddət sifilis müalicəsi mümkün olmayan təhlükəli bir xəstəlik idi. Müasir tibbdə xəstəliyi tamamilə müalicə etmək üçün bütün vasitələr var. Diaqnoz nə qədər tez qoyulsa və xəstəlik aşkar edilərsə, müalicəsi bir o qədər asan olar. Sifilis infeksiyası yalnız cinsi əlaqə zamanı deyil, həm də xəstə ilə eyni məişət əşyalarını (diş fırçası, dəsmal, mətbəx əşyaları və s.) paylaşması nəticəsində baş verir. Buna görə də, hər bir insan üçün sifilis üçün dövri ekspress qan testləri tövsiyə olunur.

İnfeksiya zamanı qasıq nahiyəsində limfa düyünləri böyüyür, ağızda və cinsiyyət orqanlarında xoralar və dəri səpgiləri əmələ gəlir. Xəstəliyin ilk əlamətlərini görsəniz, dərhal həkimə müraciət etməlisiniz. Müayinə ginekoloq, uroloq, proktoloq, veneroloq və ya adi terapevtdən göndərişlə anonim ola bilər. Testi keçdikdən sonra sifilis testinin transkripti üçün həkiminizlə əlaqə saxlamalısınız.

İmtahanın məqsədi

Tez-tez tibbi müayinələr zamanı həkim sifilis üçün bir test də daxil olmaqla bir çox laboratoriya testləri təyin edə bilər. Bu müraciət xəstəlik şübhəsi kimi qəbul edilməməlidir. İctimai həyatın bir çox sahələrində xəstəliyin olmaması haqqında arayış tələb olunur.

  • Ailənin planlaşdırılması
  • Yataqxanaya qeydiyyat
  • Tibb işçilərinin, iaşə işçilərinin iş yerinə girişi və s.
  • Orqan və ya qan donorluğu
  • Cinsi əlaqədə olan xəstələr
  • Klinik simptomların olması
  • Sifilis müalicəsinin sonu

Bir qayda olaraq, ilkin tədqiqat kimi qeyri-spesifik (qeyri-treponemal) testlərdən biri təyin edilir. Belə testlərin etibarlılığı nisbətən aşağıdır və xəstə yanlış müsbət nəticə ala bilər. Bu vəziyyətdə, xüsusi (treponemal) testdən istifadə edərək təkrar tədqiqat təyin ediləcəkdir. Müsbət və ya mənfi bir test iştirak edən həkim tərəfindən nəzərdən keçirilməlidir.

Testə hazırlıq

Laboratoriya müayinəsi üçün barmaqdan və ya damardan qan verməzdən əvvəl, analizin mümkün qədər etibarlı olması üçün bəzi qaydalara riayət etməlisiniz. Qan almadan 8-12 saat əvvəl yemək, çay və ya qəhvə qəbul etməməlisiniz. Laboratoriyaya getməzdən əvvəl gün ərzində ədviyyatlı, yağlı, qızardılmış, duzlu və hisə verilmiş qidalar yemək tövsiyə edilmir. Antibiotiklər və digər dərmanlar da testə mane ola bilər. Qəbul edilən bütün maddələr həkiminizə bildirilməlidir. O, sizə 1 və ya bir neçə həftə ərzində testdən imtina etməyi tövsiyə edə bilər. Qan nümunəsi özəl laboratoriyada, rayon klinikasında götürülə bilər və ya evinizə həkim çağıra bilərsiniz.

Hər halda, steril avadanlıq və birdəfəlik əlcəklərdən istifadə olunur.

Sifilis üçün sürətli test evdə müstəqil olaraq edilə bilər. Apteklər rus dilində ətraflı təlimatlarla xüsusi testlər təklif edirlər. Testin nəticəsi 10 dəqiqə ərzində məlum olur. Göstəricidəki bir qırmızı zolaq sifilis üçün mənfi testdir, iki zolaq müsbətdir. Bu cür testlərin etibarlılığı kifayət qədər yüksək deyil və diaqnozun təsdiqi kimi xidmət edə bilməz.

Qeyri-spesifik müayinənin nəticəsini necə başa düşmək olar

Xəstələr tez-tez testdən sonra əminlik hiss edirlər. Qan vermək və sifilis testlərini özünüz deşifrə edə bilməmək, əlbəttə ki, xoşagəlməz haldır. Qan testinin deşifrə edilməsi tibbi təhsil və həkimin müvafiq keyfiyyətlərini, həmçinin nəticəyə təsir edən bütün amilləri nəzərə almaq tələb edir. Xəstə sifilis testinin nəticələrini oxuya bilərmi? Laboratoriya hesabatını gördükdən sonra sadə nəticələr çıxara bilərsiniz, lakin həkim diaqnozu təsdiqləməli və ya təkzib etməlidir.

Toluidin qırmızı testi diaqnoz üçün deyil, xəstəliyin müalicəsinin effektivliyini yoxlamaq üçün təyin edilir. tədqiqat antikorların sayının əvvəlki analizlə müqayisədə nə qədər dəyişdiyini göstərir. Əgər sayı azalıbsa, müalicə uğurludur. Həkimin təyin etdiyi müalicə zamanı analiz bir neçə dəfə aparılır. Prosedurlar başa çatdıqdan 3 ay sonra nəzarət testi aparılır.

Qeyri-treponemal testlər (RSKk, RMP və RPR) tez-tez tibbi müayinələr zamanı və sürətli diaqnoz kimi təyin edilir. Tədqiqat nəticəsində bir neçə not variantı var. Onları deşifrə etmək olduqca sadədir:

  • "-" mənfi nəticə
  • “+”, “1+”) və ya “++”, “2+” zəif müsbət təhlil
  • Sifilis üçün “+++”, “3+” və ya “++++”, “4+” müsbət test

İstənilən nəticə sifilis üçün yanlış müsbət və ya yanlış mənfi ola bilər. Klinik simptomlar və təsadüfi cinsi əlaqə olmadıqda, mənfi nəticə həkim tərəfindən düzgün qəbul edilə bilər. Müsbət reaksiya adətən treponemal testdən istifadə etməklə yoxlanılır.

Xüsusi Tədqiqatın Nəticələri

Treponemal testlər qeyri-treponemal testlərlə müqayisədə mürəkkəb və bahalıdır. Sifilis diaqnozu üçün istifadə olunan bir neçə növ test var: RSCT, RIBT, RIF, RPGA, ELISA və immunoblotting). Dəqiq spesifik tədqiqatlardan biri RIBT analizidir. Testin nəticəsi laboratoriya tərəfindən faizlə bildirilə bilər.

  • 20% mənfi nəticəyə uyğundur (“-”)
  • 21-30% şübhəli analiz (“++” və ya “2+”)
  • 31-50% zəif müsbət (“+++”, “3+”)
  • 51% və ya daha çox müsbət nəticəyə uyğundur

İmmunoblotinq xəstəliyin diaqnostikasının müasir və dəqiq üsullarından biridir. Adətən ilk tədqiqatın nəticələrini təsdiqləmək və ya təkzib etmək üçün təyin edilir. Qanda IgG və IgM antikorlarının aşkarlanması zolaqlarla göstərilir. Test nəticələri qeyri-treponemal testlə müqayisədə şərh edilir.

Hər iki nəticə mənfi olarsa, xəstə sağlamdır və ya infeksiya inkişafın ilk həftəsindədir. Hər iki müsbət nəticə sifilis və ya başqa, ehtimal ki, otoimmün xəstəliyin varlığını göstərir.

Mənfi qeyri-treponemal tədqiqatdan sonra müsbət immunoblot testi sifilis, otoimmün xəstəlik və ya xərçəngin varlığını göstərir.

Hamilə qadınlarda müsbət reaksiya ola bilər. Müsbət qeyri-treponemal tədqiqatdan sonra mənfi immunoblot testi xəstəliyin olmaması deməkdir.

Analizlərin etibarlılığı

Test nəticəsinin səhv olma ehtimalı həmişə var. Sifilis üçün testləri şərh edərkən, xəstənin nəzarətindən kənar xarici amillərə xüsusi diqqət yetirilməlidir. Tədqiqatı aparan laborant və ya xəstə qan nümunəsi götürməyə səhv hazırladıqda və ya həkimə özləri haqqında doğru məlumat vermədikdə də səhv edə bilər. Yanlış müsbət nəticə aşağıdakı amillərin təsiri altında mümkündür:

  • İstənilən növ diabet
  • Qanda narkotik maddələrin olması
  • Alkoqol intoksikasiyası
  • Yoluxucu xəstəliklər (qızılca, hepatit, mononükleoz və s.)
  • Yaxşı və ya bədxassəli neoplazmalar
  • Ürək xəstəlikləri
  • Antibiotik qəbulu və ya son peyvənd
  • Otoimmün xəstəliklər (lupus eritematosus, romatoid artrit və s.)
  • Hamiləlik
  • Qan almadan əvvəl gün ərzində yağlı, ədviyyatlı və ya duzlu qidalar yemək

Xəstəliyin mərhələsindən asılı olaraq bəzi testlər xəstəliyi aşkar etməyə bilər. Beləliklə, Wasserman reaksiyası (RSKt və RSKk) 100% ehtimalı ilə mümkün infeksiyadan yalnız 3-4 həftə sonra həyata keçirilir; üçüncü dərəcəli sifilis olduqda etibarlılıq yalnız 75% olacaqdır. Xəstəliyin erkən mərhələlərində diaqnoz qoymaq üçün ELISA testindən istifadə etmək məsləhətdir. Təhlil antikorlara qarşı yüksək həssaslığa malik ferment immunoassayıdır. Nəticənin etibarlılığı 100% -ə yaxındır, digər xəstəliklərin olması halında yanlış müsbət nəticə istisna edilir.

Cinsi yolla keçən xəstəliklər üçün test nəticələrinin mənfi olması həmin şəxsin sağlam olduğunu bildirir. Sifilis üçün şübhəli bir test təkrar müayinəyə səbəb olacaq. Son nəticəyə təsir edə biləcək amillər varsa, məsələn, digər xəstəliklərin olması, həkim test parametrlərini dəyişdirəcəkdir. Sifilis üçün müsbət test nəticəsi ölüm hökmü və ya çaxnaşma səbəbi deyil. Dərmanların köməyi ilə xəstəlik tamamilə müalicə edilə bilər. Ancaq yadda saxlamaq lazımdır ki, erkən mərhələdə xəstəliklər daha çox müalicə olunur.

Sifilis üçün ELISA: analiz üsulu, şərhi, yanlış müsbət nəticələrin səbəbləri

Yoluxucu xəstəliklər üçün istifadə edilən standart diaqnostik tədbirlərin siyahısına ferment immunoassay daxildir. ELISA sifilis üçün müsbətdirsə, dərhal panikaya düşməyin.

Bu tədqiqat texnikasının xüsusiyyətlərini və xəstələrin müxtəlif kateqoriyalarında əldə edilən nəticələrin şərh edilməsi prinsiplərini daha ətraflı nəzərdən keçirək.

Tədqiqatın mahiyyəti

Ferment immunoassay yoluxucu xəstəliklərin diaqnostikası üçün ən geniş yayılmış üsullardan biridir. Treponemal testlər kateqoriyasına aiddir, yəni xəstənin bədənində sifilisin törədicisi - solğun treponema - varlığını müəyyən etmək üçün istifadə edilə bilər.

ELISA metodundan istifadə edərək, sifilis treponemaya qarşı anticisimləri aşkar etməklə aşkar edilir. Onlar xəstənin qanında olur və onların növü və miqdarı xəstəliyin mərhələsindən və formasından asılıdır, bu da insan sağlamlığının mövcud vəziyyəti haqqında vacib məlumat əldə etməyə imkan verir.

Yaxşı və pis tərəfləri

ELISA çox vaxt şübhəli sifilis və ya digər yoluxucu xəstəliklər üçün təyin edilir. Bu, təhlilin xəstəliyin dəqiq növünü və mərhələsini müəyyən etməyə imkan verməsi ilə bağlıdır və onun etibarlılığı yüksək səviyyədə qalır - çoxsaylı tədqiqatların nəticələrinə əsasən səhv ehtimalı yalnız 1% -dir, ilkin ELISA təxminən 90% dəqiqliyə malikdir.

Yüksək keyfiyyətli reagentlərin və müasir avadanlıqların istifadəsi bizə göstəricilərin dəqiqliyini maksimum dərəcədə artırmağa imkan verir.

Ümumiyyətlə, metodun üstünlükləri aşağıdakılardır:

  1. Nəticələrin yüksək dəqiqliyi. Yanlış məlumatların alınması ehtimalı çox aşağıdır.
  2. İnsan təsir faktorunun minimuma endirilməsi. ELISA-nın aparılması üçün müasir avadanlıq prosesin avtomatlaşdırılması hesabına insanın tədqiqatın nəticələrinə təsirini aradan qaldırır.
  3. Xüsusi antikorların təyini. Bir növün antigenlərini başqaları ilə qarışdırmaq mümkün deyil, buna görə də analiz müəyyən bir diaqnoz üçün dəqiq nəticəni göstərir.
  4. Normadan ən kiçik sapmaların qeydə alınması. Patoloji agentlərin ən kiçik konsentrasiyası belə diqqətdən kənarda qalmayacaq.

Bu metodun zəif tərəflərini unutmamalıyıq. ELISA-nın aşağıdakı çatışmazlıqları var:

  1. Yüksək qiymət. Yüksək qiymət bir çox amillərlə, xüsusən də yaxşı avadanlıqlara, yüksək keyfiyyətli reagentlərə və kifayət qədər hazırlıq səviyyəsinə malik mütəxəssislərə ehtiyacla bağlıdır.
  2. İlkin diaqnoz ehtiyacı. Hansı antigenləri axtarmaq lazım olduğunu bilməlisiniz, çünki əlavə məlumat olmadan dəqiq diaqnoz qoymaq mümkün olmayacaqdır.
  3. Yanlış müsbət nəticə ehtimalı. Müəyyən bədən şəraiti və digər amillər yekun məlumatları təhrif edə bilər.

İstifadəyə göstərişlər

Həkim yalnız sifilisin deyil, həm də bir sıra digər yoluxucu xəstəliklərin diaqnozu üçün bir ferment immunoassay təyin edə bilər.

Vəziyyəti birbaşa treponema infeksiyası ilə nəzərdən keçirsək, müayinənin səbəbi ola bilər:

  • xəstəliyin xarici əlamətlərinin görünüşü (şankrlar, sifilitik döküntülər, gummalar və s.);
  • toxunulmazlığın əhəmiyyətli dərəcədə azalması;
  • cinsi partnyorda, yaxınlarınızda və ailə üzvlərində sifilisin aşkarlanması və ya şübhəsi;
  • digər testlər zamanı müsbət reaksiya;
  • sifilislə əlaqəli ola biləcək digər xəstəliklərin müəyyən edilməsi;
  • şəxsin müayinədən keçmək istəyi.

İcra üsulları

ELISA müxtəlif yollarla həyata keçirilə bilər. Hər bir konkret halda ən uyğun variant seçilir.

Əvvəla, metodların aşağıdakılara bölünməsi var:

  1. Keyfiyyətli. Xəstənin bədənində infeksiya və ya virusun olması aşkar edilir.
  2. Kəmiyyət. Xəstəliyin inkişaf mərhələsini və intensivliyini göstərən insan orqanizmində patogen agentə qarşı antikorların konsentrasiyasını müəyyən edir.

Tələb olunan reaksiyanın təkrar istehsalı prinsipinə əsaslanaraq ELISA-nın aparılması üsullarının təsnifatı da mövcuddur.

3 variant var:

  1. Düz. İşarələnmiş antikorlar təqdim edilmiş qan nümunələrinə yeridilir.
  2. Antigenlərlə dolayı. Sorbiyalı antigenlər əvvəlcə ELISA üçün nəzərdə tutulmuş polistirol plitəsinin hüceyrələrinə yerləşdirilir. Sonra onlara viral antikorlar əlavə olunur ki, bu da nəticələrin daha da qiymətləndirilməsi üçün lazım olan immun komplekslərin meydana gəlməsinə səbəb olur.
  3. Antikorlarla dolayı yolla. Bu üsul tez-tez cinsi yolla keçən xəstəliklər üçün istifadə olunur. Antikorların ilkin udulmasını nəzərdə tutur, yalnız bundan sonra tabletə antigenlər əlavə olunur.

Material toplama qaydaları

Etibarsız nəticələr əldə etmək riskini azaltmaq üçün analiz üçün düzgün qan vermək lazımdır.

ELISA testindən keçməzdən əvvəl bəzi məhdudiyyətlərə əməl etməlisiniz:

  • güclü fiziki və emosional stressdən qaçın;
  • ən azı 1-3 gün siqaret çəkməyi və spirtli içki qəbul etməyi dayandırın;
  • bir neçə gün ərzində düzgün bəslənməyə keçməlisiniz;
  • Hormonlar nəticələri təhrif edə bildiyi üçün qadınlara menstrual dövrünün fazasını idarə etmək məsləhət görülür;
  • son yemək qan vermədən 8 - 10 saat əvvəl olmalıdır;
  • Tədqiqatın nəticələrinə təsir edə biləcək dərmanların qəbulundan 10 gün əvvəl istisna olunur.

ELISA üçün dirsək damarından venoz qan alınır, səhər acqarına verilməlidir. Ümumiyyətlə, venoz qan toplanmasına hazırlıq üçün standart qaydalar tətbiq olunur. Hansı xəstəliyin sınaqdan keçirildiyindən asılı olaraq, xəstənin ilkin hazırlanması üçün əlavə tələblər qoyula bilər.

Metodologiya

ELISA aparmaq üçün təlimatlar olduqca sadədir:

  1. Xəstənin qanı venadan alınır.
  2. Alınan material hazırlanır və xüsusi incə torlu paletdə nümunələrə bölünür.
  3. Antigenlər seçilmiş üsula uyğun olaraq antikorlarla qarışdırılır.
  4. Reaksiya qiymətləndirilir. Nümunələr nəzarət nümunələri ilə müqayisə edilir, nəticələr keyfiyyət və kəmiyyət baxımından qiymətləndirilir.
  5. Məlumatlar əlavə edilmiş kəmiyyət göstəriciləri (ümumi antikorlar) ilə xüsusi cədvələ daxil edilir.
  6. Nəticələri iştirak edən həkim şərh edir. Lazım gələrsə, müvafiq müalicə təyin edilir.

Müayinədən sonra xəstəyə nəticələri olan sənəd verilir. Bu, yoluxucu xəstəliklərin adları ilə kəsişmədə hər bir immunoqlobulin növünə qarşı müvafiq simvolları olan bir cədvələ bənzəyir.

Deşifrə

Yalnız bir mütəxəssis test nəticələrini düzgün deşifrə edə biləcək. Özünüz anlamaq çətindir, məsələn, ELISA nəticəsi k = 1 4 nə deməkdir.Sifilis müxtəlif formalarda da baş verə bilər ki, bu da yekun məlumatlarda əks olunur.

Nəticələr 3 növ immunoqlobulini göstərir:

  1. IgM. Sifilislə yoluxma müddətini təyin etməyə imkan verir. Müsbət nəticə xəstəliyin kəskinləşməsini göstərir. Onların olmaması xroniki patologiyaların remissiyasını və ya xəstəliyin gizli bir formasını göstərə bilər.
  2. IgA.İnfeksiyadan bir aydan çox keçən bir xəstəliyi göstərir. Həm adi patologiyalarda, həm də inkişaf etmiş xroniki olanlarda xəstəliyin kəskin mərhələsinin əlamətidir.
  3. IgG. Bu, xəstəliyin pik dövrünün, yəni kəskinləşməsinin əlamətidir. Sifilis ilə müalicədən bir müddət sonra müsbət reaksiya görünür. Bəzi xəstəliklərdə bu, inkişaf etmiş toxunulmazlığın əlaməti ola bilər.

Bu maddələr orqanizm tərəfindən müəyyən bir ardıcıllıqla istehsal olunur ki, bu da xəstəliyin əlavə əlamətidir. Keyfiyyətli testlər yalnız hər bir növün qanında immunoglobulinlərin mövcudluğunu müəyyən edir.

Bu, təhlildə iştirak edən materialların rənginin dəyişməsində əks olunur. Kəmiyyət göstəriciləri köməkçidir, vəziyyəti daha dəqiq təsvir edir. Antigenlərin və antikorların nisbəti xəstəliyin şiddətini və bədənin reaksiyasının intensivliyini göstərir.

Nə etməli

Xəstədə həqiqətən sifilis varsa, müsbət ELISA mütləq həmişə aşkar edilir, belə bir araşdırma zamanı treponemlərin varlığını görməmək mümkün deyil. Ümidsiz olmayın, xəstəlik xüsusilə ilkin mərhələdə yüksək dərəcədə müalicə olunur.

Test nəticələri müsbət olarsa nə etməli:

  • həkimin göstərişlərinə uyğun olaraq əlavə müayinələrdən keçmək;
  • seçilmiş rejimə uyğun olaraq antibiotik terapiyası kursunu tamamlayın;
  • səylərinizi immunitet sisteminizi gücləndirməyə yönəldin;
  • cinsi partnyorunuza xəstəlik barədə məlumat verin;
  • gələcəkdə dispanserdə qeydiyyatdan çıxarılana qədər mütəmadi olaraq profilaktik diaqnostikadan keçin (müsbət test nəticələri olmadıqda 5 ildən sonra).

Xəstəlik məzuniyyəti almağı təxirə salmağa və nəticələri ictimaiyyətə açıqlamaqdan qorxmağa ehtiyac yoxdur. Diaqnoz şifrələnir və məxfi olaraq qalır, yalnız başqa insanlara yoluxma təhlükəsi varsa, qohumlarına və cinsi partnyorlarına problem barədə məlumat vermək lazımdır ki, onlar lazımi müayinələrdən keçsinlər.

Yanlış müsbət nəticə və onun səbəbləri

Bəzən digər testlərin və ELISA-nın nəticələri sifilis üçün yanlış müsbət olaraq qeydə alınır. Buna görə 2 - 3 köməkçi metodun aparılması və bir müddət sonra ferment immunoassayının təkrarlanması tövsiyə olunur.

Bu cür qeyri-dəqiqliklər nadirdir, onlar əsasən aşağıdakı amillərlə bağlıdır:

  • hamiləlik;
  • xroniki xəstəliklər;
  • son peyvənd;
  • zədələr.

Yanlış müsbət nəticələr, onları təhrik edən amilin xarakterindən asılı olaraq kəskin və xroniki olaraq bölünür.

Sifilis testlərinin tam təfsiri

Sifilis üçün testlər: testlərin növləri, nəticələrin şərhi, yanlış-müsbət və yalan-mənfi müayinə nəticələrinin səbəbləri.

Sifilis, Treponema pallidum (treponema pallidum) bakteriyasının yaratdığı cinsi yolla keçən xəstəlikdir. Sifilisin ötürülmə yolları, onun simptomları və mümkün fəsadları haqqında daha çox "Sifilis haqqında hər şey" məqaləsində oxuyun. Simptomlar və müalicə.

Sifilisin vaxtında aşkarlanması (xüsusi testlərdən istifadə etməklə) həkimlərə vaxtında müalicəyə başlamağa və bu xəstəliyin təhlükəli ağırlaşmalarının inkişafının qarşısını almağa imkan verir.

Hamiləlik dövründə sifilis üçün testlər anadangəlmə sifilisli uşaqların doğulmasının qarşısını almağa kömək edir. Hamiləlik dövründə sifilis üçün testlər haqqında daha çox məlumat Hamiləlik dövründə sifilisin diaqnozu və müalicəsi haqqında məqalədə təsvir edilmişdir.

Niyə mənə sifilis testi təyin olundu?

Əksər hallarda həkimlərin xəstələrin cinsi həyatı haqqında dəqiq məlumat əldə etmək imkanı yoxdur (bəzi insanlar cinsi həyatlarının təfərrüatlarını gizlədir və ya cinsi yolla keçən xəstəliklərə yoluxma riskini az qiymətləndirirlər). Buna görə də, insanları öz ehtiyatsızlıqlarının və ya tibbi biliklərin olmamasının mümkün nəticələrindən qorumaq üçün bəzi hallarda həkimlər sifilis müayinəsi adlanan testləri (yəni çox sayda insan tərəfindən aparılan testlər) təyin edirlər.

Həkiminiz hətta xəstəliyin heç bir əlaməti olmasa da, sifilis üçün testlər təyin edə bilər və ona yoluxmadığınızdan əmindir.

Bu testlərə ehtiyac, sifilisin bəzən gündəlik təmasda (cinsi əlaqə ilə deyil) ötürülməsi və gizli formada (yəni simptomlar olmadan) baş verməsi ilə əlaqədardır.

Bir qayda olaraq, skrininq müayinəsi aşağıdakı hallarda təyin edilir:

  1. İş üçün müraciət edərkən (səhiyyə işçiləri, iaşə işçiləri, hərbi qulluqçular və s.)
  2. Hamiləlik üçün qeydiyyatdan keçərkən.
  3. Xəstəxanaya qəbul zamanı, əməliyyatlara hazırlıq zamanı.
  4. Qan donorları.
  5. Azadlıqdan məhrumetmə yerlərində cəza çəkən şəxslər.

Həkiminiz həmçinin sifilis üçün testlər təyin edə bilər:

  1. Xəstəliyin simptomları aşkar edildikdə (adətən cinsiyyət orqanlarında bir döküntü).
  2. Sifilis üçün skrininq testlərinin müsbət nəticələrini aldıqdan sonra.
  3. Əgər sifilis diaqnozu qoyulmuş bir şəxslə cinsi əlaqədə olmusunuzsa.
  4. Analarında sifilis olan yeni doğulmuş uşaqlar.

Bundan əlavə, müalicə zamanı (müalicənin effektiv olmasını təmin etmək üçün) və hətta müalicə kursu bitdikdən sonra da müalicəyə nəzarət etmək üçün sifilis üçün testlər vaxtaşırı aparılır.

Sifilis diaqnozu üçün hansı testlərdən istifadə olunur?

Sifilisin diaqnozu və müalicəsində dermatoveneroloq iştirak edir. Xəstəliyin diaqnozu üçün aşağıdakı testlərdən istifadə edilə bilər:

Müayinə dəri, xarici və daxili cinsiyyət orqanları sifilisin əsas əlamətlərini müəyyən etmək üçün aparılır: şans, şişkin limfa düyünləri, dəri səpgiləri və s. (bax: Sifilisin simptomları)

Üçün Treponema solğunluğu aşkar edin, həkimlər hamilə qadınlarda xoralardan, limfa düyünlərindən, amniotik mayedən və s.dən əldə edilən yaxmaları (yaxud qırıntıları) mikroskop altında yoxlayırlar.Qan mikroskop altında yoxlanılmır.

Əhəmiyyətli: Əgər mikroskop altında apardığınız testlərdə solğun Treponema aşkar edilibsə, bu, sizdə mütləq sifilis olduğunu göstərir. Ancaq testlər sifilisin törədicinin aşkar edilmədiyini göstərirsə, sifilis olmadığına tam əmin ola bilməzsiniz. Xəstə olmadığınızdan əmin olmaq üçün aşağıda təsvir olunan əlavə testlərdən keçməlisiniz.

PCR (polimeraza zəncirvari reaksiya) sifilisin diaqnozu üçün mürəkkəb və bahalı üsuldur, qanda və ya digər test materiallarında (amniotik maye, onurğa beyni mayesi) Treponema pallidum DNT-ni aşkar etməyə imkan verir. PCR testi mənfi nəticə verirsə, çox güman ki, sizdə sifilis yoxdur. Ancaq müsbət nəticə əldə etsəniz (yəni, PCR qanda Treponema pallidum DNT-ni aşkar edərsə), xəstə olduğunuza 100% zəmanət yoxdur. Bu, PCR-nin bəzən yanlış müsbət nəticələr verməsi ilə bağlıdır (xəstəlik olmadıqda müsbət nəticə verir). Buna görə də, PCR müsbət nəticə verərsə, əlavə olaraq sifilis üçün digər müayinə üsullarından (məsələn, immunofluoressensiya reaksiyası (RIF) və passiv hemaqlütinasiya testi (RPHA)) keçmək tövsiyə olunur.

Sifilis üçün seroloji test nədir?

Seroloji analiz qanda infeksiyaya cavab olaraq insan orqanizmində istehsal olunan xüsusi zülalların (antikorların) aşkarlanmasıdır. Əvvəlki diaqnostika üsullarından fərqli olaraq, seroloji testlər Treponema solğunluğunun özünü deyil, yalnız bədəndəki "izlərini" aşkar edir.

Əgər qanınızda solğun Treponema-ya qarşı anticisimlər aşkar edilərsə, bu, ya hal-hazırda sifilislə yoluxduğunuzu və ya əvvəllər bu xəstəliyə tutulduğunuzu göstərir.

Hansı testlər bir insanın sifilis olduğunu göstərir?

Sifilis üçün seroloji testlər 2 böyük qrupa bölünür: qeyri-spesifik və spesifik testlər. Bu testlər arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, qeyri-spesifik testlər yalnız bir şəxsdə hal-hazırda sifilis varsa və müalicədən sonra mənfi nəticə verərsə, müsbət nəticə göstərir, xüsusi testlər isə xəstəlik sağaldıqdan sonra da müsbət qalır.

Başqa sözlə, mənfi qeyri-spesifik test nəticəsi sağlam olduğunuza bir zəmanətdir.

Sifilis üçün hansı testlər qeyri-spesifikdir (qeyri-treponemal)?

Qeyri-spesifik testlərə mikroçökmə reaksiyası (MR) və Vasserman reaksiyası (RW) daxildir. Bu testlər sifilis üçün skrininq üçün istifadə olunur. Sifilis sağaldıqdan sonra insanların 90%-də bu testlər mənfi olur.

Bu testlər necə işləyir: Treponema pallidumun (sifilislə) həyati fəaliyyəti nəticəsində bədəndəki hüceyrələr ölür. Hüceyrələrin məhvinə cavab olaraq immunitet sistemi xüsusi zülallar (antikorlar və ya immunoqlobulinlər) istehsal edir. Qeyri-spesifik testlər bu antikorların müəyyən edilməsinə, həmçinin onların konsentrasiyasının hesablanmasına (antikor titrinin təyin edilməsi) yönəlmişdir.

Yağış mikroreaksiyası (MR) və bəzi ölkələrdə analoqları: sürətli reagin testi (RPR, Rapid Plasma Reagins)VDRL testi (Zöhrəvi Xəstəliklər Tədqiqat Laboratoriyası) sifilis üçün skrininq üçün təyin olunan qeyri-treponemal testlərdir.

Nə yoxlanılacaq:

adətən infeksiyadan 4-5 həftə sonra.

test müsbət nəticə verirsə, onda sifilis olma ehtimalı var. Bu test yanlış olaraq müsbət nəticələr verə biləcəyi üçün aşağıda təsvir edilən xüsusi testlərdən istifadə edərək əlavə testlərdən keçməyiniz tövsiyə olunur. Mənfi nəticə sifilisin olmadığını və ya xəstəliyin erkən mərhələsini (qanda antikorların görünməsindən əvvəl) göstərir.

antikorlar qanda 1:2-dən 1:320 və ya daha yüksək titrdə aşkar edilərsə, bu, sifilislə yoluxduğunuz deməkdir. Gec sifilis ilə antikor titri aşağı ola bilər (bu, şübhəli bir nəticə kimi qiymətləndirilir).

Yanlış müsbət MR nəticələri təxminən 2-5% hallarda baş verir, onların mümkün səbəbləri bunlardır:

  1. Sistemik birləşdirici toxuma xəstəlikləri (sistemik lupus eritematosus, skleroderma, revmatoid artrit, dermatomiyozit, vaskulit və s.)
  2. Yoluxucu xəstəliklər: viral hepatit, yoluxucu mononükleoz, vərəm, bəzi bağırsaq infeksiyaları və s.
  3. İltihabi ürək xəstəlikləri (endokardit, miokardit).
  4. Diabet.
  5. Hamiləlik.
  6. Son vaksinasiya (peyvənd).
  7. Alkoqol, narkotik və s. istifadəsi.
  8. Əvvəllər əziyyət çəkən və müalicə olunan sifilis (müalicə olunan insanların təxminən 10% -ində MR testi ömür boyu müsbət qala bilər).

Yanlış mənfi nəticələrin səbəbləri nə ola bilər: qanda çoxlu antikor varsa, test xəstəliyin erkən mərhələsində antikorlar görünməzdən əvvəl aparılırsa və ya gec sifilislə, qanda az sayda antikor qaldıqda test səhvən mənfi nəticə göstərə bilər.

Wasserman reaksiyası (RW, RW) MDB ölkələrində sifilisin müayinəsi üçün istifadə olunan qeyri-treponemal testdir.

Nə yoxlanılacaq: qan (barmaqdan və ya damardan), serebrospinal maye.

İnfeksiyadan nə qədər sonra test müsbət olur? adətən infeksiyadan 6-8 həftə sonra.

Təhlil nəticələrini necə qiymətləndirmək olar:“-” mənfi reaksiya, “+” və ya “++” zəif müsbət reaksiya, “+++” müsbət reaksiya, “++++” güclü müsbət reaksiyadır. Wasserman reaksiyası ən azı bir artı göstərdisə, sifilis üçün əlavə testlər etməlisiniz. Mənfi reaksiya sizin sağlam olduğunuza zəmanət deyil.

Yaranan antikor titrini necə qiymətləndirmək olar: 1:2-dən 1:800-ə qədər olan antikor titri sifilisin varlığını göstərir.

Yanlış müsbət nəticələrin səbəbləri nə ola bilər: Wasserman reaksiyası, mikroçökmə reaksiyası (MR) ilə eyni səbəblərə görə səhvən müsbət nəticə verə bilər, həmçinin analiz üçün qan verməzdən bir müddət əvvəl spirt içmisinizsə və ya yağlı qidalar yeyirsinizsə.

Çoxlu sayda səhv nəticələrə görə, Wasserman reaksiyası (RW, RW) getdikcə daha az istifadə olunur və digər, daha etibarlı diaqnostik üsullarla əvəz olunur.

Qeyri-spesifik testlər (çökmə mikroreaksiyası (MR) və Vasserman reaksiyası (RW, RW)) sifilis diaqnozu üçün yaxşı üsullardır. Mənfi test nəticəsi çox güman ki, sağlam olduğunuzu göstərir. Ancaq bu testlərin müsbət nəticələri əldə edildikdə, xüsusi (treponemal) testlərdən istifadə etməklə əlavə müayinə lazımdır.

Sifilis üçün hansı testlər spesifikdir (treponemal)?

Treponemal testlərə aşağıdakı testlər daxildir: immunofluoressensiya reaksiyası (RIF), immunoblotinq, passiv aglütinasiya reaksiyası (RPGA), pallidum pallidum immobilizasiya reaksiyası (TPI), fermentlə əlaqəli immunosorbent analizi (ELISA).

Müsbət mikroçökmə reaksiyası (MR) və ya Wasserman reaksiyası (WR) nəticələri olan insanlar üçün xüsusi testlər təyin edilir. Xüsusi testlər sifilis sağaldıqdan sonra uzun müddət müsbət olaraq qalır.

Bu testlər necə işləyir: Sifilis patogenləri bədənə daxil olduqda, immunitet sistemi solğun treponema ilə mübarizə aparmağa yönəlmiş antikorlar istehsal edir. Bu antikorlar infeksiyadan dərhal sonra deyil, yalnız bir neçə həftə sonra qanda görünür. İnfeksiyadan sonra ikinci həftənin sonunda qanda IgM antikorları görünür. Bu sinifin antikorları sifilislə son infeksiyanı göstərir, lakin müalicə olmadan onlar bir neçə ay və hətta illərlə qanda qalırlar (onların sayı getdikcə azalır). Sifilislə yoluxduqdan 4-5 həftə sonra qanda başqa bir sinif IgG antikorları aşkar edilməyə başlayır. Bu tip antikorlar qanda uzun illər (bəzən həyat boyu) qalır. Treponema testləri, solğun Treponema ilə mübarizə aparmağa yönəlmiş qanda antikorların (IgM və IgG) varlığını aşkar edə bilər.

İmmunofluoressensiya reaksiyası (RIF) və ya Floresan Treponemal Antikor (FTA və onun variantı FTA-ABS) sifilis diaqnozunu ən erkən mərhələlərdə (hətta ilk simptomlar görünməzdən əvvəl) təsdiqləmək üçün istifadə olunan treponemal testdir.

Nə yoxlanılacaq: damardan və ya barmaqdan qan.

İnfeksiyadan nə qədər sonra test müsbət olur?: adətən 6-9 həftədən sonra.

Təhlil nəticələrini necə qiymətləndirmək olar: Təhlil nəticələri mənfi və ya müsbət (birdən dördə qədər) şəklində təqdim olunur. Test mənfi işarə göstərirsə, bu, heç bir antikor aşkar edilmədiyini və sağlam olduğunuzu göstərir. Bir artı və ya daha çox olması sifilisin varlığını göstərir.

Yanlış müsbət nəticələrin səbəbləri nə ola bilər: Yanlış müsbət nəticələr nadirdir, lakin səhvlər birləşdirici toxuma xəstəlikləri olan insanlarda (sistemik lupus eritematosus, dermatomiyozit və s.), hamilə qadınlarda və s.

Passiv aglütinasiya reaksiyası (RPGA), və ya Treponema solğun qanaxma analizi (TPHA) demək olar ki, hər hansı bir mərhələdə sifilis diaqnozunu təsdiqləmək üçün istifadə edilən xüsusi bir testdir.

Nə yoxlanılır?: damardan və ya barmaqdan qan.

İnfeksiyadan nə qədər sonra test müsbət olur? adətən 4 həftə ərzində.

Təhlil nəticələrini necə qiymətləndirmək olar: müsbət RPGA nəticəsi sifilis olduğunuzu və ya sağlam olduğunuzu, lakin keçmişdə bu xəstəliyə sahib olduğunuzu göstərir.

Yaranan antikor titrini necə qiymətləndirmək olar: Antikor titrindən asılı olaraq sifilislə yoluxma müddətini təxmini olaraq qəbul etmək olar. Treponemanın bədənə ilk daxil olmasından qısa müddət sonra antikor titri adətən 1:320-dən az olur. Antikor titri nə qədər yüksəkdirsə, infeksiyadan bir o qədər çox vaxt keçir.

Fermentlə əlaqəli immunosorbent analizi (ELISA), və ya Ferment İmmunoAssay (EIA), və ya ELISA (fermentlə əlaqəli immunoSorbent analizi) diaqnozu təsdiqləmək və sifilisin mərhələsini təyin etmək üçün istifadə edilən treponemal testdir.

Nə yoxlanılacaq: damardan və ya barmaqdan qan.

İnfeksiyadan nə qədər sonra test müsbət olur? artıq infeksiyadan 3 həftə sonra.

Təhlil nəticələrini necə qiymətləndirmək olar: müsbət ELISA nəticəsi sifilis olduğunuzu və ya əvvəllər bu xəstəliyə tutulduğunuzu göstərir. Bu test müalicədən sonra da müsbət qala bilər.

ELISA istifadə edərək sifilis infeksiyasının müddətini təyin etmək: Qanda hansı sinif antikorların (IgA, IgM, IgG) tapıldığından asılı olaraq, infeksiyanın nə qədər əvvəl olduğunu təxmin edə bilərik.

Məqalə sifilis24.ru, www.health-ua.org, krov.expert, zppp.su, polismed.ru saytlarının materialları əsasında yazılmışdır.

Bədənin vəziyyətini (xüsusilə onun qoruyucu funksiyalarını) hərtərəfli qiymətləndirmək üçün fermentlə əlaqəli immunosorbent testi (ELISA) təyin edilir. ELISA qan testi yoluxucu, otoimmün, hematoloji patologiyaları, birincili və ikincil immun çatışmazlıqları təyin etmək üçün aparılır. Bu yazıda ELISA qan testinin nə olduğunu və onun həyata keçirilməsi üçün hansı göstəricilərin mövcud olduğunu daha ətraflı nəzərdən keçirməyi təklif edirik.

ELISA metodundan istifadə edərək qan testinin təyin edilməsi üçün göstərişlər və onun iş prinsipi

Artıq qeyd etdiyimiz kimi, ELISA metodundan istifadə edən qan testi qan nümunəsində antigenlərin və ya antikorların təyin olunduğu laboratoriya testidir. Bu analiz hormonların, immunoloji komplekslərin və immunoqlobulinlərin səviyyəsini aşkar etmək üçün istifadə olunur. ELISA analizi üçün aşağıdakı göstəricilər var:

  • Allergiyanın diaqnozu.
  • Viral mənşəli xəstəliklərin diaqnozu - Epstein-Barr virusu, herpes, hepatit, sitomeqalovirus.
  • Cinsi yolla keçən infeksiyaların diaqnozu - mikoplazma, ureaplazma, sifilis, trichomonas, xlamidiya.
  • İmmunçatışmazlığın tərifi.
  • Onkoloji patologiyaların diaqnostikası.
  • Terapiyanın effektivliyinin qiymətləndirilməsi.
  • Hormon səviyyələrinin təyini.
  • Əməliyyatdan əvvəl hərtərəfli müayinə.

Bir ferment immunoassayının işləmə prinsipi immunoqlobulinlərin (spesifik antikor zülalları) olması üçün qan testinə əsaslanır. Antigenlər (xarici mikroorqanizmlər) insan orqanizminə daxil olduqda immunoqlobulinlər immun sistemi tərəfindən istehsal olunur. Bu immun molekullar müxtəlif yoluxucu patogenlərə bağlanır və onları zərərsizləşdirir. İmmunoqlobulinlərin əhəmiyyətli fərqləndirici xüsusiyyəti onların spesifikliyidir. Bu xüsusiyyətlərə görə onlar spesifik bir antigenə bağlanaraq antigen-antikor kompleksi yarada bilirlər. ELISA qan testi apararkən, kəmiyyət və keyfiyyətcə müəyyən edilən bu kompleksdir.

Bu tədqiqatı aparmaq üçün çox vaxt insan qanından istifadə olunur. Bununla belə, analiz üçün material kimi şüşəvari gövdə, amniotik maye və onurğa beyni mayesinin tərkibi götürülə bilər. Qan nümunəsi adətən xəstənin antekubital venasından götürülür. Aç qarına qan vermək tövsiyə olunur (son yeməkdən ən azı 12 saat keçməlidir). Xəstə dərman qəbul edirsə, həkimə məlumat vermək lazımdır, çünki onlardan bəziləri testin nəticəsinə təsir göstərə bilər. Test nəticələrinin etibarlılığına narkotik və alkoqol qəbulu da təsir göstərir.

ELISA üçün qan testinin şərhi

Bu analiz forması adətən immunoqlobulinlərin hər bir sinfinin hesablanması üçün mənfi (-) və ya müsbət (+) nəticəni göstərir.

ELISA qan testinin ehtimal olunan şərhinin təfsirini nəzərdən keçirməyi təklif edirik.

  • IgG, IgA aşkar edilmir və IgM nəticəsi mənfidir - tam bərpa.
  • IgM, IgA, IgG nəticəsi mənfidir - infeksiyaya qarşı immunitet yoxdur.
  • IgG, IgA nəticəsi müsbət və mənfi, həmçinin IgM nəticəsi müsbətdir - kəskin infeksiyanın olması.
  • Müsbət IgG nəticəsi və mənfi IgA və IgM nəticəsi peyvənddən sonra və ya infeksiyadan sonrakı toxunulmazlıq deməkdir.
  • IgG, IgA-nın müsbət və ya mənfi nəticəsi və IgM-nin mənfi nəticəsi - xroniki infeksiya.
  • IgG, IgM, IgA nəticəsi müsbətdir - xroniki yoluxucu patologiyanın kəskinləşməsi.

Qanın ferment immunoassayında, transkriptdə antikorların siniflərini təyin etməklə yanaşı, onların kəmiyyət göstəriciləri də göstərilir. Bununla belə, yalnız iştirak edən həkim onlara geniş izahat verir.

Bu tədqiqatın güclü və zəif tərəfləri

  • Nisbətən aşağı qiymət.
  • İstifadə rahatlığı.
  • Şübhəli xəstəliyin erkən mərhələsində diaqnozun mümkünlüyü.
  • Əldə edilən məlumatların nisbətən yüksək dəqiqliyi.
  • Tədqiqatın nəticəsini əldə etmək üçün tələb olunan qısa müddət.
  • Bədəndə yoluxucu prosesin inkişaf dinamikasını izləmək imkanı.
  • Kütləvi sorğular keçirməyə imkan verən yüksək səviyyəli birləşmə.
  • Tədqiqatın bütün mərhələlərinin avtomatlaşdırılması.

ELISA qan testinin dezavantajı odur ki, o, kifayət qədər nadir hallarda yalan-müsbət və ya yalan-mənfi nəticələr verə bilər. Həmçinin, bir araşdırma apararkən, texniki səhvlərə əlavə olaraq, xəstədə yanlış nəticələrin səbəbi romatoid faktor, xroniki xəstəliklərin olması (antikorların istehsal edildiyi), müəyyən dərmanların qəbulu və ya metabolik pozğunluqlar ola bilər.

  • Giardiasis.
  • askaridoz.
  • Sistiserkoz.
  • Amebiaz.
  • Trichinosis - tədqiqat bir dəfədən çox aparılır, antikorların maksimum səviyyəsi infeksiyadan 4-12 həftə sonra müəyyən edilir.
  • Taeniasis.
  • Opistorxoz - xəstəliyin kəskin və xroniki formaları arasında diferensial diaqnostika aparın.
  • Toksoplazmoz.
  • Fascioliasis - xəstəliyin kəskin mərhələsində antikorların olması müəyyən edilir.
  • Dəri və ya visseral leyşmanioz.

Beləliklə, ümumiləşdirə bilərik: antigenləri (parazitlərin tullantı məhsulları və onların mövcudluğu), həmçinin antikorları (immunoqlobulinlər) müəyyən etmək üçün parazitlər üçün ELISA testi lazımdır. Parazitlərin müəyyən edilməsində bu tədqiqat metodunun spesifikliyi, statistik məlumatlara görə, təxminən 90% təşkil edir. Bu analiz sayəsində həkim parazitlərin növünü, onların ümumi sayını dəqiq müəyyən edə, həmçinin antikorların səviyyəsi sayəsində patoloji proseslərin inkişaf dinamikasını izləyə bilər.

Hüceyrə texnologiyaları, molekulyar biologiya, genetika, fizika, kimya və bir sıra digər yüksək texnologiyalı fənlərin inkişafı ilə əlaqədar olaraq gündəlik praktikaya yeni yüksək dəqiqlik və yüksək texnologiyalı üsullar tətbiq edilir. Bu fənlərarası meyllər həm tibbi bilik sahəsinə, həm də bioloji və biokimyəvi problemlərin əlaqəli sahələrinə təsir göstərir. Son on il ərzində ferment immunoassay adlı klinik laboratoriya diaqnostik metodu geniş yayılmış və kütləvi praktikaya daxil edilmişdir.

Ümumiyyətlə, 20-ci əsrin 80-ci illərinin əvvəllərindən hüceyrələrin, hüceyrə kulturalarının və müxtəlif toxumaların tipləşdirilməsində immunoloji fermentativ və radioloji reaksiyaların texnologiyalarından geniş istifadə olunur. Bununla belə, bu üsullar çox əmək tutumlu idi, vahid deyil, standartlaşdırılmamışdır ki, bu da onların diaqnostik və müalicə məqsədləri üçün kütləvi miqyasda istifadəsini istisna edirdi. Belə üsullardan yalnız dar, bilik tutumlu və yüksək ixtisaslaşmış laboratoriyalar istifadə edirdi.

Bununla belə, texnologiyanın, mikrotexnologiyanın inkişafı, müxtəlif biopolimer materialların istehsalı ilə ümumi tibb müəssisələrinin laboratoriyalarında istifadə oluna bilən hazır fermentlə əlaqəli immunosorbent diaqnostik dəstlərin istehsalı mümkün olmuşdur. ELISA hər növ infeksiyaların (xlamidiya, sifilis, sitomeqalovirus, toksoplazmoz, herpes və s.) həm kəskin, həm xroniki, həm də kliniki əlamətlər olmadan baş verən latent formalarının diaqnostikasında geniş istifadə olunur.Bu üsul həm də xroniki xəstəliklərlə mübarizədə istifadə olunur. . Bunun hansı üsul olduğunu və onun əsasında hansı prinsiplərin dayandığını anlamağa çalışaq?

Ferment immunoassay komponentləri - immun reaksiya və fermentativ reaksiya

Ferment immunoassay, adından da göründüyü kimi, iki fərqli komponentdən ibarətdir - immun reaksiya və fermentativ reaksiya. İmmun reaksiya bioloji molekulların, hüceyrənin və ya mikroorqanizmin elementlərinin əslində aşkarlamağa çalışdıqları birləşməni yaradır və ferment reaksiyası immunoloji reaksiyanın nəticəsini görməyə və ölçməyə imkan verir. Yəni, immun reaksiya əslində istənilən mikrobu aşkar edən kompleks texnikanın bir hissəsidir. Ferment reaksiyası isə immun reaksiyasının nəticəsini adi kimyəvi üsullardan istifadə etməklə gözə görünən və ölçmək üçün əlçatan olan formaya çevirməyə imkan verən kompleks texnikanın bir hissəsidir. Ferment immunoassay metodunun bu strukturuna əsaslanaraq onun hər iki hissəsini ayrıca təhlil edəcəyik.

İmmun reaksiya, bu nədir? Antikor və ya antigen nədir?

İmmun reaksiya nədir? Antigen nədir?
Əvvəlcə immun reaksiyalarının nə olduğuna baxaq. İmmun reaksiyalar– bunlar immun kompleksin əmələ gəlməsi ilə antigenin antikora bağlanmasının spesifik reaksiyalarıdır. Bunun mənası nədi? Hər hansı bir orqanizmin hər hüceyrəsinin səthində adlanan xüsusi strukturlar var antigenlər. Ümumilikdə antigenlər hüceyrə haqqında məlumat daşıyan molekullardır (bir şəxsin nişanında olan, həmin şəxsin əsas məlumatlarını göstərən məlumat kimi).

Fərdi və növ antigenləri - bunlar nədir? Bu antigenlər nə üçün lazımdır?

Mövcuddur fərdi antigenlər, yəni yalnız bu xüsusi orqanizmə xasdır. Bu fərdi antigenlər bütün insanlar üçün fərqlidir; bəziləri bir-birinə bənzəyir, lakin yenə də fərqlidir. Təbiətdə fərdi antigenlərin iki eyni nüsxəsi yoxdur!

İkinci əsas antigen növüdür növ antigenləri, yəni hər hansı bir xüsusi canlı növünə xas olan. Məsələn, insanların öz növ antigeni var, bütün insanlar üçün ümumidir, siçanların öz siçan növlərinin antigeni var və s. Hər bir hüceyrənin səthində xüsusi və fərdi bir antigen mütləq mövcuddur.

Növün antigenindən immunitet sisteminin hüceyrələri “dost və ya düşməni” tanımaq üçün istifadə olunur.

Antigenin tanınması necə baş verir?

İmmunitet hüceyrəsi şübhəli hüceyrə ilə təmasda olur və fərdi antigen əsasında identifikasiya edir. İmmun hüceyrənin yaddaşında onun “antigeni”nin necə göründüyü “qeyd olunur”. Beləliklə, şübhəli hüceyrənin antigeni "öz antigeni" təsvirinə uyğun gəlirsə, bədənin bu hüceyrəsi təhlükə yaratmır. Sonra immun hüceyrə "açılır" və ayrılır. Əgər antigen “öz”ün təsvirinə uyğun gəlmirsə, immun hüceyrə bu hüceyrəni “yad” kimi tanıyır və buna görə də bütün orqanizm üçün potensial təhlükəlidir. Bu vəziyyətdə immunitet hüceyrəsi "boşalmır", lakin təhlükəli obyekti məhv etməyə başlayır. Belə immunoloji tanınmanın dəqiqliyi heyrətamizdir - 99,97%. Praktik olaraq heç bir səhv yoxdur!

Antikor, immun kompleks nədir?
Antikor nədir?

Antikor immun hüceyrənin səthində yerləşən xüsusi bir molekuldur. Şübhəli hüceyrənin antigenlərinə bağlanan antikordur. Daha sonra, antikor tanınmanın baş verdiyi hüceyrə daxilində məlumat ötürür və iki növ, "öz" və ya "xarici" bir qayıdış siqnalı alır. “Öz” siqnalını qəbul edərkən, antikor antigenlə əlaqəni pozur və hüceyrəni buraxır.

İmmunitet kompleksi nədir?
Siqnal “qərib” olduqda, vəziyyət başqa cür cərəyan edir. Antikor antigenlə əlaqəni pozmur, əksinə, xüsusi siqnallar göndərərək, "möhkəmlənməyə" səbəb olur. Bioloji olaraq bu o deməkdir ki, hüceyrənin başqa hissəsində yerləşən digər anticisimlər təhlükə siqnalının gəldiyi yerə doğru hərəkət etməyə başlayır və həmçinin özləri ilə tutulan antigen arasında əlaqə yaradır. Sonda antigenin hər tərəfdən əhatə olunduğu və möhkəm bağlandığı ortaya çıxır.Bu antigen+antikor kompleksi adlanır. immun kompleks. Bu andan etibarən antigenin istifadəsi başlayır. Amma indi bizi antigenin neytrallaşdırılması prosesinin təfərrüatları maraqlandırmır.

Antikor növləri (IgA, IgM, IgG, IgD, IgE)
Antikorlar, müvafiq olaraq, antikor sözünün sinonimi kimi istifadə olunan kimyəvi bir ada sahib olan zülal strukturlarıdır. Belə ki, antikorlar = immunoqlobulinlər.

5 növ immunoqlobulin var (Ig), insan bədəninin müxtəlif yerlərində (məsələn, dəridə, selikli qişalarda, qanda və s.) müxtəlif növ antigenlərə bağlanan. Yəni antikorların əmək bölgüsü var. Bu immunoqlobulinlər latın əlifbasının hərfləri ilə çağırılır - A, M, G, D, E və aşağıdakı kimi təyin olunur - IgA, IgM, IgG, IgD, IgE.

Diaqnozda yalnız bir növ antikor istifadə olunur ki, bu da aşkar edilən mikrob üçün ən spesifikdir. Yəni, bu tip antikorun aşkar edilmiş antigenə bağlanması həmişə baş verir. Ən çox istifadə edilənlər IgG və IgM-dir.

Məhz immun reaksiyasının bu prinsipi (müəyyən olunan bioloji obyektin tanınmasının unikal dəqiqliyi və spesifikliyi) ferment immunoassayının əsasını təşkil edir.Antitellərin antigenlərin tanınmasında yüksək dəqiqliyi sayəsində bütün ferment immunoassay metodunun dəqiqliyi də ən yüksək.

Enzimatik reaksiya

Hansı reaksiya enzimatikdir? Reaksiyaya yaxınlıq, substrat və məhsul nədir?
Ferment immunoassay metodunun işində fermentativ reaksiyanı nəzərdən keçirməyə davam edək.

Enzimatik reaksiya nədir?

Enzimatik reaksiya bir fermentin təsiri ilə bir maddənin digərinə çevrildiyi kimyəvi reaksiyadır. Fermentin fəaliyyət göstərdiyi maddə deyilir substrat. Və fermentin təsiri nəticəsində əldə edilən maddə deyilir reaksiya məhsulu. Üstəlik, fermentativ reaksiyanın özəlliyi ondan ibarətdir ki, müəyyən bir ferment yalnız müəyyən bir substratda fəaliyyət göstərir. Bir fermentin "öz" substratını tanımaq üçün bu xüsusiyyəti deyilir qohumluq.

Beləliklə, hər bir ferment özünə xas olan yalnız bir reaksiya həyata keçirir. Bioloji aləmdə bir çox fermentlər, eləcə də enzimatik reaksiyalar məlumdur. Fermentlə əlaqəli immunosorbent diaqnostikasında yalnız bir neçə fermentativ reaksiya istifadə olunur - 10-dan çox deyil. Eyni zamanda, məhsulu rəngli maddələr olan belə fermentativ reaksiyalar seçildi. Niyə fermentativ reaksiyanın məhsulları rənglənməlidir? Çünki rəngli məhluldan bir maddənin konsentrasiyasını hesablamaq üçün sadə kimyəvi üsul var - kolorimetriya.

Kolorimetriya üsulu - mahiyyəti və prinsipi

Kolorimetriya məhlulun rəng sıxlığının ölçülməsindən istifadə edir və maddənin konsentrasiyası rəng sıxlığından hesablanır.Bu zaman xüsusi cihaz - kolorimetr məhlulun rəng sıxlığını ölçür. Kolorimetriyada rəng sıxlığının maddənin konsentrasiyasından asılılığının iki mümkün variantı var - birbaşa mütənasib asılılıq və ya tərs mütənasib asılılıq. Birbaşa mütənasib əlaqə ilə, maddənin konsentrasiyası nə qədər yüksək olarsa, məhlulun rəng sıxlığı bir o qədər sıx olur. Tərs mütənasib bir əlaqə ilə, maddənin konsentrasiyası nə qədər yüksək olarsa, məhlulun rəng sıxlığı bir o qədər aşağı olar. Texniki olaraq bu belə olur: maddənin məlum konsentrasiyası olan bir neçə məhlul alınır, bu məhlulların sıxlığı ölçülür və konsentrasiyanın rəng sıxlığından asılılığının qrafiki qurulur ( kalibrləmə cədvəli).

Sonra konsentrasiyası təyin olunan məhlulun rəng sıxlığı ölçülür və kalibrləmə qrafikindən məhlulun ölçülən rəng sıxlığının səviyyəsinə uyğun konsentrasiya dəyəri tapılır.Müasir avtomatik kolorimetrlərdə kalibrləmə aparılır. yalnız bir dəfə həyata keçirilir, sonra cihazın özü cihazın yaddaşında qalan kalibrləmə əyrisini qurur və ölçmə avtomatik olaraq baş verir.

Aşağıdakı fermentlər ən çox ferment immunoassay istifadə olunur: peroksidaza, qələvi fosfataz, avidin.

Bir ferment immunoassayında immunoloji və fermentativ reaksiyalar necə birləşdirilir? İndi biz ferment immunoassayının özünü nəzərdən keçirməyə davam edəcəyik. Hansı mərhələləri əhatə edir və bu reaksiyalar zamanı nə baş verir? Enzim immunoassay ola bilər birbaşa və dolayı.

Birbaşa ferment immunoassay - həyata keçirilməsi mərhələləri

Birbaşa ferment immunoassayında müəyyən edilmiş antigenə qarşı antikorlar xüsusi etiketlə birləşdirilir. Bu xüsusi etiket enzimatik reaksiyanın substratıdır.

Antigenlərin quyunun səthinə yapışması və antigenin antikorla birləşməsi

Birbaşa ferment immunoassay necə aparılır? Bioloji material götürülür (qan, selikli qişalardan qırıntılar, yaxmalar) və xüsusi deşiklərə yerləşdirilir. Antigenlərin quyuların səthinə yapışması üçün bioloji material quyularda 15-30 dəqiqə saxlanılır. Sonra, aşkar edilmiş antigenə qarşı antikorlar bu quyulara əlavə edilir. Bu o deməkdir ki, antigenləri, məsələn, sifilis aşkar edərkən, sifilis antigenlərinə qarşı antikorlar əlavə olunur. Bu anticisimlər sənaye üsulu ilə alınır və laboratoriyalar hazır dəstlər alırlar.Sınaq materialı ilə anticisimlərin bu qarışığı bir müddət (30 dəqiqədən 4-5 saata qədər) saxlanılır ki, anticisimlər “öz” antigenini tapıb əlaqə saxlasınlar. Antigenlərin bioloji nümunəsində nə qədər çox olarsa, bir o qədər çox antikor onlara bağlanacaqdır.

"Əlavə" antikorların çıxarılması

Göstərildiyi kimi, antikorlar da spesifik etiketlə əlaqələndirilir.Antikorlar artıq əlavə olunduğu üçün onların heç də hamısı antigenlərə bağlanmayacaq və əgər nümunədə antigen yoxdursa, deməli, müvafiq olaraq heç bir antikor da antigenlə bağlanmayacaq. arzu olunan antigen. "Əlavə" antikorları çıxarmaq üçün quyuların məzmunu sadəcə tökülür. Nəticədə, bütün "əlavə" antikorlar çıxarılır və antigenlərlə əlaqəli olanlar qalır, çünki antigenlər quyuların səthinə "yapışdırılır". Quyular bir neçə dəfə xüsusi bir həll ilə yuyulur, bu, bütün "əlavə" antikorları yumağa imkan verir.

Sonra ikinci mərhələ başlayır - enzimatik reaksiya. Yuyulmuş quyulara fermentli məhlul əlavə edilir və 30-60 dəqiqə buraxılır. Bu fermentin antikorların bağlandığı maddəyə (xüsusi etiket) yaxınlığı var. Ferment bu xüsusi işarəni (substratı) rəngli maddəyə (məhsul) çevirən bir reaksiya həyata keçirir. Sonra kolorimetriyadan istifadə edərək bu rəngli maddənin konsentrasiyası tapılır. Bu xüsusi etiket antikorlarla əlaqəli olduğundan, rəngli reaksiya məhsulunun konsentrasiyası antikorların konsentrasiyasına bərabərdir. Və antikorların konsentrasiyası antigenlərin konsentrasiyasına bərabərdir. Beləliklə, analiz nəticəsində aşkar edilən mikrob və ya hormonun konsentrasiyası ilə bağlı cavab alırıq.

Birbaşa ferment immunoassay məhz belə işləyir. Bununla birlikdə, bu gün dolayı ferment immunoassay daha çox istifadə olunur, çünki dolayı həssaslıq və dəqiqlik birbaşadan daha yüksəkdir. Beləliklə, dolayı ferment immunoassayına keçək.

Dolayı ferment immunoassay - həyata keçirilməsi mərhələləri

Dolayı ferment immunoassayında iki mərhələ var. Birinci mərhələdə aşkar edilmiş antigenlərə qarşı etiketlənməmiş anticisimlər, ikinci mərhələdə isə ilk etiketlənməmiş antikorlara etiketli anticisimlər istifadə olunur. Yəni, bu, bir antikorun antigenə birbaşa bağlanması deyil, ikiqat nəzarətdir: antikorların antigenə bağlanması, ardınca ikinci antikorların antikor + antigen kompleksinə bağlanması. Bir qayda olaraq, birinci mərhələ üçün antikorlar siçan, ikincisi isə keçidir.

Quyunun səthində antigenlərin fiksasiyası və antigenin etiketsiz antikora bağlanması
Birbaşa ferment immunoassay üçün olduğu kimi, bioloji material toplanır - qan, qırıntılar, ləkələr. Tədqiq olunan bioloji material quyulara daxil edilir və antigenlərin quyuların səthinə yapışması üçün 15-30 dəqiqə buraxılır. Sonra antigenlərə etiketlənməmiş anticisimlər quyulara əlavə edilir və müəyyən müddətə (1-5 saat) qalır ki, antikorlar “öz” antigenləri ilə birləşib immun kompleksi əmələ gətirir ( İlk addım). Bundan sonra, "əlavə" bağlanmamış antikorlar quyuların tərkibini tökərək çıxarılır. Bütün bağlanmamış antikorları tamamilə çıxarmaq üçün xüsusi bir həll ilə yuyun.

Etiketli antikorun antigen + etiketsiz antikor kompleksinə bağlanması
Bundan sonra onlar ikinci etiketli antikorları götürürlər, quyulara əlavə edirlər və yenidən bir müddət buraxırlar - 15-30 dəqiqə ( ikinci mərhələ). Bu müddət ərzində etiketlənmiş antikorlar birinci - etiketsiz olanlara bağlanır və kompleks - antikor + antikor + antigen əmələ gətirir. Bununla belə, quyulara həm etiketli, həm də etiketsiz antikorlar artıq əlavə olunur. Buna görə də, etiketlənməmiş antikorlarla əlaqəsi olmayan "əlavə" artıq etiketlənmiş antikorları yenidən çıxarmaq lazımdır. Bunu etmək üçün, quyuların məzmununu tökmək və xüsusi bir həll ilə yuyulma prosedurunu təkrarlayın.

Enzimatik reaksiya - rəngli birləşmənin əmələ gəlməsi
Bundan sonra, "etiket" i rəngli bir maddəyə çevirmək reaksiyasını həyata keçirən bir ferment əlavə olunur. Rəng 5-30 dəqiqə ərzində inkişaf edir. Sonra kolorimetriya aparılır və rəngli maddənin konsentrasiyası hesablanır. Rəngli maddənin konsentrasiyası etiketlənmiş antikorların konsentrasiyasına bərabər olduğundan, etiketlənmiş antikorların konsentrasiyası isə etiketlənməmiş antikorların konsentrasiyasına bərabərdir, bu da öz növbəsində antigenin konsentrasiyasına bərabərdir. Beləliklə, aşkar edilmiş antigenin konsentrasiyasını əldə edirik.
İki növ antikorun istifadəsi şəklində bu ikiqat nəzarət ferment immunoassay metodunun həssaslığını və spesifikliyini artırmağa imkan verdi. Təhlil müddətinin uzadılmasına və əlavə mərhələlərin daxil edilməsinə baxmayaraq, bu itkilər nəticənin dəqiqliyi ilə kompensasiya edilir. Məhz buna görə də hazırda ferment immunoassay üsullarının böyük əksəriyyəti dolayı ferment immunoanalizidir.


Ferment immunoassay ilə hansı xəstəliklər aşkar edilir?

Ferment immunoassay ilə hansı xəstəliklərin və hansı bioloji aktiv maddələrin aşkar edildiyini nəzərdən keçirək. Enzim immunoassay ilə aşkar edilən maddələr cədvəldə təqdim olunur.
Tiroid xəstəliyinin hormonları və markerləri Tiroid peroksidaza (TPO)
Tiroqlobulin (TG)
Tiroid stimullaşdırıcı hormon (TSH)
Tiroksin (T4)
Triiodotironin (T3)
Sərbəst tiroksin (T4)
Pulsuz triiodotironin (T3)
Reproduktiv funksiyanın diaqnostikası Luteinizing hormon (LH)
Follikül stimullaşdırıcı hormon (FSH)
Prolaktin
Progesteron
Estradiol
Testosteron
Kortizol
Steroid bağlayıcı qlobulin (SBG)
Alfafetoprotein (AFP)
Şiş markerləri Xorionik gonadotropin (CG)
Prostat spesifik antigen (PSA)
SA - 125
SA – 19.9
CYFRA-21-1
M – 12 (SA – 15,3)
MUC – 1 (M – 22)
MUC1 (M – 20)
Alveomusin
K - zəncir
L - zəncir
Şiş nekrozu faktoru (TNFα)
γ – interferon
Karsinoembrionik antigen (CEA)
Yoluxucu xəstəliklərin diaqnostikası