FISH ayırıcı tanıya yönelik bir çalışmadır. Floresan yerinde hibridizasyon En son teşhis yöntemleri

Bu yöntem şu anda belirli kanserli tümör türlerini teşhis etmek için kullanılmaktadır, çünkü bir hücrenin kötü huylu dönüşümü, genomundaki değişikliklerden kaynaklanmaktadır. Buna göre genlerde karakteristik bozukluklar tespit edilen bu hücre, yüksek bir kesinlikle kanserli olarak sınıflandırılabilir. Ek olarak, FISH testi, önceden belirlenmiş bir tanıyı doğrulamanın yanı sıra, belirli kemoterapi ilaçlarının meme kanseri için kemoterapi amacıyla kullanılma olasılığı hakkında ek veriler elde etmek ve hastalığın prognozunu açıklığa kavuşturmak için de kullanılır.

FISH testinin kullanımına iyi bir örnek meme kanseri olan hastalardadır. Bu teknikle biyopsiden elde edilen dokuda HER-2 adı verilen genin kopyalarının olup olmadığı incelenir. Bu genin mevcut olması, hücre yüzeyinde çok sayıda HER2 reseptörünün bulunduğu anlamına gelir. Tümör elemanlarının gelişimini ve çoğalmasını uyaran sinyallere duyarlıdırlar. Bu durumda trastuzumabın etkili kullanımı için fırsat açılır - bu ilaç HER2 reseptörlerinin aktivitesini bloke eder ve bu nedenle tümör büyümesini engeller.

FISH testi nasıl yapılır?

Kromozomların yapısındaki bu sapmaların çeşitli türleri vardır:
translokasyon – kromozomal materyalin bir kısmının aynı veya başka bir kromozom içinde yeni bir konuma hareketi;
inversiyon – bir kromozomun bir kısmının ana gövdesinden ayrılmadan 1800 derece dönmesi;
delesyon – herhangi bir kromozomal bölgenin kaybı;
duplikasyon, bir kromozomun bir kısmının kopyalanmasıdır, bu da hücrede bulunan aynı genin kopya sayısında artışa yol açar.

Bu bozuklukların her biri belirli tanısal işaretler ve bilgiler taşır. Örneğin translokasyonlar lösemi, lenfoma veya sarkomların varlığına işaret edebilir ve gen kopyalarının varlığı en etkili tedavinin reçetelenmesine yardımcı olur.

FISH testinin avantajı nedir?

FISH testinin bir diğer avantajı da hastadan yeni alınan materyal üzerinde kullanılabilmesidir. Standart sitogenetik analiz için öncelikle bir hücre kültürünün yetiştirilmesi, yani hastanın hücrelerinin laboratuvarda çoğalmasına izin verilmesi gerekir. Bu süreç yaklaşık 2 hafta sürer ve bir hafta daha düzenli test yapılmasına ayrılırken, FISH testinin sonucu sadece birkaç gün içinde alınacaktır.

Tıp biliminin istikrarlı gelişimi, FISH testinin maliyetinde yavaş yavaş bir azalmaya ve onkologların günlük uygulamalarına giderek daha geniş bir şekilde girmesine yol açmaktadır.

Meme kanseri, istatistiklere göre kadınlarda görülen kanser hastalıkları arasında ilk sırada yer alan tehlikeli bir hastalıktır. Bu hastalığa yakalanma riski 40 yaşın üzerindeki tüm kadınlarda artar ve başka birçok faktöre bağlı olabilir. Meme kanserinin en olası nedenleri arasında obezite, genetik veya kalıtsal yatkınlık, menstruasyonun erken başlaması ve geç tamamlanması, hormonal veya radyasyon tedavisi sayılabilir.

Ayrıca doğum yapmamış kadınlarda ve daha önce kanser geçirmiş kadınlarda morbidite riski artmaktadır. Erkekler de meme kanserine yakalanabilir.

Teşhis türleri ve yöntemleri

Meme kanseri teşhisinin ilk adımı bir meme uzmanı tarafından yapılan rutin muayenedir. 40 yaş üstü kadınların en az iki yılda bir bu kontrolleri yaptırması gerekmektedir. Doktor meme bezlerinin görsel muayenesini, palpasyonunu ve mamografisini yapar. Hastalığın gelişiminin görsel belirtileri şunları içerebilir:

Genel bilgi

Memenin röntgeni (mamografi), tümörün varlığını, boyutunu ve yerini belirlemenizi sağlar. Elde edilen sonuçların doğruluğunu arttırmak için kontrast madde ekleme teknolojisi kullanılır. Bir tümör zaten tespit edilmişse, pnömositografi yöntemi kullanılır - tümör sıvısının çıkarılması ve boşluğa hava verilmesi. Bir tümörün varlığı belirtilmemişse, duktografi kullanılır - süt kanallarına kontrast maddenin sokulması.

Bu yöntemler meme dokusundaki oluşumların varlığını görselleştirmenizi sağlar.

Mamografide de bir tümörün varlığı açıkça ortaya çıkarsa, hastaya bir dizi teşhis önlemi için sevk edilir:

Doktor ultrason kullanarak bir tümörü kistten ayırt edebilir ve oluşumun yerini netleştirebilir. Daha sonra biyopsi için doku örneği alınır. Biyopsi, tümörün türünü bulmanızı sağlar: iyi huylu veya kötü huylu ve ayrıca tümörün hormona bağımlı olup olmadığını da belirler. Bu bilgi, doktorun bir tedavi stratejisine karar vermesine olanak tanır, ancak evreyi belirlemeyi her zaman mümkün kılmaz. Çoğu zaman, gerekli tüm teşhis önlemlerine rağmen, ancak ameliyattan sonra belirlenebilir.

Histolojik çalışmaların mekanizması

Ameliyattan önce ve sonra doku biyopsisi yapılır. İşlem, oluşumun lokalizasyonu netleştirildikten sonra gerçekleştirilir.

Biyopsi, bir doku parçasının çıkarılması işlemidir ve çalışmasına "histolojik inceleme" veya kısaca "histoloji" denir.

Bir sağlık çalışanı, tümörden az miktarda doku çıkarmak için özel bir iğne kullanır veya hastanın vücudundan zaten çıkarılmış olan bir tümör, histolojik inceleme için gönderilir. Daha sonra doku parçası, kontrastı artırmak ve çalışmayı kolaylaştırmak için özel olarak boyanır ve işlenir. Bir uzman mikroskop kullanarak kesiti inceler ve tümör oluşumunun kalitesi hakkında fikir verir. Bu çalışmanın çoğu, sonucu veren laboratuvar teknisyeninin dikkatine ve niteliklerine bağlıdır.

Benzer bir çalışma immünohistokimyadır. Genel olarak “histoloji” olarak da adlandırılabilir çünkü Yöntem dokuların incelenmesine dayanmaktadır, ancak immünohistokimya daha gelişmiş bir analiz yöntemidir. Bu çalışmadaki doku ayrıca, yalnızca görsel kontrastı arttırmakla kalmayıp aynı zamanda antikorlarla özel bir şekilde birleşen (“etiket”) özel reaktiflerle de boyanır, bu da neoplazmın daha fazla özelliğini belirlemeyi mümkün kılar. Bu durumda reaksiyon çok daha hızlı gerçekleşir ve bu da analiz sonuçlarını hızlı bir şekilde almanızı sağlar.

İmmünohistokimya sadece neoplazmın tipini açıklığa kavuşturmakla kalmaz, aynı zamanda tümör dokusunun çeşitli terapötik etkilere duyarlılığını belirlemeye dayalı bir hastayı tedavi etmek için bir strateji planlamaya da olanak tanır. Ek olarak, bu çalışmanın yürütülmesi mümkün olduğunca otomatikleştirilmiştir, bu da insan faktöründen kaynaklanan teşhis hatası olasılığını en aza indirir.

Vücutta bir tümörün varlığını tespit etmeye izin veren modern teşhis önlemleri de vardır: bu, kanın spektral bir analizi, immünolojik (biyokimyasal) bir analiz, tümör dokusunun bir FISH testidir. Genetik kan testi, herhangi bir kadının meme kanseri oluşumu için ön koşulların varlığını veya yokluğunu doğrulamasını sağlar. CT ve MRI, tümörün lokalizasyonunu doğru bir şekilde belirlemenize ve gelişiminin dinamiklerini izlemenize, neoplazmın yapısını değerlendirmenize olanak tanır.

Kan testiyle kanser nasıl anlaşılır?

Kan testi genellikle ultrason muayenesinden sonra doktor tarafından reçete edilir. Bir hastanın kendi inisiyatifiyle, meme kanserine yatkınlığı olup olmadığını belirlemek amacıyla pencere işaretleri veya genetik analiz için kan bağışladığı durumlar vardır. Bazı durumlarda, genel bir kan testi, bir onkoloji dispanseriyle temasa geçmenin bir nedeni olabilir (bir mührün palpasyonu veya görsel kanser belirtileriyle birlikte).

Biyokimyasal analiz

Araştırma materyali olarak kan, aşağıdaki teşhis önlemlerine olanak tanır:

Aynı zamanda, yalnızca ilk iki analize kanseri belirlemek için özel yöntemler denilebilir; ikincisi operasyonel olmaktan çok önleyici bir önlemdir. Vücudun durumunu ve sürecin boyutunu belirlemek için esas olarak ameliyattan önce iki kan testi daha yapılır. Ancak daha önce de belirttiğimiz gibi göğüste bir şişlik hissedilirse ve genel kan testi ikiden fazla negatif tanı katsayısı gösteriyorsa, bu bir uzmana başvurmak için bir nedendir. Negatif katsayılar, kan bileşiminin belirli parametrelerinde normun dışındaki göstergelerdir.

Biyokimyasal bir kan testi, tümör hücrelerine karşı antikorların varlığını tespit edebilir. Bu tür cisimlere tümör belirteçleri denir. Tümör belirteçlerinin sayısı ve türü, kanser tümörünün özelliklerine (lokalizasyonuna) ve gelişim aşamasına bağlıdır. Tümör belirteçleri şunları içerir:

Meme kanseri durumunda, ilgilenen doktor öncelikle CA-15-3 tümör belirtecinin varlığıyla ilgilenecektir, çünkü kandaki varlığı açıkça meme kanserini gösterir. Sonucun deşifre edilmesi ortalama bir gün sürer. Hastalığın seyri boyunca birkaç kez biyokimyasal analiz yapılır. Onun için kan sabahları aç karnına damardan alınır. Testten iki hafta önce hasta tüm ilaçları almayı bırakır (ilgili doktorla teyit edilmelidir). Kan bağışından iki gün önce alkol, yağlı ve kızarmış yiyecekler alamazsınız.

İşlemden bir saat önce sigara içmemelisiniz ve duygusal stresin azaltılması tavsiye edilir. Radyasyon ve fizyoterapötik tedaviden hemen sonra biyokimyasal analiz için kan genellikle bağışlanmaz.

Genetik faktörlerin tanımı

Genetik kan testinden bahsetmeden önce “genetik” ve “kalıtsal” kavramları arasındaki farkı vurgulamakta fayda var. Kanserin genetik faktörü, yalnızca yakınlarda meme kanseri olan kişilerin varlığını değil, aynı zamanda bu hastalığın riskini artıran spesifik bir gen mutasyonunu da ifade eden daha geniş bir kavramdır.

Kalıtım, aile öyküsüne dayalı olarak potansiyel meme kanseri riskini ima eder. Aynı zamanda mutant geni sadece kadınlar değil erkekler de alabilir, ancak taşıyıcısının mutlaka hastalanması gerekmez.

Her kadın genetik teste tabi tutulabilir. Bu özellikle doğrudan akrabalarında meme kanseri olan kişiler için önerilir. Analiz için kan bağışı prosedüründen önce, genetik alanında uzman bir hasta, sonuçların deşifre edilmesinin nüanslarını açıklayacak olan hastayla konuşmalıdır. Kan bağışlamadan önce hastanın özel bir hazırlık yapmasına gerek yoktur.

BRCA gen mutasyonunun pozitif sonucunu alırsanız ancak diğer endişe verici semptomların olmaması durumunda paniğe kapılmamalısınız. Bu genlerde mutasyon bulunan kadınlar için önleyici tedbir olarak düzenli kendi kendine muayene ve fizik muayene önerilebilir. 40 yıl sonra yumurtalıkların ve göğüslerin alınmasını düşünmek mantıklıdır; gelecekte çocuk sahibi olmayı planlamayan genç kadınlara bazen doğum kontrol hapı almaları tavsiye edilir. Bu önlemlere ilişkin karar tamamen kadının omuzlarındadır ve düşünceli bir yaklaşım ve doktorlara danışmayı gerektirir.

En yeni teşhis yöntemleri

Kanın spektral analizi, vücutta% 93'e varan olasılıkla neoplazmların varlığını ortaya koymaktadır. Bu, kan serumunun kızılötesi ışınlamasına ve moleküler bileşiminin analizine dayanan nispeten ucuz bir teşhis yöntemidir.

Kanın spektral analizine ilişkin sonuç "varlık-yokluk" ilkesine göre verilmiştir ve çoğu kötü huylu tümör tipini tanımlamayı amaçlamaktadır. Bu test aynı zamanda meme kanseri gelişim aşamasını da belirleyebilir. Sonuçların yorumlanması laboratuvarda yapılır ve ek bir doktor görüşü gerektirmez.

Spektral analiz için kan bağışı yapabilmek için işlemden 2 ay önce ilaç alımının tamamlanması gerekmektedir. Röntgen veya başka bir maruziyetin yanı sıra kemoterapi anından itibaren en az 3 ay geçmelidir. Ayrıca kan örneği alınırken kadının hamile olmaması veya regl olmaması gerekmektedir. Kan örneklemesi günün ilk yarısında aç karnına yapılır. Spektral kan testi ortalama 12 iş günü sürer.

Kanser teşhisinde kullanılan en yeni yöntemlerden biri “balık testi” (FISH, floresan hibridizasyon) olarak adlandırılan testtir. Etkinliği hâlâ tartışılıyor; uygulanabilirliğiyle ilgili asıl soru pahalı araştırma prosedürüdür. Yöntemin özü, hücre parçalarını floresan bir bileşimle etiketlemek ve hücrelerin daha fazla mikroskobik incelenmesidir. Etiketli parçaların genetik materyalin hangi bölümleriyle ilişkili olduğuna bağlı olarak hastanın kansere yatkınlığı olup olmadığı ve belirli bir vakada hangi tedavi yöntemlerinin uygun olacağı anlaşılabilir.

FISH testi tamamen olgunlaşmış hücrelere ihtiyaç duymaz, bu nedenle gerçekleştirilmesi diğer laboratuvar testlerine göre çok daha hızlıdır. Ayrıca FISH yöntemi, diğer analiz türleriyle yapılması mümkün olmayan genetik hasarı daha net gözlemlemenize olanak sağlar. FISH testi çoğunlukla meme kanserini tespit etmek için kullanılır, ancak aynı zamanda diğer bazı kanser türlerini tespit etmek için de çalışır.

FISH testinin dezavantajları, yüksek maliyetinin yanı sıra, etiketlerin özgüllüğü nedeniyle bazı kromozom bölgelerinde çalışılamamasıdır. Ayrıca FISH testi, genetik koddaki bazı mutasyon türlerini ve kırılmaları göz ardı eder ve bu da tanıda önemli bir ihmal olabilir. FISH'in daha ucuz IHC testi ile karşılaştırmalı çalışmaları, kanser hücrelerinin Herceptin'e duyarlılığının belirlenmesinde önemli bir avantaj göstermedi. Ancak FISH testi şu anda kanser teşhisinde yüksek doğruluk oranına sahip yöntemler arasında en hızlı olanıdır.

FISH - Floresan in situ hibridizasyon tekniği 1980'lerin ortalarında geliştirildi ve kromozomlar üzerindeki spesifik DNA dizilerinin varlığını veya yokluğunun yanı sıra kromozom 6'nın sentromeri olan CEP6(6p11.1) üzerinde yer alan alfa uydu DNA'sının varlığını veya yokluğunu tespit etmek için kullanıldı. 1-q11.1).

Bu, tümör antijenlerinin keşfi nedeniyle melanositik kökenli onkolojik hastalıkların tanısında önemli bir değişiklik sağladı. Malign bir arka plana karşı, üç antijende bir mutasyon belirlenir: CDK2NA (9p21), CDK4 (12q14) ve CMM1(1p). Bu bağlamda, melanositik deri tümörlerinin genetik özelliklerinin belirlenmesine dayanan objektif ayırıcı tanı olasılığı, melanom ve öncüllerinin erken teşhisinde büyük önem taşımaktadır.Çalışılan genlerin ve kromozom 6'nın normal bir setine sahip çekirdekte Kırmızı renkli iki RREB1 geni, sarı renkli iki MYB geni, yeşil renkli iki CCND1 geni ve mavi renkli kromozom 6'nın iki sentromeri gözlenir. Teşhis amacıyla floresan numuneler kullanılır.

Reaksiyon sonuçlarının değerlendirilmesi: Her numunenin 30 çekirdeğindeki kırmızı, sarı, yeşil ve mavi sinyallerin sayısı sayılır, numunenin genetik olarak melanomaya karşılık geldiği, genetik bozuklukların çeşitli varyantlarının dört parametresi tanımlanır. Örneğin, çekirdek başına ortalama CCND1 geni sayısı ≥2,5 ise bir numune melanom ile tutarlıdır. Diğer genlerin kopya sayısı da aynı prensibe göre tahmin edilir. Bir ilaç, dört koşuldan en az birinin karşılanması durumunda FISH pozitif olarak kabul edilir. Dört parametrenin tamamının kesim değerlerinin altında olduğu numuneler FISH negatif olarak kabul edilir.

Kromozomlar üzerindeki spesifik DNA dizilerinin belirlenmesi, biyopsi veya cerrahi materyalin kesitleri üzerinde gerçekleştirilir. Pratik uygulamada, FISH reaksiyonu şuna benzer: melanositlerin çekirdeğinde DNA içeren, incelenen materyal, çift sarmallı yapıyı kırmak ve böylece istenen bölgeye erişimi kolaylaştırmak için molekülünü kısmen yok edecek şekilde işlenir. gen. Örnekler DNA molekülüne bağlanma yerine göre sınıflandırılır. Klinik pratikte FISH reaksiyonunun materyali parafin doku kesitleri, smearlar ve baskılardır.

FISH reaksiyonu, gen kopya sayısındaki artış, gen kaybı, kromozom sayısındaki değişiklikler ve niteliksel değişiklikler (gen lokuslarının aynı anda hareketi) sonucunda DNA molekülünde meydana gelen değişiklikleri tespit etmenizi sağlar. Kromozom ve iki kromozom arasındadır.

FISH reaksiyonu kullanıldığında elde edilen verileri işlemek ve üç çalışma grubunun genlerinin kopya sayıları arasındaki ilişkiyi incelemek için Spearman korelasyon katsayısı kullanılır.

Melanom, nevüs ve displastik nevüs ile karşılaştırıldığında kopya sayısında artış ile karakterize edilir.

Basit bir nevüs, displastik nevüsle karşılaştırıldığında kopya sayısında daha az anormalliğe sahiptir (yani daha normal kopya sayıları).

Bir numunenin bir sınıfa mı yoksa diğerine mi ait olduğunu tahmin etmeyi mümkün kılan karar kurallarını oluşturmak için (basit ve displastik nevüslerin ayırıcı tanısı), "karar ağaçlarının" matematiksel aparatı kullanılır. Bu yaklaşım pratikte kendini iyi bir şekilde kanıtlamıştır ve bu yöntemi kullanmanın sonuçları (sinir ağları gibi diğer birçok yöntemin aksine), basit, displastik nevus ve melanomun ayırt edilmesine yönelik karar kurallarını oluşturmak için açıkça yorumlanabilir. Tüm durumlarda ilk veriler dört genin kopya numaralarıydı.

Ayırıcı tanı için bir karar kuralı oluşturma görevi birkaç aşamaya ayrılmıştır. İlk aşamada nevüsün türü dikkate alınmadan melanom ve nevüs ayrılır. Bir sonraki aşamada basit ve displastik nevüsleri ayırmak için bir karar kuralı oluşturulur. Son olarak son aşamada displastik nevüs displazisinin derecesini belirlemek için bir "karar ağacı" oluşturmak mümkündür.

Nevileri alt görevlere ayırma görevinin bu şekilde bölünmesi, her aşamada yüksek tahmin doğruluğu elde edilmesini mümkün kılar. Karar ağacını oluşturmaya yönelik girdi verileri, melanom tanısı alan hastalar ve melanom dışı tanı alan hastalar (çeşitli nevüs türlerine sahip hastalar - basit ve displastik) için dört genin kopya sayısına ilişkin verilerdir. Her hasta için 30 hücreye ait gen kopya sayılarına ilişkin veriler bulunmaktadır.

Böylece, bir tanıyı tahmin etme sorununu birkaç aşamaya bölmek, yalnızca melanom ile nevüs arasında ayrım yapmak için değil, aynı zamanda nevüs tipini belirlemek ve displastik nevüs için displazi derecesini tahmin etmek için de oldukça doğru karar kuralları oluşturmayı mümkün kılar. Oluşturulan "karar ağaçları", gen kopya sayıları hakkındaki bilgilere dayanarak tanıyı tahmin etmenin görsel bir yoludur ve klinik uygulamada cildin iyi huylu, kötü huylu ve kötü huylu melanositik neoplazmalarını ayırt etmek için kolayca kullanılabilir. Önerilen ek ayırıcı tanı yöntemi, pediatrik hastalarda dev konjenital pigmente nevüslerin ve displastik nevüslerin eksizyonu sırasında özellikle önemlidir, çünkü bu tür hastalar tıbbi kurumları ziyaret ettiğinde yüksek oranda tanısal hata gözlenir. Açıklanan yöntemi kullanmanın sonuçları oldukça etkilidir; özellikle FAMM sendromlu hastalarda pigmente deri tümörlerinin tanısında kullanılması tavsiye edilir.

İnvazif doğum öncesi teşhis yöntemleri, yalnızca geleceğe bakmayı ve doğmamış bebeğin intrauterin malformasyonlarla ilişkili hastalıklarla karşılaşıp karşılaşmayacağını güvenilir bir şekilde tahmin etmeyi değil, aynı zamanda konjenital patolojilerin doğasını ve nedenlerini de bulmayı sağlar.

Ancak herhangi bir bilgi yalnızca zamanında verildiğinde değerlidir. Fetal gelişim durumu söz konusu olduğunda test sonuçlarının alınma hızı hayati önem taşır.

Bu nedenle, embriyoda en sık görülen gelişimsel anomalilerin varlığının mümkün olan en kısa sürede tespit edilmesini sağlayan FISH yöntemi, genetik teşhiste büyük talep görmektedir.

FISH, kromozomal anormallikleri - floresan in situ hibridizasyon - "ev" ortamında floresan hibridizasyonu tespit etmeye yönelik teknolojinin özünü deşifre eden bir kısaltmadır.

Geçen yüzyılın 70'li yıllarının sonlarında J. Goll ve M.-L. tarafından önerilen bu teknik. Pardew, denatürasyondan sonra nükleik asit parçalarının (DNA veya RNA) dizilimini geri yükleme olasılığına dayanmaktadır.

Yazarlar, yapay olarak oluşturulmuş etiketli DNA problarının (problar) ve analiz için alınan sitogenetik materyalin yerinde hibridizasyonunu kullanarak, ilgilenilen kromozomlardaki niceliksel ve niteliksel sapmaları tanımlamaya olanak tanıyan bir yöntem geliştirdiler.

Geçen yüzyılın sonunda, DNA problarını boyamak için floresan boyaların başarılı bir şekilde kullanılmasından sonra, FISH yöntemi adını aldı ve o zamandan beri yoğun bir şekilde geliştirildi ve çeşitlendirildi.

Modern FISH analiz teknikleri, seçilen genetik materyalin analizi için tek bir hibridizasyon prosedüründe en eksiksiz bilginin elde edilmesinin mümkün olmasını sağlamaya çalışmaktadır.

Gerçek şu ki, hibridizasyondan sonra aynı sitogenetik materyalin yalnızca sınırlı sayıda kromozomu değerlendirilebilir. DNA zincirlerini yeniden hibritleme yeteneği zaman zaman azalır.

Bu nedenle, şu anda genetik teşhiste, in situ hibridizasyon yöntemi en sık, 21, 13, 18 numaralı kromozomların yanı sıra X, Y cinsiyet kromozomları üzerindeki mevcut, en yaygın anöploidiler hakkındaki soruları hızlı bir şekilde yanıtlamak için kullanılır.

FISH analizi için her türlü doku veya hücre örneği uygundur.

Doğum öncesi tanıda bunlar kan örnekleri, ejakülat veya sperm örneği olabilir.

Analiz için alınan materyalden elde edilen hücrelerin, klasik karyotipleme yönteminde olduğu gibi, besin ortamlarında yetiştirilmesine gerek kalmaması ve gerekli sayıda bölünmesinin sağlanmasıyla sonuç alma hızı sağlanır.

Seçilen malzeme, konsantre saf hücre süspansiyonu elde etmek için özel hazırlıklara tabi tutulur. Daha sonra, DNA numunesinin ve incelenen numunenin doğal DNA'sının denatürasyon süreci, tek sarmallı bir duruma ve renkli DNA problarının numunenin DNA'sı ile inkübe edildiği hibridizasyon prosesine kadar gerçekleştirilir.

Böylece hücrede istenilen (renkli) kromozomlar görselleştirilir, sayıları, genetik yapıların yapısı vb. değerlendirilir. Özel bir floresan mikroskobun göz merceği, parlayan DNA zincirlerini incelemenizi sağlar.

Şu anda FISH yöntemi, genetik hastalıkları, üreme tıbbında, onkolojide, hematolojide, biyolojik dozimetride vb. kromozomal anormallikleri tanımlamak için teşhis amaçlı yaygın olarak kullanılmaktadır.

Fetusun FISH tanısı nasıl kullanılır?

Üreme tıbbı alanında moleküler sitogenetik tanı yöntemlerinden biri olan FISH yöntemi her aşamada kullanılmaktadır.

• bir çift.

Gelecekteki ebeveynlerin karyotipini belirlemek için, insan genomu yaşam boyunca değişmeden kaldığı için bir kez gerçekleştirilir.

Bir çiftin çocuk sahibi olmadan önce karyotiplenmesi, ebeveynlerin gizli olanlar da dahil olmak üzere kalıtsal genetik patolojilerin taşıyıcıları olup olmadığının belirlenmesine yardımcı olacaktır. Ayrıca anne ve baba adayının genomunun genel durumu, bebek sahibi olma ve hamileliği sonuna kadar taşıma başarısını etkileyebilir.

Bu durumda FISH yöntemini kullanan teşhis, mozaikçilik şüphesi varsa, test materyalindeki (ebeveynlerin venöz kanı) kromozomal patolojileri belirlerken genellikle klasik karyotiplemeye ek bir inceleme görevi görür.

FISH yöntemini kullanan ek inceleme, gelecekteki ebeveynin hücrelerinde şüpheli bir anormalliğin varlığını güvenilir bir şekilde doğrulayacak veya çürütecektir.

• Boşalma çalışması.

"Erkek faktörü" nedeniyle bir çiftte üreme güçlükleri için endikedir. FISH yöntemini kullanarak sperm analizi, kromozomal setteki anormal sperm seviyesini değerlendirmenize ve ayrıca bir erkeğin cinsiyete bağlı genetik hastalıkların taşıyıcısı olup olmadığını belirlemenize olanak tanır.

Çift daha sonra tüp bebek yöntemine başvurursa, ejakülatın FISH analizi, yumurtayı döllemek için en kaliteli spermin seçilmesine olanak sağlayacaktır.

• IVF ile.

Preimplantasyon genetik tanı (PGD) için. Ebeveynlerin karyotip çalışmalarının sonuçlarına göre embriyoya geçebilecek olası kromozomal ve genetik anormallikler belirlenir.

FISH teşhisinin yetenekleri sayesinde, ortaya çıkan embriyoların genetik sağlığına ilişkin bir çalışma, sağlıklı olduğu bilinen bir fetusla hamileliğin sağlanması için rahim boşluğuna transfer edilmeden birkaç saat önce gerçekleştirilebilir.

Ek olarak, PGD'nin yetenekleri embriyoların cinsiyetini belirlemeyi ve dolayısıyla gerekirse doğmamış çocuğun cinsiyetini "sıralamayı" mümkün kılar.

• Hamilelik sırasında.

Doğum öncesi teşhislerde: Koryonik villus örneklemesi, amniyosentez veya kordosentez kullanılarak elde edilen fetal hücrelerin FISH yöntemi kullanılarak analizi genellikle tıp merkezleri tarafından fetal hücrelerin klasik genetik çalışmasına (karyotipleme) ek olarak sunulmaktadır.

Bu yöntem, fetüsteki en yaygın kromozomal kusurların varlığı hakkında hızlı bir şekilde bir cevap elde etmek gerektiğinde vazgeçilmezdir: 21, 18, 13 numaralı kromozomlardaki trizomi, X ve Y kromozomlarındaki anormallikler, bazen de 14 numaralı kromozomdaki anöploidiler (veya 17), 15, 16.

FISH analizinin avantajları

FISH yöntemini kullanarak genetik analiz yapmak, günümüzde kromozomal patolojilerin teşhisinde yardımcı bir yöntem olarak kalsa da, uygulamasının fizibilitesi yadsınamaz avantajlarla belirlenir:

• Test edilen kromozomlarla ilgili sonuçların elde edilme hızı birkaç saat içindedir - en fazla 72 saat.

Hamileliğin kaderi genetikçilerin tanısına bağlıysa bu önemli olabilir;

• FISH yönteminin yüksek hassasiyeti ve güvenilirliği - ihmal edilebilir miktarda biyomateryal üzerinde başarılı analiz mümkündür - bir hücre yeterlidir, sonuçların hatası% 0,5'ten fazla değildir.

Orijinal numunedeki hücre sayısı sınırlı olduğunda, örneğin bölünmeleri zayıf olduğunda bu önemli olabilir.

• Hamileliğin herhangi bir aşamasında (7. haftadan itibaren) FISH yöntemini kullanarak ve herhangi bir biyolojik numuneyi kullanarak teşhis yapma imkanı: koryon parçaları, amniyotik sıvı, fetal kan vb.

FISH yöntemini kullanarak tanıyı nerede koyabilirim?

Moskova'da, fetüsün kromozomal anormalliklerinin doğum öncesi tanısı için FISH yöntemi aşağıdaki tıp merkezlerinde kullanılmaktadır:

Kural olarak klinikler, ek bir ücret karşılığında, invaziv müdahale yoluyla tam fetal karyotiplemenin bir parçası olarak FISH teşhis hizmetlerini sunmaktadır. Ve kural olarak, gelecekteki ebeveynler fazladan ödeme yapmayı kabul eder, çünkü FISH yöntemi sayesinde sadece birkaç gün içinde bebeğinizle ilgili en önemli şeyleri öğrenebilirsiniz.

Meme kanseri hafife alınmamalıdır. Kesinlikle herkesi etkileyebilir – genç ve yaşlı, kadın ve erkek. Tedavinin aşırı karmaşıklığı, yüksek mortalite ve artan morbidite dinamikleri, tıpta bu soruna artan ilginin nedenidir.

Bugüne kadar hastalığın olumlu sonucunu %100 garanti eden bir tedavi yöntemi yoktur. Mevcut yöntemler emek yoğundur, pahalıdır ve vücuda büyük zararlar verebilir.

Bu, en iyi tedavinin risk faktörlerinin ortadan kaldırılması ve zamanında teşhis olduğunu söyleyebileceğimiz hastalıklardan biridir.

Meme kanserine yatkınlık

Kanserin ilk kez M.Ö. 15. yüzyılda tanımlanmasına ve bilim adamlarının elinde çok fazla bilgi bulunmasına rağmen meme kanserinin etiyolojisini tam olarak tanımlamak hala yeterli değildir.

Kanserin ortaya çıkmasını veya gelişmesini etkileyen çevresel faktörler yeterli güvenilirlikle bulunamamıştır. Belirli bir kanserojeni gösteren bireysel çalışmalar tüm tıp camiası tarafından tam olarak kabul görmemektedir. Ancak meme kanseri ile aşağıdakiler arasında bazı korelasyonlar vardır:

Yukarıda listelenen en önemli faktörlerden biri yaştır: Yıllar geçtikçe meme kanserine yakalanma olasılığı kat kat artar. Genel olarak meme kanseri etiyolojisi konusunun karmaşıklığı genetik yapısından kaynaklanmaktadır. Neden aniden bir arıza meydana geldiği ve meme dokusunun kontrolsüz bir şekilde bölünmeye başlayarak komşu dokuları etkileyerek tüm vücutta metastazlara yol açmasının nedeni bilinmemektedir.

Ancak bilim insanları bir konuda hemfikir: Modern yaşam, kansere eskisinden çok daha fazla yol açıyor.

Bu nedenle, yüksek dozda elektromanyetik radyasyon, zayıf ekoloji, şehirlerdeki düşük oksijen seviyeleri, fiziksel hareketsizlik, stres vb. belirtilmektedir.Kişi, önemli ölçüde artan yaşam yaşını hesaba katmadan edemez, çünkü kanser genellikle ortaya çıkan bir hastalıktır. yetişkinlik.

Gerekli testler

Olumlu bir kanser sonucu olasılığı doğrudan tedavinin başlama zamanlaması ile ilgilidir, bu nedenle tanıya yönelik tutum en ciddi olmalıdır.

Aşağıdaki teşhis yöntemleri gereklidir:

• aylık kendi kendine kontrol (palpasyon testi);
• üç ayda bir doktora danışın;
• Her altı ayda bir ultrason;
• Her yıl MR.

Radyasyona maruz kalmaktan genç yaşta kaçınmak en iyisi olduğundan, 30 yaşından önce mamografi (röntgen) önerilmez. Meme kanserinden şüpheleniyorsanız aşağıdaki testlerden geçmeniz gerekecektir:

FISH araştırma yöntemi

FISH çalışması (FISH analizi), HER2 membran proteinini (İnsan Östrojen Reseptörü2) incelemek için kullanılan sitogenetik bir yöntemdir. FISH çalışması yapılırken floresan boyayla etiketlenmiş DNA probları kullanılır. Bu problar istenen DNA bölgelerine yerleştirilir ve HER2 amplifikasyonunun derecesini ölçebilir. Çalışma zaman içinde yapıldığından ve genler bölünmeye devam ettiğinden, HER2 geninin kopya sayısının normal bölünen bölgenin kopya sayısına oranını tahmin etmek mümkündür. 2'den büyük veya ona eşitse sonuç HER2 pozitif kabul edilir.

FISH analizi, kanserin prognozunda ve tedavi prensiplerinin seçiminde hayati bir rol oynar. Dolayısıyla bu proteinin çoğalması veya aktivitesinin artması, kanser vakalarının %30'unda meydana gelir ve işlevini engellemeyi amaçlayan özel tedavi yöntemleri gerektirir. Normal koşullar altında HER2 hücre büyümesini, bölünmesini ve kendi kendini onarmayı kontrol eder. Kanser durumunda bu protein çok fazla zar reseptörü üretir ve hücrelere kontrolsüz bir şekilde bölünme talimatı verir. Hücre bu şekilde kansere dönüşür.

FISH testi sonucu pozitif ise HER2'yi baskılamaya yönelik tedavi reçete edilir. Günümüzün ana ilacı Herceptin'dir. Bu testin yapılmaması veya sonuçlarının göz ardı edilmesi durumunda tedavi seçimi yanlış olacak ve kanser terminal aşamaya ilerleyecektir. Ayrıca bu tür kanserlerin gelişimi HER2 negatif kansere göre daha agresiftir.

FISH analizi ile birlikte immünohistokimyasal analiz yapılır. Bu aynı zamanda HER2 proteinini incelemek için kullanılan bir gen yöntemidir, ancak immünohistokimyasal analiz durumunda HER2 proteininin miktarı hücrede değil belirli bir örnekte tespit edilir.

Maliyet açısından balık yönteminden farklıdır ancak çıktı, araştırmacıya, laboratuvara ve kullanılan kriterlere bağlı olarak daha az bilgilendirici sonuçlar verir. HER2 proteininin miktarı, test örneğinin rengine göre belirlenir ve sıfırdan üçe kadar bir ölçekte puanlanır. Bu iki yöntem birlikte bir hastanın HER2 durumunu incelemek için altın standarttır.

Dolayısıyla imajına rağmen meme kanseri oldukça tedavi edilebilir. Onkologların cephaneliklerinde tıbbın tüm gelişmiş başarıları var. Tüm bu araçlara en sıradan vatandaş bile oldukça erişilebilir.

Hastalığın başarılı bir şekilde sonuçlanmasındaki en önemli şey, meme kanseri için zamanında test yapılması, doğru tedavi yönteminin seçilmesi ve tedaviye daha erken başlanmasıdır. Sonuç yoksa umutsuzluğa kapılmayın çünkü olumlu bir duygusal arka planın da hastalığın seyri üzerinde önemli bir etkisi vardır.