FISH on diferentsiaaldiagnostika uuring. Fluorestsents in situ hübridisatsioon Uusimad diagnostikameetodid

Seda meetodit kasutatakse tänapäeval teatud tüüpi vähi kasvajate diagnoosimiseks, kuna raku pahaloomuline degeneratsioon on põhjustatud muutustest selle genoomis. Seega, olles tuvastanud geenides iseloomulikud kõrvalekalded, on võimalik seda rakku suure kindlusega klassifitseerida vähkkasvajateks. Lisaks kasutatakse FISH-testi juba väljakujunenud diagnoosi kinnitamiseks, samuti täiendavate andmete saamiseks spetsiifiliste keemiaravi ravimite kasutamise võimaluse kohta rinnavähi keemiaravi läbiviimiseks ja haiguse prognoosi selgitamiseks.

Hea näide FISH-testi kasutamisest on selle kasutamine rinnavähiga patsientidel. Selle tehnikaga uuritakse biopsiakudet geeni HER-2 koopiate suhtes. Kui see geen on olemas, tähendab see, et rakkude pinnal asub suur hulk HER2 retseptoreid. Nad on tundlikud signaalide suhtes, mis stimuleerivad kasvajaelementide arengut ja vohamist. Sel juhul avaneb võimalus trastuzumabi efektiivseks kasutamiseks – see ravim blokeerib HER2 retseptorite aktiivsust ja seega pärsib kasvaja kasvu.

Kuidas FISH-testi tehakse?

Neid kromosoomide struktuuri kõrvalekaldeid on mitut tüüpi:
translokatsioon - kromosomaalse materjali osa liikumine uude kohta samas või teises kromosoomis;
inversioon – kromosoomi osa pööramine 1800 võrra ilma selle põhikehast eraldumiseta;
deletsioon – mis tahes kromosomaalse piirkonna kaotus;
dubleerimine on kromosoomi osa kopeerimine, mis viib rakus sisalduvate sama geeni koopiate arvu suurenemiseni.

Kõik need häired kannavad teatud diagnostilisi märke ja teavet. Näiteks võivad translokatsioonid viidata leukeemia, lümfoomide või sarkoomide esinemisele ning geenide dubleerimise olemasolu aitab määrata kõige tõhusama ravi.

Mis on FISH-testi eelis?

Teine FISH-testi eelis on see, et seda saab kasutada patsiendilt hiljuti saadud materjali puhul. Standardse tsütogeneetilise analüüsi jaoks on vaja kõigepealt kasvatada rakukultuur, st lasta patsiendi rakkudel laboris paljuneda. See protsess võtab aega umbes 2 nädalat ja veel üks nädal kulub tavapärasele testile, samas kui FISH-testi tulemus saadakse vaid mõne päevaga.

Arstiteaduse pidev areng toob järk-järgult kaasa FISH-testi maksumuse vähenemise ja selle üha laialdasema kaasamise onkoloogide igapäevatöösse.

Rinnavähk on ohtlik haigus, mis on statistiliselt naiste vähihaiguste hulgas esikohal. Selle haiguse tekkerisk suureneb kõigil üle 40-aastastel naistel ja see võib olla tingitud mitmetest muudest teguritest. Kõige tõenäolisemad rinnavähi põhjused on rasvumine, geneetiline või pärilik eelsoodumus, menstruatsiooni varajane algus ja hiline lõppemine, hormonaal- või kiiritusravi.

Lisaks suureneb haigestumuse risk sünnitamata naistel ja naistel, kes on juba põdenud vähki. Ka mehed võivad haigestuda rinnavähki.

Diagnoosimise tüübid ja meetodid

Rinnavähi diagnoosimise esimene etapp on mammoloogi rutiinne uuring. Üle 40-aastased naised peaksid läbima sellised uuringud vähemalt kord kahe aasta jooksul. Arst teeb piimanäärmete visuaalset uurimist, palpatsiooni ja mammograafiat. Haiguse arengu visuaalsed märgid võivad hõlmata järgmist:

Üldine informatsioon

Rindade röntgenuuring (mammograafia) võimaldab teil määrata kasvaja olemasolu, suurust ja asukohta. Saadud tulemuste täpsuse suurendamiseks kasutatakse kontrastaine sisseviimise tehnoloogiat. Kui kasvaja on juba avastatud, siis kasutatakse pneumotsüstograafia meetodit - kasvajavedeliku eemaldamist ja õhu sisestamist õõnsusse. Kui kasvaja olemasolu ei ole täpsustatud, kasutatakse duktograafiat - kontrastaine sisestamist piimakanalitesse.

Need meetodid võimaldavad visualiseerida moodustiste olemasolu rinnakoes.

Kui kasvaja esinemine ilmneb ka mammograafias, antakse patsiendile saatekiri diagnostiliste meetmete kogumiseks:

Ultraheli abil saab arst eristada kasvajat tsüstist ja selgitada moodustumise asukohta. Pärast seda võetakse sellest koeproov biopsia jaoks. Biopsia võimaldab teil välja selgitada kasvaja tüübi: healoomuline või pahaloomuline, samuti määrata, kas kasvaja on hormoonsõltuv. See teave võimaldab arstil otsustada ravistrateegia üle, kuid see ei võimalda alati määrata etappi. Sageli isegi kõigi vajalike diagnostiliste meetmetega saab seda määrata alles pärast operatsiooni.

Histoloogiliste uuringute mehhanism

Kudede biopsia tehakse nii enne kui ka pärast operatsiooni. Protseduur viiakse läbi pärast moodustumise lokaliseerimise selgitamist.

Biopsia on koetüki eemaldamise protsess ja selle uurimist nimetatakse "histoloogiliseks uuringuks" või lihtsalt "histoloogiaks".

Meditsiinitöötaja eemaldab kasvajast väikese koguse kudet spetsiaalse nõelaga või saadetakse patsiendi kehast juba eemaldatud kasvaja histoloogilisele uuringule. Seejärel värvitakse ja töödeldakse koefragment spetsiaalselt kontrastsuse suurendamiseks ja uurimise hõlbustamiseks. Spetsialist uurib sektsiooni mikroskoobiga ja annab arvamuse kasvaja moodustumise kvaliteedi kohta. Selles uuringus sõltub palju järelduse teinud laboritehniku ​​tähelepanelikkusest ja kvalifikatsioonist.

Sarnane uuring on immunohistokeemia. Üldiselt võib seda nimetada ka “histoloogiaks”, sest meetod põhineb kudede uurimisel, kuid immunohistokeemia on arenenum analüüsimeetod. Selles uuringus värvitakse kude ka spetsiaalsete reagentidega, mis mitte ainult ei suurenda visuaalset kontrasti, vaid kombineerivad ("märgis") ka antikehadega erilisel viisil, mis võimaldab selgitada rohkem kasvaja omadusi. Sel juhul toimub reaktsioon palju kiiremini, mis võimaldab teil kiiresti analüüsitulemusi saada.

Immunohistokeemia võimaldab mitte ainult selgitada kasvaja tüüpi, vaid ka kavandada patsiendi ravistrateegia, mis põhineb kasvajakoe tundlikkuse tuvastamisel erinevat tüüpi ravitoimete suhtes. Lisaks on see uuring võimalikult automatiseeritud, mis võimaldab minimeerida inimfaktorist tingitud diagnostilise vea tõenäosust.

Samuti on olemas kaasaegsed diagnostilised meetmed, mis võimaldavad tuvastada kasvaja olemasolu organismis: see on spektraalne vereanalüüs, immunoloogiline (biokeemiline) analüüs, kasvajakoe FISH-test. Geneetiline vereanalüüs võimaldab igal naisel kontrollida, kas tal on rinnavähi tekkeks eeldusi või mitte. CT ja MRI võimaldavad täpselt määrata kasvaja asukohta ja jälgida selle arengu dünaamikat, hinnates kasvaja struktuuri.

Kuidas tuvastada vähki vereanalüüsi abil?

Vereanalüüsi määrab arst tavaliselt pärast ultraheliuuringut. On olukordi, kus patsient loovutab omal algatusel verd aknamarkerite või geneetilise analüüsi jaoks, et tuvastada eelsoodumus rinnavähi tekkeks. Mõnel juhul võib üldine vereanalüüs olla põhjus onkoloogiakliinikusse pöördumiseks (koos tüki palpeerimisega või vähi visuaalsete tunnustega).

Biokeemiline analüüs

Veri kui uurimismaterjal võimaldab läbi viia järgmisi diagnostilisi meetmeid:

Samas võib vähi määramise erimeetoditeks nimetada vaid kahte esimest analüüsi, millest teine ​​on pigem ennetav kui operatiivne. Kaks muud vereanalüüsi tehakse peamiselt enne operatsiooni, et teha kindlaks keha seisund ja protsessi ulatus. Kuid nagu juba mainitud, kui rinnus on tunda tükki ja üldine vereanalüüs näitab rohkem kui kahte negatiivset diagnostilist koefitsienti, on see põhjus spetsialistiga konsulteerimiseks. Negatiivsed koefitsiendid on teatud vere koostise parameetrite normivälised näitajad.

Biokeemiline vereanalüüs võimaldab tuvastada kasvajarakkude vastaste antikehade olemasolu. Selliseid kehasid nimetatakse kasvajamarkeriteks. Kasvajamarkerite arv ja tüüp sõltuvad vähi kasvaja spetsiifilisusest (asukohast) ja selle arenguastmest. Kasvaja markerite hulka kuuluvad:

Rinnavähi korral huvitab raviarst eelkõige kasvajamarkeri CA-15-3 olemasolu, kuna selle olemasolu veres viitab selgelt rinnavähile. Tulemuse dekodeerimine võtab keskmiselt ühe päeva. Biokeemilist analüüsi tehakse haiguse käigus mitu korda. Selleks võetakse veenist verd päeva esimesel poolel tühja kõhuga. Kaks nädalat enne analüüsi lõpetab patsient kõigi ravimite võtmise (kinnitab raviarst). Kaks päeva enne vereloovutamist ei tohi te juua alkoholi, rasvaseid ega praetud toite.

Tund enne protseduuri ei tohiks suitsetada ja emotsionaalset stressi on soovitatav vähendada. Tavaliselt ei anta verd biokeemiliseks analüüsiks kohe pärast kiiritus- ja füsioterapeutilist ravi.

Geneetiliste tegurite määramine

Enne geneetilisest vereanalüüsist rääkimist tasub rõhutada erinevust mõistete “geneetiline” ja “pärilik” vahel. Vähi geneetiline tegur on laiem mõiste, mis ei tähenda ainult rinnavähiga sugulaste olemasolu, vaid ka spetsiifilist geenimutatsiooni, mis suurendab selle haiguse riski.

Pärilikkus viitab potentsiaalsele rinnavähi riskile perekonna ajaloo põhjal. Samal ajal võivad mutantse geeni saada mitte ainult naised, vaid ka mehed, kuid selle kandja ei pruugi haigestuda.

Iga naine võib läbida geneetilise testimise. See on eriti soovitatav neile, kelle otsesed sugulased on põdenud rinnavähki. Enne analüüsi jaoks vere loovutamist peaks patsient rääkima geneetika valdkonna spetsialistiga, kes selgitab tulemuste dešifreerimise nüansse. Enne vere loovutamist ei ole patsiendilt vaja erilist ettevalmistust.

Kui saate BRCA geenimutatsiooni positiivse tulemuse, kuid muude murettekitavate sümptomite puudumisel pole paanikaks põhjust. Nendes geenides mutatsioonidega naistel võib soovitada ennetava meetmena läbida regulaarne enesekontroll ja füüsiline läbivaatus. 40 aasta pärast on mõttekas mõelda munasarjade ja rindade eemaldamisele, noorematel naistel, kes ei plaani tulevikus lapsi saada, soovitatakse vahel võtta rasestumisvastaseid vahendeid. Otsus nende meetmete üle lasub täielikult naise enda õlul ning nõuab läbimõeldud lähenemist ja arstidega konsulteerimist.

Uusimad diagnostikameetodid

Spektraalne vereanalüüs näitab kasvajate esinemist organismis tõenäosusega kuni 93%. See on suhteliselt odav diagnostiline meetod, mis põhineb vereseerumi kiiritamisel infrapunaspektriga ja selle molekulaarse koostise analüüsil.

Spektraalse vereanalüüsi järeldus tehakse vastavalt "olemasolu-puudumise" põhimõttele ja on suunatud enamiku pahaloomuliste kasvajate tüüpide tuvastamisele. See test võib määrata ka rinnavähi arengu staadiumi. Tulemused dešifreeritakse laboris ja ei vaja täiendavat arsti arvamust.

Spektraalseks analüüsiks vere loovutamiseks on vaja lõpetada ravimite võtmine 2 kuud enne protseduuri. Röntgeni või muu kiiritamise, samuti keemiaravi hetkest peab mööduma vähemalt 3 kuud. Lisaks ei tohi naine verevõtu ajal olla rase ega tal olla menstruatsioon. Vereproovide võtmine toimub tühja kõhuga päeva esimesel poolel. Spektraalne vereanalüüs võtab keskmiselt 12 tööpäeva.

Üks uusimaid vähi diagnoosimise meetodeid on nn kalatest (FISH, fluorescence hybridization). Selle tõhususe üle arutatakse endiselt selle teostatavuse põhiküsimuseks on kallis uurimismenetlus. Meetodi olemus on raku fragmentide märgistamine fluorestseeruva koostisega ja rakkude edasine mikroskoopiline uurimine. Selle põhjal, milliste geneetilise materjali osadega märgistatud fragmendid on seotud, saab aru, kas patsiendil on eelsoodumus vähi tekkeks ja millised ravimeetodid on konkreetsel juhul asjakohased.

FISH-test ei nõua täielikult küpseid rakke, seega on selle sooritamine palju kiirem kui teiste laboratoorsete testide puhul. Lisaks võimaldab FISH-meetod selgemalt jälgida geneetilisi kahjustusi, mida muud tüüpi analüüsidega pole võimalik teha. FISH-testi kasutatakse kõige sagedamini rinnavähi tuvastamiseks, kuid see toimib ka mitmete teiste vähiliikide tuvastamiseks.

FISH-testi puudusteks on lisaks kõrgele hinnale ka selle võimetus töötada mõne kromosoomi piirkonnaga, mis on tingitud märgiste spetsiifilisusest. Lisaks ignoreerib FISH-test teatud tüüpi mutatsioone ja katkestusi geneetilises koodis, mis võib olla diagnoosimisel oluline puudus. FISH-i võrdlevad uuringud odavama IHC-testiga ei näidanud vähirakkude tundlikkuse määramisel Herceptini suhtes olulist eelist. Siiski on FISH-test praegu kiireim vähi diagnoosimise ülitäpsete meetodite seas.

FISH – Fluorescent in situ hübridisatsioonitehnika töötati välja 1980. aastate keskel ja seda kasutatakse spetsiifiliste DNA järjestuste olemasolu või puudumise tuvastamiseks kromosoomides, samuti 6. kromosoomi CEP6 (6p11) tsentromeeril paikneva alfa-satelliidi DNA. 1-11).

See andis tänu kasvajaantigeenide avastamisele olulise nihke melanotsüütilise päritoluga onkoloogiliste haiguste diagnoosimisel. Pahaloomulise tausta taustal määratakse mutatsioon kolmes antigeenis: CDK2NA (9p21), CDK4 (12q14) ja CMM1 (1p). Sellega seoses on melanoomi ja selle prekursorite varajases diagnoosimises väga oluline objektiivse diferentsiaaldiagnostika võimalus, mis põhineb melanotsüütiliste nahakasvajate geneetiliste omaduste määramisel , vaadeldakse kahte RREB1 geeni, mis on värvitud punaseks, kaks MYB geeni on värvitud kollaseks, kaks CCND1 geeni on rohelised ja kaks kromosoomi 6 tsentromeeri on sinised. Diagnostika eesmärgil kasutatakse fluorestsentsteste.

Reaktsioonitulemuste hindamine: iga proovi 30 tuumas loendatakse punaste, kollaste, roheliste ja siniste signaalide arv, tuvastatakse neli erinevate geneetiliste häirete variantide parameetrit, milles proov vastab geneetiliselt melanoomile. Näiteks on proov melanoomiga kooskõlas, kui CCND1 geeni keskmine arv tuuma kohta on ≥2,5. Teiste geenide koopiate arvu hinnatakse samal põhimõttel. Ravim loetakse FISH-positiivseks, kui on täidetud vähemalt üks neljast tingimusest. Proovid, milles kõik neli parameetrit on alla piirväärtusi, loetakse FISH-negatiivseteks.

Kromosoomide spetsiifiliste DNA järjestuste määramine toimub biopsiate või kirurgilise materjali lõikudel. Praktilises teostuses näeb FISH reaktsioon välja järgmine: uuritavat materjali, mis sisaldab melanotsüütide tuumades DNA-d, töödeldakse selle molekuli osaliseks hävitamiseks, et lõhkuda kaheahelaline struktuur ja hõlbustada seeläbi juurdepääsu soovitud piirkonda. geen. Proovid klassifitseeritakse selle järgi, kus nad on DNA molekuliga seotud. Kliinilises praktikas FISH-reaktsiooni materjaliks on parafiinkoe ​​lõigud, määrded ja jäljendid.

FISH-reaktsioon võimaldab tuvastada DNA molekulis toimunud muutusi, mis on tingitud geenikoopiate arvu suurenemisest, geenide kadumisest, kromosoomide arvu muutustest ja kvalitatiivsetest muutustest - geeni lookuste liikumine mõlemas samas. kromosoomi ja kahe kromosoomi vahel.

FISH-reaktsiooni kasutamisel saadud andmete töötlemiseks ja kolme uuringurühma geenide koopiaarvude vaheliste seoste uurimiseks kasutatakse Spearmani korrelatsioonikordajat.

Melanoomi iseloomustab koopiate arvu suurenemine võrreldes nevuse ja düsplastiliste nevustega.

Võrreldes düsplastilise nevusega on lihtsal nevusel koopiate arvus vähem kõrvalekaldeid (st normaalsem koopiate arv).

Otsustusreeglite koostamiseks, mis võimaldavad ennustada, kas valim kuulub ühte või teise klassi (lihtsate ja düsplastiliste nevide diferentsiaaldiagnoos), kasutatakse „otsustuspuude” matemaatilist aparaati. See lähenemisviis on end praktikas hästi tõestanud ja selle meetodi kasutamise tulemusi (erinevalt paljudest teistest meetoditest, näiteks närvivõrkudest) saab selgelt tõlgendada, et koostada otsustusreegleid lihtsate düsplastiliste nevi ja melanoomi eristamiseks. Kõigil juhtudel olid esialgsed andmed nelja geeni koopiate arvud.

Diferentsiaaldiagnostika otsustusreegli koostamise ülesanne on jagatud mitmeks etapiks. Esimeses etapis eristatakse melanoom ja nevus, võtmata arvesse nevuse tüüpi. Järgmises etapis konstrueeritakse otsustusreegel lihtsate ja düsplastiliste nevi eraldamiseks. Lõpuks on viimases etapis võimalik konstrueerida "otsuste puu", et määrata düsplastilise nevuse düsplaasia aste.

Selline nevi klassifitseerimise ülesande jaotus alamülesanneteks võimaldab saavutada igas etapis prognooside suure täpsuse. “Otsustuspuu” koostamise sisendandmeteks on andmed nelja geeni koopiate arvu kohta melanoomdiagnoosiga patsientidel ja mittemelanoomdiagnoosiga patsientidel (patsiendid, kellel on erinevat tüüpi nevus - lihtne ja düsplastiline). Iga patsiendi kohta on andmed geenikoopiate arvu kohta 30 raku kohta.

Seega võimaldab diagnoosi ennustamise probleemi jagamine mitmeks etapiks koostada ülitäpsed otsustusreeglid mitte ainult melanoomi ja nevi eristamiseks, vaid ka nevi tüübi määramiseks ja düsplaasia nevuse düsplaasia astme ennustamiseks. Konstrueeritud "otsustuspuud" on visuaalne viis diagnoosi ennustamiseks, mis põhineb teabel geenikoopiate arvu kohta, ja neid saab hõlpsasti kasutada kliinilises praktikas naha healoomuliste, pahaloomuliste ja pahaloomuliste melanotsüütiliste kasvajate eristamiseks. Kavandatav täiendav diferentsiaaldiagnostika meetod on eriti oluline hiiglaslike kaasasündinud pigmenteerunud nevi ja düsplastiliste nevi väljalõikamisel pediaatrilistel patsientidel, kuna selliste patsientide meditsiiniasutuste külastamisel täheldatakse suurt protsenti diagnostilisi vigu. Kirjeldatud meetodi kasutamise tulemused on väga tõhusad, seda on soovitatav kasutada pigmenteerunud nahakasvajate diagnoosimisel, eriti FAMM-i sündroomiga patsientidel.

Sünnieelse diagnostika invasiivsed meetodid võimaldavad mitte ainult vaadata tulevikku ja usaldusväärselt ennustada, kas sündimata lapsel on emakasiseste väärarengutega seotud haigused, vaid ka välja selgitada kaasasündinud patoloogiate olemus ja põhjused.

Igasugune teave on aga väärtuslik ainult siis, kui see on õigeaegne. Kui rääkida loote arengust, muutub analüüsitulemuste saamise kiirus eluliselt oluliseks.

Seetõttu on geenidiagnostikas väga nõutud FISH-meetod, mis võimaldab võimalikult lühikese aja jooksul hinnata levinumate arenguanomaaliate esinemist embrüos.

FISH on lühend, mis dešifreerib kromosomaalsete kõrvalekallete tuvastamise tehnoloogia olemuse - fluorestsents in situ hübridisatsioon - fluorestsentshübridisatsioon "kodukeskkonnas".

See tehnika, mille pakkusid välja eelmise sajandi 70. aastate lõpus J. Goll ja M.-L. Pardew, põhineb võimalusel taastada nukleiinhappefragmentide (DNA või RNA) järjestus pärast nende denatureerimist.

Autorid on välja töötanud meetodi, mis võimaldab kunstlikult loodud märgistatud DNA sondide (sondide) ja analüüsiks võetud tsütogeneetilise materjali in situ hübridisatsiooni abil tuvastada huvipakkuvate kromosoomide kvantitatiivseid ja kvalitatiivseid kõrvalekaldeid.

Möödunud sajandi lõpus, pärast fluorestsentsvärvide edukat kasutamist DNA-sondide värvimiseks, sai FISH-meetod oma nime ning sellest ajast alates on seda intensiivselt täiustatud ja muudetud.

Kaasaegsed FISH-analüüsi tehnikad püüavad tagada, et valitud geneetilise materjali analüüsiks oleks võimalik saada kõige täielikum informatsioon ühe hübridisatsiooniprotseduuriga.

Fakt on see, et pärast hübridisatsiooni saab hinnata ainult piiratud arvu sama tsütogeneetilise materjali kromosoome. DNA ahelate uuesti hübridiseerimise võime aeg-ajalt väheneb.

Seetõttu kasutatakse geenidiagnostikas hetkel kõige sagedamini in situ hübridisatsiooni meetodit, et kiiresti vastata küsimustele 21., 13., 18. kromosoomidel, aga ka sugukromosoomidel X, Y esinevate enamlevinud aneuploidiate kohta.

FISH analüüsiks sobivad kõik koe- või rakuproovid.

Sünnieelses diagnoosimises võivad need olla vereproovid, ejakulaat või.

Tulemuste saamise kiiruse tagab asjaolu, et analüüsiks võetud materjalist saadud rakke ei ole vaja toitekeskkonnas kasvatada, saavutades nende jagunemise vajaliku arvuni, nagu klassikalise karüotüpiseerimise meetodi puhul.

Valitud materjal läbib spetsiaalse ettevalmistuse, et saada kontsentreeritud puhas rakususpensioon. Järgmisena viiakse uuritava proovi DNA proovi ja natiivse DNA denatureerimise protsess läbi üheahelalise olekuni ja hübridisatsiooniprotsess, mille käigus inkubeeritakse värvilisi DNA sonde proovi DNA-ga.

Seega visualiseeritakse rakus soovitud (värvilised) kromosoomid, hinnatakse nende arvukust, geneetiliste struktuuride struktuuri jne. Spetsiaalse fluorestsentsmikroskoobi okulaar võimaldab uurida hõõguvaid DNA ahelaid.

Praegu kasutatakse FISH-meetodit laialdaselt diagnostilistel eesmärkidel geneetiliste haiguste, kromosoomaberratsioonide tuvastamiseks reproduktiivmeditsiinis, onkoloogias, hematoloogias, bioloogilises dosimeetrias jne.

Kuidas kasutatakse loote FISH diagnostikat?

Reproduktiivmeditsiini valdkonnas kasutatakse FISH-meetodit kui üht molekulaartsütogeneetilise diagnostika meetodit kõikides etappides.

• paar.

Tulevaste vanemate karüotüübi määramiseks tehakse see üks kord, kuna inimese genoom jääb kogu elu muutumatuks.

Paari karüotüpiseerimine enne lapse eostamist aitab kindlaks teha, kas vanemad on pärilike, sealhulgas varjatud geneetiliste patoloogiate kandjad. Nagu ka lapseootel ema ja isa genoomi üldine seisund, mis võib mõjutada lapse eostamise ja raseduse lõpuni kandmise edukust.

FISH-meetodit kasutav diagnostika toimib sel juhul sageli klassikalise karüotüpiseerimise lisauuringuna, tuvastades kromosomaalseid patoloogiaid uuritavas materjalis (vanemate venoosne veri), kui esineb mosaiiksuse kahtlus.

Täiendav uurimine FISH-meetodi abil kinnitab või lükkab usaldusväärselt ümber kahtlustatava anomaalia olemasolu tulevase vanema rakkudes.

• Ejakulaadi uuring.

Näidustatud "meesfaktori" tõttu paaril paljunemisraskuste korral. Sperma analüüs FISH-meetodi abil võimaldab teil hinnata ebanormaalsete spermatosoidide taset kromosoomikomplektis ning teha kindlaks, kas mees on suguga seotud geneetiliste haiguste kandja.

Kui paar hakkab hiljem viljastama IVF-i kaudu, võimaldab ejakulaadi FISH-analüüs valida munaraku viljastamiseks kvaliteetseima sperma.

• IVF-iga.

Implantatsioonieelseks geneetiliseks diagnoosimiseks (PGD). Vanemate karüotüübi uuringute tulemuste põhjal tehakse kindlaks võimalikud kromosomaalsed ja geneetilised aberratsioonid, mis võivad embrüole edasi kanduda.

Tänu FISH-diagnostika võimalustele saab mõne tunni jooksul enne emakaõõnde siirdamist läbi viia saadud embrüote geneetilise tervise uuringu, et tagada teadaoleva terve lootega rasedus.

Lisaks võimaldavad PGD võimalused määrata embrüote sugu ja seega vajadusel "tellida" sündimata lapse sugu.

• Raseduse ajal.

Sünnieelses diagnostikas: koorionivilluse proovide võtmise, amniotsenteesi või kordotsenteesiga FISH-meetodil saadud looterakkude analüüsi pakuvad tavaliselt meditsiinikeskused lisaks looterakkude klassikalisele geneetilisele uuringule (karüotüüpimine).

See meetod on hädavajalik, kui on vaja kiiresti saada vastus levinumate kromosoomidefektide esinemise kohta lootel: trisoomia kromosoomidel 21, 18, 13, aberratsioonid kromosoomides X ja Y, mõnikord ka aneuploidiad kromosoomides 14 (või 17), 15, 16.

FISH-analüüsi eelised

Geneetilise analüüsi läbiviimine FISH-meetodi abil, kuigi see on tänapäeval kromosomaalsete patoloogiate diagnoosimise abimeetod, määravad selle rakendamise teostatavuse vaieldamatud eelised:

• testitud kromosoomide tulemuste saamise kiirus on mõne tunni jooksul - mitte rohkem kui 72.

See võib olla oluline, kui raseduse saatus sõltub geneetikute diagnoosist;

• FISH meetodi kõrge tundlikkus ja usaldusväärsus - edukas analüüs on võimalik tühisel hulgal biomaterjalil - piisab ühest rakust, tulemuste viga ei ületa 0,5%.

See võib olla oluline, kui rakkude arv algses proovis on piiratud, näiteks kui nende jagunemine on halb.

• võimalus teha FISH-meetodil diagnostikat raseduse mis tahes staadiumis (alates 7. nädalast) ja kasutada mis tahes bioloogilist proovi: koorioni fragmente, lootevett, looteveri jne.

Kust saab FISH-meetodi abil diagnoosi panna?

Moskvas kasutatakse FISH-meetodit loote kromosoomianomaaliate sünnieelseks diagnoosimiseks järgmistes meditsiinikeskustes:

Reeglina pakuvad kliinikud lisatasu eest FISH-i diagnostikateenuseid osana täielikust loote karüotüüpimisest invasiivse sekkumise teel. Ja reeglina on tulevased vanemad nõus lisatasu maksma, sest tänu FISH-meetodile saad juba paari päevaga teada oma beebi kohta kõige olulisema

Rinnavähki ei tohi alahinnata. See võib mõjutada absoluutselt kõiki – noori ja vanu, naisi ja mehi. Ravi äärmuslik keerukus, kõrge suremus ja haigestumuse kasvav dünaamika on põhjuseks, miks meditsiin sellele probleemile tähelepanu pöörab.

Siiani pole ühtegi ravimeetodit, mis tagaks 100% haiguse positiivse tulemuse. Olemasolevad meetodid on töömahukad, kallid ja võivad põhjustada kehale suuri kaaskahjustusi.

See on üks neist haigustest, mille puhul võib öelda, et parim ravi on riskitegurite kõrvaldamine ja õigeaegne diagnoosimine.

Rinnavähi eelsoodumus

Vaatamata sellele, et vähki kirjeldati esmakordselt 15. sajandil eKr ja teadlastel on tohutult teavet, ei piisa sellest siiski rinnavähi etioloogia täielikuks kirjeldamiseks.

Vähi tekkimist või arengut mõjutavaid keskkonnategureid ei ole piisavalt usaldusväärselt leitud.Üksikuid uuringuid, mis näitavad konkreetset kantserogeeni, ei tunnustata kogu meditsiiniringkond. Siiski on teatav seos rinnavähi ja järgmiste vahel:

Üks olulisemaid ülalloetletud tegureid on vanus: aastatega suureneb tõenäosus haigestuda rinnavähki suurusjärkude võrra. Üldiselt on rinnavähi etioloogia küsimuse keerukus tingitud selle geneetilisest olemusest. Ei ole teada, miks äkki tekib rike ja rinnakude hakkab kontrollimatult jagunema, mõjutades naaberkudesid ja põhjustades metastaase kogu kehas.

Kuid ühes on teadlased ühel meelel: kaasaegne elu soodustab vähki palju rohkem kui varem.

Seega on näidustatud suured elektromagnetkiirguse doosid, kehv ökoloogia, madal hapnikutase linnades, kehaline passiivsus, stress jne., ei saa jätta arvestamata oluliselt kõrgenenud elueaga, sest vähk on haigus, mis tavaliselt sisse tuleb täiskasvanueas.

Vajalikud testid

Vähi positiivse tulemuse võimalus on otseselt seotud ravi alustamise ajastusega, seega peaks suhtumine diagnoosimisse olema kõige tõsisem.

Vajalikud on järgmised diagnostilised meetodid:

• igakuine enesekontroll (palpatsioonitest);
• kontrollige arstiga kord kvartalis;
• Ultraheli iga kuue kuu tagant;
• MRI igal aastal.

Mammograafiat (röntgeni) ei soovitata teha enne 30. eluaastat, kuna kiirgusega kokkupuudet on kõige parem vältida noores eas. Kui kahtlustate rinnavähki, peate läbima järgmised testid:

FISH uurimismeetod

FISH-uuring (FISH-analüüs) on tsütogeneetiline meetod, mida kasutatakse membraanivalgu HER2 (inimese östrogeeniretseptor2) uurimiseks. FISH-uuringu läbiviimisel kasutatakse fluorestsentsvärviga märgistatud DNA-sonde. Need sondid sisestatakse soovitud DNA piirkondadesse ja on võimelised kvantifitseerima HER2 amplifikatsiooni astet. Kuna uuring viiakse läbi aja jooksul ja geenide jagunemine jätkub, on võimalik hinnata HER2 geeni koopiate arvu ja normaalselt jaguneva piirkonna koopiate arvu suhet. Kui see on suurem või võrdne 2-ga, loetakse tulemus HER2-positiivseks.

FISH-analüüs mängib vähi prognoosimisel ja ravipõhimõtete valikul üliolulist rolli. Seega esineb selle valgu amplifikatsiooni või aktiivsuse suurenemist 30% vähijuhtudest ja see nõuab spetsiaalseid ravimeetodeid, mille eesmärk on selle funktsiooni pärssimine. Normaalsetes tingimustes kontrollib HER2 rakkude kasvu, jagunemist ja eneseparanemist. Vähi korral toodab see valk liiga palju membraaniretseptoreid ja juhendab rakke kontrollimatult jagunema. Nii muutub rakk vähiks.

Kui FISH-testi tulemus on positiivne, määratakse HER2 pärssimisele suunatud ravi. Peamine ravim on tänapäeval Herceptin. Kui seda testi ei tehta või selle tulemusi eiratakse, on ravi valik vale ja vähk areneb lõppstaadiumisse. Lisaks on selline vähk arengus agressiivsem kui HER2-negatiivne vähk.

Immunohistokeemiline analüüs tehakse koos FISH analüüsiga. See on ka geenimeetod HER2 valgu uurimiseks, kuid immunohistokeemilise analüüsi puhul tuvastatakse HER2 valgu kogus mitte rakus, vaid konkreetses proovis.

See erineb kalameetodist maksumuse poolest, kuid väljund annab vähem informatiivseid tulemusi, mis sõltuvad uurijast, laborist ja kasutatud kriteeriumidest. HER2 valgu kogus määratakse uuritava proovi värvi järgi ja seda hinnatakse skaalal nullist kolmeni. Need kaks meetodit koos on patsiendi HER2 staatuse uurimise kullastandard.

Seega on rinnavähk vaatamata oma kuvandile üsna ravitav. Onkoloogide arsenalis on kõik meditsiini arenenud saavutused. Kõik need vahendid on kõige tavalisemale kodanikule üsna kättesaadavad.

Haiguse edukas tagajärjes on peamine rinnavähi õigeaegne testimine, õige ravimeetodi valimine ja varasem alustamine. Ärge heitke meelt, kui tulemusi pole, sest positiivne emotsionaalne taust mõjutab oluliselt ka haiguse kulgu.