Analiza żeber po leczeniu kiły. Pełna interpretacja testów na kiłę

Test immunofluorescencyjny (IF) to test serologiczny, który wykrywa przeciwciała przeciwko znanym antygenom. Metoda polega na mikroskopii wybarwionych rozmazów.

Ta reakcja jest wykorzystywana w immunologii, wirusologii i mikrobiologii. Pozwala określić obecność wirusów, bakterii, grzybów, pierwotniaków i ICC. RIF jest bardzo szeroko stosowany w praktyce diagnostycznej do wykrywania antygenów wirusowych i bakteryjnych w materiale zakaźnym. Metoda opiera się na zdolności fluorochromu do wiązania się z białkami bez naruszania ich swoistości immunologicznej. Stosowany jest głównie w diagnostyce infekcji dróg moczowych.

Istnieją następujące metody przeprowadzenia reakcji immunofluorescencyjnej: bezpośrednia, pośrednia, z dopełniaczem. Metoda bezpośrednia polega na barwieniu materiału fluorochromami. Ze względu na zdolność antygenów drobnoustrojów lub tkanek do świecenia w promieniach UV mikroskopu fluorescencyjnego określa się je jako komórki z jasno zabarwioną zieloną obwódką.

Metoda pośrednia polega na określeniu kompleksu antygen+przeciwciało. W tym celu materiał doświadczalny traktuje się przeciwciałami przeciwdrobnoustrojowej surowicy królika, przeznaczonymi do diagnostyki. Po tym, jak przeciwciała zwiążą się z drobnoustrojami, są one oddzielane od niezwiązanych i poddawane działaniu surowicy przeciwkróliczej znakowanej fluorochromem. Następnie kompleks drobnoustrój + przeciwciała zwierzęce + przeciwciała przeciwkrólicze są określane za pomocą mikroskopu ultrafioletowego w taki sam sposób, jak w metodzie bezpośredniej.

Reakcja immunofluorescencyjna jest niezbędna w diagnostyce kiły. Pod wpływem fluorochromu czynnik sprawczy kiły jest określany jako komórka z żółto-zieloną obwódką. Brak blasku oznacza, że ​​pacjent nie jest zarażony kiłą. Ta analiza jest często zalecana z pozytywną reakcją Wassermana. Ta metoda jest bardzo skuteczna w diagnozie, ponieważ pozwala zidentyfikować patogen we wczesnych stadiach choroby.

Oprócz tego, że RIF pozwala zdiagnozować kiłę, służy również do określenia obecności patogenów, takich jak chlamydia, mykoplazma, rzęsistki, a także patogeny rzeżączki i opryszczki narządów płciowych.

Do analizy wykorzystuje się rozmazy lub krew żylną. Procedura pobrania wymazu jest całkowicie bezbolesna i nie stanowi żadnego zagrożenia. Przygotuj się do tej analizy. Dwanaście godzin przed nią nie zaleca się stosowania produktów higienicznych, takich jak małe czy żele. Czasami, według zeznań lekarza, przeprowadzana jest prowokacja. Aby to zrobić, zalecają spożywanie pikantnych potraw lub alkoholu lub wstrzyknięcie substancji prowokującej, takiej jak gonovaccine lub pirogenna. Ponadto przerwa między przyjęciem leków przeciwbakteryjnych a wykonaniem testu powinna wynosić co najmniej czternaście dni.

Oceniając wyniki należy wziąć pod uwagę fakt, że luminescencję obserwuje się nie tylko w żywych bakteriach, ale także w martwych, zwłaszcza w przypadku chlamydii. Po serii antybiotyków martwe komórki chlamydii również świecą.

Przy odpowiednim przygotowaniu pacjenta i przestrzeganiu techniki pobierania wymazu analiza ta pozwala zidentyfikować choroby we wczesnych stadiach, co jest bardzo ważne dla szybkiego leczenia. Pozytywnymi aspektami tej metody jest krótki czas uzyskania wyniku, łatwość wdrożenia oraz niski koszt analizy.

Wady obejmują fakt, że do analizy wymagana jest wystarczająco duża ilość badanego materiału. Ponadto tylko doświadczony specjalista może ocenić wyniki.

Analizę kiły przeprowadza się przy użyciu wielu metod wykrywania patogenu. Wraz z rozwojem patologii pojawia się wiele specyficznych znaków, dlatego w celu ustalenia dokładnej diagnozy chory jest badany w sposób złożony. Jednocześnie ogólne badanie krwi jest nieinformacyjne, nie jest wykorzystywane do diagnozowania tej infekcji wenerycznej.

Rodzaje badań i biomateriały do ​​analizy

Do wykrywania choroby stosuje się różne metody i biomateriały. We wczesnych stadiach kiłę określa się za pomocą testu bakterioskopowego. Próbki są badane pod mikroskopem. Urządzenie pozwala na wykrycie szczepów patogenu. Później wykonywane są serologiczne badania krwi. Dzięki nim w próbkach wykrywane są antygeny i przeciwciała kiły.

Metody określania infekcji seksualnej są podzielone na 2 kategorie:

• Bezpośrednie, ujawniające patogenny drobnoustrój. Należą do nich: mikroskopia ciemnego pola, analiza RIT (zakażenie królików biomateriałem do badań), metoda PCR - reakcja łańcuchowa polimerazy (z jej pomocą znajdują się elementy genetyczne patogenu).
• Pośrednie (serologiczne) wykrywanie przeciwciał przeciwko patogenowi. Są wytwarzane przez układ odpornościowy w odpowiedzi na infekcję.

Metody serologiczne dzielą się na 2 kategorie: krętkowe i niekrętkowe.

• Niekrętkowe, w tym: test z czerwienią toluidynową, analiza RSK, test RPR, badanie krwi metodą RMP express.
• Treponemal, w tym: immunoblotting, test RSK, analiza RIT, badanie RIF, test RPGA, analiza ELISA.

Informacyjność testów na infekcję jest inna. Częściej wykonuje się główne rodzaje testów na kiłę, które obejmują metody serologiczne.

Biomateriał do badań

Aby zidentyfikować bladą treponemę, patogen, który wygląda jak spirala i powoduje kiłę, pobierane są próbki:

• krew żylna;
• alkohol (wydzielina z kanału kręgowego);
• zawartość węzłów chłonnych;
• tkanka wrzodowa.

Jeśli konieczne jest przeprowadzenie testów na wykrycie kiły, krew pobiera się nie tylko z żyły łokciowej, ale także z palca. Na wybór biomateriału i metody badań ma wpływ stopień zaawansowania infekcji oraz wyposażenie ośrodka diagnostycznego.

Badania bezpośrednie

Przekonującym dowodem na kiłę jest identyfikacja czynników zakaźnych pod mikroskopem. W ten sposób patogen występuje u 8 na 10 przebadanych pacjentów, a ujemny wynik u pozostałych 2 pacjentów nie oznacza, że ​​nie są zakażeni.

Badanie przeprowadza się w pierwotnych i wtórnych stadiach (stadiach) choroby, które charakteryzują się pojawieniem się wysypki na skórze i kiły (owrzodzeń) na tkankach nabłonkowych lub błonach śluzowych. W wydzielinie ze zmian znajdują się patogeny wywołujące chorobę weneryczną.

Dokładniej, złożony test, zwany RIF, reakcja immunofluorescencyjna, radzi sobie z określeniem krętków. Próbka do badań jest wstępnie traktowana przeciwciałami fluorescencyjnymi. Związki zdolne do świecenia sklejają się z bakteriami. Badając próbki pod mikroskopem, w przypadku infekcji asystent laboratorium widzi musujące patogeny.

Test służy do wczesnej diagnozy choroby. Im dłużej trwa choroba, tym mniejsza czułość metod badawczych. Ponadto spada po leczeniu wysypek i owrzodzeń środkami antyseptycznymi oraz u pacjentów poddanych leczeniu. Czasami badanie daje wyniki fałszywie ujemne i fałszywie dodatnie.

Analiza RIT to bardzo dokładny sposób wykrywania kiły. Podczas testu na wyniki trzeba długo czekać. Dopóki zarażony królik nie wykaże oznak infekcji. Test jest używany bardzo rzadko, mimo że jest niezwykle dokładny.

Używając reakcja łańcuchowa polimerazy kiła zależy od elementów genetycznych patogenów. Jedyną wadą PCR jest wysoki koszt.

Testy bez krętków

Takie badania krwi pomagają wykryć przeciwciała, które pojawiają się w odpowiedzi na kardiolipinę, związek związany z ogólną strukturą błon patogenów.

reakcja Wassermana (РВ lub RW)

Najbardziej znanym testem na kiłę jest reakcja Wassermana. RS należy do kategorii reakcji wiązania dopełniacza (CFR). Nowe metody RSC znacznie różnią się od tradycyjnych metod RW. Ale są one określane, jak poprzednio, pojęciem „reakcji Wassermana”.

Układ odpornościowy syntetyzuje przeciwciała (markery) w odpowiedzi na inwazję treponema. Są one wykrywane w badaniu krwi na kiłę metodą reakcji Wassermana. Dodatni wynik RW potwierdza infekcję osobnika.

Reakcja hemolizy - wskaźnik analizy PB. Dzięki niemu oddziałują 2 substancje: surowica hemolityczna i erytrocyty owiec. Surowicę wytwarza się przez immunizację królika erytrocytami barana. Aktywność płynu biologicznego zmniejsza się przez ogrzewanie.

Wskaźniki RV zależą od tego, czy hemoliza minęła, czy nie. W próbce wolnej od markerów dochodzi do hemolizy. W takim przypadku reakcja na antygeny jest niemożliwa. Dopełniacz jest przeznaczany na interakcję z erytrocytami owiec. Gdy w próbce znajdują się markery, komplement reaguje z antygenami. W takim przypadku hemoliza nie występuje.

Określa przeciwciała antylipidowe (reagin). Do surowicy krwi pacjenta dodaje się antygeny syfilityczne, które tworzą kompleks immunologiczny z reaginami, zdolny do adsorpcji i wiązania dopełniacza. Jeśli powstanie taki kompleks, nie następuje zniszczenie erytrocytów (hemoliza) i wytrącają się (reakcja dodatnia). Jeśli w surowicy pacjenta nie ma reagin, następuje hemoliza, a erytrocyty nie wytrącają się (reakcja negatywna).

RPR (Rapid Plasma Reagin)

Lub reakcja mikroprecypitacji z antygenem kardiolipiny jest metodą przesiewową do diagnozowania kiły. Reakcja ta w pewnym stopniu może być uważana za bardziej nowoczesną modyfikację reakcji Wassermanna. Głównym wskazaniem do tego testu jest wstępne badanie na kiłę, badania lekarskie, monitorowanie skuteczności leczenia. Pozytywny wynik wymaga innych, dokładniejszych testów w celu potwierdzenia diagnozy.

Test immunoenzymatyczny (ELISA)

Jedna z najbardziej obiecujących metod diagnostyki laboratoryjnej kiły. Jego zasadą jest identyfikacja specyficznego kompleksu antygen-przeciwciało, który powstaje przez połączenie antygenów syfilitycznych zaabsorbowanych na stałym nośniku z przeciwciałami badanej surowicy krwi. Obecnie najczęstszym jest wariant pośredni ELISA, w końcowym etapie którego wykorzystuje się przeciwciała przeciwko ludzkim immunoglobulinom sprzężonym z peroksydazą chrzanową lub innymi markerami enzymatycznymi. Mierzona jest barwa końcowych produktów tej reakcji, która zależy od ilości związanych przeciwciał surowicy.

Reakcja immunofluorescencyjna (RIF)

W trakcie reakcje immunofluorescencyjne(RIF) zależy od intensywności blasku bladego treponema w preparacie, który występuje tylko w obecności przeciwciał przeciwkrętkowych w surowicy krwi. Reakcję prowadzi się z surowicą w różnych rozcieńczeniach (10 i 200 razy).

Reakcja unieruchamiania Treponema pallidum (RIBT)

Najbardziej specyficzny test diagnostyczny na kiłę. W surowicy krwi pacjentów oznaczane są przeciwciała wideospecyficzne (immobilizyny), które unieruchamiają blade krętkowce w obecności dopełniacza. Za pomocą mikroskopu zlicza się odsetek unieruchomionych (unieruchomionych) bladych krętków. Krew metodą RIBT jest badana nie wcześniej niż 2 tygodnie po zakończeniu antybiotyków i innych leków.

W celu zdiagnozowania kiły utajonej wykonuje się badanie krwi metodą RIBT i RIF. RIF (10-krotne rozcieńczenie surowicy) pozwala postawić diagnozę nawet u pacjentów, u których nie wykryto bladego treponema.

Pasywna reakcja hemaglutynacji (RPHA)

Połączenie bladych krętków surowicy krwi z erytrocytami owiec poddanymi obróbce specjalnymi metodami. W obecności czynnika wywołującego kiłę w surowicy krwi dochodzi do aglutynacji (sklejania i późniejszego wytrącania) erytrocytów. Odczynniki wprowadza się do studzienek specjalnych płytek, wynik reakcji ocenia się przez barwienie. Aglutynian erytrocytów ma ciemnoczerwony kolor i kształt plamki lub pierścienia.

W sieć przychodni "MedCenterService" Możesz oddać krew na kiłę za pomocą dowolnej z opisanych powyżej metod. Krew do analizy należy pobrać z żyły na pusty żołądek (co najmniej 4 godziny od ostatniego posiłku). Nie zaleca się oddawania krwi po spożyciu alkoholu, narkotyków, a także w trakcie cyklu miesiączkowego.
Jeśli masz podejrzenie, że mogłaś zarazić się kiłą lub planujesz ciążę, to nie odkładaj badania, przyjdź do przychodni "MedCenterService".

RIF, RIBT, RPGA

RIF - reakcja immunofluorescencyjna- próba krętkowa. Jest to jeden z najczulszych testów na kiłę. RIF staje się dodatni 10-20 dni po zakażeniu, co odnosi się do metod wczesnego wykrywania kiły.

Wskazania do RIF:

• RIF wykonuje się u osób z objawami kiły, z reakcjami ujemnymi – RMP, RV;
• jako odpowiedź różnicowa u osób z RW dodatnimi reakcjami, mikroreakcjami i bez objawów;
• u kobiet w ciąży przy braku objawów klinicznych i historii kiły.

Metodologia RIF:

• Podczas przeprowadzania reakcji do surowicy pacjenta dodaje się krew królika zakażoną bladą treponemą (czynnik wywołujący kiłę) i fluorescencyjną (świecącą) surowicę. Badanie polega na obserwacji świecenia kompleksów pod mikroskopem fluorescencyjnym. Wyniki reakcji interpretuje się w zależności od intensywności świecenia od 1+ do 4+, co wskazuje na obecność kiły. Brak blasku - negatywny wynik RIF oznacza, że ​​obiekt jest zdrowy. Fałszywe wyniki testów są niezwykle rzadkie w procesach ogólnoustrojowych, ciąży itp.
• Reakcja jest umieszczona w modyfikacji RIF-200 i RIF-avs (absorpcja).
• Czułość reakcji w kile pierwotnej wynosi około 85%
• z kiłą trzeciorzędową - 98-100%.

Ujemny RIF pojawia się w ciągu kilku lat po leczeniu kiły. Po terapii przeciwkiłowej konieczne jest monitorowanie wskaźników w dynamice.

RIBT- reakcja unieruchomienia bladego treponemy - jest najbardziej swoistym badaniem krwi na kiłę. RIBT to wysokiej jakości, drogie badanie krwi, na które stać dobrze wyposażone zaplecze laboratoryjne. RIBT jest podstawową reakcją w utajonych postaciach kiły, kiły nerwowej, kiły wiscerosyfilis. Pozwala odróżnić fałszywie pozytywne reakcje od prawdziwej choroby kiły.

Reakcja opiera się na unieruchomieniu (unieruchomieniu) czynnika wywołującego kiłę za pomocą przeciwciał swoistych dla gatunku. W badaniu mikroskopowym odczytuje się wynik reakcji: 0-20% - negatywny, 21-30% - wątpliwy, 31-50% - słabo pozytywny, 51-100% - reakcja dodatnia. Oznacza to, że pozytywne wyniki dla kiły obejmują te, w których RIBT wynosi ponad 50%. W przypadku kiły RIBT staje się dodatnia dość powoli: w pierwotnym okresie kiły nadal jest ujemna, we wtórnym okresie świeżym dodatnia w 50% przypadków, w wtórnym okresie nawrotowym dodatnia w 90-100%, w w okresie studiów jest dodatnia w 99-100%.

Negatywny wynik RIBT jest przeprowadzany od dziesięcioleci, dlatego nie jest upoważniony do stosowania go jako kryterium wiarygodności wyleczenia, niemniej jednak konieczne jest dynamiczne monitorowanie po leczeniu przeciwkiłowym.

Wskazane jest przeprowadzenie reakcji RIBT nie wcześniej niż 30 dni po zakończeniu leczenia. RPHA - pasywna reakcja hemaglutynacji - odnosi się do testów krętkowych, wykonywanych w połączeniu z testami niekrętkowymi. Służy do potwierdzenia diagnozy kiły na dowolnym etapie.

Wskazane jest przeprowadzenie reakcji 4 tygodnie po rzekomej infekcji. Podczas przeprowadzania reakcji do surowicy krwi pacjenta dodaje się lek przygotowany z erytrocytów pochodzenia zwierzęcego uczulonych antygenem bladego treponemy, czynnika wywołującego kiłę.

Istotą reakcji RPGA jest sklejanie (aglutynacja) w obecności przeciwciał przeciwko krętkowi i tworzenie aglutynianu - postać obserwowana przez asystenta laboratoryjnego. Reakcję ocenia się liczbą +: 4+ - wynik ostro dodatni, 3+ - dodatni, 2+ - słabo dodatni, 1+ - wątpliwy, - - wynik ujemny. Po pozytywnym wyniku reakcji przeprowadza się ocenę ilościową z oznaczeniem stężenia (miana) przeciwciał. Wraz z postępem kiły miano przeciwciał stale rośnie.

RPHA pozostaje dodatnie przez dziesięciolecia po leczeniu kiły i dlatego nie może być stosowane jako kryterium ważności wyleczenia. Konieczna jest jednak obserwacja miana przeciwciał TPHA w dynamice.

Metoda jest bardzo czuła. Wyniki RPHA mogą być fałszywie dodatnie. Choroby tkanki łącznej, niektóre infekcje itp. mogą prowadzić do takich wyników analizy.

Badania laboratoryjne osocza krwi były i pozostają główną metodą diagnozowania i monitorowania kiły.

Ta choroba nie jest trwała, a ukryte formy na ogół nie są widoczne na zewnątrz. Wśród różnorodnych metod serologicznych najbardziej wiarygodne wyniki zapewniają: analiza na kiłę RIF.

RAFA jest reakcją immunofluorescencyjną. Pod względem możliwości diagnostycznych technika ta należy do pośrednich testów specyficznych. Oznacza to, że za jego pomocą nie można wykryć samego patogenu. Ale na podstawie dowodów pośrednich można wyciągnąć rozsądny wniosek na temat obecności lub braku bladego treponemy w ciele.

Badania wymagają:

• Próbka krwi pacjenta. Z reguły stosuje się żyłę żylną, jednak istnieją opcje prowadzenia RIF z krwią włośniczkową z palca.
• Standardowa produkcja przemysłowa, antygen krętkowy. Są to specjalne białka krętków, które służą jako „kotwice” dla przeciwciał przeciwko blademu krętkowi z surowicy pacjenta.
• Standard z białkami immunoglobulinowymi, które wiążą się z przeciwciałami krwi pacjenta.
• Mikroskop luminescencyjny.

Ta reakcja ma bardzo wysoką specyficzność i czułość. Ale jest drogi i niełatwy w konfiguracji. Dlatego służy głównie do weryfikacji diagnozy w przypadkach wątpliwych i fałszywie dodatnich.

Jak przeprowadza się diagnostykę RIF kiły?

Algorytm nastawiania reakcji immunofluorescencyjnej składa się z kilku etapów. W dużej mierze ze względu na złożoność tej techniki nie nadaje się ona do masowych badań przesiewowych.

Same kroki to:

• Próbkę krwi/osocza pobraną od pacjenta traktuje się szkiełkiem, na którym znajduje się wysuszony antygen krętkowy. Uzyskuje się ją z jąder królika zakażonego krętkiem szczepu Nichols.
• Po kilku minutach szkło myje się wodą destylowaną.
• Przemyta próbka jest traktowana specjalną komercyjnie produkowaną surowicą, która zawiera własne przeciwciała przeciwko ludzkim przeciwciałom przeciw krętkom. Immunoglobuliny tej surowicy są wstępnie oznakowane specjalną substancją, która świeci żółto-zielono w świetle ultrafioletowym.
• Po tym następuje ponowne płukanie.
• Szkiełko jest umieszczane w mikroskopie fluorescencyjnym i badane.

Jeśli asystent laboratoryjny zauważy charakterystyczny blask w okularze mikroskopu, oznacza to, że we krwi pacjenta były przeciwciała przeciwko blademu krętkowi. Powiązali się z typem antygenu. A one z kolei reagowały z immunoglobulinami znakowanymi fosforem ze standaryzowanej surowicy przemysłowej.

Analiza dla kiły RIF: wiarygodność wyników

W diagnostyce serologicznej kiły bardzo ważne jest uzyskanie wiarygodnego i dokładnego wyniku.

Podejmowane są pewne działania w celu poprawy jakości danych:

• Surowicę testową rozcieńcza się 200 razy (1:200), aby uniknąć fałszywie dodatnich reakcji. Potem mówią, że to trwa analiza na kiłę RIF 200.
• W innej opcji przy rozcieńczaniu serum 1:5 dodatkowo stosuje się specjalny absorbent, który zbiera na sobie „dodatkowe” przeciwciała, aby nie zaburzały wyników.

Rozmiary krętków również grają w rękach badaczy. Duże ciała drobnoustrojów krętków są wyraźnie widoczne pod mikroskopem fluorescencyjnym. Jeśli są „przyczepione” do białek znakowanych fosforem z surowicy. Zastosowanie wystandaryzowanego antygenu i surowic pozwala zmaksymalizować czułość i swoistość RIF w diagnostyce kiły.

Opcje prywatnej analizy RIF: absorpcja RIF

Jedną z alternatywnych metod jest RIF-Abs. Różni się od zwykłej techniki niskim rozcieńczeniem badanej surowicy - jak zwykle 1:5 kontra 1:200.

Stężona próbka zawiera dużo aktywnych cząsteczek białka.

Aby uniknąć i zwiększyć wrażliwość, serum potraktowano specjalnym absorbentem z fragmentów syfilitycznych krętków. Sorbent zbiera na sobie nadmiernie aktywne przeciwciała, a następnie próbkę traktuje się przemysłową, znakowaną fosforem surowicą. Dzięki temu wstępnemu przygotowaniu wszystkie zbędne cząsteczki, które mogłyby wpłynąć na wyniki testu, zostają wyeliminowane.

Ułożyli to zgodnie z następującymi wskazaniami:

• Pozytywny na tle dobrego samopoczucia klinicznego i braku ryzyka infekcji w historii.
• Dodatnia RV u pacjentów z chorobami przewlekłymi.
• Ujemna RV, gdy pojawiają się objawy podejrzane o kiłę.

Pierwsze pozytywne wyniki pojawiają się już 15-16 dni po zakażeniu. Jeśli reakcja pozytywna staje się negatywna, oznacza to całkowite wyleczenie kiły. Prawdopodobieństwo fałszywie pozytywnego wyniku jest mniejsze niż 0,4%.

Taka sytuacja może wystąpić podczas badania pacjentów onkologicznych, alkoholików, kobiet w ciąży i osób cierpiących na zaburzenia odporności.

Pewna część przypada na błędy techniczne, ponieważ produkcja jest dość skomplikowana. Zdarzają się przypadki, gdy konieczne jest odróżnienie wrodzonej patologii od nabytej. Można to zrobić, szukając różnych typów przeciwciał we krwi pacjenta.

Przeciwciała przeciw kile klasy M (IgM) pojawiają się wkrótce po zakażeniu i są znacznie szybsze niż IgG. Pozwala na ich identyfikację analiza absorpcji kiły RIF IgM. Jeśli wyniki tej reakcji są pozytywne, możemy mówić o niedawnej infekcji. Tak więc przypadki reinfekcji można odróżnić od nawrotów lub infekcji dziecka po porodzie.

Na podstawie wyników tej metody analizy RIF stwierdzają również, że leczenie kiły wczesnej jest skuteczne.

Jeśli podejrzewasz kiłę, skontaktuj się z doświadczonym wenerologiem.

Dom " Analizy » Jakie są miana kiły. Analiza kiły rafowej