Како се спроведува и што покажува ензимската имуноанализа. Што е ИФА? Метод на ензимска имуноанализа: суштина, принцип, недостатоци Што значи методот IF

Списокот на достапни дијагностички методи рапидно се шири во последниве децении, дијагностичарите се обидуваат да ги комбинираат предностите на сите претходни анализи во нови методи, ослободувајќи се од сите нивни претходни недостатоци.

Неодамна, сè почесто во списокот на дијагностички процедури се појавува ензимска имуноанализа - модерен и прилично нов тест, кој е малку познат на обичниот човек кој не е поврзан со медицината. Сепак, оваа техника брзо ги надополнува редовите на своите приврзаници меѓу квалификуваниот медицински персонал. Што е тоа и во кои случаи треба да се користи, можете да се обидете да го дознаете со запознавање со неговите карактеристики и главни карактеристики.

Ензимската имуноанализа е инструментална лабораториска техника заснована на молекуларната реакција антиген-антитело, што овозможува откривање на специфични протеини во биолошки материјали (примероци за истражување). Такви протеини можат да бидат ензими, разни микроорганизми (вируси, бактерии, габи), протозои итн.

По откривањето на методот, го доби името ELISA тест, кој не е поврзан со името на откривачите, туку е кратенка од целото име во англиската верзија - ензимски имуносорбентен тест. Лекарите ширум светот го користат ова име, некои лекари во земјите што зборуваат руски исто така го нарекуваат овој тип на студии.

Главниот принцип на методот е молекуларната реакција „антиген-антитело“.

Антиген е секоја туѓа молекула која влегува во човечкото тело како дел од патоген микроб. Антигените обично се протеински молекули. Покрај микроорганизмите, таков „странец“ може да бидат клетки од туѓа крв што не се совпаѓаат во група или Rh фактор.

Како одговор на влегувањето на таков антиген во телото, се започнува имунолошка реакција, која е насочена кон заштита од какви било туѓи молекули. Ова се случува поради синтезата на специјални агенси на имунолошкиот систем - антитела (имуноглобулини). Секое антитело се приближува само до одреден антиген и го неутрализира патогениот „аутсајдер“, врзувајќи се за него во единствен комплекс. Токму процесот на такво врзување се нарекува реакција на антиген-антитело.

Видови на антитела

Сите антитела (имуноглобулини) се поделени на 5 типа во зависност од тоа во која фаза од имунолошкиот одговор се појавуваат:

За ELISA дијагностика, најчесто се важни нивоата на имуноглобулините IgG, IgM и IgA. Според нивните заслуги, можете да дознаете дали некое лице претходно имало болест или неодамна се заразило, дали има развиено имунитет или неговото тело е беспомошно од патологија.

Предности и недостатоци на ензимската имуноанализа

Во моментов, ELISA е еден од најточните и најчувствителните методи. Тој е усвоен од специјалисти од различни области на медицината и продолжува да го проширува својот опсег.

Предности на методот

  • Висока точност на примените податоци.
  • Чувствителност (ви овозможува да ја откриете потребната супстанција дури и со минимално присуство на патогенот во примерокот).
  • Можноста за дијагноза во првите денови од болеста или во периодот на инкубација.
  • Брзината на стекнување податоци во споредба со другите методи со слична точност.
  • Висока автоматизација на процесот и минимално човечко учество, што ја намалува грешката на изведувачот.
  • Добивање податоци за фазата на патолошкиот процес и ефективноста на избраната терапија.
  • Безболна и ниска инвазивност при изборот на материјал.

Недостатоци на методот

  • Во повеќето случаи, тоа ви овозможува да го одредите одговорот на телото на патоген агенс, а не на самиот патоген.
  • Пред студијата, сомнителната болест мора точно да се знае, бидејќи тестот е многу специфичен.
  • Веројатноста за лажни индикатори предизвикани од технички проблеми, земање лекови, истовремено присуство на неколку хронични заболувања или метаболички нарушувања во телото на пациентот.
  • Толкувањето на резултатите треба да го врши само високо квалификуван специјалист, бидејќи за да се интерпретираат добиените податоци, неопходно е да се има специјална обука и голем залиха на медицинско знаење во одредена област.
  • ELISA е прилично ретка анализа, затоа не се изведува во сите дијагностички лаборатории.
  • Методот е прилично скап, бидејќи покрај реагенси, лабораторијата мора да има многу скапа опрема и примероци на антигени произведени во специјални институти.

Кога се користи ензимска имуноанализа?

Целосната листа на индикации за назначување на ензимска имуноанализа е многу широка, ги вклучува скоро сите гранки на медицината.

Најчесто, ELISA се користи за такви цели:

  • откривање на заразни болести;
  • дијагноза на венерични болести;
  • определување на имунолошкиот статус или индивидуални автоимуни болести;
  • идентификација на туморски маркери;
  • дефиниција на хормони.

Во случај на заразни и вирусни заболувања, техниката овозможува да се идентификуваат следниве патологии:

Покрај тоа, ELISA ви овозможува брзо и ефикасно да одредите срцев удар, да го процените репродуктивниот потенцијал на телото, да ги идентификувате алергиите, неговиот извор итн.

Техниката ELISA се користи за спроведување на клинички испитувања во развојот на нови лекови и во проценката на нивното влијание врз човечкото тело.

Видови примероци и методи на нивна селекција за истражување

Најчесто, тест материјал за ензимска имуноанализа е крвта, која се зема од кубиталната вена на пациентот. Земањето мостри се врши на празен стомак, главно наутро. По изборот од крвта, оние формирани клетки кои се мешаат во студијата се одвојуваат и се отстрануваат, оставајќи го само серумот.

При дијагностицирање на генитоуринарни инфекции, брисевите од мукозните ткива на гениталните органи, слузта од уретрата или грлото на матката, примероците од ректумот, стругањата од ерозии или чиреви во пределот на препоните и од други делови на телото често стануваат материјални. Може да се земат брисеви од усната шуплина, како и од назофаринксот.

Понекогаш ензимската имуноанализа се користи во акушерската и гинеколошката пракса за време на бременоста за да се утврди состојбата на плодовата вода. Во овој случај, амнионската течност станува примерок. За да го направите ова, мала количина течност се зема со пробивање на феталниот мочен меур со долга игла. Сите манипулации се вршат со стерилен инструмент за да се минимизираат можните ризици.

Често материјалот станува цереброспинална или серозна течност. Ова се случува со локална анестезија, која се инјектира.

Наведете каков тип на материјали е потребен за ензимска имуноанализа, треба специјалистот што испраќа на студијата. Честопати се земаат примероци од повеќе типови одеднаш или од различни локации. Лекарот кој го издава упатот за овој вид преглед треба да му каже на пациентот и за подготовката за испорака на биоматеријалот.

Подготовка за ензимска имуноанализа

За да се зголеми точноста на податоците добиени по ензимската имуноанализа, подготовката за избор на материјал треба да биде како што следува:

  • 10 дена пред студијата, исклучете антибиотици, антивирусни и антимикотични лекови;
  • за еден ден е неопходно да се исклучи алкохолот, пушењето и земање дрога;
  • во истиот период, неопходно е да се избегне физички прекумерен напор;
  • информирајте го препишувачот за сите лекови што ги зема пациентот;
  • Известете го вашиот лекар ако сте бремени или се сомневате дека сте бремени.

Најдобро е материјалите за тестирање да се изберат наутро на празен стомак.

Ако дијагнозата има за цел да ја одреди состојбата на хормоналната позадина, тогаш важно е да се обезбеди мирна состојба во пресрет и да се избегне нервна напнатост. За жените, крводарителството за хормони е јасно определено со периодот на месечниот циклус, за кој лекарот ќе разговара за време на назначувањето.

2-3 дена пред да се земе материјалот, пржената и мрсната храна треба да се исклучи од менито, а цитрусно овошје и секое друго портокалово и жолто овошје и зеленчук не треба да се јаде пред тестот за хепатитис.

Дешифрирање на резултатите од ензимската имуноанализа

Резултатот од квалитативна студија, по правило, е означен со знаците „+“ (пронајден) или „-“ (не е пронајден).

Со присуство или отсуство на одредени групи на имуноглобулини, може да се извлечат следниве заклучоци:

  • JgM (-), JgG (-), JgA (-) - имунитетот на болеста е целосно отсутен (телото претходно не се сретнало со овој тип на антиген);
  • JgM (-), JgG (+), JgA (-) - претходно имаше судир со овој антиген или со вакцина;
  • JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) - акутен патолошки процес (најверојатно примарен);
  • JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) - хроничен тек;
  • JgM (+), JgG (+), JgA (+) - релапс;
  • JgM (-) - фаза на закрепнување.

Квантитативните вредности носат големо оптоварување со информации, но само лекарот што посетува може да ги интерпретира, врз основа на претходните индикации, возраста на пациентот и нормите за секоја специфична болест. Поради оваа причина, невозможно е самостојно да се проценат резултатите.

Колку долго да чекате за резултати

Оваа техника има многу варијанти, во зависност од тоа што се одредува терминот за добивање податоци при рака. Просечното времетраење на дијагностиката ELISA е 4-6 часа, што овозможува да се издаваат резултати веќе следниот ден.

Најдолгите методи траат до 10 дена, на пример, во случај на откривање на ХИВ инфекција.

Во случај на итна потреба, можно е да се користат експресни методи, во кои одговорот се добива во рок од 1-2 часа.

Каде можам да добијам ELISA тест?

Бидејќи опремата за овој тип на дијагностика е прилично скапа, не можат сите лаборатории да ја купат. Дополнително, тестовите кои содржат специфични антигени имаат ограничен рок на траење (обично околу 1 година), па затоа треба постојано да се ажурираат.

Поради овие причини, државните медицински установи не секогаш имаат лаборатории за ЕЛИСА. Најчесто, треба да контактирате со големи приватни медицински или големи дијагностички центри.

За да се спроведе студија за ELISA, лабораторијата мора да има посебна лиценца, а персоналот и лабораториските асистенти мора да поминат специјална обука.

Најчесто, специфичен дијагностички центар или лабораторија препорачува лекарот кој го насочува пациентот на преглед.

Цената на ензимската имуноанализа

Цената за оваа студија зависи од регионот на земјата и од нивото на клиниката што ја обезбедува услугата. Во Москва, минималната цена за одредување на еден антиген започнува од 700 рубли. Ако е неопходно да се идентификуваат неколку имуноглобулини одеднаш, цената ќе се сумира.

Во случај на итна анализа, цената се зголемува за 150-200 рубли. за секој антиген.

И покрај прилично високата цена, ензимската имуноанализа овозможува да се направи прегледот на пациентот што е можно поинформативен и брз, што го намалува времето пред почетокот на третманот и ви овозможува брзо да ја стабилизирате состојбата на лицето.

Ова видео го прикажува филмот „Основи на ензимска имуноанализа“.

Од време на време, лекарите препишуваат тестови за ELISA, не секој знае што е тоа. Декодирањето на ELISA го има следново - ензимска имуноанализа. Таквиот тест на крвта помага да се разбере како телото се бори со болестите на инфективниот спектар и да ја покаже фазата на болеста. Ензимската имуноанализа помага во проценката на заштитната активност на крвта, идентификување на имунодефициенција кај патологии поврзани со инфекции, хормонски проблеми и многу повеќе.

Крвниот тест ELISA работи со материјал кој се зема од вена. Дополнително, за испитување е достапна содржината на стаклестото тело, течност од 'рбетниот мозок, брисеви од уретрата или цервикалниот канал. За ензимска имуноанализа, ELISA кај бремени жени може да ја земе течноста што го опкружува фетусот.

Во овој случај, крвта може директно да се тестира за ELISA користејќи различни техники. Има директен пат, индиректен пат, конкуренција и блокирање. Кога организмот е заразен со некој патоген агенс, кој се нарекува антиген, имунолошкиот систем почнува да произведува специфични антитела, на пример, за хепатитис. Овие антитела се насочени кон „справување“ со странски агенти. Што се антитела? Тоа се специјални протеини кои можат да се врзат за антигени и да формираат имунолошки насочени комплекси, кои се нарекуваат антиген-антитела. За откривање на овие комплекси е одговорна дијагностиката ELISA.За да се открие антиген, антителата се додаваат на добиениот примерок од крв или се врши обратна процедура.

Позитивниот резултат на ELISA се заснова на реакцијата на имунитетот и ензимите. Под дејство на првото, агенсите за инфекција и клеточните елементи се врзуваат, вториот помага да се визуелизира резултатот од првиот. Имунолошкиот одговор вклучува антитела и антигенски лигамент. Како резултат на овој процес, се формира имунолошки насочен комплекс. Сите клетки имаат антиген на нивната површина. Имунолошката клетка ја фаќа сомнителната, а антигенот, кој е фиксиран на површината, поминува низ процедура за споредба со информациите што се „вчитаат“ во меморијата. Ако има совпаѓање со описот, тогаш клетката се враќа дома, ако не, тогаш се јавува врска, чие создавање е одговорно за антителото што се прицврстува на површината.

Ензимската реакција, пак, дозволува супстанциите да се трансформираат во нови. Материјалот е изложен на ензимот. Во овој случај, ензимската разлика е обезбедена од различни супстрати. Производот што произлегува од оваа реакција се испраќа до одредување на количината на патогенот, чиешто определување се заснова на густината на бојата на растворот.

Карактеристики на методот

Ензимски имуносорбентна анализа се пропишува кога е неопходно да се дијагностицираат алергии, болести кои се од вирусно потекло. Исто така постои и ELISA тест за сифилис и голем број други инфекции, чиешто пренесување се јавува преку незаштитен сексуален контакт. Таквата дијагностика станува сè попопуларна во споредба со PCR. Факт е дека ПЦР вклучува работа со размаски. За разлика од PCR, резултатите од ELISA може да се добијат од тестови на крвта.

Дополнително, може да се препише тест на крвта ELISA кога е неопходно да се утврди присуство на имунодефициенција, да се дијагностицира онкологија, да се оцени колку е ефективен третманот, да се одреди хормонското ниво и да се изврши предоперативен преглед во комплексот.

Ако ги споредиме студиите на ELISA, на пример, со PCR, можеме да најдеме голем број на предности. Главната работа е можноста за целосна дијагноза дури и во најраните фази на развој. Дополнително, резултатите од ELISA помагаат во одредувањето на специфичната фаза на болеста, на кое ниво е нејзиниот развој.

Анализата ELISA во споредба со PCR има поголема ефикасност, покрај тоа, може да се земе за време на бременоста за откривање на СПБ. Секој кој го поминал овој тест може да ја дознае концентрацијата на TSH во крвниот серум. Ова е многу важно за да се провери реакцијата на тироидната жлезда, дали има дефекти во нејзината работа.

Дополнителни предности, меѓутоа, ги има и полимеразната верижна реакција, е брзината на студијата, што значи дека резултатите се добиваат брзо. Лекарите ја ценат точноста на резултатите. Ако зборуваме за СПБ, тогаш нивото достигнува 98 проценти, како што е случајот со концентрацијата на ТСХ.

Се разбира, тоа не е без недостатоци. Меѓутоа, во овој случај зборуваме за индиректни карактеристики на тестот. Конкретно, зборуваме за фактот дека е невозможно да се исклучат можните грешки во дефинирањето на нормите. Понекогаш анализата што ја направила апсолутно здрава девојка може да покаже лажно позитивен резултат или негативен во спротивен случај. Меѓутоа, класификацијата на методите на психолошко истражување во повеќето случаи ги поврзува таквите недостатоци со несоодветна подготовка или повреда на техниката со која е земен материјалот.

Карактеристики на извршување

Со ELISA анализа во повеќето случаи се дарува крв. Пред да се дарува крв, важно е да се одржи најмалку осум часа пост, за да се исклучи употребата на голем број лекови кои влијаат на резултатот од анализата. Станува збор за антихистаминици и хормонални лекови кои влијаат на функционирањето на тироидната жлезда. Покрај тоа, алкохолот треба да се исклучи најмалку еден ден пред тоа. Погрижете се да не пушите барем еден час пред да донирате крв. Искривување на резултатот е можно и при земање лекови.

Пред да се продолжи со дешифрирање, вреди да се спомене кои методи на мерење се користат за таков тест. Како резултат на анализата, ќе бидат индицирани антитела или Ig имуноглобулини. Под нив се подразбираат многу специфичните протеини кои беа претходно дискутирани. Б-лимфоцитите се одговорни за нивното производство веднаш штом вирусите, бактериите или габите ќе влезат во телото. Се разликуваат пет типа на имуноглобулини, означени со латинската азбука.

Нивните разлики се поврзани со различна молекуларна форма и тежина. Тие имаат различен полуживот, се вклучени или не учествуваат во инфективни процеси на различни начини. Исто така, варира и временската рамка во која тие можат да се откријат од моментот на настанување на инфекцијата.

Ако имуноглобулините се класифицираат користејќи молекуларна тежина како основа, тогаш IgM има највисоки стапки. Карактеристика на овој тип на имуноглобулини е неможноста да помине низ плацентарната бариера. Ако во анализата се открие ИгМ кај новороденче, зборуваме за присуство на инфекција кај фетусот.

Огромното мнозинство од човечката крв содржи IgG имуноглобулини, најмалку IgE. Зборувајќи за работата во рамките на инфективни процеси, особено значење треба да се даде на опциите A, M, G. IgE делува како маркер на алергиска реакција. IgD се наоѓа само во ткивата на лимфните јазли и крајниците. Ова е важно од гледна точка на создавање имунитет на локално ниво.

Покрај тоа, во анализата се одредуваат антигени. Тие се подразбираат како супстанции од високомолекуларен тип, кои се познати по нивното органско потекло. Конкретно, зборуваме за патогени на заразни и други болести од спектарот. Освен тоа, мислиме и на супстанци кои сигнализираат за различни клеточни промени кои се неизбежни кај голем број болести. Имунолошкиот комплекс е исто така индициран, што го демонстрира комплексот антиген-антитела кој е вклучен во имунолошкиот процес.

Обично, времето на производство зависи од специфичната лабораторија во која аплициравте. Голем број лаборатории можат да дадат резултати во рок од еден или два дена, а други бараат една недела. Доцнењата може да се должат на потребата да се акумулира одредена количина на серум.

Влијание врз резултатите и толкувањето

И покрај фактот дека ELISA се смета за еден од најточните методи за тестирање, сепак се појавуваат грешки. Постапката за земање на материјалот, неговото неправилно транспортирање и складирање на материјалот може да влијае на исправноста на резултатите. Земање лекови, како што е споменато погоре, присуство на скриени болести. Метаболичките нарушувања или имунодефициенцијата исто така нема да ви дозволат да ги добиете вистинските индикатори. Во периодот на живот до една година, новороденчињата исто така може да немаат целосно точни индикатори. Ова се должи на фактот дека мајчините антитела се присутни во телото.

Зборувајќи за декодирање, во формуларите за анализа се користи позитивен или негативен знак, што укажува на резултатите од пресметката за секоја од класите на имуноглобулини. Можните опции се следните.

Отсуството на откриени IgG, IgA и IgM укажува на целосно закрепнување. Негативен резултат за компоненти како што се IgM, IgA, IgG е недостатокот на имунитет на инфекција.

Комбинацијата на позитивен и негативен резултат за IgG, IgA во комбинација со позитивен IgM укажува на присуство на акутна инфекција во телото. Позитивен резултат на IgG во комбинација со негативен резултат на IgA и IgM одговара на периодот по вакцинацијата или стекнувањето имунитет како резултат на инфекција.

Комбинацијата на позитивен или негативен IgG, IgA резултат и негативен IgM резултат укажува на присуство на инфекција во нејзиниот хроничен тек. Позитивен резултат за три компоненти: IgG, IgM, IgA укажува на егзацербација на инфекцијата, која беше во хронична форма на курсот. Покрај директното разјаснување на класите на антитела, како дел од декодирањето на анализата ELISA, лекарот добива информации за нивните квантитативни показатели. Важно е да се нагласи дека лекарот што посетува треба да биде одговорен за декодирање. Факт е дека комбинацијата на некои компоненти може да го доведе до идејата за лажен резултат, што ќе доведе до повторно предавање. Самодекрипцијата во овој случај е бескорисна.

Целта на тестот на крвта за сифилис е да открие антитела кои телото можеби ги создало за да се бори против својот патоген Treponema pallidum.

Лажно позитивна анализа за сифилис може да биде во случаи кога производството на антигени настанало поради други причини.

Лажно позитивен сифилис се дијагностицира во 10% од случаите.

Бидејќи анализата за сифилис се пропишува не само кога пациентот има поплаки, туку и кога е подложен на лекарски преглед, пред вработување, за време на бременост, пред хоспитализација, процентот на инфекција кај луѓе кои дури и не се сомневале за присуство на таква болест е висок. .

За да ја елиминирате грешката, треба да ја потврдите веродостојноста на резултатите.

Позитивните резултати за сифилис се поделени во две групи: акутен и хроничен. Акутен лажно позитивен резултат се јавува во рок од 6 месеци од редовното тестирање.

  • акутни инфективни заболувања;
  • траума;
  • која било вакцинација 1-7 дена пред земање мостри;
  • акутно труење.

Во присуство на некој од факторите во телото се активира процесот на производство на антитела, што се рефлектира во резултатите од тестовите.

Ако има хронични нарушувања, тестот може да покаже погрешни резултати за 6 или повеќе месеци.

  • нарушувања на сврзното ткиво;
  • која било форма на туберкулоза;
  • хронични нарушувања на црниот дроб;
  • ХИВ, хепатитис Б, Ц, Д и други вирусни заболувања;
  • автоимуни процеси во телото.

Резултатот станува погрешен поради систематското производство на неспецифични антитела како одговор на едно од наведените нарушувања.

Што да направите ако се открие лажен сифилис

За да одредите дали тестот за сифилис може да биде погрешен, треба да го оцените присуството на други фактори во манифестацијата на болеста и веројатноста за инфекција.

Бледа трепонема е предизвикувачкиот агенс на болеста, која сексуално се пренесува преку мукозните мембрани на гениталните органи, устата и ректумот при контакт со заразено лице. Исто така, можно е да се пренесе инфекцијата од заразена мајка на нејзиното дете.

Периодот на инкубација во кој болеста не се чувствува сама по себе е 2-6 недели. После тоа, на местата на можна пенетрација на инфекцијата се формираат сифилитични улкуси со густа основа.

По 1-2 недели, лимфните јазли најблиску до местото на лезијата се зголемуваат и стануваат болни.

Кога поставувате дијагноза - лажно позитивен сифилис, мора повторно да аплицирате во медицинска установа. Во исто време, пријавете ги сите лекови што сте ги земале во пресрет на анализата, хронични и акутни заболувања.

Доколку сте имале незаштитен секс со непроверен партнер или сте ги нашле првите знаци на болеста, треба да го известите вашиот лекар за ова.

Откако ќе соберете анамнеза и ќе спроведете преглед, лекарот ќе ви препише серија тестови кои ќе ви овозможат да воспоставите точен резултат со грешка помала од 1%.

Видови тестови за сифилис

Анализите се од два вида: нетрепонемални и трепонемални. Првата опција вклучува употреба на вештачки аналози на бледа трепонема, во вториот случај се користат вистински трепонеми.

Не-трепонемални методи

Ваквите техники се широко користени и најчесто се користат при рутински медицински прегледи.

Предноста е ниската цена, брзите резултати, способноста да се спроведе истражување на стандардна лабораториска опрема.

Анализа на RW

За нејзино спроведување, крвта се зема од пациентот, поретко - цереброспиналната течност. Крвта може да се земе од прст или вена. Грешката во таква студија може да биде до 7%.

Микрореакција на врнежите (MR или RMP)

Може да вклучува два вида тестови за сифилис RPR и VDRL. Како резултат на распаѓање на клетките под влијание на трепонема, се формираат анти-липидни антитела.

Липидите може да се уништат под влијание на други нарушувања, така што степенот на грешка во спроведувањето на VDRL и RPR е 1-3%.

Трепонемални тестови

Ваквите студии не се вршат во сите клиники и бараат скапа опрема.

Затоа, тие се користат кога постои сомневање за присуство на болеста според резултатите од нетрепонемалните тестови. Грешката на таквите студии е помала од 1%.

Овозможува откривање на антигени и антитела. За да се утврди резултатот, пациентот донира крв од прст или вена. Како резултат на тоа, тестирањето исто така ви овозможува да ја утврдите фазата на болеста.

Анализата за сифилис RPGA ви овозможува да го одредите процентот на аглутинација на еритроцитите. Точен резултат од реакцијата на пасивна хемаглутинација може да се добие на 28-от ден по инфекцијата.

ELISA го одредува присуството и фазата на болеста според нивото на имуноглобулини од различни видови.

Најточен тест за откривање на патогена ДНК. Се користи во ретки случаи, бидејќи бара сложени реагенси.

Веројатноста за грешки на тестот RIF, RPGA, ELISA е помала од 1%. Со PCR, грешката може да биде 0-1%.

Позитивно за сифилис во бременоста

Кај бремени жени, погрешен резултат може да се забележи во 1,5% од случаите при спроведување на нетрепонемални тестови. Анализата за овој тип на болест е задолжителна во текот на целата бременост.

Првиот тест за сифилис се прави на 12-та недела, потоа на 30-та недела и пред породувањето. Резултатот може да биде лажен поради природните промени во телото, а особено, имунитетот за заштита на растечкиот фетус.

Затоа, за време на бременоста, може да се препише втор тест, честопати се пропишува дури и со негативни резултати од првиот, ако имало фактор на ризик.

Може да се препишат и трепонемални тестови, бидејќи ефектот на болеста врз телото на детето е поштетен од антибиотскиот третман доколку се потврди дијагнозата.

Слаба позитивна анализа

Ако формата што ја добивте со резултатот е 1-2 плус, ова може да укаже на присуство на мала количина на антитела. Ваквите резултати може да се појават во неколку случаи:

  • нецелосен период на инкубација;
  • доцна форма, по 2-4 години;
  • резидуални антитела откако болеста е излечена.

Во овој случај, повторна проверка е задолжителна по 2 недели.

Како да се подготвите за анализа

Ако е направен погрешен тест за сифилис, ќе ви биде доделен втор. Со цел неговите резултати да бидат што е можно попрецизни, потребно е правилно да се подготвите.

  • пред анализата, дозволено е да се пие само вода, забрането е да се јаде храна;
  • откажете се од алкохол и пушење 1 час на ден;
  • ако донирате крв од вена, поминете 10 минути на одмор пред тоа;
  • ако заразните болести се влошат, менструацијата помине или пациентот бил изложен на рентген еден ден претходно, не се прави тест на крвта за сифилис.

Исто така, има голем број лекови на списокот на контраиндикации, па ако се лекувате, кажете му на вашиот лекар за лековите што ги земате.

Доколку болеста се потврди

Ако по неколку проверки, вклучително и трепонемални тестови, резултатот е позитивен, вреди да се преземат голем број мерки:

  • информирајте го вашиот сексуален партнер за ова, неопходно е и тој да подлежи на преглед;
  • блиските роднини треба да бидат прегледани;
  • неопходно е да се спроведе превентивен третман на роднините;
  • во текот на целиот тек на лекувањето, неопходно е да се издаде боледување и да се избегне близок контакт со други луѓе за да се избегне пренос на инфекција;
  • на крајот од лекувањето се издава потврда, која мора да се приложи кон медицинскиот картон и да се обезбеди при прегледи за антитела, за дијагностичарите да немаат прашања за појавата на антигени во резултатите.

Кога се поставува дијагноза, информациите се доверливи. Не се открива при земање на боледување, во сите документи што ги издава болницата е шифрирано името на болеста, луѓето кои немаат близок контакт со пациентот не се информирани за дијагнозата.

По извршениот третман, пациентот е целосно безбеден, присуството на сифилис во минатото не може да биде причина за негирање на вработување или други човекови права.

Ако дијагнозата се потврди во раните фази, тогаш веројатноста за целосно излекување е 100%. Бледа трепонема, една од ретките долгогодишно лекување на пациенти со пеницилин, нема развиено заштита од него.

Затоа, третманот на пациентите се спроведува со помош на лекови базирани на деривати на пеницилин. Доколку постои примарна форма на болеста, неопходно е да се дијагностицираат и лекуваат сите сексуални партнери кои биле со заразено лице 3 месеци.

Сифилис по третман на почетната фаза не остава компликации. Болеста може да доведе до инвалидитет ако помине хроничен тек или се појави инфекција во мајчината утроба.

АКО за сифилис позитивен

Прашања и одговори на: позитивен ИФА за сифилис

Прашање до д-р Сухов Ју.А.
Здраво. Веќе многу кратко ви поставив прашање на веб-страницата Здравје на Украина. Ќе ја напишам мојата целосна приказна. Молам за совет. Кои тестови треба да се направат?
Пред 2 години имаше отворен неврзан сексуален контакт.
После 1,5 месец почна некаков ужас: продолжена треска, како да се работи некаква работа во тироидната жлезда, нешто зуе, потоа главоболки, болки во грлото, силни болки во коските и мускулите, на почетокот. прободувачка природа, потоа како зовриена вода помина низ мускулите, гадење, еднократен осип, чести акутни респираторни вирусни инфекции кои долго време не реагираа на лекување, отежнато дишење, тешкотии при дишењето, лош здив, невралгија, ноќно потење, тешка слабост, намалени перформанси. Скоро станав мртовец. Пред тоа бев здрава и цвета девојка, професионално се занимаваше со танцување, физички бев доста издржлива и активна. Практично воопшто не се настинував, бев практично здрав.
По 1 година и 10 месеци по незаштитен сексуален контакт, таа го положила тестот за ХИВ во 2 различни лаборатории, ЕЛИСА за антитела на ХИВ била негативна.
Хепатитис Б и Ц негативни.
EBV PCR негативен
CMV PCR негативен
Херпес вирус тип 6 негативен
Токсоплазмоза PCR негативна
Сифилисот е негативен
СПИ негативни.

Во општата анализа на крвта: ESR 30; останатото е нормално.
Биохемија позитивен CRP, останатото е нормално.

Што да правам? Во очај сум.веќе тестирав за се,за сите инфекции,но причината не е пронајдена.Дали пак да тестирам за ХИВ?Поминаа веќе 2 години од контактот. Некои симптоми исчезнаа, но се чувствувам многу лошо, силна слабост, постојана невралгија, потење во пределот на градниот кош навечер. Не разбирам од што сум болен. дека овој млад човек ме зарази, никогаш повеќе не го видов. Помош. Советувајте што да правите?

Здраво!
Имам 31 година и бремена 35 недела. Пред 2 месеци дарував крв за инфекции по методот ELISA (бидејќи со солза влегов на инфективно, таму направија студија), мојот гинеколог не ме упати да дарувам крв за инфекции во раните фази од бременоста ( што ми изгледа чудно, иако за СИДА и сифилис крв земаше три пати во текот на бременоста, и сето тоа негативно). Сега ми ги кажаа резултатите. Ве молиме коментирајте ве молам. Некои индикатори се алармантни, како што се вирусот на рубеола, ЦМВ, херпес ХСВ 1/2, инфекција со вирусот Епштајн-Бар (ЕБВ):

Рубеола Ig G K=2,0
CMV Ig G K=4.1
Херпес ХСВ Иг Г 1 тип К=3,4, 2 типа нег.
Epstein-Barr VCA K=4,7 NA —
кламидија и микоплазма - нег.

Мојата насока е следна:
Коефициент на позитивност K=оптичка густина на примерокот. Ако К е помал од 0,9 - резултатот е негативен, ако К е од 0,9 до 1,1 - сомнителен, ако К е повеќе од 1,1 - позитивен.
Вредностите на Ig G, EBV, NA до 55 c.u./ml може да бидат нормални, над оваа вредност резултатот е позитивен.
Ве молиме коментирајте! Ти благодарам за вниманието!

Дешифрирање на резултатите од анализата за сифилис

Сифилисот е сериозна, многу заразна болест. За откривање на болеста се користат крвни тестови (венски и капиларни), а во некои случаи се испитува и цереброспиналната течност. Дешифрирањето на анализата за сифилис го врши лекарот што посетува. Пациентот може самостојно да види и разбере некои од ознаките во анализата, но конечниот заклучок за присуството или отсуството на болеста треба да го направи квалификуван лекар. Можен е лажно позитивен или лажно негативен тест за сифилис.

Кога да одите на лекар

Долго време сифилисот беше опасна болест која не можеше да се излечи. Модерната медицина ги има сите средства целосно да ја излечи болеста. Колку побрзо се дијагностицира и открие болеста, толку полесно ќе се лекува. Инфекцијата со сифилис се јавува не само преку сексуален контакт, туку и при користење на исти предмети за домаќинството со пациентот (четка за заби, крпа, кујнски прибор итн.). Затоа, за секој човек се препорачува периодичен брз крвен тест за сифилис.

Кога е заразен, има зголемување на лимфните јазли во препоните, појава на рани и осип на кожата во устата и гениталиите. Ако се откријат првите симптоми на болеста, веднаш треба да се консултирате со лекар. Прегледот може да биде анонимен со упат од гинеколог, уролог, проктолог, венеролог или општ лекар. Откако ќе го поминете тестот, треба да се јавите кај вашиот лекар за препис од анализата за сифилис.

Цел на анкетата

Често за време на физичките прегледи, лекарот може да препише многу лабораториски тестови, вклучително и тест за сифилис. Таквата насока не треба да се сфаќа како сомнеж за некоја болест. Во многу области од јавниот живот, потребна е потврда за отсуство на болеста.

  • Планирање на семејството
  • Регистрација во хостелот
  • Прием на работно место за здравствени работници, вработени во угостителство и сл.
  • Дарување органи или крв
  • Сексуално активни пациенти
  • Присуство на клинички симптоми
  • Крај на третманот со сифилис

Како примарна студија, по правило, се пропишува еден од неспецифичните (нетрепонемални) тестови. Веродостојноста на ваквите тестови е релативно мала и пациентот може да добие лажно позитивен резултат. Во овој случај, ќе се закаже втора студија со користење на специфичен (трепонемален) тест. Позитивен или негативен тест треба да го земе предвид лекарот што посетува.

Подготовка на тестот

Пред да донирате крв од прст или вена за лабораториски тест, мора да следите некои правила за анализата да биде што е можно посигурна. Не треба да се консумира храна, чај или кафе 8-12 часа пред земање крв. Во текот на денот пред посетата на лабораторијата, не се препорачува да се јаде зачинета, мрсна, пржена, солена или пушена храна. Антибиотиците и другите лекови, исто така, може да го искриват тестот. Сите земени супстанции треба да се известат кај лекарот што посетува. Тој може да препорача да се воздржите од полагање на тестот 1 или повеќе недели. Примерок од крв може да се земе во приватна лабораторија, областна клиника или може да се повика здравствен работник во вашиот дом.

Во секој случај се користи стерилна опрема и ракавици за еднократна употреба.

Експрес анализа за сифилис може да се направи независно дома. Аптеките нудат специјални тестови со детални упатства на руски јазик. Резултатот од тестот е познат во рок од 10 минути. Една црвена линија на индикаторот е негативна за сифилис, две линии се позитивни. Веродостојноста на таквите тестови не е доволно висока и не може да послужи како потврда на дијагнозата.

Како да се разбере резултатот од неспецифичен преглед

Пациентите често се чувствуваат несигурни по тестот. Да донирате крв и да не можете сами да ги дешифрирате тестовите за сифилис, се разбира, е непријатно. Дешифрирањето на тестот на крвта бара медицинско образование и соодветни квалификации на лекар, како и земање предвид на сите фактори кои влијаат на резултатот. Може ли пациентот самостојно да ги прочита резултатите од неговиот тест за сифилис? Откако ќе го видите лабораторискиот извештај, може да се извлечат едноставни заклучоци, но лекарот мора да ја потврди или побие дијагнозата.

Тест со црвено толуидин не е пропишан за дијагноза, туку за тестирање на ефективноста на третманот на болеста. студијата покажува колку количината на антитела е променета во однос на претходната анализа. Ако бројката е намалена, тогаш третманот е успешен. Анализата се спроведува во текот на третманот неколку пати како што е пропишано од лекарот. 3 месеци по завршувањето на процедурите се врши контролно тестирање.

Нетрепонемалните тестови (RSKk, RMP и RPR) често се препишуваат за време на медицинските прегледи и како експресна дијагностика. Постојат неколку опции за ознаки како резултат на истражување. Нивното дешифрирање е прилично едноставно:

  • „-“ негативен резултат
  • „+“, „1+“) или „++“, „2+“ слабо позитивна анализа
  • „+++“, „3+“ или „++++“, „4+“ позитивен тест за сифилис

Било кој од резултатите може да биде лажно позитивен или лажно негативен за сифилис. Во отсуство на клинички симптоми и случајни сексуални контакти, негативниот резултат може да го прифати лекарот како вистинит. Позитивната реакција обично се проверува со трепонемален тест.

Резултати од одредена студија

Трепонемалните тестови се сложени и скапи во споредба со нетрепонемалните тестови. Постојат неколку типови на тестови кои се користат за дијагностицирање на сифилис: RSKt, RIBT, RIF, RPHA, ELISA и имуноблотинг). Една од точните специфични студии е RIBT анализата. Резултатот од тестот може да биде претставен од лабораторијата како процент.

  • 20% одговара на негативен резултат ("-")
  • 21-30% сомнителна анализа („++“ или „2+“)
  • 31-50% слабо позитивно („+++“, „3+“)
  • 51% или повеќе одговара на позитивен резултат

Имуноблотирањето е еден од современите и точни методи за дијагностицирање на болеста. Обично се назначува со цел да се потврдат или побијат резултатите од првата студија. Откривањето во крвта на антитела како што се IgG и IgM е означено со ленти. Резултатите од тестот се толкуваат во споредба со тестот без трепонема.

Ако двата резултати се негативни, пациентот е здрав или инфекцијата е во првата недела од развојот. Двата позитивни резултати укажуваат на присуство на сифилис или друга евентуално автоимуна болест.

Позитивен имуноблот тест по негативен нетрепонемален тест укажува на присуство на сифилис, автоимуна болест или рак.

Може да има позитивна реакција кај бремени жени. Негативниот тест за имуноблот по позитивен нетрепонемален тест покажува дека нема болест.

Веродостојност на анализите

Секогаш постои можност резултатот од тестот да е погрешен. При декодирање на тестовите за сифилис, посебно внимание треба да се посвети на надворешните фактори кои не зависат од пациентот. Лабораторискиот асистент што го спроведува истражувањето или пациентот, исто така, може да згреши кога не се подготвил правилно за земање крв или не му дал на лекарот вистинити информации за себе. Лажно позитивен резултат е можен под влијание на следниве фактори:

  • Дијабетес од секаков тип
  • Присуство на лекови во крвта
  • Алкохолна интоксикација
  • Заразни болести (сипаници, хепатитис, мононуклеоза, итн.)
  • Бенигни или малигни неоплазми
  • Срцеви заболувања
  • Земање антибиотици или неодамнешна вакцинација
  • Автоимуни болести (лупус еритематозус, ревматоиден артритис, итн.)
  • Бременост
  • Јадење масна, зачинета или солена храна во текот на денот пред земање крв

Во зависност од стадиумот на болеста, некои тестови може да не ја откријат болеста. Значи, реакцијата на Васерман (RSKt и RSKk) се спроведува само 3-4 недели по можна инфекција со веројатност од 100%, во присуство на терциерен сифилис, веродостојноста ќе биде само 75%. За да се дијагностицираат раните фази на болеста, препорачливо е да се користи тест ELISA. Анализата е ензимска имуноанализа со висока чувствителност на антитела. Веродостојноста на резултатот е блиску до 100%, исклучен е лажно позитивен резултат во присуство на други болести.

Негативните резултати од тестот за сексуално преносливи болести значат дека лицето е здраво. Сомнителната анализа за сифилис ќе доведе до втор преглед. Доколку има фактори кои би можеле да влијаат на конечниот заклучок, како што е присуството на други болести, лекарот ќе ги промени параметрите на тестот. Позитивниот резултат од тестот за сифилис не е реченица или причина за паника. Со помош на лекови, болеста може целосно да се излечи. Сепак, треба да се запомни дека болестите во рана фаза се многу подобро третирани.

ЕЛИСА за сифилис: техника на анализа, интерпретација, причини за лажно позитивни резултати

Списокот на стандардни дијагностички мерки што се користат за заразни болести вклучува ензимска имуноанализа. Ако ELISA за сифилис е позитивна, не паничете веднаш.

Да ги разгледаме подетално карактеристиките на оваа истражувачка техника и принципите за дешифрирање на резултатите добиени кај различни категории пациенти.

Суштината на студијата

Ензимската имуноанализа е еден од најчестите методи за дијагностицирање на заразни болести. Припаѓа на категоријата трепонемални тестови, односно може да се користи за да се утврди присуството во телото на пациентот на предизвикувачкиот агенс на сифилис - бледа трепонема.

Со ELISA, сифилисот се открива поради откривање на антитела на трепонема. Тие се содржани во крвта на пациентот, а нивниот тип и количина зависат од фазата и формата на болеста, што ви овозможува да добиете важни информации за моменталната состојба на човековото здравје.

Предности и недостатоци

ELISA многу често се препишува за сомнителен сифилис или други заразни болести. Ова се должи на фактот дека анализата ви овозможува да го идентификувате точниот тип и фаза на болеста, а нејзината веродостојност останува на високо ниво - веројатноста за грешка врз основа на резултатите од повеќе студии е само 1%, примарната ELISA има точност од околу 90%.

Употребата на висококвалитетни реагенси и модерна опрема ни овозможува да ја максимизираме точноста на индикаторите.

Во принцип, предностите на методот се:

  1. Висока точност на резултатот. Веројатноста да се добијат лажни податоци е многу мала.
  2. Минимизирање на човечкиот фактор на влијание.Современата опрема за спроведување на ELISA го исклучува човечкото влијание врз резултатите од студијата поради автоматизација на процесот.
  3. Откривање на специфични антитела. Невозможно е да се мешаат антигени од еден тип со други, така што анализата покажува точен резултат за одредена дијагноза.
  4. Поправање на најмалите отстапувања од нормата. Дури и најмалата концентрација на патолошки агенси нема да остане незабележана.

Не заборавајте за слабостите на овој метод. ELISA ги има следните недостатоци:

  1. Висока цена. Високата цена се должи на многу фактори, особено на потребата од добра опрема, висококвалитетни реагенси и специјалисти со доволно ниво на обука.
  2. Потребата за прелиминарна дијагноза. Треба да знаете кои антигени да ги барате, бидејќи без дополнителни податоци ќе биде невозможно да се постави точна дијагноза.
  3. Веројатноста за лажно позитивен резултат. Некои состојби на телото и други фактори може да ги искриват конечните податоци.

Индикации за спроведување

Лекарот може да препише ензимски имуноанализа за да се дијагностицира не само сифилис, туку и голем број други заразни болести.

Ако ја земеме предвид ситуацијата директно со инфекција со трепонема, причината за испитувањето може да биде:

  • појавата на надворешни симптоми на болеста (шанкр, сифилитичен осип, непца, итн.);
  • значително намалување на имунитетот;
  • идентификација или сомневање за сифилис кај сексуален партнер, роднини и членови на семејството;
  • позитивна реакција за време на други тестови;
  • идентификација на други болести кои можат да бидат поврзани со сифилис;
  • личната желба на една личност да биде прегледана.

Методи на извршување

ELISA може да се спроведе на различни начини. Во секој случај, се избира најсоодветната опција.

Како прво, постои поделба на методите на:

  1. Квалитативни. Се открива присуство на инфекција или вирус во телото на пациентот.
  2. Квантитативни. Ја одредува концентрацијата на антитела на патоген агенс во човечкото тело, што укажува на фазата и интензитетот на развојот на болеста.

Исто така, постои класификација на методи за спроведување на ELISA според принципот на репродукција на потребната реакција.

Има 3 опции:

  1. Директно. Обележаните антитела се инјектираат во дадените примероци на крв.
  2. Индиректно со антигени.Адсорбираните антигени се прелиминарно поставени во клетките на полистиренска плоча наменета за ELISA. Потоа на нив се додаваат антитела на вируси, што предизвикува формирање на имуни комплекси неопходни за понатамошна евалуација на резултатите.
  3. Индиректно со антитела.За сексуално преносливи болести, овој метод често се користи. Тоа вклучува прелиминарна сорпција на антитела, само тогаш антигени се додаваат на плочата.

Правила за земање примероци на материјали

За да се намалат ризиците од добивање лажни резултати, потребно е правилно да се донира крв за анализа.

Пред да се подложите на ELISA, мора да се почитуваат некои ограничувања:

  • избегнувајте интензивен физички и емоционален стрес;
  • престанете да пушите и да пиете алкохол најмалку 1-3 дена однапред;
  • за неколку дена треба да се префрлите на правилна исхрана;
  • пожелно е жените да ја контролираат фазата на менструалниот циклус, бидејќи хормоните можат да ги нарушат резултатите;
  • последниот оброк треба да биде 8-10 часа пред дарувањето крв;
  • за 10 дена, лековите кои можат да влијаат на резултатите од студијата се исклучени.

За ELISA се зема венска крв од кубиталната вена, мора да се зема наутро на празен стомак. Општо земено, важат стандардните правила за подготовка за земање мостри од венска крв. Во зависност од присуството на која болест се тестира, може да се воведат дополнителни барања за прелиминарна подготовка на пациентот.

Методологија

Инструкциите за спроведување на ELISA се прилично едноставни:

  1. Пациентот зема крв од вена.
  2. Земениот материјал се подготвува и се дели на примероци на специјална палета со ситна мрежа.
  3. Антигените се мешаат со антитела според избраниот метод.
  4. Реакцијата се оценува. Примероците се споредуваат со контролните примероци, се врши квалитативна и квантитативна евалуација на резултатите.
  5. Податоците се внесуваат во посебна табела со примена на квантитативни показатели (вкупни антитела).
  6. Лекарот што посетува ги дешифрира резултатите. Доколку е потребно, се пропишува соодветен третман.

По прегледот, на пациентот му се дава документ со резултатите. Има форма на табела со соодветните ознаки спроти секој тип на имуноглобулин на пресекот со имињата на заразни болести.

Дешифрирање

Само специјалист ќе може правилно да ги дешифрира резултатите од анализите. Тешко е сами да сфатите, на пример, што значи резултатот од ELISA k = 1 4. Сифилисот може да се појави и во различни форми, што исто така влијае на конечните податоци.

Резултатите укажуваат на 3 типа на имуноглобулини:

  1. IgM. Дозволете да го одредите периодот на инфекција со сифилис. Позитивен резултат укажува на егзацербација на болеста. Нивното отсуство може да укаже на ремисија на хронични патологии или латентна форма на болеста.
  2. IgA.Укажува на болест која е стара повеќе од еден месец од инфекцијата. Тоа е и знак за акутната фаза на болеста, како со обични патологии, така и со напредни хронични патологии.
  3. IgG. Тоа е знак за шпицот на болеста, односно нејзино влошување. Со сифилис, позитивна реакција се појавува некое време по третманот. Кај некои видови болести може да биде знак за развиен имунитет.

Овие супстанции ги произведува телото во одредена низа, што е дополнителен знак на болеста. Со квалитативни тестови се утврдува само присуство на имуноглобулини во крвта од секој тип.

Ова се изразува со промена на бојата на материјалите вклучени во анализата. Квантитативните показатели се помошни, тие попрецизно ја опишуваат ситуацијата. Односот на антигени и антитела укажува на сериозноста на болеста и интензитетот на одговорот на телото.

Што да се прави

Ако пациентот навистина има сифилис, апсолутно секогаш се открива позитивна ELISA, невозможно е да не се забележи присуство на трепонеми во таква студија. Не очајувајте, болеста добро реагира на третманот, особено во почетните фази.

Што да направите ако резултатот од тестот е позитивен:

  • подложени на дополнителни прегледи според индикации на лекарот;
  • земете курс на антибиотска терапија според избраната шема;
  • се фокусира на зајакнување на имунолошкиот систем;
  • информирајте го вашиот сексуален партнер за болеста;
  • во иднина, редовно подлежи на превентивна дијагностика до дерегистрација во диспанзерот (по 5 години во отсуство на позитивни резултати од тестот).

Нема потреба да го одложувате боледувањето и да се плашите од објавување на резултатите. Дијагнозата е шифрирана и останува тајна, само доколку постои закана од инфекција на други луѓе, неопходно е да се известат роднините и сексуалниот партнер за проблемот за да ги направат потребните прегледи.

Лажно позитивен резултат и неговите причини

Понекогаш резултатот од други тестови се евидентира и ELISA е лажно позитивен за сифилис. Затоа се препорачува да се спроведат 2-3 помошни методи и да се повтори ензимската имуноанализа по некое време.

Ваквите неточности се ретки, тие главно се должат на такви фактори:

  • бременост;
  • хронични заболувања;
  • неодамнешна вакцинација;
  • повреда.

Лажно-позитивните резултати се поделени на акутни и хронични, во зависност од природата на факторот што ги предизвикал.

Целосно толкување на тестовите за сифилис

Тестови за сифилис: видови на тестови, толкување на резултатите, причини за лажно-позитивни и лажно-негативни резултати од испитувањето.

Сифилисот е полово пренослива болест предизвикана од бактеријата Treponema pallidum (treponema pallidum). Прочитајте повеќе за начините на пренесување на сифилисот, неговите симптоми и можните компликации во написот Сè за сифилисот. Симптоми и третман.

Навременото откривање на сифилис (со користење на специјални тестови) им овозможува на лекарите да започнат со лекување на време и да спречат развој на опасни компликации на оваа болест.

Тестирањето за сифилис за време на бременоста помага да се спречи раѓањето на бебиња со вроден сифилис. Детали за тестовите за сифилис за време на бременоста се опишани во написот Сè за дијагноза и третман на сифилис за време на бременоста.

Зошто бев тестиран за сифилис?

Во огромното мнозинство на случаи, лекарите немаат можност да добијат точни податоци за сексуалниот живот на пациентите (некои луѓе ги кријат деталите за својот сексуален живот или го потценуваат ризикот од заразување со сексуално преносливи болести). Во тој поглед, со цел да се заштитат луѓето од можните последици од сопственото невнимание или недостаток на медицинско знаење, во некои случаи лекарите препишуваат таканаречени скрининг тестови за сифилис (т.е. тестови што ги прават голем број луѓе).

Вашиот лекар може да нареди тестови за сифилис дури и ако немате симптоми на болеста и сте сигурни дека не сте можеле да се заразите.

Потребата за овие тестови се должи на фактот дека сифилисот понекогаш се пренесува преку домаќинство (не преку сексуален контакт) и продолжува во латентна форма (т.е. без симптоми).

Како по правило, скрининг преглед се пропишува во следниве ситуации:

  1. Кога аплицирате за работа (здравствени работници, угостителство, воен персонал итн.)
  2. При пријавување за бременост.
  3. За време на приемот во болница, како подготовка за операции.
  4. Крводарители.
  5. Лица затворени во места на притвор.

Вашиот лекар исто така може да нареди тестови за сифилис:

  1. Кога ќе се откријат симптоми на болеста (обично, ова е осип во пределот на гениталиите).
  2. По добивањето на позитивни резултати од скрининг тестовите за сифилис.
  3. Ако сте имале сексуален контакт со лице на кое му е дијагностициран сифилис.
  4. Новородени деца чии мајки се болни со сифилис.

Дополнително, за време на третманот периодично се прават тестови за сифилис (за да се увери дека третманот е ефективен), па дури и по завршувањето на текот на третманот за да се следи излекувањето.

Кои тестови се користат за дијагностицирање на сифилис?

Дијагнозата и третманот на сифилисот ги врши дерматовенеролог. При дијагностицирање на болеста, може да се користат следниве тестови:

Инспекцијакожата, надворешните и внатрешните генитални органи се изведуваат со цел да се идентификуваат главните симптоми на сифилис: тврд шанкр, отечени лимфни јазли, осип на кожата итн. (види Симптоми на сифилис)

Со цел да се најдете трепонема бледа, лекарите на микроскоп ги испитуваат брисевите (или стругањата) добиени од чиреви, лимфни јазли, плодова вода кај трудници итн.. Крвта не се испитува под микроскоп.

Важно: ако во вашите анализи под микроскоп е откриена бледа трепонема, тоа значи дека дефинитивно имате сифилис. Но, ако тестовите покажаа дека предизвикувачкиот агенс на сифилисот не е откриен, не може да се биде целосно сигурен дека нема сифилис. За да бидете сигурни дека не сте болни, треба да направите дополнителни тестови, опишани подолу.

PCR (полимеразна верижна реакција)- Ова е сложена и скапа метода за дијагностицирање на сифилис, која ви овозможува да ја откриете ДНК на бледата трепонема во крвта или други материјали за тестирање (амнионска течност, цереброспинална течност). Ако PCR тестот даде негативен резултат, тогаш најверојатно немате сифилис. Меѓутоа, кога ќе добиете позитивен резултат (односно, ако PCR откри Treponema pallidum ДНК во крвта), нема 100% гаранција дека сте болни. Ова се должи на фактот дека PCR понекогаш дава лажно позитивни резултати (дава позитивен резултат во отсуство на болест). Затоа, ако PCR даде позитивен резултат, се препорачува дополнително да се подложат на други методи на испитување за сифилис (на пример, тест за имунофлуоресценција (RIF) и тест за пасивна хемаглутинација (RPHA)).

Што е серолошки тест за сифилис?

Серолошката анализа е откривање во крвта на специјални протеини (антитела) кои се произведуваат во човечкото тело како одговор на инфекција. За разлика од претходните дијагностички методи, серолошките тестови не откриваат самата бледа трепонема, туку само нејзините „траги“ во телото.

Ако во крвта ви се најдат антитела за бледа трепонема, тоа укажува дека или сте заразени со сифилис во моментот или сте го имале претходно.

Кои тестови покажуваат дека некое лице има сифилис?

Серолошките тестови за сифилис се поделени во 2 големи групи: неспецифични и специфични тестови. Главната разлика помеѓу овие тестови е што неспецифичните тестови покажуваат позитивен резултат само ако лицето има сифилис во моментот и станува негативно по третманот, додека специфичните тестови остануваат позитивни дури и по излекувањето на болеста.

Со други зборови, негативен резултат од неспецифичен тест е одредена гаранција дека сте здрави.

Кои тестови за сифилис се неспецифични (нетрепонемални)?

Неспецифичните анализи вклучуваат микрореакција на врнежите (MR) и Wassermann реакција (PB, RW). Овие тестови се користат за скрининг за сифилис. По излекувањето на сифилисот, овие тестови стануваат негативни кај 90% од луѓето.

Како функционираат овие тестови:како резултат на виталната активност на бледата трепонема (со сифилис), клетките умираат во телото. Како одговор на уништувањето на клетките, имунолошкиот систем произведува специјални протеини (антитела или имуноглобулини). Неспецифичните тестови се насочени кон идентификување на овие антитела, како и броење на нивната концентрација (одредување на титар на антитела).

Микрореакција на врнежите (MR)и неговите колеги во некои земји: тест за брз реагин (RPR, брзи плазма реагини)и VDRL тест (Лабораторија за истражување на венерични болести)се нетрепонемални тестови кои се пропишани за скрининг за сифилис.

Што се испитува:

обично 4-5 недели по инфекцијата.

ако анализата покажала позитивен резултат, тогаш постои можност да имате сифилис. Бидејќи овој тест може погрешно да даде позитивни резултати, се препорачува да се изврши дополнително испитување користејќи ги специфичните тестови опишани подолу. Негативниот резултат укажува на отсуство на сифилис, или рана фаза на болеста (пред појавата на антитела во крвта).

ако се најдат антитела во крвта во титар од 1:2 до 1:320 и погоре, тоа значи дека сте заразени со сифилис. Со доцен сифилис, титарот на антителата може да биде низок (што се проценува како сомнителен резултат).

Лажно-позитивни резултати од МР се јавуваат во околу 2-5% од случаите, еве ги нивните можни причини:

  1. Системски заболувања на сврзното ткиво (системски лупус еритематозус, склеродерма, ревматоиден артритис, дерматомиозитис, васкулитис, итн.)
  2. Заразни болести: вирусен хепатитис, инфективна мононуклеоза, туберкулоза, некои цревни инфекции итн.
  3. Воспалителна срцева болест (ендокардитис, миокардитис).
  4. Дијабетес.
  5. Бременост.
  6. Неодамнешна вакцинација (вакцинација).
  7. Употреба на алкохол, дрога итн.
  8. Минат и излечен сифилис (приближно 10% од луѓето кои биле лекувани може да имаат позитивен МР тест доживотно).

Кои би можеле да бидат причините за лажно негативни резултати:тестот може погрешно да покаже негативен резултат ако крвта содржи многу антитела, ако тестот се зема во рана фаза на болеста пред појавата на антитела или со доцен сифилис, кога остануваат малку антитела во крвта.

Васерманска реакција (РВ, RW)е нетрепонемален тест кој се користи за скрининг за сифилис во земјите на ЗНД.

Што се испитува:крв (од прст или од вена), цереброспинална течност.

Колку долго по инфекцијата тестот станува позитивен?обично 6-8 недели по инфекцијата.

Како да се проценат резултатите од анализата:„-“ е негативна реакција, „+“ или „++“ е слабо позитивна реакција, „+++“ е позитивна реакција, „++++“ е остро позитивна реакција. Ако реакцијата на Васерман покажа барем еден плус, тогаш треба да направите дополнителни тестови за сифилис. Негативната реакција не е гаранција дека сте здрави.

Како да се оцени добиениот титар на антитела:титарот на антитела од 1:2 до 1:800 укажува на присуство на сифилис.

Кои би можеле да бидат причините за лажни позитивни резултати:Реакцијата на Васерман може погрешно да даде позитивен резултат од истите причини како и микрореакцијата на врнежите (МР), а исто така и ако сте пиеле алкохол или сте јаделе масна храна непосредно пред да донирате крв за анализа.

Поради големиот број на погрешни резултати, Wasserman реакцијата (РВ, RW) се помалку се користи и се заменува со други, посигурни дијагностички методи.

Неспецифични тестови (микрореакција на врнежите (MR) и реакција на Васерман (PB, RW)) се добри методи за дијагностицирање на сифилис. Негативниот резултат од тестот е многу веројатно да покаже дека сте здрави. Но, при добивање на позитивни резултати од овие тестови, потребно е дополнително испитување со помош на специфични (трепонемални) тестови.

Кои тестови за сифилис се специфични (трепонемални)?

Трепонемалните тестови ги вклучуваат следните тестови: реакција на имунофлуоресценција (RIF), имуноблотинг, реакција на пасивна аглутинација (RPHA), реакција на имобилизација на бледа трепонема (RIBT), ензимска имуноанализа (ELISA).

Специфични тестови се пропишуваат за луѓе кои имаат позитивни резултати од микрореакција на врнежите (MR) или Wassermann реакција (PW). Специфичните тестови остануваат позитивни долго откако ќе се излечи сифилисот.

Како функционираат овие тестови:кога патогените на сифилисот влегуваат во телото, имунолошкиот систем произведува антитела насочени кон борба против трепонема бледа. Овие антитела не се појавуваат во крвта веднаш по инфекцијата, туку само по неколку недели. Околу крајот на втората недела по инфекцијата, во крвта се појавуваат антитела од класата IgM. Антителата од оваа класа укажуваат на неодамнешна инфекција со сифилис, но ако не се лекуваат, тие остануваат во крвта неколку месеци, па дури и години (додека нивниот број постепено се намалува). 4-5 недели по инфекцијата со сифилис, антителата од друга класа, IgG, почнуваат да се откриваат во крвта. Антителата од овој тип остануваат во крвта многу години (понекогаш во текот на животот). Трепонемалните тестови можат да откријат присуство во крвта на антитела (IgM и IgG) насочени кон борба против трепонема бледа.

Реакција на имунофлуоресценција (RIF)или Флуоресцентни трепонемални антитела (FTA и неговата варијанта FTA-ABS)е трепонемален тест кој се користи за да се потврди дијагнозата на сифилис во најраните фази (дури и пред да се појават првите симптоми).

Што се испитува:крв од вена или од прст.

Колку долго по инфекцијата тестот станува позитивен?: обично по 6-9 недели.

Како да се проценат резултатите од анализата:Резултатите од анализата се дадени во форма на минус или плус (од еден до четири). Ако има минус во анализата, тогаш антителата не се откриени, а вие сте здрави. Присуството на еден плус или повеќе укажува на присуство на сифилис.

Кои би можеле да бидат причините за лажни позитивни резултати:лажно позитивни резултати се ретки, но можни се грешки кај луѓе со болести на сврзното ткиво (системски лупус еритематозус, дерматомиозитис итн.), кај трудници итн.

Пасивна реакција на аглутинација (RPHA), или Трепонема бледа хемаглуција (TPHA)- Ова е специфичен тест кој се користи за да се потврди дијагнозата на сифилис во речиси секоја фаза.

Што се испитува: крв од вена или од прст.

Колку долго по инфекцијата тестот станува позитивен?обично во рок од 4 недели.

Како да се проценат резултатите од анализата:позитивен резултат на TPHA покажува дека имате сифилис или сте здрави, но сте ја имале болеста во минатото.

Како да се оцени добиениот титар на антитела:Во зависност од титарот на антителата, привремено може да се претпостави времетраењето на инфекцијата со сифилис. Набргу по првото влегување на трепонема во телото, титарот на антителата обично е помал од 1:320. Колку е поголем титарот на антителата, толку повеќе време поминало од инфекцијата.

Ензимска имуноанализа (ELISA), или Ензимска имуноанализа (EIA), или ELISA (Ензимско поврзана имуносорбентна анализа)е трепонемален тест кој се користи за да се потврди дијагнозата и да се одреди стадиумот на сифилис.

Што се испитува:крв од вена или од прст.

Колку долго по инфекцијата тестот станува позитивен?веќе 3 недели по инфекцијата.

Како да се проценат резултатите од анализата:позитивен ELISA тест покажува дека имате или сте имале сифилис. Оваа анализа може да остане позитивна дури и по третманот.

Одредување на времетраењето на инфекција со сифилис со помош на ELISA:Во зависност од тоа кои класи на антитела (IgA, IgM, IgG) се наоѓаат во крвта, можеме да ја претпоставиме возраста на инфекцијата.

Написот е напишан врз основа на материјали од страниците: sifilis24.ru, www.health-ua.org, krov.expert, zppp.su, polismed.ru.

За сеопфатна проценка на состојбата на телото (особено, неговите заштитни функции), пропишана е ензимска имуносорбентна анализа (ELISA). Крвниот тест ELISA се врши за дијагностицирање на инфективни, автоимуни, хематолошки патологии, примарни и секундарни имунодефициенција. Во оваа статија, предлагаме подетално да разгледаме што е тест на крвта ELISA, како и какви индикации постојат за негово спроведување.

Индикации за назначување на тест на крвта со ELISA и принципот на неговото дејствување

Како што веќе забележавме, тестот на крвта ELISA е лабораториски тест со кој се одредуваат антигени или антитела во примерок од крв. Оваа анализа се користи за откривање на нивото на хормони, имунолошки комплекси и имуноглобулини. Постојат следниве индикации за испорака на ELISA анализа:

  • Дијагноза на алергија.
  • Дијагноза на болести од вирусно потекло - Епштајн-Бар вирус, херпес, хепатитис, цитомегаловирус.
  • Дијагноза на сексуално преносливи инфекции - микоплазма, уреаплазма, сифилис, трихомонас, кламидија.
  • Дефиниција за имунодефициенција.
  • Дијагностика на онколошки патологии.
  • Евалуација на ефективноста на терапијата.
  • Одредување на нивото на хормони.
  • Предоперативен сеопфатен преглед.

Принципот на дејство на ензимската имуноанализа се заснова на тест на крвта за присуство на имуноглобулини (специфични протеински антитела). Имуноглобулините се произведуваат од имунолошкиот систем кога антигени (странски микроорганизми) влегуваат во човечкото тело. Овие имунолошки молекули се врзуваат за различни инфективни агенси и ги неутрализираат. Важна карактеристична карактеристика што ја поседуваат имуноглобулините е нивната специфичност. Поради овие карактеристики, тие можат да формираат комплекс антиген-антитело со врзување за специфичен антиген. За време на тестот на крвта ELISA, токму овој комплекс се одредува квантитативно и квалитативно.

За оваа студија, често се користи човечка крв. Сепак, како материјал за анализа, можете да ја земете содржината на стаклестото тело, амнионската течност, цереброспиналната течност. Примерокот од крвта обично се зема од кубиталната вена на пациентот. Се препорачува да се дарува крв на празен стомак (од последниот оброк мора да поминат најмалку 12 часа). Ако пациентот зема лекови, лекарот мора да биде информиран, бидејќи некои од нив може да влијаат на резултатот од анализата. Исто така, врз веродостојноста на резултатите од тестот влијае и употребата на лекови и алкохол.

Дешифрирање на тест на крвта за ELISA

Формата на оваа анализа обично укажува на негативен (-) или позитивен (+) резултат од пресметката на секоја класа на имуноглобулини.

Предлагаме да се разгледа толкувањето на веројатното декодирање на тест на крвта за ELISA.

  • IgG, IgA не се откриени и резултатот од IgM е негативен - целосно закрепнување.
  • Резултатот од IgM, IgA, IgG е негативен - нема имунитет на инфекција.
  • Резултат на IgG, IgA позитивни и негативни, како и резултат на IgM позитивен - присуство на акутна инфекција.
  • Позитивен IgG резултат и негативен IgA и IgM резултат - пост-вакцинација или пост-инфективен имунитет.
  • Позитивен или негативен резултат на IgG, IgA и негативен IgM е хронична инфекција.
  • Резултатот од IgG, IgM, IgA е позитивен - егзацербација на хронична инфективна патологија.

Во ензимската имуноанализа, покрај разјаснувањето на класите на антитела, нивните квантитативни индикатори се наведени во транскриптот. Сепак, само лекарот што посетува дава опширно објаснување за нив.

Предности и недостатоци на оваа студија

  • Релативно ниска цена.
  • Леснотија на користење.
  • Можноста за дијагностицирање во рана фаза на наводната болест.
  • Релативно висока точност на добиените податоци.
  • Потребен е краток временски период за да се добие резултатот од студијата.
  • Способност да се следи динамиката на развојот на инфективниот процес во телото.
  • Високо ниво на обединување, што овозможува да се спроведат масовни истражувања.
  • Автоматизација на сите фази на истражување.

Недостаток на ELISA тестот на крвта е тоа што може, во ретки случаи, да даде лажно позитивни или лажно негативни резултати. Исто така, при спроведување на студија, покрај техничките грешки, причина за лажни резултати кај пациентот може да биде ревматоиден фактор, присуство на хронични заболувања (во кои се произведуваат антитела), земање одредени лекови и метаболички нарушувања.

  • Џардијаза.
  • Аскаријаза.
  • Цистицеркоза.
  • Амебијаза.
  • Трихиноза - студијата се спроведува повеќе од еднаш, на 4-12 недели по инфекцијата, се одредува максималното ниво на антитела.
  • Тенијаза.
  • Описторхијаза - врши диференцијална дијагноза помеѓу акутна и хронична форма на болеста.
  • Токсоплазмоза.
  • Фасциолијаза - во акутната фаза на болеста се утврдува присуство на антитела.
  • Кожна или висцерална лајшманиоза.

Значи, можеме да резимираме: неопходно е да се помине ELISA тест за паразити за откривање на антигени (отпадни производи од паразити и самото нивно присуство), како и антитела (имуноглобулини). Специфичноста на овој метод на истражување при определување на паразити според статистички податоци е околу 90%. Благодарение на оваа анализа, лекарот може точно да го одреди типот на паразити, нивниот вкупен број, а исто така да ја следи динамиката на развојот на патолошките процеси поради нивото на антитела.

Во врска со развојот на клеточните технологии, молекуларната биологија, генетиката, физиката, хемијата и низа други високотехнолошки дисциплини, во секојдневната практика се воведуваат нови високо-прецизни и високотехнолошки методи. Овие интердисциплинарни трендови влијаат и на полето на медицинското знаење и на сродните области на биолошки и биохемиски проблеми. Во текот на изминатите десет години, методот на клиничка лабораториска дијагностика наречен ензимски имуноесеј стана широко распространет и воведен во масовна практика.

Општо земено, технологиите на имунолошки ензимски и радиолошки реакции се широко користени во типизацијата на клетки, клеточни култури и различни ткива од раните 1980-ти. Сепак, овие методи беа многу макотрпни, не унифицирани, не стандардизирани, што ја исклучуваше нивната употреба за медицински и дијагностички цели во масовно ниво. Само тесни, интензивни со знаење и високо специјализирани лаборатории користеа такви методи.

Меѓутоа, со развојот на технологијата, микротехнологијата и производството на различни биополимерни материјали, стана возможно да се произведат готови комплети за ензимски имуноесеј што можат да ги користат лабораториите на општите медицински установи. ELISA нашироко се користи за дијагностицирање на сите видови инфекции (кламидија, сифилис, цитомегаловирус, токсоплазмоза, херпес итн.), како акутни и хронични, како и латентни форми кои се јавуваат без клинички симптоми.Овој метод се користи и за контрола на хронични заболувања . Ајде да се обидеме да откриеме за каков вид метод е тоа и кои принципи стојат во основата?

Компоненти на ензимски имуноесеј - имунолошка реакција и ензимска реакција

Ензимската имуноанализа, како што имплицира името, се состои од две различни компоненти - имунолошки одговор и ензимска реакција. Имунолошката реакција произведува врзување на биолошките молекули, елементи на клетката или микроорганизмот, кои всушност се обидуваат да ги детектираат, а ензимската реакција ви овозможува да го видите и измерите резултатот од имунолошката реакција. Односно, имунолошкиот одговор е дел од сложената техника која всушност го открива саканиот микроб. И ензимската реакција е дел од сложената техника која ви овозможува да го преведете резултатот од имунолошката реакција во форма која е видлива за око и достапна за мерење со рутински хемиски методи. Врз основа на оваа структура на методот на ензимска имуноанализа, ќе ги анализираме двата негови дела одделно.

Имунолошка реакција, што е тоа? Што е антитело или антиген?

Што е имунолошки одговор? Што е антиген?
Најпрво, да погледнеме кои се имунолошки реакции. имунолошки реакции- Тоа се специфични реакции на врзување на антиген за антитело со формирање на имун комплекс. Што значи тоа? На површината на секоја клетка на кој било организам има посебни структури наречени антигени. Антигените генерално се молекули кои носат информации за клетка (слично на информациите на значката на една личност, што ги означува основните податоци за оваа личност).

Антигени на индивидуални и видови - што е тоа? Зошто се потребни овие антигени?

Достапно антигени индивидуални, што е, својствено само за овој конкретен организам. Овие индивидуални антигени се различни за сите луѓе, некои се слични едни на други, но сепак различни. Во природата не постојат две идентични копии на индивидуални антигени!

Вториот главен тип на антигени е видови антигени, што е, својствено за секој посебен вид на живи суштества. На пример, луѓето имаат свој антиген од видот заеднички за сите луѓе, глувците имаат свој антиген од видот глушец итн. На површината на секоја клетка, нужно е присутен специфичен и индивидуален антиген.

Видовиот антиген го користат клетките на имунолошкиот систем за да идентификуваат „пријател или непријател“.

Како се случува препознавањето на антигенот?

Имунолошката клетка се врзува за сомнителна клетка и ја врши идентификацијата токму од индивидуален антиген. Во меморијата на имуната клетка се „запишува“ како изгледа „неговиот антиген“. Така, ако антигенот на сомнителна клетка се совпаѓа со описот „сопствен антиген“, тогаш оваа клетка на сопственото тело не претставува опасност. Тогаш имунолошката клетка се „одврзува“ и заминува. И ако антигенот не се совпаѓа со описот на „јас“, тогаш имунолошката клетка ја идентификува оваа клетка како „туѓа“, а со тоа и потенцијално опасна за целиот организам. Во овој случај, имуната клетка не се „ослободува“, туку почнува да го уништува опасниот предмет. Точноста на таквото имунолошко препознавање е неверојатна - 99,97%. Речиси и да нема грешки!

Што е антитело, имун комплекс?
Што е антитело?

Антителото е специјална молекула која се наоѓа на површината на имуната клетка. Тоа е антителото што се врзува за антигените на сомнителната клетка. Понатаму, антителото пренесува информации внатре во клетката, каде што се одвива идентификацијата, и добива повратен сигнал од два типа, „јас“ или „вонземјанин“. На сигналот „сопствено“, антителото ја уништува врската со антигенот и ја ослободува клетката.

Што е имунолошки комплекс?
Со сигналот „вонземјанин“, ситуацијата се одвива поинаку. Антителото не ја раскинува врската со антигенот, туку напротив, со испраќање специфични сигнали предизвикува „засилување“. Биолошки, тоа значи дека другите антитела лоцирани во друг дел од клетката почнуваат да се движат до местото од каде доаѓа сигналот за опасност, а исто така формираат врска меѓу нив и заробениот антиген. На крајот се покажува дека антигенот е опкружен од сите страни и цврсто прикачен.Таков комплекс антиген + антитела се нарекува имунолошки комплекс. Од овој момент започнува искористувањето на антигенот. Но, сега не сме заинтересирани за деталите за процесот на неутрализација на антигенот.

Видови на антитела (IgA, IgM, IgG, IgD, IgE)
Антителата се протеински структури, кои, соодветно, имаат хемиско име, кое се користи како синоним за зборот антитела. Значи, антитела = имуноглобулини.

Постојат 5 типа на имуноглобулини (Ig), кои се врзуваат за различни видови на антигени на различни места на човечкото тело (на пример, на кожата, на мукозните мембрани, во крвта итн.). Тоа е, антителата имаат поделба на трудот. Овие имуноглобулини се нарекуваат букви од латинската азбука - A, M, G, D, E и се означени на следниов начин - IgA, IgM, IgG, IgD, IgE.

Во дијагностиката се користи само еден тип на антитела, кој е најспецифичен за микробот што се одредува. Односно, врзувањето на овој тип на антитела за антигенот што се одредува секогаш се случува. Најчесто користени се IgG и IgM.

Токму овој принцип на имунолошкиот одговор (се одредува единствената точност и специфичност на препознавањето на биолошкиот објект) лежи во основата на ензимската имуноанализа.Поради високата точност на антителата во препознавањето на антигените, точноста на целиот метод на ензимска имуноанализа е исто така највисок.

ензимска реакција

Што е ензимска реакција? Што е афинитет, супстрат и производ на реакција?
Да се ​​свртиме кон разгледување на ензимската реакција во работата на методот на ензимска имуноанализа.

Што е ензимска реакција?

Ензимска реакција е хемиска реакција во која една супстанција се претвора во друга со дејство на ензим. Супстанцијата на која делува ензимот се нарекува супстрат. Супстанцијата која се добива како резултат на дејството на ензимот се нарекува производ на реакција. Покрај тоа, особеноста на ензимската реакција е таква што одреден ензим делува само на одредена супстрат. Ова својство на ензимот да го препознае својот „сопствен“ супстрат се нарекува афинитет.

Така, секој ензим спроведува само една реакција специфична за него. Има многу ензими во биолошкиот свет, како и ензимски реакции. Во ензимската имуноанализа се користат само неколку ензимски реакции - не повеќе од 10. Во овој случај беа избрани такви ензимски реакции, чии производи се обоени супстанции. Зошто производите од ензимската реакција треба да бидат обоени? Бидејќи постои едноставен хемиски метод за пресметување на концентрацијата на супстанција од обоен раствор - колориметрија.

Метод на колориметрија - суштина и принцип

Колориметријакористи мерење на густината на бојата на растворот, а концентрацијата на супстанцијата се пресметува од густината на бојата.Во овој случај, посебен уред - колориметар ја мери густината на бојата на растворот. Во колориметријата, можни се две варијанти на зависноста на густината на бојата од концентрацијата на супстанцијата - ова е директно пропорционална зависност или обратно пропорционална зависност. Со директно пропорционална врска, колку е поголема концентрацијата на супстанцијата, толку е поинтензивна густината на бојата на растворот. Во обратно пропорционален однос, колку е поголема концентрацијата на супстанцијата, толку е помала густината на бојата на растворот. Технички, ова се случува вака: се земаат неколку раствори со позната концентрација на супстанција, се мери густината на овие раствори и се прикажува графикон за зависноста на концентрацијата од густината на бојата ( графикон за калибрација).

Следно, се мери густината на бојата на растворот, чија концентрација се одредува и според графикот за калибрација се наоѓа вредноста на концентрацијата што одговара на нивото на измерената густина на бојата на растворот, се случува автоматски.

Во ензимската имуноанализа најчесто се користат следните ензими: пероксидаза, алкална фосфатаза, авидин.

Како се комбинираат имунолошките и ензимските реакции во ензимската имуноанализа? Сега се свртуваме кон разгледувањето на самата ензимска имуносорбентна анализа. Кои чекори ги вклучува и што се случува за време на овие реакции? Ензимската имуноанализа е директни и индиректни.

Директна ензимска имуноанализа - фази на имплементација

Во директна ензимска имуноанализа, се користат антитела на откриениот антиген, во комбинација со специфична ознака. Оваа специфична ознака е супстрат на ензимската реакција.

Прицврстување на антигени на површината на бунарот и врзување на антиген за антитела

Како се изведува директна ензимска имуноанализа? Се зема биолошки материјал (крв, стругања од мукозни мембрани, размаски) и се става во посебни бунари. Биолошкиот материјал се остава во бунарите 15-30 минути за да може антигените да се залепат на површината на бунарите. Понатаму, на овие бунари се додаваат антитела на откриениот антиген. Ова значи дека при откривање на антигени, на пример, сифилис, се додаваат антитела против антигени на сифилис. Овие антитела се произведуваат индустриски, а лабораториите купуваат готови комплети.Оваа мешавина од тест материјал и антитела се остава одредено време (од 30 минути до 4-5 часа) за да можат антителата да го најдат и да се врзат за „својот“ антиген. примероци од антигени, толку повеќе антитела ќе се врзат за нив.

Отстранување на „екстра“ антитела

Како што е наведено, антителата се исто така поврзани со специфична ознака. Бидејќи антителата се додаваат во вишок, не сите од нив ќе се врзат за антигени, а ако воопшто нема антиген во примерокот, тогаш, соодветно, ниту едно антитело нема да се врзе до саканиот антиген. За да се отстранат „дополнителните“ антитела, содржината на бунарите едноставно се истура. Како резултат на тоа, сите „дополнителни“ антитела се отстранети, а оние што контактирале со антигени остануваат, бидејќи антигените се „залепени“ на површината на бунарите. Бунарите се исплакнуваат неколку пати со специјален раствор кој ви овозможува да ги измиете сите „дополнителни“ антитела.

Потоа започнува втората фаза - ензимската реакција. Растворот со ензимот се додава во измиените бунари и се остава 30-60 минути. Овој ензим има афинитет за супстанцијата (специфична ознака) за која се врзани антителата. Ензимот врши реакција, како резултат на која оваа специфична ознака (супстрат) се претвора во обоена супстанција (производ). Тогаш концентрацијата на оваа обоена супстанција се наоѓа со колориметрија. Бидејќи оваа специфична ознака е поврзана со антитела, тоа значи дека концентрацијата на обоениот производ на реакција е еднаква на концентрацијата на антителата. И концентрацијата на антитела е еднаква на концентрацијата на антигени. Така, како резултат на анализата го добиваме одговорот, колкава е концентрацијата на откриениот микроб или хормон.

Вака функционира директната ензимска имуноанализа. Сепак, индиректната ензимска имуноанализа денес почесто се користи бидејќи чувствителноста и точноста на индиректните се повисоки од оние на директните. Значи, да преминеме на индиректна ензимска имуноанализа.

Индиректна ензимска имуноанализа - чекори

Постојат две фази во индиректната ензимска имуноанализа. Во текот на првата фаза се користат неозначени антитела на откриените антигени, а во втората фаза се користат означени антитела против првите неозначени антитела. Односно, не се добива директно врзување на антителото за антигенот, туку двојна контрола: врзување на антителата за антигенот, по што врзување на второто антитело за комплексот антитело + антиген. Како по правило, антитела за првата фаза се глушец, а за втората фаза коза.

Фиксација на антигени на површината на бунарот и врзување на антигенот за неозначено антитело
Како и за директна ензимска имуноанализа, се зема биолошки материјал - крв, гребење, брисеви. Проучениот биолошки материјал се внесува во бунарите и се остава 15-30 минути за антигените да се залепат на површината на бунарите. Потоа, неозначените антитела на антигените се додаваат во бунарите и се оставаат одреден временски период (1-5 часа), така што антителата се врзуваат за „нивните“ антигени и формираат имун комплекс ( првата фаза). После тоа, „екстра“, неврзаните антитела се отстрануваат со истурање на содржината на бунарите. Миењето се врши со специјален раствор за целосно отстранување на сите неврзани антитела.

Врзување на означено антитело за антиген + неозначен комплекс на антитела
После тоа, се земаат вторите антитела - се етикетираат, се додаваат во бунарите и повторно се оставаат некое време - 15-30 минути ( втората фаза). За тоа време, означените антитела се врзуваат за првиот - необележан и формираат комплекс - антитело + антитела + антиген. Сепак, и означените и неозначените антитела се додаваат во бунарите во вишок. Затоа, неопходно е повторно да се отстранат „дополнителните“, веќе означени антитела кои не се врзувале за неозначените антитела. За да го направите ова, повторете ја постапката за истурање на содржината на бунарите и миење со специјално решение.

Ензимска реакција - формирање на обоено соединение
После тоа, се воведува ензим кој ја спроведува реакцијата на претворање на „етикетата“ во обоена супстанција. Бојата се развива во рок од 5-30 минути. Потоа се врши колориметрија и се пресметува концентрацијата на обоената супстанција. Бидејќи концентрацијата на обоената супстанција е еднаква на концентрацијата на означените антитела, а концентрацијата на означените е еднаква на концентрацијата на неозначените антитела, што, пак, е еднаква на концентрацијата на антигенот. Така, ја добиваме концентрацијата на откриениот антиген.
Таквата двојна контрола во форма на употреба на два типа на антитела овозможи да се зголеми чувствителноста и специфичноста на методот на ензимска имуноанализа. И покрај продолжувањето на времето на анализа и вклучувањето на дополнителни фази, овие загуби се компензираат со точноста на резултатот. Тоа е причината зошто во моментов огромното мнозинство на ензимски имуноанализи се индиректни ензимски имуноанализи.


Кои болести се откриваат со ензимска имуноанализа?

Ајде да продолжиме да размислуваме за тоа кои болести и кои биолошки активни супстанции се откриваат со ензимска имуноанализа. Супстанциите откриени со ензимска имуноанализа се претставени во табелата.
Хормони и маркери на болест на тироидната жлезда тиропероксидаза (TPO)
тироглобулин (TG)
Хормон за стимулирање на тироидната жлезда (TSH)
Тироксин (Т4)
Тријодотиронин (Т3)
Слободен тироксин (Т4)
Бесплатен тријодотиронин (Т3)
Дијагностика на репродуктивната функција лутеинизирачки хормон (LH)
Фоликуло стимулирачки хормон (FSH)
Пролактин
Прогестерон
Естрадиол
Тестостерон
Кортизол
Стероид врзувачки глобулин (SHB)
Алфафетопротеин (AFP)
туморски маркери Хорионски гонадотропин (CG)
Специфичен антиген на простата (PSA)
СА - 125
СА - 19,9
CYFRA-21-1
М - 12 (СА - 15,3)
MUC-1 (M-22)
MUC1 (M-20)
Алвеомуцин
К - синџир
L - синџир
Фактор на туморска некроза (TNFα)
γ - интерферон
Рак-ембрионски антиген (ЦЕА)
Дијагноза на заразни болести