FISH is een studie voor differentiële diagnose. Fluorescentie in situ hybridisatie De nieuwste diagnostische methoden

Deze methode wordt momenteel gebruikt om bepaalde soorten kankertumoren te diagnosticeren, omdat de kwaadaardige transformatie van een cel het gevolg is van veranderingen in het genoom. Dienovereenkomstig kan deze cel, na kenmerkende stoornissen in de genen te hebben gevonden, met grote zekerheid als kanker worden geclassificeerd. Daarnaast wordt de FISH-test ook gebruikt om een ​​reeds vastgestelde diagnose te bevestigen, evenals om aanvullende gegevens te verkrijgen over de mogelijkheid om specifieke chemotherapiemedicijnen te gebruiken voor chemotherapie bij borstkanker en om de prognose van de ziekte te verduidelijken.

Een goed voorbeeld van het gebruik van een FISH-test is bij patiënten met borstkanker. Met deze techniek wordt biopsieweefsel onderzocht op kopieën van een gen genaamd HER-2. Als dit gen aanwezig is, betekent dit dat een groot aantal HER2-receptoren zich op het celoppervlak bevinden. Ze zijn gevoelig voor signalen die de ontwikkeling en reproductie van tumorelementen stimuleren. In dit geval opent zich een kans voor het effectieve gebruik van trastuzumab - dit medicijn blokkeert de activiteit van HER2-receptoren, wat betekent dat het de tumorgroei remt.

Hoe wordt de FISH-test uitgevoerd?

Deze afwijkingen in de structuur van chromosomen zijn van verschillende typen:
translocatie - de verplaatsing van een stuk chromosomaal materiaal naar een nieuwe positie binnen hetzelfde of een ander chromosoom;
inversie - rotatie van een deel van het chromosoom tegen 1800 zonder scheiding van het hoofdlichaam;
deletie - verlies van een chromosomaal gebied;
duplicatie - het kopiëren van een deel van het chromosoom, wat leidt tot een toename van het aantal kopieën van hetzelfde gen in de cel.

Elk van deze aandoeningen bevat bepaalde diagnostische tekens en informatie. Translocaties kunnen bijvoorbeeld wijzen op de aanwezigheid van leukemieën, lymfomen of sarcomen, en de aanwezigheid van genduplicaties helpt bij het voorschrijven van de meest effectieve therapie.

Wat is het voordeel van de FISH-test?

Een ander voordeel van de FISH-test is dat deze kan worden gebruikt op recent verkregen materiaal van een patiënt. Voor standaard cytogenetische analyse is het noodzakelijk om eerst een celcultuur te laten groeien, dat wil zeggen dat de cellen van de patiënt zich in het laboratorium kunnen vermenigvuldigen. Dit proces duurt ongeveer 2 weken en het duurt nog een week om een ​​routineonderzoek uit te voeren, terwijl het resultaat van de FISH-test binnen enkele dagen zal worden ontvangen.

De gestage ontwikkeling van de medische wetenschap leidt geleidelijk tot een verlaging van de kosten van de FISH-test en de steeds bredere intrede ervan in de dagelijkse praktijk van oncologen.

Borstkanker is een gevaarlijke ziekte die volgens de statistieken de eerste plaats inneemt onder kankerziekten bij vrouwen. Het risico op het ontwikkelen van deze ziekte neemt toe bij alle vrouwen ouder dan 40 jaar en kan te wijten zijn aan verschillende andere factoren. Tot de meest waarschijnlijke oorzaken van borstkanker behoren obesitas, genetische of erfelijke aanleg, vroeg begin van de menstruatie en late voltooiing, hormonale therapie of bestraling.

Bovendien is het risico op morbiditeit verhoogd bij nulliparae vrouwen en vrouwen die al kanker hebben gehad. Mannen kunnen ook borstkanker krijgen.

Soorten en methoden van diagnose

De eerste stap bij het diagnosticeren van borstkanker is een routineonderzoek door een mammoloog. Vrouwen ouder dan 40 zouden deze controles minstens eens in de twee jaar moeten ondergaan. De arts voert een visueel onderzoek, palpatie en mammografie van de borstklieren uit. Visuele tekenen van de ontwikkeling van de ziekte kunnen zijn:

algemene informatie

Met röntgenfoto's van de borst (mammografie) kunt u de aanwezigheid, grootte en locatie van de tumor bepalen. Om de nauwkeurigheid van de verkregen resultaten te verbeteren, wordt de technologie van het introduceren van een contrastmiddel gebruikt. Als de tumor al is gedetecteerd, wordt de methode van pneumocystografie gebruikt - het verwijderen van de tumorvloeistof en het inbrengen van lucht in de holte. Als de aanwezigheid van een tumor niet is gespecificeerd, wordt ductografie gebruikt - de introductie van een contrastmiddel in de melkkanalen.

Met deze methoden kunt u de aanwezigheid van formaties in de weefsels van de borstklier visualiseren.

Als de aanwezigheid van een tumor ook op mammografie blijkt, wordt de patiënt doorverwezen naar een reeks diagnostische maatregelen:

Op echografie kan de arts een tumor van een cyste onderscheiden en de lokalisatie van de formatie verduidelijken. Daarna wordt er een weefselmonster van genomen voor een biopsie. Met een biopsie kunt u het type formatie achterhalen: goedaardig of kwaadaardig, en ook om te bepalen of de tumor hormoonafhankelijk is. Deze informatie stelt de arts in staat om een ​​behandelstrategie te bepalen, maar maakt het niet altijd mogelijk om het stadium te bepalen. Vaak is het, zelfs met alle noodzakelijke diagnostische maatregelen, mogelijk om het pas na de operatie te bepalen.

Het mechanisme van histologische studies

Zowel voor als na de operatie wordt een weefselbiopsie uitgevoerd. De procedure wordt uitgevoerd na verduidelijking van de lokalisatie van het onderwijs.

Een biopsie is het proces waarbij een stuk weefsel wordt verwijderd en de studie ervan wordt "histologisch onderzoek" of gewoon "histologie" genoemd.

Een medisch werker neemt met een speciale naald een kleine hoeveelheid weefsel uit het neoplasma, of de tumor die al uit het lichaam van de patiënt is verwijderd, wordt opgestuurd voor histologisch onderzoek. Vervolgens wordt het weefselfragment gekleurd en op een speciale manier bewerkt om het contrast te vergroten en het bestuderen te vergemakkelijken. Het plakje wordt door een specialist met een microscoop onderzocht en geeft een conclusie over de kwaliteit van de tumorvorming. Veel hangt in deze studie af van de oplettendheid en kwalificaties van de laboratoriumassistent die de conclusie geeft.

Een verwante studie is immunohistochemie. Over het algemeen kan het ook "histologie" worden genoemd, omdat. de methode is gebaseerd op de studie van weefsels, maar immunohistochemie is een meer geavanceerde analysemethode. Het weefsel in deze studie wordt ook gekleurd met speciale reagentia, die niet alleen het visuele contrast versterken, maar ook op een speciale manier combineren (“labelen”) met antilichamen, waardoor het mogelijk wordt om meer kenmerken van het neoplasma te specificeren. De reactie vindt in dit geval veel sneller plaats, waardoor u snel de resultaten van de analyse kunt krijgen.

Immunohistochemie maakt het niet alleen mogelijk om het type neoplasma te verduidelijken, maar ook om een ​​strategie te plannen voor de behandeling van een patiënt op basis van het identificeren van de gevoeligheid van tumorweefsel voor verschillende soorten therapeutische effecten. Daarnaast is de uitvoering van dit onderzoek zoveel mogelijk geautomatiseerd, waardoor de kans op een diagnostische fout door de menselijke factor minimaal is.

Er zijn ook moderne diagnostische maatregelen waarmee de aanwezigheid van een tumor in het lichaam kan worden opgespoord: dit is een spectrale analyse van bloed, een immunologische (biochemische) analyse, een FISH-test van tumorweefsel. Een genetische bloedtest stelt elke vrouw in staat om de aanwezigheid of afwezigheid van voorwaarden voor het optreden van borstkanker te verifiëren. Met CT en MRI kunt u de lokalisatie van de tumor nauwkeurig bepalen en de dynamiek van zijn ontwikkeling volgen, de structuur van het neoplasma evalueren.

Hoe kanker op te sporen door middel van bloedonderzoek?

Een bloedonderzoek wordt voornamelijk voorgeschreven door een arts na een echografisch onderzoek. Er zijn situaties waarin een patiënt op eigen initiatief bloed doneert voor windowmarkers of genetische analyse om vast te stellen of hij aanleg heeft voor borstkanker. In sommige gevallen kan een algemene bloedtest een reden zijn om contact op te nemen met een oncologische apotheek (samen met palpatie van een zeehond of visuele tekenen van kanker).

Biochemische analyse

Bloed als materiaal voor onderzoek maakt de volgende diagnostische maatregelen mogelijk:

Tegelijkertijd kunnen alleen de eerste twee analyses gespecialiseerde methoden voor het bepalen van kanker worden genoemd, waarvan de tweede meer een preventieve dan een operationele maatregel is. Twee andere bloedonderzoeken worden voornamelijk vóór de operatie uitgevoerd om de toestand van het lichaam en de omvang van het proces te bepalen. Echter, zoals eerder vermeld, als een verzegeling in de borst wordt gevoeld en tegelijkertijd een algemeen bloedonderzoek meer dan twee negatieve diagnostische coëfficiënten aantoont, is dit een reden om contact op te nemen met een specialist. Negatieve coëfficiënten zijn indicatoren buiten de norm in bepaalde parameters van de bloedsamenstelling.

Een biochemische bloedtest onthult de aanwezigheid van antilichamen tegen tumorcellen. Dergelijke lichamen worden tumormarkers genoemd. Het aantal en type tumormarkers hangt af van de specifieke kenmerken (lokalisatie) van de kankergezwel en het stadium van zijn ontwikkeling. Tumormarkers zijn onder meer:

Bij borstkanker zal de behandelend arts vooral geïnteresseerd zijn in de aanwezigheid van de tumormarker CA-15-3, aangezien de aanwezigheid ervan in het bloed ondubbelzinnig wijst op een borstkankerziekte. Het ontcijferen van het resultaat duurt gemiddeld een dag. Biochemische analyse wordt meerdere keren uitgevoerd in de loop van de ziekte. Bloed voor hem wordt 's ochtends op een lege maag uit een ader genomen. Twee weken voor het onderzoek stopt de patiënt met het innemen van alle medicijnen (te overleggen met de behandelend arts). Twee dagen voordat u bloed doneert, kunt u geen alcohol, vet en gefrituurd voedsel gebruiken.

Een uur voor de ingreep mag u niet roken en is het wenselijk om emotionele stress te verminderen. Bloed voor biochemische analyse wordt meestal niet direct na bestraling en fysiotherapie afgenomen.

Definitie van genetische factoren

Voordat we het hebben over een genetische bloedtest, moet het verschil tussen de begrippen "genetisch" en "erfelijk" worden benadrukt. De genetische factor bij het ontstaan ​​van kanker is een breder begrip dat niet alleen de aanwezigheid van verwanten met borstkanker impliceert, maar ook een specifieke genmutatie, waardoor het risico op deze ziekte toeneemt.

De erfelijke factor impliceert een potentieel risico op borstkanker op basis van een familiegeschiedenis. Tegelijkertijd kunnen niet alleen vrouwen, maar ook mannen een gemuteerd gen krijgen, maar de drager ervan wordt niet noodzakelijk ziek.

Elke vrouw kan een genetische analyse ondergaan. Dit wordt vooral aanbevolen voor degenen van wie directe familieleden borstkanker hebben gehad. Voorafgaand aan de procedure voor het doneren van bloed voor analyse, moet een specialist op het gebied van genetica met de patiënt praten, die de nuances van het ontcijferen van de resultaten zal uitleggen. Er is geen speciale voorbereiding van de patiënt vereist voordat bloed wordt gedoneerd.

Als u een positief resultaat krijgt van de BRCA-genmutatie, maar bij afwezigheid van andere alarmerende symptomen, hoeft u niet in paniek te raken. Voor vrouwen met een mutatie in deze genen kunnen als preventieve maatregelen regelmatig zelfonderzoek en lichamelijk onderzoek worden aanbevolen. Na 40 jaar is het zinvol om na te denken over het verwijderen van de eierstokken en borsten; jongere vrouwen die niet van plan zijn om in de toekomst kinderen te krijgen, wordt soms aangeraden om anticonceptie te gebruiken. De beslissing over deze maatregelen ligt geheel op de schouders van de vrouw zelf en vraagt ​​om een ​​doordachte aanpak en overleg met artsen.

De nieuwste diagnostische methoden

Een spectrale analyse van bloed onthult de aanwezigheid van neoplasmata in het lichaam met een waarschijnlijkheid tot 93%. Dit is een relatief goedkope diagnostische methode op basis van infraroodbestraling van bloedserum en analyse van de moleculaire samenstelling.

De conclusie over de spectrale analyse van bloed wordt gegeven op het principe van "aanwezigheid-afwezigheid" en is gericht op het identificeren van de meeste soorten kwaadaardige tumoren. Ook kan deze studie het ontwikkelingsstadium van borstkanker bepalen. De interpretatie van de resultaten vindt plaats in het laboratorium en vereist geen aanvullend doktersadvies.

Om bloed te doneren voor spectrale analyse, is het noodzakelijk om de medicatie-inname 2 maanden voor de procedure te voltooien. Vanaf het moment van röntgen- of andere blootstelling, evenals chemotherapie, moeten er minimaal 3 maanden verstrijken. Bovendien mag de vrouw niet zwanger zijn of menstrueren op het moment van bloedafname. De bloedafname vindt 's ochtends op een lege maag plaats. Spectrale analyse van bloed duurt gemiddeld 12 werkdagen.

Een van de nieuwste methoden om kanker te diagnosticeren is de zogenaamde "fish-test" (FISH, fluorescent hybridization). De effectiviteit ervan staat nog ter discussie, het belangrijkste punt van de haalbaarheid is de kostbare onderzoeksprocedure. De essentie van de methode bestaat uit het labelen van celfragmenten met een fluorescerende samenstelling en verder microscopisch onderzoek van cellen. Aan de hand van welke delen van het genetische materiaal de gelabelde fragmenten in contact zijn gekomen, kan worden begrepen of de patiënt aanleg heeft voor kanker en welke behandelingsmethoden in een bepaald geval relevant zijn.

De FISH-test vereist geen volledig volgroeide cellen, dus deze analyse is veel sneller dan andere laboratoriumtests. Bovendien kunt u met de FISH-methode genetische schade duidelijker waarnemen, wat niet mogelijk is met andere soorten analyses. De FISH-test wordt meestal specifiek gebruikt om borstkanker op te sporen, maar het werkt ook om sommige andere soorten kanker op te sporen.

De nadelen van de FISH-test zijn, naast de hoge kosten, de onmogelijkheid om op sommige delen van de chromosomen te werken vanwege de specificiteit van de markeringen. Bovendien negeert de FISH-test bepaalde soorten mutaties en breuken in de genetische code, wat een belangrijke omissie bij de diagnose kan zijn. Vergelijkende studies van FISH met de goedkopere IHC-test brachten geen significante voordelen aan het licht bij het bepalen van de gevoeligheid voor Herceptin van kankercellen. Desalniettemin is de FISH-test momenteel de snelste van de uiterst nauwkeurige methoden voor het diagnosticeren van kanker.

De FISH-techniek, Fluorescent in situ hybridization, werd halverwege de jaren tachtig ontwikkeld en wordt gebruikt om de aan- of afwezigheid van specifieke DNA-sequenties op chromosomen te detecteren, evenals de alfasatelliet van DNA op het centromeer van chromosoom 6, CEP6( 6p11.1-q11.one).

Dit gaf een significante verschuiving in de diagnose van oncologische ziekten van melanocytische oorsprong door de detectie van tumorantigenen. Tegen de achtergrond van maligniteit wordt een mutatie in drie antigenen vastgesteld: CDK2NA (9p21), CDK4 (12q14) en CMM1(1p). In dit opzicht is de mogelijkheid van objectieve differentiële diagnose op basis van de bepaling van de genetische kenmerken van melanocytische huidtumoren van groot belang bij de vroege diagnose van melanoom en zijn voorlopers.In de kern met een normale set van de bestudeerde genen en chromosoom 6. , twee RREB1-genen rood gekleurd, twee MYB-genen worden waargenomen in geel, twee CCND1-genen in groen en twee chromosoom 6 centromeren in blauw. Voor diagnostische doeleinden worden fluorescerende monsters gebruikt.

Evaluatie van de resultaten van de reactie: het aantal rode, gele, groene en blauwe signalen in 30 kernen van elk monster wordt geteld, vier parameters van verschillende varianten van genetische aandoeningen worden geïdentificeerd, waarbij het monster genetisch consistent is met melanoom. Een monster komt bijvoorbeeld overeen met melanoom als het gemiddelde aantal CCND1-gen per kern ≥2,5 is. Het aantal kopieën van andere genen wordt volgens hetzelfde principe geschat. Een geneesmiddel wordt als FISH-positief beschouwd als aan ten minste één van de vier voorwaarden is voldaan. Monsters waarin alle vier de parameters onder de breekpunten liggen, worden als FISH-negatief beschouwd.

De bepaling van specifieke DNA-sequenties op chromosomen wordt uitgevoerd op coupes van biopsiespecimens of chirurgisch materiaal. In praktische uitvoering is de FISH-reactie als volgt: het testmateriaal dat DNA in de kernen van melanocyten bevat, wordt verwerkt om het molecuul ervan gedeeltelijk te vernietigen om de dubbelstrengige structuur te breken en daardoor de toegang tot het gewenste gengebied te vergemakkelijken. Monsters worden geclassificeerd volgens de plaats van aanhechting aan het DNA-molecuul. Het materiaal voor de FISH-reactie in de klinische praktijk zijn paraffineweefselcoupes, uitstrijkjes en afdrukken.

Met de FISH-reactie kunt u veranderingen vinden die zijn opgetreden in het DNA-molecuul als gevolg van een toename van het aantal kopieën van een gen, verlies van een gen, een verandering in het aantal chromosomen en kwalitatieve veranderingen - de beweging van gen loci zowel in hetzelfde chromosoom als tussen twee chromosomen.

Om de met de FISH-reactie verkregen gegevens te verwerken en de relatie tussen het aantal kopieën van de genen van de drie bestudeerde groepen te bestuderen, wordt de Spearman-correlatiecoëfficiënt gebruikt.

Melanoom wordt gekenmerkt door een toename van het aantal kopieën in vergelijking met naevus en dysplastische naevus.

Een eenvoudige naevus heeft, vergeleken met een dysplastische naevus, minder afwijkingen in het aantal kopieën (d.w.z. meer normale kopieën).

Om beslissingsregels te bouwen om te voorspellen of een monster tot een bepaalde klasse behoort (differentiële diagnose van eenvoudige en dysplastische naevi), wordt het wiskundige apparaat van "beslissingsbomen" gebruikt. Deze aanpak heeft zichzelf in de praktijk bewezen en de resultaten van het toepassen van deze methode (in tegenstelling tot veel andere methoden, zoals neurale netwerken) kunnen duidelijk worden geïnterpreteerd om beslissingsregels te bouwen voor het onderscheiden van eenvoudige, dysplastische naevi en melanoom. De initiële gegevens waren in alle gevallen de kopieaantallen van vier genen.

Het opstellen van een beslisregel voor differentiële diagnostiek is opgedeeld in verschillende fasen. In de eerste fase worden melanoom en naevus gedifferentieerd, zonder rekening te houden met het type naevus. In de volgende fase wordt een beslissingsregel gebouwd om eenvoudige en dysplastische naevi te scheiden. Ten slotte is het in de laatste fase mogelijk om een ​​"beslissingsboom" te bouwen om de mate van dysplastische naevusdysplasie te bepalen.

Een dergelijke verdeling van de taak om naevi in ​​subtaken te classificeren, maakt het mogelijk om in elk van de fasen een hoge nauwkeurigheid van voorspellingen te bereiken. De invoergegevens voor het construeren van de beslisboom zijn gegevens over het kopieaantal van vier genen voor patiënten met de diagnose melanoom en patiënten met de diagnose niet-melanoom (patiënten met verschillende soorten naevus - eenvoudig en dysplastisch). Voor elke patiënt zijn genkopienummers beschikbaar voor 30 cellen.

Door de taak van het voorspellen van een diagnose in verschillende fasen te verdelen, kunnen we dus zeer nauwkeurige beslissingsregels opstellen, niet alleen voor het onderscheid tussen melanoom en naevi, maar ook voor het bepalen van het type naevi en het voorspellen van de mate van dysplasie voor een dysplastische naevus. De geconstrueerde "beslissingsbomen" zijn een duidelijke manier om een ​​diagnose te voorspellen op basis van het aantal kopieën van genen en kunnen in de klinische praktijk gemakkelijk worden gebruikt om goedaardige, premaligne en kwaadaardige melanocytische huidtumoren te onderscheiden. De voorgestelde aanvullende methode voor differentiële diagnose is vooral belangrijk bij de excisie van gigantische aangeboren gepigmenteerde naevi en dysplastische naevi bij pediatrische patiënten, aangezien dergelijke patiënten medische instellingen bezoeken met een hoog percentage diagnostische fouten. De resultaten van het gebruik van de beschreven methode zijn zeer effectief, het is raadzaam om het te gebruiken bij de diagnose van gepigmenteerde huidtumoren, vooral bij patiënten met het FAMM-syndroom.

Invasieve methoden voor prenatale diagnose maken het niet alleen mogelijk om in de toekomst te kijken en betrouwbaar te voorspellen of de ongeboren baby nog steeds ziekten verwacht die verband houden met intra-uteriene misvormingen, maar ook om de aard en oorzaken van aangeboren pathologieën te achterhalen.

Alle informatie is echter alleen waardevol als deze op tijd is. Als het gaat om de ontwikkelingstoestand van de foetus, is de snelheid van het verkrijgen van testresultaten van cruciaal belang.

Daarom is er veel vraag naar de FISH-methode, die het mogelijk maakt om de aanwezigheid van de meest voorkomende ontwikkelingsafwijkingen in het embryo in de kortst mogelijke tijd te beoordelen, in de genetische diagnostiek.

FISH is een afkorting die de essentie ontcijfert van de technologie voor het detecteren van chromosomale afwijkingen - fluorescentie in situ hybridisatie - fluorescentie hybridisatie in een "thuis" omgeving.

Deze techniek, eind jaren 70 van de vorige eeuw voorgesteld door J. Goll en M.-L. Pardew is gebaseerd op de mogelijkheid om de sequentie van nucleïnezuurfragmenten (DNA of RNA) te herstellen na hun denaturatie.

De auteurs hebben een methode ontwikkeld die het mogelijk maakt, met behulp van in situ hybridisatie van kunstmatig gecreëerde gelabelde DNA-probes (probes) en cytogenetisch materiaal dat voor analyse is genomen, om kwantitatieve en kwalitatieve afwijkingen van de van belang zijnde chromosomen te identificeren.

Aan het einde van de vorige eeuw, na het succesvolle gebruik van fluorescerende kleurstoffen voor het kleuren van DNA-sondes, kreeg de FISH-methode zijn naam en is sindsdien intensief verbeterd en gevarieerd.

Moderne methoden van FISH-analyse streven ernaar om de mogelijkheid te bieden om de meest volledige informatie te verkrijgen voor de analyse van het verzamelde genetische materiaal in een enkele hybridisatieprocedure.

Feit is dat na hybridisatie slechts een beperkt aantal chromosomen van hetzelfde cytogenetische materiaal eenmalig kan worden beoordeeld. Het vermogen om DNA-ketens opnieuw te hybridiseren neemt van tijd tot tijd af.

Daarom wordt op dit moment in de genetische diagnostiek de in situ hybridisatiemethode het vaakst gebruikt om snel vragen te beantwoorden over de meest voorkomende aneuploïdieën voor chromosomen 21, 13, 18, evenals voor geslachtschromosomen X, Y.

Elk weefsel- of celmonster is geschikt voor FISH-analyse.

Bij prenatale diagnose kunnen dit bloedmonsters, ejaculaat of.

De snelheid van het verkrijgen van resultaten wordt verzekerd door het feit dat de cellen die zijn verkregen uit het materiaal dat voor analyse is genomen, niet in voedingsmedia hoeven te worden gekweekt en hun deling tot het vereiste aantal bereiken, zoals bij de klassieke methode van karyotypering.

Het geselecteerde materiaal is speciaal voorbereid om een ​​geconcentreerde zuivere celsuspensie te verkrijgen. Vervolgens worden het proces van denaturatie van de DNA-probe en natuurlijk DNA van het testmonster tot een enkelstrengs toestand en het hybridisatieproces uitgevoerd, waarbij de gekleurde DNA-probes worden geïncubeerd met het DNA van het monster.

Zo worden de gewenste (gekleurde) chromosomen in de cel gevisualiseerd, hun aantal, de structuur van genetische structuren, enz. geschat. Met het oculair van een speciale fluorescentiemicroscoop kun je de lichtgevende DNA-ketens bekijken.

Momenteel wordt de FISH-methode veel gebruikt voor diagnostische doeleinden om genetische ziekten, chromosomale afwijkingen in de reproductieve geneeskunde, oncologie, hematologie, biologische dosimetrie, enz. Op te sporen.

Hoe wordt de FISH-diagnose van de foetus gebruikt?

Op het gebied van reproductieve geneeskunde wordt de FISH-methode, als een van de methoden van moleculaire cytogenetische diagnostiek, in alle stadia gebruikt.

• stel.

Om het karyotype van toekomstige ouders te bepalen, wordt het één keer uitgevoerd, omdat het menselijk genoom gedurende het hele leven onveranderd blijft.

Karyotypering van een paar voordat een kind wordt verwekt, zal helpen om vast te stellen of de ouders drager zijn van genetische pathologieën die zijn geërfd, inclusief verborgen pathologieën. Evenals de algemene toestand van het genoom van toekomstige moeders en vaders, die het succes van het verwekken van een baby en het dragen van een zwangerschap kan beïnvloeden.

In dit geval fungeert FISH-diagnostiek vaak als aanvullend onderzoek op klassieke karyotypering, wanneer chromosomale pathologieën worden gedetecteerd in het testmateriaal (veneus bloed van ouders), als mozaïek wordt vermoed.

Een aanvullend onderzoek met de FISH-methode zal op betrouwbare wijze de aanwezigheid van een vermoedelijke anomalie in de cellen van de toekomstige ouder bevestigen of weerleggen.

• Onderzoek naar ejaculaat.

Het is geïndiceerd voor problemen met reproductie bij een paar vanwege de "mannelijke factor". Analyse van sperma met de FISH-methode stelt u in staat om het niveau van abnormale spermatozoa te beoordelen in termen van het aantal chromosomen, en om te bepalen of een man drager is van genetische ziekten die verband houden met seks.

Als het paar later via IVF tot conceptie overgaat, kunt u met FISH-analyse van het ejaculaat sperma van de hoogste kwaliteit selecteren voor eierbevruchting.

• Met IVF.

Voor pre-implantatie genetische diagnose (PGD). Volgens de resultaten van studies van het karyotype van de ouders, worden mogelijke chromosomale en genetische afwijkingen die op het embryo kunnen worden overgedragen, bepaald.

Dankzij de mogelijkheden van FISH-diagnostiek kan de studie van de genetische gezondheid van de resulterende embryo's worden uitgevoerd in een kwestie van uren voordat ze naar de baarmoederholte worden overgebracht om het begin van de zwangerschap met een bekende gezonde foetus te garanderen.

Bovendien maken de mogelijkheden van PGD het mogelijk om het geslacht van de embryo's te bepalen, en bijgevolg, indien nodig, het geslacht van het ongeboren kind te "ordenen".

• Tijdens de zwangerschap.

Bij prenatale diagnose: analyse van foetale cellen verkregen door vlokkentest, vruchtwaterpunctie of cordocentese met de FISH-methode, bieden medische centra meestal naast de klassieke genetische studie van foetale cellen (karyotypering).

Deze methode is onmisbaar wanneer het nodig is om snel antwoord te krijgen op de aanwezigheid van de meest voorkomende chromosoomafwijkingen bij de foetus: trisomie op chromosomen 21, 18, 13, afwijkingen op chromosomen X en Y, soms ook aneuploïdieën op chromosomen 14 (of 17), 15, 16.

Voordelen van FISH-analyse

Het uitvoeren van genetische analyse door de FISH-methode, hoewel het vandaag nog steeds een hulpmethode is voor het diagnosticeren van chromosomale pathologieën, bepaalt de doelmatigheid van de implementatie ervan de onmiskenbare voordelen:

• de snelheid van het verkrijgen van resultaten met betrekking tot de geteste chromosomen - binnen enkele uren - niet meer dan 72.

Dit kan belangrijk zijn als het lot van de zwangerschap afhangt van de diagnose van genetici;

• hoge gevoeligheid en betrouwbaarheid van de FISH-methode - succesvolle analyse is mogelijk op een verwaarloosbaar kleine hoeveelheid biomateriaal - één cel is voldoende, de fout van de resultaten is niet meer dan 0,5%.

Dit kan van belang zijn wanneer het aantal cellen in het initiële monster beperkt is, bijvoorbeeld wanneer hun deling slecht is.

• mogelijkheid van FISH-diagnostiek in elk stadium van de zwangerschap (vanaf de 7e week) en op elk biologisch monster: chorionfragmenten, vruchtwater, foetaal bloed, enz.

Waar kan ik een FISH-diagnose krijgen?

In Moskou wordt de FISH-methode voor prenatale diagnose van foetale chromosomale afwijkingen gebruikt in de volgende medische centra:

In de regel bieden klinieken een FISH-diagnosedienst aan als onderdeel van een volledige foetale karyotypering door invasieve interventie tegen een extra vergoeding. En in de regel stemmen toekomstige ouders ermee in om extra te betalen, want dankzij de FISH-methode kun je in een paar dagen het belangrijkste over je baby te weten komen

Borstkanker is niet te onderschatten. Het kan absoluut iedereen treffen - jong en oud, vrouwen en mannen. De extreme complexiteit van de behandeling, de hoge mortaliteit en de groeiende dynamiek van morbiditeit zijn de reden voor meer aandacht voor dit probleem vanuit de geneeskunde.

Tot op heden is er geen behandelingsmethode die een 100% positief resultaat van de ziekte garandeert. Bestaande methoden zijn tijdrovend, kostbaar en kunnen grote nevenschade aan het lichaam veroorzaken.

Dit is een van die ziekten waarvan we kunnen zeggen dat de beste behandeling het uitsluiten van risicofactoren en tijdige diagnose is.

aanleg voor borstkanker

Ondanks het feit dat kanker voor het eerst werd beschreven in de 15e eeuw voor Christus en wetenschappers een enorme hoeveelheid informatie hebben, is het nog steeds niet voldoende om de etiologie van borstkanker volledig te beschrijven.

Omgevingsfactoren die het ontstaan ​​of de ontwikkeling van kanker beïnvloeden, zijn niet met voldoende betrouwbaarheid gevonden. Individuele onderzoeken die wijzen op een bepaalde kankerverwekkende stof krijgen geen volledige erkenning van de hele medische gemeenschap. Er is echter een verband tussen borstkanker en het volgende:

Een van de belangrijkste factoren die hierboven zijn genoemd, is de leeftijdsfactor: in de loop der jaren neemt de kans op het ontwikkelen van borstkanker met ordes van grootte toe. Over het algemeen is de complexiteit van de kwestie van de etiologie van borstkanker te wijten aan de genetische aard ervan. Het is niet bekend waarom er plotseling een storing optreedt en het borstweefsel zich ongecontroleerd begint te delen, waardoor aangrenzende weefsels worden aangetast en metastasen door het hele lichaam ontstaan.

Maar wetenschappers zijn het over één ding eens: het moderne leven is veel gunstiger voor kanker dan voorheen.

Zo zijn hoge doses elektromagnetische straling, slechte ecologie, laag zuurstofgehalte in steden, fysieke inactiviteit, stress, enz. De aanzienlijk verhoogde leeftijd van het leven kan niet worden genegeerd, omdat kanker een ziekte is die meestal op volwassen leeftijd optreedt.

Vereiste tests

De mogelijkheid van een positieve uitkomst van kanker is direct gerelateerd aan het tijdstip van de start van de behandeling, dus de houding ten opzichte van de diagnose zou het ernstigst moeten zijn.

Aangezien diagnostische methoden vereist zijn:

• maandelijkse zelfcontrole (palpatietest);
• controle eens per kwartaal bij een arts;
• Echografie om de zes maanden;
• MRI jaarlijks.

Mammogrammen (röntgenfoto's) worden niet aanbevolen vóór de leeftijd van 30, omdat blootstelling aan straling het best op jonge leeftijd kan worden vermeden. Als u borstkanker vermoedt, moet u de volgende onderzoeken ondergaan:

FISH onderzoeksmethode

FISH-studie (FISH-analyse) is een cytogenetische methode die wordt gebruikt om het membraaneiwit HER2 (Human Oestrogeen Receptor2) te bestuderen. Bij het uitvoeren van een FISH-onderzoek worden DNA-sondes gelabeld met een fluorescerende kleurstof gebruikt. Deze sondes worden in de vereiste DNA-regio's ingebracht en zijn in staat om de mate van HER2-amplificatie te kwantificeren. Omdat het onderzoek in de loop van de tijd wordt uitgevoerd en de genen zich blijven delen, is het mogelijk om de verhouding tussen het aantal kopieën van het HER2-gen en het aantal kopieën van het normaal delende gebied te schatten. Als het groter is dan of gelijk is aan 2, wordt het resultaat als HER2-positief beschouwd.

FISH-analyse speelt een cruciale rol bij de voorspelling van kanker en de keuze van de behandeling. Dus, amplificatie of verhoogde activiteit van dit eiwit komt voor in 30% van de kankergevallen en vereist speciale behandelingen die gericht zijn op het remmen van de functie ervan. Normaal gesproken regelt HER2 de groei, deling en het zelfherstel van cellen. In het geval van kanker produceert dit eiwit te veel membraanreceptoren en dwingt het de cellen om zich ongecontroleerd te delen. Dit is hoe de cel kanker wordt.

Als de FISH-test positief is, wordt een behandeling gegeven om HER2 te onderdrukken. Het belangrijkste medicijn van vandaag is Herceptin. Als deze test niet wordt uitgevoerd of de resultaten ervan worden genegeerd, is de behandelingskeuze verkeerd en zal de kanker naar het terminale stadium gaan. Bovendien zijn dergelijke kankers agressiever dan HER2-negatieve.

Samen met de FISH-analyse wordt een immunohistochemische analyse uitgevoerd. Dit is ook een genmethode om het HER2-eiwit te bestuderen, maar in het geval van immunohistochemische analyse wordt de hoeveelheid HER2-eiwit niet gedetecteerd in de cel, maar in een bepaald monster dat wordt genomen.

Het verschilt van de vismethode in kosten, maar dit resulteert in minder informatieve resultaten, die afhankelijk zijn van de onderzoeker, het laboratorium en de gebruikte criteria. De hoeveelheid HER2-eiwit wordt bepaald door de kleur van het testmonster en wordt gescoord op een schaal van nul tot drie. Samen vormen deze twee methoden de gouden standaard voor het onderzoeken van de HER2-status van een patiënt.

Dus, ondanks zijn imago, is borstkanker heel vatbaar voor een succesvolle behandeling. In het arsenaal van oncologen - alle geavanceerde prestaties van de geneeskunde. Al deze fondsen zijn vrij toegankelijk voor de meest gewone burger.

Het belangrijkste voor het succesvolle resultaat van de ziekte is de tijdige levering van tests voor borstkanker, de keuze van de juiste behandelingsmethode en de vroege start ervan. Wanhoop niet als er geen resultaat is, want ook een positieve emotionele achtergrond heeft een grote invloed op het verloop van de ziekte.