STD diagnostika kirjeldus: ensüümiga seotud immunosorbentanalüüs (ELISA). Ensüümi immuunanalüüsi vereanalüüs Analüüsi tõlgendamine IFA meetodil

Saadaolevate diagnostikameetodite loetelu on viimastel aastakümnetel kiiresti laienenud, diagnostikud püüavad kombineerida kõigi varasemate testide eeliseid uutes meetodites, vabanedes kõigist nende varasematest puudustest.

Viimasel ajal on diagnostiliste protseduuride nimekirjas üha enam ensüümiga seotud immunosorbentanalüüs – kaasaegne ja üsna uus test, mida tavainimene, kes ei tegele meditsiiniga, on vähe teada. Sellegipoolest kogub see tehnika kvalifitseeritud meditsiinitöötajate seas kiiresti oma poolehoidjaid. Võite proovida aru saada, mis see on ja millistel juhtudel seda kasutada, tutvudes selle funktsioonide ja põhiomadustega.

Ensüüm-immunoanalüüs on instrumentaalne laboritehnika, mis põhineb molekulaarsel "antigeen-antikeha" reaktsioonil, mis võimaldab tuvastada spetsiifilisi valke bioloogilistes materjalides (proovid uuringuteks). Sellised valgud võivad olla ensüümid, erinevad mikroorganismid (viirused, bakterid, seened), algloomad jne.

Pärast meetodi avastamist anti sellele nimi ELISA test, millel pole avastajate nimedega midagi pistmist, vaid see on inglise keeles täisnimetuse lühend – ensüüm-linked immunosorbent assay. Seda nime kasutavad arstid üle maailma, mõned venekeelsete maade arstid nimetavad seda tüüpi uuringuid ka nii.

Meetodi põhiprintsiip on molekulaarne "antigeen-antikeha" reaktsioon.

Antigeen on mis tahes võõrmolekul, mis siseneb inimkehasse haigust põhjustava mikroobi osana. Antigeenid on tavaliselt valgumolekulid. Lisaks mikroorganismidele võivad sellised "võõrad" olla võõrad vererakud, mis ei vasta rühmale ega Rh-faktorile.

Vastuseks sellise antigeeni sisenemisele kehasse käivitatakse immuunreaktsioon, mille eesmärk on kaitsta võõrmolekulide eest. See tekib immuunsüsteemi spetsiaalsete ainete - antikehade (immunoglobuliinide) sünteesi tõttu. Iga antikeha sobib ainult konkreetse antigeeni jaoks ja neutraliseerib patogeense "võõra", seondudes sellega üheks kompleksiks. Just sellise seondumise protsessi nimetatakse "antigeen-antikeha" reaktsiooniks.

Antikehade tüübid

Kõik antikehad (immunoglobuliinid) jagunevad 5 tüüpi, sõltuvalt sellest, millises immuunvastuse etapis need ilmnevad:

ELISA diagnostika jaoks on kõige sagedamini olulised immunoglobuliinide IgG, IgM ja IgA tasemed. Nende tiitrite järgi saate teada, kas inimene on seda haigust põdenud või hiljuti nakatunud, kas tal on välja kujunenud immuunsus või kas tema keha on patoloogia vastu kaitsetu.

Ensüümi immuunanalüüsi eelised ja puudused

Hetkel on ELISA üks täpsemaid ja tundlikumaid meetodeid. Selle on vastu võtnud erinevate meditsiinivaldkondade spetsialistid ja see laiendab jätkuvalt selle rakendusala.

Meetodi eelised

  • Saadud andmete kõrge täpsus.
  • Tundlikkus (võimaldab tuvastada vajaliku aine isegi patogeeni minimaalse esinemise korral proovis).
  • Diagnoosimise võimalus esimestel haiguspäevadel või peiteperioodil.
  • Andmete kogumise kiirus võrreldes teiste sarnase täpsusega meetoditega.
  • Protsessi kõrge automatiseeritus ja minimaalne inimeste osalus, mis vähendab teostaja viga.
  • Andmete saamine patoloogilise protsessi staadiumi ja valitud ravi efektiivsuse kohta.
  • Materjali kogumisel valutu ja minimaalselt invasiivne.

Meetodi puudused

  • Enamikul juhtudel võimaldab see määrata organismi reaktsiooni patogeensele ainele, mitte patogeenile endale.
  • Enne testi tegemist peab olema kahtlustatav haigus täpselt teada, kuna test on väga spetsiifiline.
  • Valenäitajate tõenäosus, mis on põhjustatud tehnilistest probleemidest, ravimite võtmisest, mitme kroonilise haiguse või ainevahetushäirete samaaegsest esinemisest patsiendi kehas.
  • Tulemusi peaks tõlgendama ainult kõrgelt kvalifitseeritud spetsialist, kuna saadud andmete tõlgendamiseks on vajalik eriväljaõpe ja suur hulk meditsiinilisi teadmisi teatud valdkonnas.
  • ELISA on üsna haruldane test, mistõttu seda ei tehta kõigis diagnostikalaborites.
  • Meetod on üsna kallis, kuna lisaks reagentidele peab laboris olema arvukalt kalleid seadmeid ja spetsiaalsetes instituutides toodetud antigeenide proove.

Millistel juhtudel kasutatakse ensüümi immuunanalüüsi?

Ensüümi immuunanalüüsi näidustuste täielik loetelu on väga lai, see hõlmab peaaegu kõiki meditsiiniharusid.

Kõige sagedamini kasutatakse ELISA-d järgmistel eesmärkidel:

  • nakkushaiguste avastamine;
  • sugulisel teel levivate haiguste diagnoosimine;
  • immuunseisundi või üksikute autoimmuunhaiguste määramine;
  • kasvaja markerite tuvastamine;
  • hormoonide määramine.

Nakkus- ja viirushaiguste korral võimaldab tehnika tuvastada järgmisi patoloogiaid:

Lisaks võimaldab ELISA kiiresti ja tõhusalt määrata infarkti seisundit, hinnata organismi reproduktiivpotentsiaali, tuvastada allergiaid, nende allikaid jne.

Immunoensüümitehnikat kasutatakse kliiniliste uuringute läbiviimiseks uute ravimite väljatöötamisel ja nende mõju hindamisel inimorganismile.

Proovide tüübid ja nende uurimistööks valimise meetodid

Ensüümi immuunanalüüsi uuritavaks materjaliks on enamasti veri, mis võetakse patsiendi antecubitaalveenist. Proovide võtmine toimub tühja kõhuga, peamiselt hommikul. Pärast proovide võtmist eraldatakse need moodustunud rakud, mis segavad uurimistööd, ja eemaldatakse verest, jättes alles ainult seerumi.

Urogenitaalinfektsioonide diagnoosimisel tekib materjalist sageli määrdumine suguelundite limaskestadelt, kusiti või emakakaela lima, pärasoolest võetud proovid, kubemepiirkonna erosioonide või haavandite kraapimine ja mujalt kehaosadest. Tampoonid võib võtta nii suuõõnest kui ka ninaneelust.

Mõnikord kasutatakse amnionivedeliku seisundi määramiseks raseduse ajal sünnitusabi ja günekoloogia praktikas ensüümi immuunanalüüsi. Sel juhul saab prooviks lootevesi. Selleks võetakse lootekotti pika nõelaga torgates väike kogus vedelikku. Kõik manipulatsioonid tehakse võimalike riskide minimeerimiseks steriilsete instrumentidega.

Sageli muutub materjal tserebrospinaalseks või seroosseks vedelikuks. See toimub kohaliku anesteesiaga, mida manustatakse süstimise teel.

Uuringule saatev spetsialist peaks selgitama, mis tüüpi materjale on vaja ensüümi immuunanalüüsiks. Sageli võetakse korraga mitut tüüpi või erinevatest kohtadest proove. Seda tüüpi uuringuteks saatekirja väljastav arst peaks patsiendile rääkima ka ettevalmistustest biomaterjali loovutamiseks.

Ettevalmistus ensüümi immuunanalüüsiks

Ensüümi immuunanalüüsi järgselt saadud andmete täpsuse suurendamiseks peaks materjali valimise ettevalmistamine olema järgmine:

  • 10 päeva enne uuringut välistage antibiootikumid, viirusevastased ja seenevastased ravimid;
  • päeva jooksul on vaja välistada alkohol, suitsetamine ja narkootiliste ainete võtmine;
  • samal perioodil on vaja vältida füüsilist ülepinget;
  • Hoiatage väljakirjutajat kõigi ravimite eest, mida patsient võtab;
  • Teavitage oma arsti, kui olete rase või kahtlustate rasedust.

Parim on, kui analüüsimaterjalid kogutakse hommikul tühja kõhuga.

Kui diagnoosi eesmärk on määrata hormonaalset taset, siis on oluline jälgida, et olete eelmisel päeval rahulik ja vältida närvipinget. Naiste jaoks määrab vere loovutamise hormoonide jaoks selgelt igakuise tsükli periood, mida arst arutab kohtumise ajal.

2-3 päeva enne proovide võtmist peate menüüst välja jätma praetud ja rasvased toidud ning enne hepatiidi testimist ärge sööge tsitrusvilju ega muid oranže või kollaseid puu- ja köögivilju.

Ensüümi immuunanalüüsi tulemuste tõlgendamine

Kvalitatiivse uuringu tulemust tähistavad tavaliselt märgid “+” (tuvastatud) või “-” (ei leitud).

Teatud immunoglobuliinirühmade olemasolu või puudumise põhjal võib teha järgmised järeldused:

  • JgM (-), JgG (-), JgA (-) - immuunsus haiguse suhtes puudub täielikult (organism pole seda tüüpi antigeeniga varem kokku puutunud);
  • JgM (-), JgG (+), JgA (-) - selle antigeeni või vaktsiiniga oli varem kokkupõrge;
  • JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) - äge patoloogiline protsess (tõenäoliselt esmane);
  • JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) - krooniline protsess;
  • JgM (+), JgG (+), JgA (+) - retsidiiv;
  • JgM (-) - taastumise etapp.

Kvantitatiivsetel väärtustel on suur teabekoormus, kuid neid saab tõlgendada ainult raviarst, lähtudes varasematest näidustustest, patsiendi vanusest ja iga konkreetse haiguse normidest. Sel põhjusel ei saa te tulemusi ise hinnata.

Kui kaua peate tulemusi ootama?

Sellel tehnikal on palju variante, sõltuvalt sellest, millest määratakse andmete kogumise periood. ELISA diagnostika keskmine kestus on 4-6 tundi, mis võimaldab tulemusi anda juba järgmisel päeval.

Pikimatel meetoditel kulub näiteks HIV-nakkuse korral kuni 10 päeva.

Kiireloomulise vajaduse korral on võimalik kasutada kiirmeetodeid, mille puhul saadakse vastus 1-2 tunni jooksul.

Kust saab ELISA testi teha?

Kuna seda tüüpi diagnostika seadmed on üsna kallid, ei saa kõik laborid seda osta. Lisaks on spetsiifilisi antigeene sisaldavatel testidel piiratud säilivusaeg (tavaliselt umbes 1 aasta) ja seetõttu tuleb neid pidevalt uuendada.

Nendel põhjustel ei ole riiklikes meditsiiniasutustes alati ELISA laboreid. Kõige sagedamini on vaja ühendust võtta suurte erameditsiini- või suurte diagnostikakeskustega.

ELISA testi läbiviimiseks peab laboril olema erilitsents ning töötajad ja laborandid peavad läbima eriväljaõppe.

Kõige sagedamini soovitab konkreetset diagnostikakeskust või laborit arst, kes suunab patsiendi uuringutele.

Ensüümi immuunanalüüsi maksumus

Selle uuringu hind sõltub riigi piirkonnast ja teenust osutava kliiniku tasemest. Moskvas algab ühe antigeeni määramise miinimumhind 700 rublast. Kui on vaja tuvastada mitu immunoglobuliini korraga, liidetakse hind kokku.

Kiireloomulise analüüsi korral suureneb maksumus 150-200 rubla võrra. iga antigeeni kohta.

Vaatamata üsna kõrgele hinnale võimaldab ensüümimmuunanalüüs muuta patsiendi läbivaatuse võimalikult informatiivseks ja kiireks, mis vähendab aega enne ravi algust ja võimaldab inimese seisundit kiiremini stabiliseerida.

See video esitleb filmi "Ensüümide immuunanalüüsi alused".

Tänu kaasaegse meditsiini arengule ei pea arst diagnoosi panemisel enam keskenduma haiguste kaudsetele ilmingutele ega läbi viima mitmeastmelisi laboriuuringuid. Piisab ühe analüüsi läbiviimisest, mis kinnitab või lükkab ümber väidetava esialgse diagnoosi.

See meetod on ensüümiga seotud immunosorbentanalüüs (ELISA) - see uuring võimaldab tuvastada erinevatele patoloogiatele iseloomulikke spetsiifilisi antikehi ja antigeene, mis kiirendab oluliselt diagnoosi.

ELISA analüüs on laboratoorne analüüs (meetod), mis aitab kindlaks teha teatud viirusega võitlevate antikehade olemasolu või puudumist organismis ja nende kogust.

Uuringu aluseks on loodusliku reaktsiooni antigeen (organismile kahjulik objekt) - antikeha (kahjulikke esemeid hävitav valk), mis võimaldab tuvastada erinevate viiruste ja bakterite esinemist.

ELISA on organismi loomulik immuunvastus – antikeha interaktsioon vastava antigeeniga. Niisiis lisatakse ELISA käigus antigeenid või antikehad ükshaaval koos materjaliga katseklaasi, mille järel määratakse saadud antigeen-antikeha komplekside kontsentratsioon.

Kui tekivad vasted, tekivad immuunkompleksid, seejärel toimub värvaine ensümaatiline reaktsioon kombineeritud molekuliga. Tänu värvimuutusele ensümaatilise näidustuse ajal tuvastatakse haigus pärast määratud ühendi taseme uurimist.

Immunoglobuliinide tüübid

Inimese immunoglobuliinid jagunevad mitmeks klassiks, mis erinevad üksteisest raskete ahelate (H-ahela) omaduste, struktuuri ja antigeensete omaduste poolest. Kõigil imetajatel, sealhulgas inimestel, on viis H-ahelat, mis määravad immunoglobuliinide kuuluvuse vastavasse klassi: G, M, A, D, E.

Iga klass erineb üksteisest bioloogiliste omaduste ja antigeenide sidumisvõime ning molekuliga ühenduse kiiruse ja tugevuse poolest.

Iga immunoglobuliini (Ig) funktsioonid on erinevad:

Kogus kehas Funktsioonid Poolväärtusaeg (päevades) Tähendus
G70% Moodustage vastsündinul passiivne immuunsus;

vajalik immuunvastuse jaoks

parandada fagotsütoosi,

21-24 pakkuda pikaajalist humoraalset immuunsust nakkushaiguste vastu
M5-10% vajalik fagotsütoosi aktiveerimiseks,

on võimeline siduma 5 antigeeni molekuli,

5 Annab esmase immuunvastuse
A10-15 Neutraliseerib toksiine ja viirusi

vajalik varajase immuunsuse moodustamiseks

Immunoglobuliinide tekkimine toimub mööda omapärast "ahelat" - lgM lgG, nii reageerib keha antigeeni ilmumisele kehas. Laboratoorse diagnostika käigus hinnatakse kolme peamise immunoglobuliini - G, M, A kontsentratsiooni.

Näidustused immunoglobuliinide testimiseks

ELISA analüüs muutub iga aastaga üha populaarsemaks.

Selline uuring kiirendab diagnoosimist ja see on väga oluline selliste patoloogiate raviks nagu:

  • viiruslik hepatiit;
  • HIV-nakkus;
  • tsütomegaloviirus,
  • Epsteini-Barri viirus,
  • herpesviirus,
  • punetised,
  • tuberkuloos,
  • salmonelloos,
  • düsenteeria,
  • puukentsefaliit,
  • Helicobacter bakterid,
  • borrelioos,
  • teetanus,
  • süüfilis,
  • difteeria,
  • leptospiroos,
  • klamüüdia,
  • ureaplasmoos,
  • mükoplasmoos,
  • läkaköha.
  • lamedad ussid
  • ümarussid
  • histoolsed amööbid,
  • maks väriseb,
  • Giardia,
  • toksoplasma,
  • trichinella,
  • juhus,
  • tsestodoosid.

ELISA on ainulaadne autoimmuunpatoloogiate ja pahaloomuliste kasvajate marker.

Testiks valmistumine

Uuringu ettevalmistamisel peaksite järgima järgmisi reegleid:

Arstid soovitavad järgida ka spetsiaalset dieeti - välistada rasvased ja praetud toidud ning kui tehakse hepatiidi test, siis on vaja mitte süüa apelsini köögivilju ja eriti tsitrusvilju. Verd tuleks loovutada hommikul tühja kõhuga.

Valepositiivne analüüs ilmneb täitmata soovituste, eriti rasvase toidu tarbimise tõttu, mis põhjustab liiga kõrge triglütseriidide kontsentratsiooni plasmas, mis põhjustab ELISA juhtivuse vähenemise.

Proovide kogumise protseduur

Uuritava materjalina võib kasutada täisverd, seerumit või venoosset vereplasmat. Materjal kogutakse, tavaliselt ulnaarveenist, kasutades ühekordset nõela ja vaakumtoru, vaja on 5-10 ml verd.

Tulemuse täpsuse tagamiseks on oluline kinni pidada õigest proovivõtutehnikast - veresoone enda ja ümbritsevate kudede punktsioon tuleb läbi viia ühe manipulatsiooniga, seetõttu kasutatakse lühikest suure läbimõõduga nõela, et veeni vastassein ei ole vigastatud ja punased verelibled ei ole kahjustatud.

Samuti on punaste vereliblede terviklikkuse säilitamiseks vajalik, et veri voolaks mööda katseklaasi seinu alla.

Materjali ladustamisel tuleks vältida võimalikku ioniseerumist, lisaks ei tohi materjal kokku puutuda desinfitseerimisvahendite jääkidega, mistõttu kasutatakse ainult ühekordset plasttoru, millele on märgitud patsiendi nimi, materjali kohaletoimetamise kuupäev ja kellaaeg.

Kui katsematerjali lühiajaline säilitamine on vajalik, siis kasutatakse külmkambrit, mille temperatuur on 2-4 o C, pikema säilitamise korral külmutatakse materjal temperatuuril -20 o C.

Kuidas analüüsi tehakse

Pärast uuritava materjali ettevalmistamist alustab laborant vajalikke manipuleerimisi. Sel eesmärgil kasutatakse mitmeid spetsiaalseid antigeenide komplekte, millel on võime provotseerida organismi reaktsiooni ärritajale, need on mitmesugused infektsioonid, hormoonid ja allergeenid.

Eeldatav antigeeni-antikeha reaktsioon näeb välja umbes selline:

  • Esmane reaktsioon on tuvastatud Ig (Ab) ja puhastatud patogeeni antigeen (Ag).
  • Tekkivate immuunkomplekside tuvastamiseks järgneb uus immunoloogiline reaktsioon, kus antigeeniks on seotud spetsiifiline Ig ja selle antikehaks konjugaat Ig (Ab).
  • Viimane etapp on ensümaatiline reaktsioon koos konjugaadi katalüsaatormolekuliga. Substraadiks on kromogeen (mittevärviline), mis muutub reaktsiooni käigus värviliseks ja värvuse intensiivsus määratakse proovis sisalduva immunoglobuliini kvantitatiivse indikaatori järgi.

Hetkel on välja töötatud palju erinevaid ELISA võimalusi, kuid selget klassifikatsiooni nende kohta pole. Tavaliselt käsitletakse meetodeid nende jagunemise alusel hetero- ja homogeenseteks – kõik analüüsifaasid toimuvad tahket faasi kasutades või ainult lahuse kasutamisel.

Kaasaegsetes kliinilistes diagnostikalaborites kasutatakse tavaliselt heterogeenset (tahkefaasilist) ELISA-d, mille puhul tahke faas tähendab antigeenide või antikehade imendumist spetsiaalsete süvendite tahkel pinnal, mis paiknevad polüstüreenist mikroplaadil, meetod jaguneb otseseks ja kaudseks ELISA-ks.

Otsese ELISA abil fikseeritakse sisestatud antigeen inkubatsiooniprotsessi käigus tühjade süvendite pinnale, selleks asetatakse uuritav materjal 20-25 minutiks puhastesse süvenditesse, see on vajalik antigeeni kinnitumiseks nende pinnale. Pärast seda lisatakse vajalik antikeha. Järgmiseks jääb materjal teatud ajaks sidemete moodustamiseks.

Antikehi lisatakse alati liiga palju, nii et isegi kui need on olemas, jäävad sidumata antigeenid proovi ja kui antigeene pole üldse, siis ei teki ka seoseid. “Liigsete” antikehade eemaldamiseks viiakse läbi dekanteerimine, mille järel jäävad alles vaid need antikehad, mis on loonud antigeeniga sideme.

Sellele järgneb ensümaatiline reaktsioon – süvenditesse lahuse lisamine ensüümiga, mille järel tekkivad sidemed värvitakse.

Kaudse ELISA meetodi puhul kasutatakse antikehi, mis on eelnevalt kombineeritud ensümaatilise reaktsiooni substraadiga; sellisel juhul toimub antikehade seos antigeeniga inkubatsiooniprotsessi käigus, misjärel toimub süvendite pinnal olevate sidemete mobiliseerumine ning pärast lisatud konjugaat ja substraat-kromogeenne reagent värvivad reaktsiooni.

Seega ei ole kaudse ja otsese meetodi peamine erinevus mitte materjali nakkumine puhaste kaevude pinnale, vaid seondumine plaadile immobiliseeritud antigeeniga.

Reaktsioon peatatakse spetsiaalsete seadmete abil, seejärel töödeldakse iga süvendiga fotomeetrilist protsessi, millele järgneb eelnevalt läbiviidud kontrollproovidega saadud tulemuste võrdlev kirjeldus.

Kui proovis tuvastatakse optilise tiheduse suurenemine, siis on ka spetsiifiliste antikehade kontsentratsioon testitulemuses ülehinnatud.

Millal analüüs valmis saab?

Uuring ei võta palju aega, vereproovi võtmisest kuni tulemuse saamiseni kulub olenevalt diagnostilistest meetmetest 1 kuni 10 päeva.

Katsetulemused ja nende tõlgendamine

Patsiendile saabunud diagnostilise tulemuse vorm näitab teatud immunoglobuliinide klasside negatiivset või positiivset tulemust, samuti on näidatud erinevate antikehade klasside kvantitatiivne näitaja.

Tulemusi on võimalik tõlgendada mitmel erineval viisil:

  1. IgM (+) (IgA, IgG ei määratud) – paranemisprotsess;
  2. IgM (-);IgG (+), IgA (+) – krooniline nakkuspatoloogia;
  3. IgM, IgG, IgA (kõik tähendusega) – infektsioonide kaitsemehhanismide puudumine;
  4. IgG (+/-) ja IgA (+/-), IgM (+) – äge protsess;
  5. IgM (-), IgA (-), IgG (+) – postinfektsioosne immuunsus;
  6. IgM, IgG, IgA (+) – krooniline patoloogia ägedas staadiumis.

Näiteks kui tuvastati IgG ja IgM, võib patsiendil olla üks järgmistest haigustest:

  • viiruslik hepatiit;
  • tsütomegaloviirus;
  • herpes;
  • tuulerõuged;
  • klamüüdia;
  • stafülokoki või streptokoki infektsioon.

Ensüümi immuunanalüüs on sageli ette nähtud hormonaalseteks uuringuteks; normid on näidatud tabelis:

Hormooni nimi Põrand Norm
1 türeoglobuliinm/fKuni 70 RÜ/ml
2 türoksiinim/f64-146 nmol/l
3 trijodotüroniinm/f1,8-2,8 nmol/l
4 Vaba türoksiinim/f11-25 pmol/l
5 Vaba triiodritoniinm/f4,49-9,3 pmol/l
6 Testosteroon, dehüdrotestosteroonJA0,5-10 mU/l

ELISA analüüs on diagnostiline test, mis võimaldab hinnata onkoloogiliste patoloogiate tekke tõenäosust. Kuid tulemuste tõlgendamist teostab ainult raviarst.

Testitulemuste tähendus

ELISA sobib erinevate sugulisel teel levivate infektsioonide vormide, sealhulgas süüfilise tuvastamiseks ning seda kasutatakse sageli rasedate naiste sõeluuringuks.

Tänu sellele uuringule saate teada, kui kaua aega tagasi nakatumine toimus, ja haiguse staadiumi uuringu ajal:

  • immunoglobuliinid M näitavad haiguse kestust;
  • IgA - patsient nakatus rohkem kui 30 päeva tagasi;
  • IgG tuvastatakse haiguste "tippajal" või hetkel, kui ravi on hiljuti lõppenud.

Uuringu käigus jäävad negatiivse indikaatoriga plaadi süvendid värvituks ja positiivsed muutuvad erkkollaseks. Kui positiivsete aukude värvus ei ühti kontrollproovi värviga, loetakse tulemus küsitavaks ja vajalik on kordustest.

Ensüüm-immunoanalüüs on esimene samm HIV-i diagnoosimisel. Analüüsi ei saa teha kohe pärast nakatumise kahtlust, tuleb oodata inkubatsiooniperioodi lõpuni (14 päeva kuni 6 kuud).

Analüüsi käigus määratakse HIV-1 ja HIV-2 antikehad, otsitakse G-klassi antikehi, mis ilmnevad tavaliselt hilisemas staadiumis ning A- ja M-klassi antikehad tuvastatakse varases staadiumis (inkubatsiooniperioodil).

  • kui esimene analüüs annab positiivse tulemuse, siis kontrollitakse verd uuesti teise laboritehniku ​​poolt;
  • korduv positiivne tulemus eeldab materjali uuesti võtmist,
  • Kui tulemust korratakse, määratakse patsiendile immunoblotanalüüs.

Lõplik järeldus HIV-nakkuse olemasolu kohta tehakse alles pärast immunoblotanalüüsi tulemust.

ELISA-d kasutatakse ka tuberkuloosi diagnostilise testina, kuid isegi kui patsiendil on selle patoloogia vastu antikehad, ei kinnita see alati tuberkuloosi esinemist, seetõttu kasutatakse ELISA-d sageli selgitava meetodina või latentse kopsuvälise vormi diagnoosimiseks.

IgG - krooniline invasiooni staadium

IgA – infektsioon tekkis rohkem kui 30 päeva tagasi
IgG - invasioon on ägedas faasis
IgG – kinnitab diagnoosi ja näitab ravi efektiivsust

Analüüsi plussid ja miinused

ELISA-l on palju eeliseid, mis selgitab selle populaarsust arstide ja patsientide seas. Need on järgmised:

  • tulemuste kõrge täpsus,
  • taskukohane hind,
  • kiire tulemus,
  • haiguse staadiumi tuvastamine,
  • haiguse kontroll aja jooksul.

Kuid koos eelistega on ka puudus - harvadel juhtudel võib analüüs olla valepositiivne või valenegatiivne.

Miks tulemus võib olla ebausaldusväärne

Sellest tulenevad vead võivad tekkida tehniliste rikkumiste tõttu, samuti võib analüüs olla ebausaldusväärne inimestel, kellel on teatud kroonilised haigused (reumatoidfaktor), mida iseloomustab spetsiifiliste antikehade tootmine.

Lõpptulemust mõjutavad ka patsiendi ravimite tarbimine ja ainevahetushäired. Nendel põhjustel on HIV-i ja onkopatoloogia positiivse tulemuse saamiseks vaja korduvaid proove.

Uuringu maksumus

ELISA hind varieerub sõltuvalt diagnoosimise suunast (RUB):

  • hepatiit 250 -900;
  • viirused – 250 -1000;
  • HIV – 250-350;
  • helmintiinfestatsioonid – 280 – 900;
  • süüfilis -150-250;
  • seeninfektsioonid 400-500.

Artikli vorming: Lozinsky Oleg

Video ELISA analüüsi kohta

Kuidas ELISA analüüsi tehakse:

Seotud immunosorbentanalüüs(või lühidalt ELISA) on laboriuuring, mis aitab panna täpset diagnoosi, tuvastada varjatud haigusi, määrata eelsoodumust teatud haigustele ning jälgida ka määratud ravi efektiivsust. Uuringu käigus tuvastatakse patsiendi vereseerumis spetsiifilistele patogeenidele iseloomulikud antigeenid ja nende vastased antikehad.

Mis mõte sellel on

ELISA põhimõtte mõistmiseks on vaja meeles pidada, kuidas keha immuunsüsteem töötab, mis on "antigeen" ja "antikehad" ning milliseid funktsioone nad täidavad.

Antigeen on molekul, mis kannab raku kohta teatud teavet. Kui kehasse satub võõrantigeen, seostuvad antikehad (või immunoglobuliinid (Ig) vastuseks võõrorganismi ilmumisele organismi sellega ja tunnevad ära, kas tegemist on oma või võõra antigeeniga. „Võõra“ saamisel signaali, hakkavad antikehad potentsiaalselt ohtlikku objekti hävitama. Seda “antigeeni” interaktsiooni -antikeha” nimetatakse immuunkompleks. ELISA meetod põhineb sellel.

Näidustused

Analüüsi kasutatakse laialdaselt erinevate haiguste diagnoosimiseks. Ja eriti väärtuslik on see, et see uuring diagnoosib üsna täpselt haigusi, mis esinevad organismis latentselt, ilma sümptomiteta.

Selle abiga saate tuvastada:

  • sugulisel teel levivad nakkushaigused (klamüüdia, ureaplasmoos, mükoplasmoos, süüfilis, herpes, HIV jne);
  • toksoplasmoos, tuberkuloos, hepatiit, leetrid jne;
  • autoimmuunprobleemid;
  • onkoloogia;
  • suguhormoonid;
  • kilpnäärme hormoonid;
  • allergiad.

ELISA abil saab tuvastada isegi südamehaiguste markereid. Lisaks on see ette nähtud ravikuuri efektiivsuse hindamiseks, samuti enne teatud tüüpi kirurgilisi sekkumisi.

Ettevalmistus

Veri uurimiseks võetakse veenist tühja kõhuga, eelistatavalt hommikul.

Eelmisel päeval peaksite hoiduma alkoholist, magusatest jookidest, kohvist ja suurest õhtusöögist. Lisaks võib teatud ravimite kasutamine mõjutada indikaatorite tulemusi, mistõttu on vajalik konsulteerimine arstiga.

Suitsetamisest tuleks loobuda 4 tundi enne protseduuri.

Ensüümi immuunanalüüsi vereanalüüs ON CLINICUS

Rahvusvaheline meditsiinikeskus ON CLINIC on varustatud oma laboriga, millel on rahvusvaheline kvaliteedikontrolli sertifikaat. Siin viivad kogenud ja kvalifitseeritud spetsialistid läbi erinevat tüüpi analüüse (rohkem kui 1000 eset).

Selle meetodi eeliste hulgas võib esile tõsta asjaolu, et see tuvastab selle juba haiguse arengu varases staadiumis. Testi tundlikkus on 90%. Uuring näitab täpselt nakkusprotsessi dünaamikat, mis võimaldab spetsialistil jälgida ravi efektiivsust. Kogu protsess on täielikult automatiseeritud, mis välistab nn "inimfaktori" mõju.

Lisaks võimaldavad ülitäpsed seadmed saada usaldusväärseid uurimistulemusi minimaalselt lühikese aja jooksul.

Saate tulemused dešifreerida samal päeval koos arstiga. Nende põhjal valib arst teile sobiva ravitaktika.

KLIINIKUS: Rohkem kui 25 tööaasta jooksul on meid valinud miljonid inimesed. Liitu meiega!

Arstid

Administraator võtab teiega kohtumise kinnitamiseks ühendust. IMC "ON CLINIC" tagab teie taotluse täieliku konfidentsiaalsuse.

MLC hemostaasilabor kasutab uut ülitundlikku ELISA meetodit – ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay), heterogeenset tahkefaasilist immunoanalüüsi. Uuringu käigus tehakse kindlaks erinevate haiguste patogeenide antikehade olemasolu patsiendi veres.

ELISA analüüsi maksumus*


Miks te võtate ensüümi immuunanalüüsi?

ELISA-d kasutatakse paljudes meditsiinivaldkondades. Südame isheemiatõve, ateroskleroosi ja hüpertensiooniga inimestel tuvastatakse antikehad hemostaatilise süsteemi valkude – trombiini, a2 makroglobuliini ja antitrombiini 3 –, samuti hüübimissüsteemi peptiidsete bioregulaatorite – angeotensiin 2 ja bradükiniini – vastu.

ELISA on tõestanud oma efektiivsust sünnieelses diagnoosimises ja viljakuse määramisel – see on AFP test (seljaajupõletiku diagnoos, loote trisoomia), steroidhormoonide estadiool, östriool, progesteroon testid.

Raseduse, viljatuse ja tromboflebiidi mitmekordseid tüsistusi provotseerib raske autoimmuunhaigus - antifosfolipiidide sündroom. APS-i diagnoosimine Naistearstikeskuses toimub ka ensüümimmuunanalüüsi abil: määratakse kardiolipiini, b2-glükoproteiini, protrombiini ja anneksiin 5 antikehad.