FISH er en studie for differensialdiagnose. Fluorescens in situ hybridisering Siste diagnostiske metoder

Denne metoden brukes i dag for å diagnostisere visse typer kreftsvulster, siden den ondartede degenerasjonen av en celle er forårsaket av endringer i dens genom. Følgelig, etter å ha oppdaget karakteristiske abnormiteter i gener, er det mulig å klassifisere denne cellen som kreft med høy sikkerhet. I tillegg brukes FISH-testen for å bekrefte en allerede etablert diagnose, samt for å innhente tilleggsdata om muligheten for å bruke spesifikke cellegiftmedisiner med det formål å gjennomføre cellegift for brystkreft og avklare prognosen for sykdommen.

Et godt eksempel på bruken av FISH-testen er når den brukes hos pasienter med brystkreft. Med denne teknikken undersøkes biopsivev for kopier av et gen kalt HER-2. Hvis dette genet er tilstede, betyr det at det er et stort antall HER2-reseptorer lokalisert på overflaten av cellene. De er følsomme for signaler som stimulerer utvikling og spredning av tumorelementer. I dette tilfellet åpner muligheten seg for effektiv bruk av trastuzumab - dette stoffet blokkerer aktiviteten til HER2-reseptorer, og hemmer derfor tumorvekst.

Hvordan utføres FISH-testen?

Disse avvikene i strukturen til kromosomer kommer i flere typer:
translokasjon - bevegelse av en del av kromosommaterialet til en ny posisjon innenfor samme eller et annet kromosom;
inversjon - rotasjon av en del av et kromosom innen 1800 uten separasjon fra hovedkroppen;
sletting - tap av et hvilket som helst kromosomområde;
duplisering er kopiering av en del av et kromosom, noe som fører til en økning i antall kopier av det samme genet i en celle.

Hver av disse lidelsene bærer visse diagnostiske tegn og informasjon. For eksempel kan translokasjoner indikere tilstedeværelsen av leukemi, lymfomer eller sarkomer, og tilstedeværelsen av genduplikasjoner bidrar til å foreskrive den mest effektive behandlingen.

Hva er fordelen med FISH-testen?

En annen fordel med FISH-testen er at den kan brukes på materiale som nylig er hentet fra pasienten. For standard cytogenetisk analyse er det nødvendig å først dyrke en cellekultur, det vil si la pasientens celler formere seg i laboratoriet. Denne prosessen tar ca. 2 uker, og ytterligere en uke brukes på å gjennomføre en vanlig test, mens resultatet av en FISH-test vil fås i løpet av få dager.

Den jevne utviklingen av medisinsk vitenskap fører gradvis til en reduksjon i kostnadene for FISH-testen og dens stadig mer utbredte inkludering i den daglige praksisen til onkologer.

Brystkreft er en farlig sykdom, statistisk sett først blant kreftsykdommer hos kvinner. Risikoen for å utvikle denne sykdommen øker hos alle kvinner over 40 år og kan skyldes flere andre faktorer. De mest sannsynlige årsakene til brystkreft inkluderer fedme, genetisk eller arvelig disposisjon, tidlig menstruasjonsstart og sen fullføring, hormonell eller strålebehandling.

I tillegg er risikoen for sykelighet økt hos kvinner med nullitet og kvinner som allerede har hatt kreft. Menn kan også få brystkreft.

Typer og metoder for diagnose

Den første fasen av diagnostisering av brystkreft er en rutineundersøkelse av en mammolog. Kvinner over 40 år bør gjennomgå slike undersøkelser minst en gang annethvert år. Legen utfører en visuell undersøkelse, palpasjon og mammografi av brystkjertlene. Visuelle tegn på utviklingen av sykdommen kan omfatte:

generell informasjon

Røntgen av brystet (mammografi) lar deg bestemme tilstedeværelsen, størrelsen og plasseringen av svulsten. For å øke nøyaktigheten av de oppnådde resultatene, brukes teknologien for å introdusere et kontrastmiddel. Hvis en svulst allerede er oppdaget, brukes metoden for pneumocystografi - fjerning av svulstvæske og innføring av luft i hulrommet. Hvis tilstedeværelsen av en svulst ikke er spesifisert, brukes dukografi - innføring av et kontrastmiddel i melkekanalene.

Disse metodene lar deg visualisere tilstedeværelsen av formasjoner i brystvevet.

Hvis tilstedeværelsen av en svulst også blir tydelig på mammografi, får pasienten en henvisning til et sett med diagnostiske tiltak:

Ved hjelp av en ultralyd kan legen skille en svulst fra en cyste og avklare plasseringen av formasjonen. Etter dette tas en vevsprøve fra den for biopsi. En biopsi lar deg finne ut hvilken type svulst: godartet eller ondartet, og også avgjøre om svulsten er hormonavhengig. Denne informasjonen lar legen bestemme en behandlingsstrategi, men gjør det ikke alltid mulig å bestemme stadiet. Ofte, selv med alle nødvendige diagnostiske tiltak, kan det bare bestemmes etter operasjonen.

Mekanisme for histologiske studier

En vevsbiopsi utføres både før og etter operasjonen. Prosedyren utføres etter at lokaliseringen av formasjonen er avklart.

En biopsi er prosessen med å fjerne et stykke vev, og studien kalles "histologisk undersøkelse" eller ganske enkelt "histologi".

En medisinsk arbeider bruker en spesiell nål for å fjerne en liten mengde vev fra svulsten, eller en svulst som allerede er fjernet fra pasientens kropp sendes til histologisk undersøkelse. Deretter blir vevsfragmentet spesielt farget og bearbeidet for å øke kontrasten og gjøre det lettere å studere. En spesialist undersøker seksjonen ved hjelp av et mikroskop og gir en mening om kvaliteten på svulstdannelsen. Mye i denne studien avhenger av oppmerksomheten og kvalifikasjonene til laboratorieteknikeren som gir konklusjonen.

En lignende studie er immunhistokjemi. Generelt kan det også kalles "histologi", fordi metoden er basert på studiet av vev, men immunhistokjemi er en mer avansert analysemetode. I denne studien er vevet også farget med spesielle reagenser, som ikke bare forbedrer visuell kontrast, men også kombinerer ("merke") med antistoffer på en spesiell måte, som gjør det mulig å avklare flere egenskaper ved svulsten. I dette tilfellet skjer reaksjonen mye raskere, noe som lar deg raskt få analyseresultater.

Immunhistokjemi gjør det ikke bare mulig å avklare typen svulst, men også å planlegge en pasientbehandlingsstrategi basert på å identifisere svulstvevets følsomhet for ulike typer terapeutiske effekter. I tillegg er denne studien så automatisert som mulig, noe som lar oss minimere sannsynligheten for diagnostiske feil på grunn av den menneskelige faktoren.

Det er også moderne diagnostiske tiltak som gjør det mulig å oppdage tilstedeværelsen av en svulst i kroppen: dette er en spektral blodprøve, immunologisk (biokjemisk) analyse, FISH-test av tumorvev. En genetisk blodprøve lar enhver kvinne verifisere om hun har eller ikke har forutsetninger for brystkreft. CT og MR gjør det mulig å nøyaktig bestemme plasseringen av svulsten og overvåke dynamikken i utviklingen, vurdere strukturen til svulsten.

Hvordan oppdage kreft ved hjelp av en blodprøve?

En blodprøve foreskrives vanligvis av lege etter en ultralydundersøkelse. Det er situasjoner når en pasient på eget initiativ donerer blod til vindusmarkører eller genetisk analyse for å identifisere en disposisjon for brystkreft. I noen tilfeller kan en generell blodprøve være grunn til å kontakte onkologisk klinikk (sammen med palpasjon av en klump eller visuelle tegn på kreft).

Biokjemisk analyse

Blod som materiale for forskning gjør det mulig å utføre følgende diagnostiske tiltak:

Samtidig er det kun de to første analysene som kan kalles spesialiserte metoder for å bestemme kreft, hvorav den andre er mer et forebyggende tiltak enn et operasjonelt. To andre blodprøver utføres hovedsakelig før operasjonen for å bestemme kroppens tilstand og omfanget av prosessen. Men som allerede nevnt, hvis en klump føles i brystet og en generell blodprøve viser mer enn to negative diagnostiske koeffisienter, er dette en grunn til å konsultere en spesialist. Negative koeffisienter er indikatorer utenfor normen i visse parametere for blodsammensetning.

En biokjemisk blodprøve kan oppdage tilstedeværelsen av antistoffer mot tumorceller. Slike legemer kalles tumormarkører. Antall og type tumormarkører avhenger av kreftsvulstens spesifikasjoner (lokalisering) og utviklingsstadiet. Tumormarkører inkluderer:

Ved brystkreft vil den behandlende legen primært være interessert i tilstedeværelsen av tumormarkøren CA-15-3, siden dens tilstedeværelse i blodet tydelig indikerer brystkreft. Dekoding av resultatet tar i gjennomsnitt én dag. Biokjemisk analyse utføres flere ganger i løpet av sykdommen. Blod for dette tas fra en vene i første halvdel av dagen på tom mage. To uker før testen slutter pasienten å ta alle medisiner (for å bli bekreftet med behandlende lege). To dager før du donerer blod, bør du ikke drikke alkohol, fet eller stekt mat.

En time før prosedyren bør du ikke røyke, og det er tilrådelig å redusere følelsesmessig stress. Blod doneres vanligvis ikke for biokjemisk analyse umiddelbart etter stråling og fysioterapeutisk behandling.

Bestemmelse av genetiske faktorer

Før du snakker om genetisk blodtesting, er det verdt å understreke forskjellen mellom begrepene "genetisk" og "arvelig". Den genetiske faktoren til kreft er et bredere begrep som innebærer ikke bare tilstedeværelsen av slektninger med brystkreft, men også en spesifikk genmutasjon som øker risikoen for denne sykdommen.

Arvelighet innebærer en potensiell risiko for brystkreft basert på familiehistorie. Samtidig kan ikke bare kvinner, men også menn motta mutantgenet, men bæreren vil ikke nødvendigvis bli syk.

Enhver kvinne kan gjennomgå genetisk testing. Dette anbefales spesielt for de hvis direkte slektninger har hatt brystkreft. Før du donerer blod for analyse, bør pasienten snakke med en spesialist innen genetikk, som vil forklare nyansene ved å tyde resultatene. Det kreves ingen spesiell forberedelse fra pasienten før bloddonasjon.

Hvis du får et positivt resultat for BRCA-genmutasjonen, men i fravær av andre alarmerende symptomer, er det ingen grunn til panikk. Kvinner med mutasjoner i disse genene kan anbefales å gjennomgå regelmessig selvundersøkelse og fysiske undersøkelser som forebyggende tiltak. Etter 40 år er det fornuftig å tenke på å fjerne eggstokkene og brystene; yngre kvinner som ikke planlegger å få barn i fremtiden blir noen ganger anbefalt å ta prevensjonsmidler. Beslutningen om disse tiltakene ligger helt på kvinnens skuldre og krever en gjennomtenkt tilnærming og konsultasjon med leger.

De nyeste diagnostiske metodene

En spektral blodprøve avslører tilstedeværelsen av svulster i kroppen med en sannsynlighet på opptil 93%. Dette er en relativt billig diagnostisk metode, som er basert på bestråling av blodserum med det infrarøde spekteret og analyse av dets molekylære sammensetning.

Konklusjonen på en spektral blodprøve er gitt i henhold til «nærvær-fravær»-prinsippet og er rettet mot å identifisere de fleste typer ondartede svulster. Denne testen kan også bestemme stadiet av brystkreftutvikling. Resultatene er dechiffrert i laboratoriet og krever ikke en ekstra leges uttalelse.

For å donere blod for spektralanalyse, er det nødvendig å slutte å ta medisiner 2 måneder før prosedyren. Det må gå minst 3 måneder fra øyeblikket av røntgen eller annen bestråling, samt kjemoterapi. I tillegg skal kvinnen ikke være gravid eller ha menstruasjon på tidspunktet for blodprøvetaking. Blodprøvetaking skjer på tom mage i første halvdel av dagen. En spektral blodprøve tar i gjennomsnitt 12 virkedager.

En av de nyeste metodene for å diagnostisere kreft er den såkalte «fisketesten» (FISH, fluorescerende hybridisering). Effektiviteten er fortsatt under diskusjon; hovedspørsmålet om dens gjennomførbarhet er den kostbare forskningsprosedyren. Essensen av metoden er å merke cellefragmenter med en fluorescerende sammensetning og videre mikroskopisk undersøkelse av cellene. Ut fra hvilke deler av arvestoffet de merkede fragmentene er knyttet til, kan man forstå om pasienten har disposisjon for kreft og hvilke behandlingsmetoder som vil være aktuelle i et konkret tilfelle.

FISH-testen krever ikke helt modne celler, så den er mye raskere å utføre enn andre laboratorietester. I tillegg lar FISH-metoden deg tydeligere observere genetisk skade, noe som er umulig å gjøre med andre typer analyser. FISH-testen brukes oftest for å oppdage brystkreft, men den fungerer også for å oppdage flere andre typer kreft.

Ulempene med FISH-testen inkluderer, i tillegg til dens høye kostnad, dens manglende evne til å arbeide på enkelte kromosomregioner på grunn av taggenes spesifisitet. I tillegg ignorerer FISH-testen enkelte typer mutasjoner og brudd i den genetiske koden, noe som kan være en viktig utelatelse ved diagnostisering. Sammenlignende studier av FISH med den billigere IHC-testen viste ingen signifikant fordel ved å bestemme følsomheten til kreftceller for Herceptin. Imidlertid er FISH-testen for øyeblikket den raskeste blant svært nøyaktige metoder for å diagnostisere kreft.

FISH - Fluorescent in situ hybridiseringsteknikk ble utviklet på midten av 1980-tallet og brukes til å oppdage tilstedeværelse eller fravær av spesifikke DNA-sekvenser på kromosomer, samt alfa-satellitt-DNA lokalisert på sentromeren til kromosom 6, CEP6(6p11. 1-q11. 1).

Dette ga et betydelig skifte i diagnosen onkologiske sykdommer av melanocytisk opprinnelse på grunn av oppdagelsen av tumorantigener. Mot en ondartet bakgrunn bestemmes en mutasjon i tre antigener: CDK2NA (9p21), CDK4 (12q14) og CMM1(1p). I denne forbindelse er muligheten for objektiv differensialdiagnose, basert på å bestemme de genetiske egenskapene til melanocytiske hudsvulster, av stor betydning i tidlig diagnose av melanom og dets forløpere I kjernen med et normalt sett av de studerte gener og kromosom 6 , to RREB1-gener observeres, farget rødt, to MYB-gener, farget i gult, de to CCND1-genene i grønt, og de to sentromerene til kromosom 6 i blått. Fluorescerende tester brukes til diagnostiske formål.

Evaluering av reaksjonsresultatene: antall røde, gule, grønne og blå signaler i 30 kjerner av hver prøve telles, fire parametere av ulike varianter av genetiske lidelser identifiseres, hvor prøven genetisk tilsvarer melanom. For eksempel er en prøve konsistent med melanom hvis gjennomsnittlig antall CCND1-gen per kjerne er ≥2,5. Kopitallet til andre gener vurderes etter samme prinsipp. Et legemiddel anses som FISH-positivt hvis minst én av fire betingelser er oppfylt. Prøver der alle fire parameterne er under grenseverdiene regnes som FISH negative.

Bestemmelse av spesifikke DNA-sekvenser på kromosomer utføres på seksjoner av biopsier eller kirurgisk materiale. I praktisk implementering ser FISH-reaksjonen slik ut: materialet som studeres, som inneholder DNA i kjernene til melanocytter, behandles for å delvis ødelegge molekylet for å bryte den dobbelttrådete strukturen og derved lette tilgangen til ønsket region av genet. Prøver er klassifisert etter hvor de er festet til DNA-molekylet. Materialet for FISH-reaksjonen i klinisk praksis er parafinvevssnitt, utstryk og utskrifter.

FISH-reaksjonen lar deg oppdage endringer som har skjedd i DNA-molekylet som et resultat av en økning i antall genkopier, tap av gent, endringer i antall kromosomer og kvalitative endringer - bevegelsen av gen-loci begge i samme kromosom og mellom to kromosomer.

For å behandle dataene som er oppnådd ved bruk av FISH-reaksjonen og studere forholdet mellom kopiantallet av gener fra de tre studiegruppene, brukes Spearman-korrelasjonskoeffisienten.

Melanom er preget av en økning i kopiantall sammenlignet med nevus og dysplastisk nevus.

En enkel nevus, sammenlignet med en dysplastisk nevus, har færre abnormiteter i kopiantall (dvs. mer normale kopitall).

For å konstruere beslutningsregler som gjør det mulig å forutsi om en prøve tilhører en eller annen klasse (differensialdiagnose av enkle og dysplastiske nevi), brukes det matematiske apparatet til "beslutningstrær". Denne tilnærmingen har vist seg godt i praksis, og resultatene av å bruke denne metoden (i motsetning til mange andre metoder, for eksempel nevrale nettverk) kan tydelig tolkes for å konstruere beslutningsregler for å skille mellom enkle, dysplastiske nevi og melanom. De første dataene i alle tilfeller var kopinummeret til fire gener.

Oppgaven med å konstruere en beslutningsregel for differensialdiagnose er delt inn i flere stadier. På det første stadiet differensieres melanom og nevus, uten å ta hensyn til typen nevus. På neste trinn konstrueres en beslutningsregel for å skille enkle og dysplastiske nevi. Til slutt, på det siste stadiet, er det mulig å konstruere et "beslutningstre" for å bestemme graden av dysplasi av en dysplastisk nevus.

Denne inndelingen av oppgaven med å klassifisere nevi i underoppgaver gjør det mulig å oppnå høy nøyaktighet av spådommer på hvert trinn. Inndataene for å konstruere et "beslutningstre" er data om kopiantallet av fire gener for pasienter diagnostisert med melanom og pasienter diagnostisert med ikke-melanom (pasienter med forskjellige typer nevus - enkle og dysplastiske). For hver pasient er det data om genkopinummer for 30 celler.

Å dele problemet med å forutsi en diagnose i flere stadier gjør det derfor mulig å konstruere svært nøyaktige beslutningsregler ikke bare for å skille mellom melanom og nevi, men også for å bestemme typen nevi og forutsi graden av dysplasi for en dysplastisk nevus. De konstruerte "beslutningstrærene" er en visuell måte å forutsi en diagnose basert på informasjon om genkopiantall og kan enkelt brukes i klinisk praksis for å skille benigne, pre-maligne og ondartede melanocytiske neoplasmer i huden. Den foreslåtte tilleggsmetoden for differensialdiagnose er spesielt viktig ved utskjæring av gigantiske medfødte pigmenterte nevi og dysplastiske nevi hos pediatriske pasienter, siden en høy prosentandel av diagnostiske feil observeres når slike pasienter besøker medisinske institusjoner. Resultatene av bruk av den beskrevne metoden er svært effektive; det anbefales å bruke den til diagnostisering av pigmenterte hudsvulster, spesielt hos pasienter med FAMM-syndrom.

Invasive metoder for prenatal diagnostikk tillater ikke bare å se inn i fremtiden og pålitelig forutsi om den ufødte babyen vil møte sykdommer assosiert med intrauterine misdannelser, men også å finne ut arten og årsakene til medfødte patologier.

Men all informasjon er bare verdifull hvis den er betimelig. Når det kommer til tilstanden til fosterutviklingen, blir hastigheten for å oppnå testresultater livsviktig.

Derfor er FISH-metoden, som lar en vurdere tilstedeværelsen av de vanligste utviklingsavvikene i et embryo på kortest mulig tid, etterspurt i genetisk diagnostikk.

FISH er en forkortelse som tyder essensen av teknologien for å oppdage kromosomavvik - fluorescens in situ hybridisering - fluorescerende hybridisering i et "hjemme" miljø.

Denne teknikken, foreslått på slutten av 70-tallet av forrige århundre av J. Goll og M.-L. Pardew, er basert på muligheten for å gjenopprette sekvensen av nukleinsyrefragmenter (DNA eller RNA) etter deres denaturering.

Forfatterne har utviklet en metode som gjør det mulig å bruke in situ hybridisering av kunstig skapte merkede DNA-prober (prober) og cytogenetisk materiale tatt for analyse, for å identifisere kvantitative og kvalitative avvik av kromosomene av interesse.

På slutten av forrige århundre, etter vellykket bruk av fluorescerende fargestoffer for farging av DNA-prober, fikk FISH-metoden navnet sitt og har siden blitt intensivt forbedret og variert.

Moderne FISH-analyseteknikker streber etter å sikre at det er mulig å få den mest komplette informasjonen for analysen av det utvalgte genetiske materialet i én hybridiseringsprosedyre.

Faktum er at en gang etter hybridisering kan bare et begrenset antall kromosomer av samme cytogenetiske materiale vurderes. Evnen til å re-hybridisere DNA-kjeder avtar fra tid til annen.

Derfor, for øyeblikket i genetisk diagnostikk, brukes in situ hybridiseringsmetoden oftest for raskt å svare på spørsmål om de eksisterende, vanligste aneuploidiene på kromosomene 21, 13, 18, samt på kjønnskromosomene X, Y.

Eventuelle vevs- eller celleprøver er egnet for FISH-analyse.

Ved prenatal diagnose kan dette være blodprøver, ejakulasjon eller.

Hastigheten til å oppnå resultater sikres ved at celler hentet fra materialet tatt for analyse ikke trenger å dyrkes i næringsmedier, og oppnå deres deling til det nødvendige antallet, som med den klassiske metoden for karyotyping.

Det valgte materialet gjennomgår spesiell forberedelse for å oppnå en konsentrert ren cellesuspensjon. Deretter utføres prosessen med denaturering av DNA-prøven og naturlig DNA fra prøven som studeres til en enkelttrådet tilstand og hybridiseringsprosessen, hvor de fargede DNA-probene inkuberes med DNA fra prøven.

Dermed visualiseres de ønskede (fargede) kromosomene i cellen, deres antall, strukturen til genetiske strukturer osv. vurderes. Okularet til et spesielt fluorescerende mikroskop lar deg undersøke de glødende DNA-kjedene.

For tiden er FISH-metoden mye brukt til diagnostiske formål for å identifisere genetiske sykdommer, kromosomavvik i reproduksjonsmedisin, onkologi, hematologi, biologisk dosimetri, etc.

Hvordan brukes FISH-diagnostikk av fosteret?

Innenfor reproduksjonsmedisin brukes FISH-metoden, som en av metodene for molekylær cytogenetisk diagnostikk, i alle stadier.

• et par.

For å bestemme karyotypen til fremtidige foreldre, utføres den en gang, siden det menneskelige genomet forblir uendret gjennom hele livet.

Karyotyping av et par før unnfangelse av et barn vil bidra til å identifisere om foreldrene er bærere av genetiske patologier som er arvet, inkludert skjulte. Samt den generelle tilstanden til genomet til den vordende mor og far, som kan påvirke suksessen med å bli gravid og bære en graviditet til termin.

Diagnostikk ved bruk av FISH-metoden i dette tilfellet fungerer ofte som en tilleggsundersøkelse til klassisk karyotyping, når det identifiseres kromosomale patologier i testmaterialet (venøst ​​blod fra foreldre), hvis det er mistanke om mosaikk.

Ytterligere undersøkelser ved hjelp av FISH-metoden vil pålitelig bekrefte eller tilbakevise tilstedeværelsen av en mistenkt anomali i cellene til den fremtidige forelderen.

• Studie av ejakulasjon.

Indikert for problemer med reproduksjon i et par på grunn av "mannlig faktor". Analyse av sæd ved hjelp av FISH-metoden vil tillate deg å vurdere nivået av unormal sæd i kromosomsettet, samt avgjøre om en mann er bærer av genetiske sykdommer knyttet til sex.

Hvis paret deretter tyr til unnfangelse ved bruk av IVF, vil FISH-analyse av ejakulatet tillate valg av sæd av høyeste kvalitet for å befrukte egget.

• Med IVF.

For preimplantasjonsgenetisk diagnose (PGD). Basert på resultatene fra studier av foreldrenes karyotype, bestemmes mulige kromosomale og genetiske avvik som kan overføres til embryoet.

Takket være mulighetene til FISH-diagnostikk, kan en studie av den genetiske helsen til de resulterende embryoene utføres i løpet av få timer før overføring til livmorhulen for å sikre graviditet med et kjent friskt foster.

I tillegg gjør egenskapene til PGD det mulig å bestemme kjønnet til embryoer, og derfor "bestille" kjønnet til det ufødte barnet, om nødvendig.

• Under svangerskapet.

I prenatal diagnostikk: analyse av fosterceller oppnådd ved hjelp av chorionic villus prøvetaking, fostervannsprøve eller cordocentesis ved bruk av FISH-metoden tilbys vanligvis av medisinske sentre i tillegg til den klassiske genetiske studien av fosterceller (karyotyping).

Denne metoden er uunnværlig når det er nødvendig å raskt få svar på tilstedeværelsen av de vanligste kromosomfeilene hos fosteret: trisomi på kromosom 21, 18, 13, avvik i kromosom X og Y, noen ganger også aneuploider på kromosom 14 (eller 17), 15, 16.

Fordeler med FISH-analyse

Gjennomføring av genetisk analyse ved hjelp av FISH-metoden, selv om det i dag fortsatt er en hjelpemetode for diagnostisering av kromosomale patologier, bestemmes gjennomførbarheten av implementeringen av ubestridelige fordeler:

• hastigheten for å oppnå resultater angående de testede kromosomene er innen noen få timer - ikke mer enn 72.

Dette kan være viktig hvis skjebnen til graviditeten avhenger av diagnosen til genetikere;

• høy følsomhet og pålitelighet av FISH-metoden - vellykket analyse er mulig på en ubetydelig mengde biomateriale - en celle er nok, feilen i resultatene er ikke mer enn 0,5%.

Dette kan være viktig når antallet celler i den opprinnelige prøven er begrenset, for eksempel når delingen deres er dårlig.

• muligheten for å utføre diagnostikk ved hjelp av FISH-metoden på et hvilket som helst stadium av svangerskapet (fra 7. uke) og bruke enhver biologisk prøve: chorionfragmenter, fostervann, fosterblod, etc.

Hvor kan jeg stille en diagnose ved hjelp av FISH-metoden?

I Moskva brukes FISH-metoden for prenatal diagnose av kromosomavvik hos fosteret i følgende medisinske sentre:

Som regel tilbyr klinikker FISH-diagnostiske tjenester som en del av fullstendig føtal karyotyping gjennom invasiv intervensjon mot en ekstra avgift. Og som regel godtar fremtidige foreldre å betale ekstra, for takket være FISH-metoden kan du på bare et par dager finne ut de viktigste tingene om babyen din

Brystkreft skal ikke undervurderes. Det kan ramme absolutt alle – unge og gamle, kvinner og menn. Den ekstreme kompleksiteten i behandlingen, høy dødelighet og den økende dynamikken i sykelighet er årsaken til økt oppmerksomhet på dette problemet fra medisinen.

Til dags dato er det ingen behandlingsmetode som 100% garanterer et positivt utfall av sykdommen. Eksisterende metoder er arbeidskrevende, kostbare og kan forårsake stor sideskade på kroppen.

Dette er en av de sykdommene som vi kan si at den beste behandlingen er eliminering av risikofaktorer og rettidig diagnose.

Disposisjon for brystkreft

Til tross for at kreft først ble beskrevet på 1400-tallet f.Kr. og forskere har en enorm mengde informasjon, er det fortsatt ikke nok til å beskrive etiologien til brystkreft fullt ut.

Miljøfaktorer som påvirker forekomst eller utvikling av kreft er ikke funnet med tilstrekkelig pålitelighet. Individuelle studier som indikerer et bestemt karsinogen får ikke full anerkjennelse av hele det medisinske miljøet. Imidlertid er det en viss sammenheng mellom brystkreft og følgende:

En av de viktigste faktorene som er oppført ovenfor er alder: over årene øker sannsynligheten for å utvikle brystkreft i størrelsesordener. Generelt er kompleksiteten i spørsmålet om brystkreftetiologi på grunn av dens genetiske natur. Det er ukjent hvorfor en funksjonsfeil plutselig oppstår og brystvevet begynner å dele seg ukontrollert, noe som påvirker nabovev og fører til metastaser i hele kroppen.

Men forskerne er enige om én ting: Det moderne livet er mye mer gunstig for kreft enn før.

Dermed indikeres høye doser elektromagnetisk stråling, dårlig økologi, lavt oksygennivå i byer, fysisk inaktivitet, stress etc. Man kan ikke unngå å ta hensyn til den betydelig økte livsalderen, fordi kreft er en sykdom som vanligvis oppstår i voksenlivet.

Nødvendige tester

Muligheten for et positivt kreftutfall er direkte relatert til tidspunktet for behandlingsstart, så holdningen til diagnose bør være den mest alvorlige.

Følgende diagnostiske metoder er nødvendige:

• månedlig selvsjekk (palpasjonstest);
• sjekk med en lege en gang i kvartalet;
• Ultralyd hver sjette måned;
• MR hvert år.

Mammogrammer (røntgenbilder) anbefales ikke før fylte 30 år, da eksponering for stråling best unngås i ung alder. Hvis du mistenker brystkreft, må du gjennomgå følgende tester:

FISH forskningsmetode

FISH-studie (FISH-analyse) er en cytogenetisk metode som brukes til å studere membranproteinet HER2 (Human Estrogen Receptor2). Ved gjennomføring av en FISH-studie brukes DNA-prober merket med fluorescerende fargestoff. Disse probene settes inn i de ønskede DNA-regionene og er i stand til å kvantifisere graden av HER2-amplifikasjon. Siden studien utføres over tid og genene fortsetter å dele seg, er det mulig å estimere forholdet mellom antall kopier av HER2-genet og antall kopier av den normalt delende regionen. Hvis den er større enn eller lik 2, anses resultatet som HER2-positivt.

FISH-analyse spiller en viktig rolle i kreftprognose og valg av behandlingsprinsipper. Således forekommer amplifikasjon eller økt aktivitet av dette proteinet i 30% av krefttilfellene og krever spesielle behandlingsmetoder rettet mot å hemme dets funksjon. Under normale forhold kontrollerer HER2 cellevekst, deling og selvreparasjon. Ved kreft produserer dette proteinet for mange membranreseptorer og instruerer cellene til å dele seg ukontrollert. Slik blir cellen til kreft.

Hvis FISH-testresultatet er positivt, foreskrives behandling rettet mot å undertrykke HER2. Hovedmedisinen i dag er Herceptin. Hvis denne testen ikke utføres eller resultatene ignoreres, vil valget av behandling være feil og kreften vil utvikle seg til terminalstadiet. I tillegg er slik kreft mer aggressiv i utvikling enn HER2-negativ kreft.

Immunhistokjemisk analyse utføres sammen med FISH-analyse. Dette er også en genmetode for å studere HER2-proteinet, men ved immunhistokjemisk analyse påvises mengden HER2-protein ikke i cellen, men i en spesifikk prøve.

Den skiller seg fra fiskemetoden i kostnad, men produksjonen gir mindre informative resultater, som avhenger av forskeren, laboratoriet og kriteriene som brukes. Mengden HER2-protein bestemmes av fargen på testprøven og skåres på en skala fra null til tre. Sammen er disse to metodene gullstandarden for å studere en pasients HER2-status.

Til tross for bildet er brystkreft derfor ganske behandles. Onkologer har alle de avanserte prestasjonene til medisin i sitt arsenal. Alle disse midlene er ganske tilgjengelige for den mest vanlige borger.

Det viktigste i et vellykket utfall av sykdommen er rettidig testing for brystkreft, velge riktig behandlingsmetode og starte den tidligere. Ikke fortvil hvis det ikke er resultater, fordi en positiv følelsesmessig bakgrunn også har en betydelig innvirkning på sykdomsforløpet.