Tek katmanlı hücre kültürleri. hücre kültürü


hücre kültürleri


Hücre kültürü teknolojisi, canlı organizmaların dışında büyüyen hücrelerden oluşur.


Bitki hücre kültürleri


Bitki hücre kültürleri, sadece transgenik bitkilerin yaratılmasında önemli bir adım değil, aynı zamanda çevresel olarak kabul edilebilir ve ekonomik olarak uygulanabilir porsuk ağacında bulunan ve Taxol (Taxol) adı verilen bir kemoterapi ilacı olarak üretilen paklitaksel (paklitaksel) gibi tedavi edici özelliklere sahip doğal ürünler kaynağıdır. Bitki hücre kültürleri ayrıca gıda endüstrisi tarafından tat ve renk olarak kullanılan maddeleri üretmek için kullanılır.


Böcek hücre kültürleri


Böcek hücre kültürlerinin incelenmesi ve uygulanması, böcek zararlılarını yok eden, ancak faydalı böceklerin canlılığını etkilemeyen ve ayrıca çevrede birikmeyen biyolojik ajanların insanlar tarafından geliştirilmesi ve kullanılması olanaklarını genişletir. Biyolojik haşere kontrol yöntemlerinin faydaları uzun süredir bilinmesine rağmen, bu tür biyolojik olarak aktif maddelerin ve böcekler ve mikroorganizmalar için patojenlerin endüstriyel miktarlarda üretilmesi çok zordur. Böcek hücre kültürlerinin kullanılması bu sorunu tamamen çözebilir. Ayrıca bitki hücreleri gibi böcek hücreleri de ilaç sentezlemek için kullanılabilir. Bu bakış açısı şu anda aktif olarak araştırılmaktadır. Ayrıca, SARS ve influenza gibi bulaşıcı hastalıkların tedavisi için VLP aşıları (VLP - virüs benzeri parçacık - virüs benzeri parçacıklar) üretmek için böcek hücrelerinin kullanılması olasılığı araştırılmaktadır. Bu teknik, maliyetleri büyük ölçüde azaltabilir ve geleneksel tavuk yumurtası yöntemiyle ilişkili güvenlik endişelerini ortadan kaldırabilir.


memeli hücre kültürleri


Memeli hücre kültürleri, on yıldan fazla bir süredir hayvancılık uzmanları tarafından kullanılan ana araçlardan biri olmuştur. Laboratuvar koşullarında, üstün kalitedeki ineklerden elde edilen yumurtalar, ilgili boğaların spermleri ile döllenir. Elde edilen embriyolar birkaç gün boyunca bir test tüpünde büyütüldükten sonra vekil anne ineklerin rahmine implante edilirler. Aynı teknik, insan in vitro fertilizasyonunun temelidir.


Şu anda, memeli hücre kültürlerinin kullanımı suni tohumlamanın çok ötesine geçmektedir. Memeli hücreleri, yeni ilaçların güvenliğini ve etkinliğini test etmek için hayvanların kullanımını tamamlayabilir ve belki bir gün onun yerini alabilir. Ayrıca, bitki ve böcek hücreleri gibi memeli hücreleri de ilaçları, özellikle genetiği değiştirilmiş mikroorganizmalar tarafından sentezlenemeyecek kadar karmaşık olan bazı hayvan proteinlerini sentezlemek için kullanılabilir. Örneğin monoklonal antikorlar, memeli hücre kültürleri tarafından sentezlenir.


Bilim adamları ayrıca aşı üretmek için memeli hücrelerini kullanmayı düşünüyorlar. 2005 yılında ABD Sağlık ve İnsan Hizmetleri Departmanı, Sanofi Pasteur'a 97 milyon dolarlık bir sözleşme verdi. Şirketin uzmanlarının görevi, grip aşılarının geliştirilmesini hızlandırmak ve buna bağlı olarak insanlığın bir pandemiye karşı hazırlığını artırmak için memeli hücrelerini yetiştirmek için yöntemler geliştirmektir.


Kültür Temelli Terapiler yetişkin kök hücreler bazı vücut dokularında (kemik iliği, yağ dokusu, beyin vb.) bulunanlar da yakında klinik pratikte hak ettiği yeri alacaktır. Araştırmacılar, kök hücrelerin vücut tarafından hasarlı dokuyu onarmak için kullanılabileceğini bulmuşlardır. Yetişkin hematopoietik kök hücreler uzun süredir kemik iliği nakli olarak kullanılmaktadır. Her tür kan hücresinin olgunlaşma ve oluşum süreçlerini eski haline getirmek için gereklidirler. Bu tür hücreler, kordon kanından büyük miktarlarda elde edilebilir, ancak bunların izolasyonu oldukça karmaşık bir süreçtir.


Araştırmacılar şu anda plasenta ve yağ dokusundan kök hücreleri izole etmek için yöntemler üzerinde çalışıyorlar. Bir dizi uzman, hücresel yeniden programlama - örneğin cilt hücreleri gibi vücudun olgun hücrelerinin farklılaşmamış bir duruma döndürülmesi ve ardından gerekli doku tipindeki hücrelere farklılaşmalarının uyarılması için yöntemlerin geliştirilmesiyle ilgilenmektedir.


Embriyonik kök hücreleri


kullanım embriyonik kök hücreleri ayrıca birçok hastalık için potansiyel bir tedavi yöntemi olarak kabul edilmektedir. Adından da anlaşılacağı gibi, fetal hücreler embriyolardan, özellikle yumurtalardan gelişenlerden elde edilir, in vitro (in vitro fertilizasyon klinikleri) döllenir ve bağışçıların rızasıyla bilimsel kullanım için araştırmacılara bağışlanır. Genellikle blastokistler kullanılır - birkaç yüz hücreden oluşan, mikroskop altında top gibi görünen 4-5 günlük embriyolar.


İnsan embriyonik kök hücrelerinin izolasyonu için, blastosistin iç hücre kütlesi, hücrelerin aktif olarak bölünmeye başladığı, besin açısından zengin bir kültür ortamına aktarılır. Birkaç gün içinde hücreler kültür plakasının tüm yüzeyini kaplar. Bundan sonra, araştırmacılar bölünen hücreleri toplar, parçalara böler ve yeni plakalara yerleştirir. Hücreleri yeni plakalara taşıma işlemine ne ad verilir? yeniden tohumlama ve aylar boyunca birçok kez tekrarlanabilir. Hücre geçiş döngüsü denir geçit. Kültürde altı veya daha fazla ay boyunca farklılaşma olmadan var olan (yani, pluripotent kalan - vücudun herhangi bir dokusunun hücrelerine farklılaşabilen) ve normal bir gen kümesini koruyan embriyonik kök hücrelere denir. embriyonik kök hücre hattı.


Kültür plakasının iç yüzeyi genellikle bölünemeyecek şekilde genetiği değiştirilmiş fare embriyolarından elde edilen deri hücreleriyle kaplıdır. Bu hücreler, embriyonik hücrelerin yüzeye tutturulduğu bir "besin substratı" olan bir besleyici tabaka oluşturur. Bilim adamları, mevcut yöntemi iyileştirmeye ve fare hücrelerini kullanma ihtiyacını ortadan kaldırmaya çalışıyorlar, çünkü varlıkları her zaman insan hücrelerinin kültürüne alerjik reaksiyona neden olabilecek viral partiküller ve fare proteinleri riskini beraberinde getiriyor.


Kök hücre tedavisi ve doku mühendisliğinin maksimum değeri, terapötik kök hücreler ve onlardan yetiştirilen dokular genetik olarak alıcının hücreleriyle aynıysa elde edilebilir. Bu nedenle, eğer hastanın kendisi kaynağı değilse, kök hücreler, genetik materyalleri alıcının genleri ile değiştirilerek modifiye edilmeli ve ancak o zaman belirli bir tipteki hücrelere farklılaştırılmalıdır. Şu anda, genetik materyali değiştirme ve yeniden programlama prosedürü sadece embriyonik kök hücreler ile başarılı bir şekilde gerçekleştirilebilmektedir.

hücre kültürü

Hücre kültürü prokaryot ve ökaryotların in vitro tek tek hücrelerinin (veya tek bir hücrenin) kontrollü koşullar altında yapay olarak büyütüldüğü bir işlemdir. Uygulamada, "hücre kültürü" terimi esas olarak çok hücreli ökaryotlardan, en yaygın olarak hayvanlardan türetilen tek doku hücrelerinin kültivasyonuna atıfta bulunur. Hücre kültürlerini büyütmek için teknoloji ve tekniklerin tarihsel gelişimi, doku kültürlerinin ve tüm organların yetiştirilmesiyle ayrılmaz bir şekilde bağlantılıdır.

Öykü

19. yüzyılda İngiliz fizyolog S. Ringer, hayvanların kalp atışlarını vücut dışında tutmak için sodyum, potasyum, kalsiyum ve magnezyum klorür içeren bir tuzlu su çözeltisi geliştirdi. 1885'te Wilhelm Roux doku kültürü ilkesini oluşturdu, bir tavuk embriyosundan kemik iliğinin bir kısmını çıkardı ve birkaç gün boyunca ılık tuzlu suda tuttu. Johns Hopkins Tıp Okulu'nda ve ardından Yale Üniversitesi'nde çalışan Ross Granville Harrison, 1907-1910 yıllarında deneylerinin sonuçlarını yayınlayarak bir doku kültürü metodolojisi oluşturdu. Hücre kültürü teknikleri 1940'larda ve 1950'lerde viroloji alanındaki araştırmalarla bağlantılı olarak önemli ölçüde gelişmiştir. Virüslerin hücre kültürlerinde yetiştirilmesi, aşı üretimi için saf viral materyalin elde edilmesini mümkün kıldı. Çocuk felci aşısı, hücre kültürü teknolojisi kullanılarak seri üretilen ilk ilaçlardan biriydi.

Yetiştirmenin temel ilkeleri

hücre izolasyonu

Vücut dışında yetiştirmek için canlı hücreler birkaç yolla elde edilebilir. Hücreler kandan izole edilebilir, ancak kültürde sadece lökositler büyüyebilir. Mononükleer hücreler, hücre dışı matrisi yok eden kollajenaz, tripsin, pronaz gibi enzimler kullanılarak yumuşak dokulardan izole edilebilir. Ek olarak, besin ortamına doku parçaları yerleştirilebilir. Doğrudan nesneden alınan hücrelere birincil denir. Tümör hücreleri hariç, çoğu birincil hücre sınırlı bir ömre sahiptir. Belirli sayıda bölünmeden sonra hücreler yaşlanma sürecine girer ve bölünmeyi durdurur, ancak canlılığını kaybetmez. Süresiz olarak çoğalabilen "ölümsüz" hücre hatları vardır. Bu yetenek, rastgele bir mutasyonun sonucudur veya telomeraz genini baskılayarak yapay olarak elde edilir.

Büyüyen hücreler

Hücreler, hücre kültürü inkübatöründe özel besin ortamında, sabit sıcaklıkta ve özel gazlı ortamda büyütülür. Farklı hücre kültürleri için besin ortamı, bileşim, pH, glikoz konsantrasyonu, büyüme faktörlerinin bileşimi vb. Besin ortamında kullanılan büyüme faktörleri en yaygın olarak kandan elde edilir. Bu durumdaki risk faktörlerinden biri, hücre kültürünün prionlar veya virüsler ile enfeksiyon olasılığıdır. Yetiştirmede önemli görevlerden biri, kontamine bileşenlerin kullanımını önlemek veya en aza indirmektir. Ancak pratikte bu her zaman sağlanamaz. Hücreler, süspansiyon halinde veya yapışkan halde büyütülebilir. Bazı hücreler (kan hücreleri gibi) doğal olarak süspansiyon halinde bulunur. Kültürde hücre yoğunluğunu arttırmak için yüzeylere yapışamayacak şekilde yapay olarak değiştirilmiş hücre hatları da vardır. Yapışkan hücrelerin büyümesi, yapışmayı iyileştirmek ve büyümeyi ve farklılaşmayı teşvik etmek için doku kültürü veya hücre dışı matris elemanları ile kaplanmış plastik gibi bir yüzey gerektirir. Yumuşak ve sert doku hücrelerinin çoğu yapışkandır. Yapışkan kültür türünden, geleneksel laboratuvar cam eşyalarının aksine, üç boyutlu bir ortam olan organotipik hücre kültürü türü ayırt edilir. Bu kültür sistemi, fiziksel ve biyokimyasal olarak canlı dokulara en çok benzeyen sistemdir, ancak bakımında bazı teknik zorluklar vardır (örneğin, difüzyona ihtiyaç duyar).

Hücre hatlarının çapraz kontaminasyonu

Bilim adamları hücre kültürleriyle çalışırken çapraz bulaşma sorunuyla karşı karşıya kalabilirler. Çalışmaların sonuçlarına göre, vakaların %15-20'sinde deneylerde kullanılan hücrelerin hasar gördüğü veya diğer hücre dizilerinin hücreleriyle kontamine olduğu varsayılabilir.

Büyüyen hücrelerin özellikleri

Hücreleri büyütürken, sürekli bölünme nedeniyle, kültürde fazlalıkları olabilir. Sonuç olarak, aşağıdaki sorunlar ortaya çıkabilir:

  • Toksik olanlar da dahil olmak üzere atılım ürünlerinin besin ortamında birikmesi.
  • Yaşamsal aktivitelerini durduran ölü hücrelerin kültüründe birikmesi.
  • Çok sayıda hücrenin birikmesi hücre döngüsü üzerinde olumsuz bir etkiye sahiptir, büyüme ve bölünme yavaşlar ve hücreler yaşlanmaya ve ölmeye başlar (kontak büyüme inhibisyonu).
  • Aynı nedenle hücresel farklılaşma başlayabilir.

Hücre kültürlerinin normal işleyişini sürdürmek ve olumsuz olayları önlemek için, besin ortamının değiştirilmesi, yolcu ve hücrelerin transfeksiyonu periyodik olarak gerçekleştirilir. Kültürlerin bakteri, maya veya diğer hücre dizileri ile kontaminasyonunu önlemek için tüm manipülasyonlar genellikle steril bir kutuda aseptik koşullar altında gerçekleştirilir. Mikroflorayı bastırmak için besin ortamına antibiyotikler (penisilin, streptomisin) ve antifungal ilaçlar (amfoterisin B) eklenebilir.

İnsan hücre hatları

Rahim ağzı kanserinden ölen Henrietta Lacks'ten elde edilen en eski insan hücre kültürlerinden biri. Hücre kültürü çekirdekleri mavi boyanmıştır.

İnsan hücrelerinin yetiştirilmesi, biyoetik kurallarına biraz aykırıdır, çünkü izole olarak büyütülen hücreler, ana organizmadan daha uzun süre yaşayabilir ve daha sonra deneyler yapmak veya yeni tedaviler geliştirmek ve ondan kazanç sağlamak için kullanılabilir. Bu alandaki ilk mahkeme kararı, hastaların kendi rızaları ile alınan organlardan türetilen hücre hatları üzerinde hiçbir mülkiyet haklarının bulunmadığı John Moore v. California Üniversitesi davasında Kaliforniya Yüksek Mahkemesinde verilmiştir.

Hücre hattı "Hibridoma"

Biyoteknoloji ürünleri

Hücre kültürlerinden endüstriyel bir yöntem, enzimler, sentetik hormonlar, monoklonal antikorlar, interlökinler, lenfokinler, antitümör ilaçlar gibi ürünler üretir. Bakteri kültürlerinde rDNA kullanılarak birçok basit protein nispeten kolayca elde edilebilmesine rağmen, glikoproteinler gibi daha karmaşık proteinler şu anda sadece hayvan hücrelerinden elde edilebilmektedir. Bu önemli proteinlerden biri de eritropoietin hormonudur. Büyüyen memeli hücre kültürlerinin maliyeti oldukça yüksektir, bu nedenle şu anda böcek veya daha yüksek bitki hücre kültürlerinde karmaşık proteinler üretme olasılığı üzerine araştırmalar yapılmaktadır.

doku kültürleri

Hücre kültürü, doku kültürü teknolojisinin ve doku mühendisliğinin ayrılmaz bir parçasıdır, çünkü hücrelerin büyümesi ve ex vivo olarak canlı bir durumda muhafaza edilmesinin temelini tanımlar.

Aşılar

Hücre kültürü teknikleri kullanılarak çocuk felci, kızamık, kabakulak, kızamıkçık ve suçiçeğine karşı aşılar üretilmektedir. Amerika Birleşik Devletleri'nin neden olduğu bir grip salgını tehdidi nedeniyle, aşı elde etmek için araştırmaları finanse ediyor.

KK - Bunlar, vücudun dışında yapay koşullarda yaşayan ve çoğalan çok hücreli bir organizmanın hücreleridir.

Vücut dışında yaşayan hücreler veya dokular, in vivo olarak organ ve doku hücrelerinin özelliklerinden keskin bir şekilde farklı olan bütün bir metabolik, morfolojik ve genetik özellikler kompleksi ile karakterize edilir.

İki ana tip tek katmanlı hücre kültürü vardır: birincil ve nakledilen.

Öncelikle tripsinize edilir."Birincil" terimi, embriyonik veya doğum sonrası dönemde doğrudan insan veya hayvan dokularından elde edilen bir hücre kültürünü ifade eder. Bu tür mahsullerin ömrü sınırlıdır. Belirli bir süre sonra, sitoplazmanın granülasyonu ve vakuolizasyonu, hücrelerin yuvarlanması, hücreler ve üzerinde büyüdükleri katı substrat arasındaki iletişim kaybı ile ifade edilen spesifik olmayan dejenerasyon fenomenleri ortaya çıkar. Ortamın periyodik değişimi, ikincisinin bileşimindeki değişiklikler ve diğer prosedürler, birincil hücre kültürünün ömrünü sadece biraz artırabilir, ancak nihai yıkımını ve ölümünü engelleyemez. Her durumda, bu süreç, tüm organizmada etkili olan nörohumoral faktörlerin kontrolü dışında olan hücrelerin metabolik aktivitesinin doğal olarak yok olmasıyla ilişkilidir.

Hücre tabakasının çoğunun dejenerasyonunun arka planına karşı popülasyondaki yalnızca tek tek hücreler veya hücre grupları, büyüme ve üreme yeteneğini koruyabilir. In vitro olarak sonsuz üreme gücünü bulan bu hücreler, nakledilen hücre kültürleri.

Herhangi bir birincil kültürle karşılaştırıldığında, nakledilebilir hücre dizilerinin ana avantajı, vücut dışında sınırsız üreme potansiyeli ve onları bakteri ve tek hücreli protozoaya yaklaştıran göreli özerkliktir.

süspansiyon kültürleri- sıvı bir ortamda süspansiyon içinde büyütülen tek tek hücreler veya hücre grupları. Bunlar, kimyasallara kolayca maruz kalan nispeten homojen bir hücre popülasyonudur.

Süspansiyon kültürleri, ikincil metabolizma yolları, enzim indüksiyonu ve gen ekspresyonu, yabancı bileşiklerin bozunması, sitolojik çalışmalar vb. incelemek için model sistemler olarak yaygın olarak kullanılmaktadır.

"İyi" bir çizginin işareti, hücrelerin metabolizmayı yeniden düzenleme yeteneği ve belirli yetiştirme koşulları altında yüksek üreme oranıdır. Böyle bir çizginin morfolojik özellikleri:

yüksek derecede ayrışma (grup başına 5-10 hücre);

hücrelerin morfolojik tekdüzeliği (küçük boyut, küresel veya oval şekil, yoğun sitoplazma);


Tracheid benzeri öğelerin yokluğu.

diploid hücre türleri. Bunlar, orijinal diploid kromozom setinin başarısızlığını korurken, in vitro olarak 100'e kadar bölünme geçirebilen aynı tipteki hücrelerdir (Hayflick, 1965). İnsan embriyolarından elde edilen diploid fibroblast suşları, deneysel çalışmaların yanı sıra tanısal viroloji ve aşı üretiminde yaygın olarak kullanılmaktadır. Viral genomun bazı özelliklerinin yalnızca normal bir farklılaşma seviyesini koruyan hücrelerde gerçekleştiği akılda tutulmalıdır.

130. Bakteriyofajlar. Morfoloji ve kimyasal bileşim

Bakteriyofajlar (fajlar) (diğer Yunanca φᾰγω - “yiyip yutarım”) bakteri hücrelerini seçici olarak enfekte eden virüslerdir. Çoğu zaman, bakteriyofajlar bakterilerin içinde çoğalır ve parçalanmalarına neden olur. Kural olarak, bir bakteriyofaj, bir protein kabuğundan ve tek sarmallı veya çift sarmallı bir nükleik asidin (DNA veya daha az yaygın olarak RNA) genetik materyalinden oluşur. Parçacık boyutu yaklaşık 20 ila 200 nm'dir.

Farklı bakteriyofajların parçacıklarının - viryonların - yapısı farklıdır. Ökaryotik virüslerin aksine, bakteriyofajlar genellikle bakteri hücresinin yüzeyine özel bir bağlanma organına veya değişen derecelerde karmaşıklıkla düzenlenmiş bir kuyruk işlemine sahiptir, ancak bazı fajların bir kuyruk işlemi yoktur. Kapsid, fajın genetik materyalini, onun genomunu içerir. Farklı fajların genetik materyali, farklı nükleik asitlerle temsil edilebilir. Bazı fajlar, genetik materyalleri olarak DNA içerir, diğerleri ise RNA içerir. Çoğu fajın genomu çift sarmallı DNA iken, bazı nispeten nadir fajların genomu tek sarmallı DNA'dır. Bazı fajların DNA moleküllerinin uçlarında "yapışkan alanlar" (tek sarmallı tamamlayıcı nükleotid dizileri) vardır, diğer fajlarda ise yapışkan alanlar yoktur. Bazı fajların DNA moleküllerinde benzersiz gen dizileri bulunurken, diğer fajların gen permütasyonları vardır. Bazı fajlarda DNA lineer, bazılarında ise halka şeklinde kapalıdır. Bazı fajlar, DNA molekülünün uçlarında birkaç genin terminal tekrarlarına sahipken, diğer fajlarda bu terminal fazlalığı, nispeten kısa tekrarların varlığı ile sağlanır. Son olarak, bazı fajlarda genom, bir dizi birkaç nükleik asit fragmanıyla temsil edilir.

Evrimsel bir bakış açısından, bu tür farklı genetik materyal türlerini kullanan bakteriyofajlar, ökaryotik organizmaların diğer temsilcilerinden çok daha fazla farklılık gösterir. Aynı zamanda, genetik bilgi taşıyıcılarının - nükleik asitlerin - yapısındaki ve özelliklerindeki bu tür temel farklılıklara rağmen, farklı bakteriyofajlar, başta hassas bakterilerin enfeksiyonundan sonra hücresel metabolizmaya müdahalelerinin doğasında olmak üzere birçok açıdan ortaklık göstermektedir.

Hücrelerin üretken bir enfeksiyonuna neden olabilen bakteriyofajlar, yani. canlı yavrularla sonuçlanan bir enfeksiyon, kusurlu olmayan olarak tanımlanır. Tüm kusurlu olmayan fajların iki durumu vardır: hücre dışı veya serbest fajın durumu (bazen olgun faj olarak da adlandırılır) ve vejetatif fajın durumu. Bazı sözde ılıman fajlar için, bir profaj durumu da mümkündür.

Hücre dışı faj, enfeksiyonlar arasında faj genomunun korunmasını ve bir sonraki hassas hücreye girmesini sağlayan bu tip fajın yapısına sahip parçacıklardır. Hücre dışı faj biyokimyasal olarak atıl iken, fajın aktif (“canlı”) durumu olan vejetatif faj, hassas bakterilerin enfeksiyonundan sonra veya bir profajın indüklenmesinden sonra meydana gelir.

Bazen hassas hücrelerin kusurlu olmayan bir fajla enfeksiyonu, canlı soy oluşumu ile sonuçlanmaz. Bu iki durumda olabilir: abortif bir enfeksiyon sırasında veya ılıman bir faj ile enfeksiyon sırasında hücrenin lizojenik durumundan dolayı.

Enfeksiyonun abortif doğasının nedeni, enfeksiyon sırasında belirli hücre sistemlerinin aktif müdahalesi, örneğin bakteriye verilen faj genomunun yok edilmesi veya hücrede bakteri için gerekli bazı ürünlerin yokluğu olabilir. fajın gelişimi vb.

Fajlar genellikle üç tipte sınıflandırılır. Tip, üretken bir faj enfeksiyonunun, enfekte olmuş hücrenin kaderi üzerindeki etkisinin doğası ile belirlenir.

Birinci tip gerçekten öldürücü fajlardır. Bir hücrenin virülent bir fajla enfeksiyonu, kaçınılmaz olarak, enfekte olmuş hücrenin ölümüne, yok olmasına ve soy fajının salınmasına yol açar (abortif enfeksiyon vakaları hariç). Bu tür fajlara, onları öldürücü ılıman faj mutantlarından ayırt etmek için gerçekten öldürücü denir.

İkinci tip- ılıman fajlar. Ilıman bir fajlı bir hücrenin üretken bir enfeksiyonu sırasında, gelişiminin temelde farklı iki yolu mümkündür: litik genel olarak (sonucunda) virülent fajların litik döngüsüne benzer ve lizojenik, ılımlı bir fajın genomu özel bir duruma geçtiğinde - bir profaj. Profaj taşıyan bir hücreye lizojenik veya basitçe lizojen denir (çünkü belirli koşullar altında faj litik gelişimine maruz kalabilir). Litik gelişimin başlangıcında bir indükleyici faktörün uygulanmasına profaj durumunda yanıt veren ılıman fajlara indüklenebilir ve bu şekilde reaksiyona girmeyen fajlara indüklenemez denir. Virülent mutantlar ılıman fajlarda ortaya çıkabilir. Virülans mutasyonları, operatör bölgelerindeki nükleotit dizisinde, baskılayıcı için afinite kaybına yansıyan böyle bir değişikliğe yol açar.

Üçüncü tip fajlar, üretken enfeksiyonu bakterilerin ölümüne yol açmayan fajlardır. Bu fajlar, enfekte bakteriyi fiziksel yıkıma neden olmadan terk edebilir. Böyle bir fajla enfekte olmuş bir hücre, sürekli (kalıcı) üretken enfeksiyon durumundadır. Fajın gelişimi, bakteri bölünme hızının bir miktar yavaşlamasına neden olur.

Bakteriyofajlar kimyasal yapı, nükleik asit türü, morfoloji ve bakterilerle etkileşim açısından farklılık gösterir. Bakteriyel virüsler, mikrobiyal hücrelerden yüzlerce ve binlerce kez daha küçüktür.

Tipik bir faj parçacığı (virion) bir baş ve bir kuyruktan oluşur. Kuyruğun uzunluğu genellikle başın çapının 2-4 katıdır. Kafa, bir protein veya lipoprotein kabuğu ile çevrili, aktif olmayan bir durumda transkriptaz enzimi ile tek sarmallı veya çift sarmallı RNA veya DNA - genomu hücrenin dışında koruyan bir kapsid içerir.

Nükleik asit ve kapsid birlikte nükleokapsidi oluşturur. Bakteriyofajlar, bir veya iki spesifik proteinin çoklu kopyalarından oluşan bir ikosahedral kapside sahip olabilir. Genellikle köşeler, proteinin pentamerlerinden yapılır ve her bir tarafın desteği, aynı veya benzer bir proteinin heksamerlerinden yapılır. Ayrıca fajlar küresel, limon şeklinde veya pleomorfik olabilir. Kuyruk bir protein tüpüdür - başın protein kabuğunun bir devamı, kuyruğun tabanında genetik materyalin enjeksiyonu için enerji üreten bir ATPaz vardır. Kısa süreçli, süreçsiz ve ipliksi bakteriyofajlar da vardır.

Fajların ana bileşenleri proteinler ve nükleik asitlerdir. Diğer virüsler gibi fajların da yalnızca bir tür nükleik asit, deoksiribonükleik asit (DNA) veya ribonükleik asit (RNA) içerdiğine dikkat etmek önemlidir. Bu özelliği ile virüsler, hücrelerinde her iki tip nükleik asit içeren mikroorganizmalardan farklıdır.

Nükleik asit kafada bulunur. Faj kafasının içinde az miktarda protein de (yaklaşık %3) bulundu.

Bu nedenle, kimyasal bileşime göre fajlar nükleoproteinlerdir. Fajlar, nükleik asitlerinin tipine göre DNA ve RNA olarak ikiye ayrılırlar. Farklı fajlardaki protein ve nükleik asit miktarı farklıdır. Bazı fajlarda içerikleri hemen hemen aynıdır ve bu bileşenlerin her biri yaklaşık %50'dir. Diğer fajlarda, bu ana bileşenler arasındaki oran farklı olabilir.

Bu ana bileşenlere ek olarak, fajlar az miktarda karbonhidrat ve bazı ağırlıklı olarak nötr yağlar içerir.

Şekil 1: Bir faj parçacığının yapısının diyagramı.

İkinci morfolojik türün bilinen tüm fajları RNA'dır. Üçüncü morfolojik tipteki fajlar arasında hem RNA hem de DNA formları bulunur. Diğer morfolojik tiplerin fajları DNA tipidir.

131. İnterferon. Ne olduğunu?

müdahale hakkında n(Latince'den - karşılıklı olarak, kendi aralarında ve ferio - vurur, vururum), memelilerin ve kuşların vücudundaki hücreler tarafından ve ayrıca hücre kültürleri tarafından virüslerle enfeksiyona tepki olarak üretilen koruyucu bir protein; hücrede virüslerin üremesini (çoğalmasını) engeller. I. 1957 yılında İngiliz bilim adamları A. Isaacs ve J. Lindenman tarafından enfekte tavukların hücrelerinde keşfedilmiştir; daha sonra bakterilerin, riketsiyanın, toksinlerin, nükleik asitlerin, sentetik polinükleotitlerin de I oluşumuna neden olduğu ortaya çıktı. I. tek bir madde değil, geniş bir pH bölgesinde stabil olan, nükleazlara dirençli ve proteolitik enzimler tarafından parçalanan düşük moleküler ağırlıklı proteinler (molekül ağırlığı 25.000–110.000) grubudur. I.'nin hücrelerinde oluşum, içlerinde bir virüsün gelişimi ile ilişkilidir, yani hücrenin yabancı bir nükleik asidin penetrasyonuna reaksiyonudur. Virüsün bir hücresinden ve normal hücrelerde kaybolduktan sonra bulunmaz. Etki mekanizmasına göre, I. temel olarak antikorlardan farklıdır: viral enfeksiyonlara özgü değildir (farklı virüslere karşı hareket eder), virüsün enfektivitesini nötralize etmez, ancak vücutta üremesini engeller, sentezi baskılar. viral nükleik asitler. İçlerinde viral bir enfeksiyon geliştikten sonra hücrelere girdiğinde, I. etkili değildir. Ayrıca And., kural olarak, onu oluşturan hücrelere özgüdür; örneğin tavuk hücrelerinin I.'si sadece bu hücrelerde aktiftir, ancak virüsün tavşan veya insan hücrelerinde üremesini baskılamaz. I.'nin kendisinin virüsler üzerinde değil, etkisi altında üretilen başka bir protein üzerinde hareket ettiğine inanılmaktadır. Viral hastalıkların (herpetik göz enfeksiyonu, grip, sitomegali) önlenmesi ve tedavisi için I. testinde cesaret verici sonuçlar elde edilmiştir. Bununla birlikte, I.'nin yaygın klinik kullanımı, ilacı elde etmenin zorluğu, vücuda tekrarlanan uygulama ihtiyacı ve türe özgülüğü ile sınırlıdır.

132. Ayrık yol. Ne olduğunu?

1.Üretken bir viral enfeksiyon 3 dönemde ortaya çıkar:

· başlangıç ​​dönemi virüsün hücre üzerinde adsorpsiyonu, hücreye girmesi, parçalanması (deproteinizasyon) veya virüsün "soyulması" aşamalarını içerir. Viral nükleik asit, uygun hücre yapılarına verildi ve lizozomal hücre enzimlerinin etkisi altında koruyucu protein kılıflarından salındı. Sonuç olarak, benzersiz bir biyolojik yapı oluşur: enfekte olmuş bir hücre 2 genom (kendi ve viral) ve 1 sentetik aparat (hücresel) içerir;

ondan sonra başlar ikinci grup dahil olmak üzere virüs üreme süreçleri ortalama ve son dönemler, bu sırada hücresel baskının ve viral genomun ifadesinin meydana geldiği. Hücresel genomun baskılanması, herhangi bir hücrede sentezlenen histonlar gibi düşük moleküler ağırlıklı düzenleyici proteinler tarafından sağlanır. Viral bir enfeksiyon ile bu süreç güçlendirilir, şimdi hücre, genetik aparatın viral genom tarafından temsil edildiği bir yapıdır ve sentetik aparat, hücrenin sentetik sistemleri tarafından temsil edilir.

2. Hücredeki olayların daha sonraki seyri yönlendirilirviral nükleik asit replikasyonu için(yeni viryonlar için genetik materyalin sentezi) ve içerdiği genetik bilginin uygulanması(yeni virionlar için protein bileşenlerinin sentezi). DNA içeren virüslerde, hem prokaryotik hem de ökaryotik hücrelerde viral DNA replikasyonu, hücresel DNA'ya bağımlı DNA polimerazın katılımıyla gerçekleşir. Bu durumda, ilk önce tek sarmallı DNA içeren virüsler oluşur. tamamlayıcı iplik - kızı DNA molekülleri için bir şablon görevi gören sözde replikatif form.

3. DNA'da bulunan virüsün genetik bilgisinin uygulanması şu şekilde gerçekleşir: DNA'ya bağlı RNA polimerazın katılımıyla, virüse özgü proteinlerin sentezlendiği hücrenin ribozomlarına giren mRNA'lar sentezlenir. Genomu konak hücrenin sitoplazmasında kopyalanan çift sarmallı DNA içeren virüslerde, bu kendi genomik proteinidir. Genomları hücre çekirdeğinde kopyalanan virüsler, orada bulunan hücresel DNA'ya bağımlı RNA polimerazı kullanır.

saat RNA virüsleri süreçler çoğaltma onların genomu, transkripsiyonu ve genetik bilginin translasyonu başka yollarla gerçekleştirilir. Hem eksi hem de artı iplikli viral RNA'nın replikasyonu, sentezi, tüm RNA içeren virüslerin sahip olduğu bir genomik protein olan RNA'ya bağımlı RNA polimeraz tarafından sağlanan RNA'nın replikatif formu (orijinalinin tamamlayıcısı) aracılığıyla gerçekleştirilir. . Eksi iplikli virüslerin (artı iplikli) RNA'nın replikatif formu, yalnızca kızı viral RNA moleküllerinin (eksi iplikler) sentezi için bir şablon görevi görmekle kalmaz, aynı zamanda mRNA'nın işlevlerini de yerine getirir, yani. ribozomlara gider ve viral proteinlerin sentezi (yayın yapmak).

saat artı filament RNA içeren virüsler, sentezi, viral RNA'ya bağlı RNA polimerazlarının katılımıyla replikatif form (negatif iplik) aracılığıyla gerçekleştirilen kopyalarının çeviri işlevini gerçekleştirir.

Bazı RNA virüsleri (reovirüsler) tamamen benzersiz bir transkripsiyon mekanizmasına sahiptir. Spesifik bir viral enzim tarafından sağlanır - ters transkriptaz (ters transkriptaz) ve ters transkripsiyon olarak adlandırılır. Özü, ilk başta, tek bir DNA dizisi olan ters transkripsiyonun katılımıyla viral RNA matrisi üzerinde bir transkript oluşturulması gerçeğinde yatmaktadır. Üzerinde hücresel DNA'ya bağlı DNA polimeraz yardımıyla ikinci iplik sentezlenir ve çift iplikli bir DNA transkripti oluşturulur. Ondan, olağan şekilde, i-RNA'nın oluşumu yoluyla, viral genomun bilgisi gerçekleştirilir.

Tanımlanan replikasyon, transkripsiyon ve translasyon süreçlerinin sonucu, oluşumdur. kızı moleküller viral nükleik asit ve viral proteinler virüs genomunda kodlanmıştır.

ondan sonra gelir üçüncü, son dönem virüs ve hücre arasındaki etkileşim. Yeni virionlar, hücrenin sitoplazmik retikulumunun zarları üzerindeki yapısal bileşenlerden (nükleik asitler ve proteinler) toplanır. Genomu baskılanmış (bastırılmış) bir hücre genellikle ölür. yeni oluşan viryonlar pasif olarak(hücre ölümü nedeniyle) veya aktif olarak(tomurcuklanarak) hücreyi terk eder ve kendini onun ortamında bulur.

Böylece, viral nükleik asitlerin ve proteinlerin sentezi ve yeni virionların birleştirilmesi belirli bir sırayla (zamanda ayrılmış) ve farklı hücre yapılarında (uzayda ayrılmış), virüslerin üreme yönteminin adlandırıldığı bağlantılı olarak meydana gelir. ayırıcı(ayrık). Abortif bir viral enfeksiyonda, virüsün hücre ile etkileşim süreci, hücresel genomun baskılanması gerçekleşmeden önce şu veya bu nedenle kesintiye uğrar. Açıktır ki bu durumda virüsün genetik bilgisi gerçekleşmeyecek ve virüsün üremesi gerçekleşmeyecek ve hücre fonksiyonlarını değiştirmeden korumaktadır.

Gizli bir viral enfeksiyon sırasında, her iki genom hücrede aynı anda işlev görürken, virüs kaynaklı dönüşümler sırasında viral genom hücresel olanın bir parçası olur, işlev görür ve onunla birlikte kalıtılır.

133. Deve çiçeği virüsü

Çiçek hastalığı (Variola)- deride ve mukoza zarlarında ateş ve papüler-püstüler döküntü ile karakterize bulaşıcı bulaşıcı bir hastalık.
Hastalığa neden olan ajanlar, çiçek hastalığı ailesinin (Poxviridae) çeşitli virüs türlerine ve türlerine aittir. Bağımsız türler virüslerdir: doğal inek yuspa, vaccinia (Orthopoxvirus cinsi), doğal koyun çiçeği, keçiler (Carpipoxvirus cinsi), domuzlar (Suipoxvirus cinsi), kuşlar (Avipoxvirus cinsi) ile üç ana tür (tavuk, güvercin ve çiçek hastalığının etken maddeleri) kanaryalar).
çiçek hastalığı patojenleri farklı hayvan türleri morfolojik olarak benzerdir. Bunlar, nispeten büyük boyutlar (170 - 350 nm), epitelyotropi ve hücrelerde (Paschen, Guarnieli, Bollinger gövdeleri) temel yuvarlak kapanımlar oluşturma yeteneği ile karakterize edilen, Moro-zov'a göre boyamadan sonra ışık mikroskobu altında görülebilen DNA içeren virüslerdir. Bir filogenetik olmasına rağmen, farklı hayvan türlerinde çiçek hastalığına neden olan ajanlar arasında güçlü bir ilişki olmasına rağmen, patojenite spektrumu aynı değildir ve her durumda immünojenik ilişkiler korunmaz. Koyun, keçi, domuz ve kuşların variola virüsleri sadece ilgili türler için patojeniktir ve doğal koşullar altında her biri bağımsız (orijinal) bir çiçek hastalığına neden olur. Variola sığır çiçeği ve aşı virüsleri, sığır, manda, lo-tekneler, eşekler, katırlar, develer, tavşanlar, maymunlar ve insanlar dahil olmak üzere geniş bir patojenite spektrumuna sahiptir.

Deve çiçeği VARIOLA CAMELINA cilt ve mukoza zarlarında karakteristik bir nodüler-püstüler çiçek hastalığı döküntüsü oluşumu ile ortaya çıkan bulaşıcı bir hastalık. Çiçek hastalığı Variola adı, çarpık (pockmarked) anlamına gelen Latince Varus kelimesinden gelir.

Hastalığın epizootolojisi. Her yaştan deve çiçek hastalığına karşı hassastır, ancak genç hayvanlar daha sık ve daha ağır hastadır. Çiçek hastalığı sorunu olan sabit alanlarda, yetişkin develerin neredeyse tamamı genç yaşta çiçek hastalığına yakalanması nedeniyle nadiren hastalanır. Hamile develerde çiçek hastalığı düşüklere neden olabilir.

Diğer türlerin hayvanları, doğal koşullarda orijinal deve çiçeği virüsüne duyarlı değildir. İnekler ve develere ek olarak, mandalar, atlar, eşekler, domuzlar, tavşanlar ve çiçek hastalığına karşı bağışıklığı olmayan kişiler sığır çiçeği virüsü ve aşılara karşı hassastır. Laboratuvar hayvanlarından kobaylar, virüs korneaya uygulandıktan sonra sığır çiçeği ve aşı virüslerine karşı hassastır (FA Petunii, 1958).

Çiçek hastalığı virüslerinin ana kaynakları, çiçek hastalığı olan hayvanlar ve aşısı olan ve çiçek hastalığı buzağı döküntülerinde aşı virüsü ile aşılamadan sonra aşırı duyarlılıktan kurtulan kişilerdir. Hasta hayvanlar ve insanlar virüsü dış ortamda, esas olarak virüsü içeren deri ve mukoza zarının reddedilen epiteli ile yayarlar. Virüs, abortlu fetüslerle birlikte dış ortama da salınır (K. N. Buchnev ve R. G. Sadykov, 1967). Çiçek hastalığına neden olan ajan, kuşlar da dahil olmak üzere çiçeğe karşı bağışıklığı olan evcil ve vahşi hayvanlar ve ayrıca aşı ile aşılanmış çocukların çiçek hastalığına karşı bağışıklığı olan kişiler tarafından mekanik olarak taşınabilir.

Doğal koşullar altında, sağlıklı develer, virüs bulaşmış bir alanda hasta hayvanlarla enfekte su, yem, tesisler ve bakım malzemeleri yoluyla temas yoluyla ve ayrıca hasta hayvanlar virüs içeren çıkışları püskürttüğünde aerojenik olarak enfekte olurlar. Daha sık olarak, virüs vücuda deri ve mukoza zarlarından girdiğinde, özellikle de bütünlükleri bozulduğunda veya A vitamini eksikliği meydana geldiğinde develer enfekte olur.

Epizootik şeklinde, develerde çiçek hastalığı yaklaşık 20-25 yılda bir görülür. Şu anda, genç hayvanlar özellikle ciddi şekilde hasta. Develer arasında çiçek hastalığı olan durağan alanlarda epizootikler arasındaki dönemde çiçek hastalığı, çoğunlukla 2-4 yaş arası hayvanlarda olmak üzere 3-6 yılda bir az ya da çok düzenli olarak ortaya çıkan enzootik ve sporadik vakalar şeklinde ortaya çıkar. Bu gibi durumlarda, hayvanlar özellikle sıcak mevsimde nispeten daha kolay hastalanırlar. Soğuk havalarda çiçek hastalığı daha şiddetli, daha uzun sürer ve özellikle genç hayvanlarda komplikasyonları beraberinde getirir. Küçük çiftliklerde, hemen hemen tüm hassas develer 2-4 hafta içinde hastalanır. Develer arasında çiçek hastalığı salgınlarının hem orijinal deve çiçeği virüsünden hem de birbirlerine karşı bağışıklık oluşturmayan inek çiçeği virüsünden kaynaklanabileceği unutulmamalıdır. Bu nedenle, farklı çiçek hastalığı virüslerinin neden olduğu salgınlar birbirini takip edebilir veya aynı anda ortaya çıkabilir.

patogenez patojenin belirgin epitelyotropizmi ile belirlenir. Bir hayvanın vücudunda, virüs çoğalır ve kana (viremi), lenf düğümlerine, iç organlara, cildin epitel tabakasına ve mukoza zarlarına nüfuz eder ve bunlarda spesifik ekzantemlerin ve enanthemlerin oluşumuna neden olur, şiddeti organizmanın reaktivitesine ve virüsün virülansına bağlıdır, vücuda nüfuz etmesini ve epitel tabakasının durumunu belirler. Poklar, aşamalı olarak sırayla gelişir: nodüllü roseoladan kabuklu ve skar oluşumuna sahip bir püstüle kadar.

Belirtiler Kuluçka süresi develerin yaşına, virüsün özelliklerine ve vücuda nasıl girdiğine bağlı olarak 3 ila 15 gün arasında değişmektedir: genç hayvanlarda 4-7, yetişkinlerde 6-15 gün. Bağışıklığı olmayan develerden gelen develer doğumdan 2-5 gün sonra hastalanabilir. En kısa kuluçka süresi (2-3 gün) develerde aşı virüsü ile enfekte olduktan sonra ortaya çıkar.

Prodromal dönemde, hasta develerde vücut ısısı 40-41 ° C'ye yükselir, uyuşukluk ve beslenmeyi reddetme görülür, ağız ve burnun konjonktiva ve mukoza zarları hiperemiktir. Ancak bu belirtiler, özellikle hastalığın çiftlikte başladığı ilk dönemlerde sıklıkla görülmektedir.

Develerde çiçek hastalığının seyri, yaşlarına bağlı olarak da farklıdır: genç hayvanlarda, özellikle yenidoğanda, daha sık akuttur (9 güne kadar); yetişkinlerde - subakut ve kronik, bazen gizli, daha sık hamile develerde. Develerdeki çiçek hastalığının en karakteristik formu, hastalığın subakut seyri ile deri hastalığıdır (Şekil 1).

Hastalığın subakut seyrinde ağız ve burundan berrak, daha sonra bulanık, grimsi-kirli mukus salgılanır. Hayvanlar başlarını sallar, koklar ve horlar, virüsten etkilenen epiteli virüs içeren mukusla birlikte dışarı atar. Kısa süre sonra dudaklar, burun delikleri ve göz kapakları bölgesinde şişlik oluşur, bazen intermaksiller bölgeye, boyuna ve hatta gerdan bölgesine yayılır. Submandibular ve alt servikal lenf düğümleri büyümüştür. Hayvanlar iştahı azalttı, normalden daha sık ve daha uzun süre yatarlar ve büyük zorluklarla kalkarlar. Bu zamana kadar, dudak, burun ve göz kapaklarının derisinde, ağız ve burun mukozasında kırmızımsı gri lekeler belirir; altlarında, artan, gri papüllere dönüşen ve daha sonra bir bezelye ve bir fasulye büyüklüğünde püstüllere dönüşen yoğun nodüller oluşur ve kenarları boyunca silindir benzeri bir kalınlaşma vardır.

Püstüller yumuşar, patlar ve açık gri renkli yapışkan bir sıvı onlardan salınır. Bu zamana kadar başın şişmesi kaybolur. 3-5 gün sonra açılan püstüllerin üzeri kabuklarla kaplanır. Kaba yemle yaralanmazlarsa, hastalık orada biter. Kaldırılan veya düşen birincil kabuklar, ters krater benzeri bir püstül formuna sahiptir. Çiziklerin yerinde yara izleri kalır. Derideki bu lezyonların tamamı 8-15 gün içerisinde oluşur.

Hasta develerdeki çukurlar genellikle ilk önce başlarında görülür. Bir ila dört yaşlarında, develer kural olarak kolayca hastalanır. Lezyonlar saçlı deride, özellikle dudaklarda ve burunda lokalizedir. Develerde meme sıklıkla etkilenir. Baş bölgesinde primer püstüllerin açılmasından birkaç gün sonra, ciltte ve vücudun diğer düşük tüylü bölgelerinde (göğüs kemiği, koltuk altı, perine ve skrotum bölgelerinde, anüs çevresinde, iç kısımda) çiçek hastalığı lezyonları oluşur. önkol ve uyluk) ve develerde vajinanın mukoza astarında da bulunur. Bu zamanda, develerin vücut ısısı genellikle tekrar yükselir, bazen 41.5 ° 'ye kadar yükselir ve hamileliğin son ayında develer, kural olarak yakında ölen erken ve az gelişmiş develer getirir.

Bazı hayvanlarda göz korneası (diken) bulanıklaşır, bu da bir gözde 5-10 gün, develerde ise daha sık olarak her iki gözde geçici körlüğe neden olur. Doğumdan kısa bir süre sonra hastalanan deve buzağılarında ishal olur. Bu durumda hastalıktan 3-9 gün sonra ölürler.

Nispeten iyi huylu bir subakut çiçek hastalığı seyri ile ve genellikle aşı virüsü ile enfeksiyondan sonra hayvanlar 17-22 gün sonra iyileşir.

Yetişkin develerde, ağız mukozasında açılan püstüller, özellikle kaba yemle yaralandığında sıklıkla birleşir ve kanar. Bu da beslenmeyi zorlaştırıyor, hayvanlar kilo veriyor, iyileşme süreci 30-40 güne kadar gecikiyor ve hastalık kronik bir seyir izliyor.

Çiçek hastalığı sürecinin genelleşmesi ile bazen piyemi ve komplikasyonlar (pnömoni, gastroenterit, nekrobakteriyoz vb.) gelişir.Bu gibi durumlarda hastalık 45 gün veya daha uzun süre devam eder. Atoni ve kabızlığın eşlik ettiği mide ve bağırsakların işlev bozuklukları vakaları vardır. Bazı hasta hayvanlarda ekstremitelerin şişmesi not edilir.

Gizli bir çiçek hastalığı seyri olan develerde (hastalığın karakteristik klinik belirtileri olmadan, sadece ateş varlığında), kürtajlar yavrulamadan 1-2 ay önce (% 17-20'ye kadar) gerçekleşir.

Yetişkin develerde hastalığın prognozu olumludur Akut seyirli develerde, özellikle 15-20 günlük yaşta ve çiçek hastalığına karşı bağışıklığı olmayan develerde sakıncalıdır. Develer ağır hastadır ve %30-90 kadarı ölür. 1-3 yaşlarındaki develer çiçek hastalığına daha kolay hastalanırlar ve daha büyük yaşta, ciddi bir şekilde hasta olmalarına rağmen, belirgin bir genelleştirilmiş sürecin belirtileri ile ölüm oranı düşüktür (% 4-7).

Patolojik değişiklikler, yukarıda açıklanan gözlerin cilt, mukoza zarı ve kornea lezyonları ile karakterizedir. Epikardiyum ve bağırsak mukozasında noktasal kanamalar not edilir. Göğüs boşluğunda, kostal plevra üzerinde, darı tanesinden gri ve gri-kırmızı renkli mercimeklere kadar değişen, kıvrılmış içerikli küçük kanamalar ve nodüller de bazen görülebilir. Özofagusun mukoza zarı, sırt benzeri yükselmelerle çevrili darı büyüklüğünde nodüllerle kaplıdır. Yara izinin mukoza zarında (bazen mesane) benzer kanamalar ve pürüzlü kenarlı nodüllerin yanı sıra batık pembemsi bir merkeze sahip küçük ülserler bulunur. Papüllerde, geleneksel bir ışık mikroskobu ile daldırma altında bir yayma preparasyonunun mikroskopisi sırasında tanı değeri olan Paschen cisimleri gibi temel cisimler tespit edilebilir.

Tanı, klinik ve epizootik verilerin (insanlardan deve enfeksiyonu olasılığı dikkate alınarak), patolojik değişikliklerin, pozitif mikroskopi sonuçlarına (Morozov gümüş yöntemi kullanılarak taze papüllerden smear işlenirken) veya elektronoskopiye dayanır. çiçek hastalığı hayvanlarına duyarlı olanlar üzerinde biyo-tahliller. Çiçek hastalığı olan develerin abortlu fetüslerinin organlarından virüsü izole etmek mümkündür. Çiçek hastalığı teşhisi konulurken, agar jelde difüzyon çökeltme reaksiyonunun ve aktif spesifik serum veya globulinlerin varlığında nötralizasyon reaksiyonunun kullanılması da tavsiye edilir.

Şüpheli durumlarda (klinik ve epizootik özellikler dikkate alınarak) ayırıcı tanı yapılır. Çiçek hastalığı, patolojik materyalden yaymaların mikroskopisi ve buna duyarlı beyaz farelerin enfeksiyonu ile nekrobakteriyozdan ayırt edilmelidir; şap hastalığından - arka ayak derisinin plantar yüzeyinde patolojik materyal süspansiyonu ile kobay enfeksiyonu; mantar enfeksiyonlarından ve uyuzdan - cildin etkilenen bölgelerinden alınan incelenen kazımalarda ilgili patojenleri bularak; abortuslar, düşükler ve prematüre taylar sırasında brusellozdan - RA ve RSK develerinin kan serumunu inceleyerek ve fetüslerin bakteriyolojik muayenesini, besleyici ortam ve mikroskopi üzerinde bir mikrobiyal kültür izolasyonu ile (gerekirse, kobaylar üzerinde bir biyo-tahlil kullanın ve ardından kan ve serumun bakteriyolojik ve serolojik çalışmaları).

Develerde çiçek hastalığı teşhisi konulurken, dudaklarda ve burunda cilt lezyonları ile ortaya çıkan bulaşıcı olmayan, ancak bazen yaygın bir hastalığı dışlamak da gereklidir - yantak-bash (Türkm.), Jantak-bas (Kazak). deve dikeni (yantak, jantak, Alhagi) adı verilen çalıları yerken onları yaralar. Bu hastalık genellikle sonbaharda, özellikle bir yaşın altındaki genç develerde gözlenebilir. Yetişkin develer, deve dikeninden çok az etkilenir. Yantak-bash ile, oral mukozada çiçek hastalığından farklı olarak genellikle nodül veya papüler lezyon yoktur. Yantak-bash ile görünen grimsi kaplamanın çıkarılması nispeten kolaydır. Bununla birlikte, yantak-bash'in develerde çiçek hastalığı hastalığına katkıda bulunduğu ve çoğu zaman onunla aynı anda ilerlediği dikkate alınmalıdır.

Çiçek hastalığı virüsünü izole ederken, 1968 SSCB Sağlık Bakanlığı'nın talimatlarında belirtilen yöntemleri kullanarak türünü (orijinal, sığır çiçeği veya aşı) belirlemek gerekir. İnsanlarda sığır çiçeği önlenmesi hakkında, sonra elde edilen veriler çiçek hastalığı aşı virüsü ve izole patojenleri olan develerin enfeksiyonu (izole koşullarda).

Hasta develerin tedavisi esas olarak semptomatiktir. Etkilenen alanlar bir potasyum permanganat (1:3000) çözeltisi ile muamele edilir ve kuruduktan sonra, gliserin ile %10 iyot tentürü (1:2 veya 1:3) karışımı ile yağlanır. Çiçek hastalığını açtıktan sonra, 1:15-1:20 oranında iyot tentürü ilave edilen, güçlendirilmiş balık yağı üzerinde %5'lik bir synthomycin emülsiyonu ile muamele edilir; merhemler - çinko, ichthyol, penisilin vb. Petrol jölesi üzerinde %2 salisilik veya borik merhem ve %20-30 propolis merhem kullanabilirsiniz. Sıcak havalarda, %3 kreolin merhemi, katran ve heksakloran tozu belirtilir. Etkilenen alanlar, günde 2-3 kez emülsiyonlara ve merhemlere batırılmış çubuklarla yağlanır.

Ağız boşluğunun etkilenen mukoza zarı, günde 2-3 kez% 10'luk bir potasyum permanganat çözeltisi veya% 3'lük bir hidrojen peroksit çözeltisi veya adaçayı, papatya ve diğer dezenfektanlar ve büzücü maddeler ile yıkanır. Konjonktivit ile gözler% 0.1 çinko sülfat çözeltisi ile yıkanır.

İkincil bir mikrobiyal enfeksiyonun gelişmesini ve olası komplikasyonları önlemek için, kas içine penisilin ve streptomisin enjekte edilmesi önerilir. Genel zayıflık ve komplikasyonlar ile kalp ilaçları belirtilir.

Hastalığın şiddetli vakalarında belirli tedavi yollarından, çiçek hastalığı olan develerin serumunu veya kanını kullanabilirsiniz (1 kg hayvan ağırlığı başına 1-2 ml oranında deri altından). Enjeksiyon bölgeleri önceden dikkatlice kesilir ve iyot tentürü ile silinir.

Hasta ve nekahat dönemindeki develere genellikle temiz su, kepek veya arpa unu, yumuşak mavi otu veya ince yonca samanı veya arpa unu ile tatlandırılmış pamuk kabuğu verilir. Soğuk havalarda hasta hayvanlar, özellikle develer, temiz, kuru ve ılık bir odada tutulur veya battaniye ile örtülür.

Doğal olarak hasta olan çiçek hastalığı develerinde bağışıklık 20-25 yıla kadar yani neredeyse ömür boyu sürer. Bağışıklığın doğası, iyileşmiş hayvanların kan serumunda nötralize edici antikorların mevcudiyeti ve develerin homolog çiçek hastalığı virüsü ile yeniden enfeksiyona karşı direnci ile kanıtlandığı gibi, deri-hümoraldir. Çiçek hastalığı geçirmiş develerden doğan develer, özellikle ilk üç yıl yani ergenlik dönemine kadar devenin geçirdiği çiçek hastalığına duyarlı değildir. Epizootik dönemde rahim altında olan deve buzağıları, kural olarak, çiçek hastalığına yakalanmazlar veya nispeten kolay ve kısa bir süre için hastalanmazlar.

Önleme ve kontrol önlemleri, tüm veterinerlik, sıhhi ve karantina önlemlerinin sıkı bir şekilde gözetilmesi, hastalığın zamanında teşhisi ve virüs türünün belirlenmesi. Kişilerin aşılama sırasında ve aşılama sonrası dönemde, kendileri (veya çocukları) aşı çiçek hastalığına karşı klinik olarak belirgin bir reaksiyonu tamamen tamamlayana kadar develere bakmalarına izin verilmemelidir. Çiftliğe giren tüm develer, inekler ve atlar 30 gün boyunca tecrit hücresinde tutulmalıdır.

Develer, inekler ve atlar arasında çiçek hastalığı görüldüğünde, ilçe yönetim kurulunun özel kararı ile bu hastalığın bulunduğu alan, yerleşim veya ilçe, mera çiçek hastalığına uygun görülmez ve karantina, kısıtlayıcı ve sağlık önlemleri alınır.

Çiçek hastalığının ortaya çıkması, hastalığın daha fazla yayılmasını önlemek için uygun önlemlerin alınması için derhal yüksek veterinerlik kuruluşlarına, komşu çiftliklere ve ilçelere bildirilir.

Develerin inek çiçeği enfeksiyonunu önlemek için, dezavantajlı ve tehdit altındaki inek çiçeği hastalığında yaşları, cinsiyetleri ve fizyolojik durumları (hamilelik ve emziren develer) ne olursa olsun, klinik olarak sağlıklı tüm develeri aşılamak için kullanılan tıbbi bir preparat - çiçek hastalığı detritus kullanılması önerilir. çiftlikler. Bunu yapmak için, yün deve boynunun alt üçte birinden kesilir, alkol-eter veya% 0,5'lik bir karbolik asit çözeltisi ile muamele edilir, pamuk yünü ile kurulanır veya kurutulur, cilt kazınır ve kalın bir iğne ile uygulanır, bir neşter veya kazıyıcının ucu 2-3 sığ paralel çizik 2 uzunluğunda -4 cm 3-4 damla çözülmüş aşı taze kazınmış cilt yüzeyine uygulanır ve bir spatula ile hafifçe ovulur. Ampul ve ampul kutularının etiketlerinde belirtildiği gibi aşıyı çözün. Seyreltilmiş ve kullanılmamış aşı ve aşı ampulleri kaynatılarak dezenfekte edilerek imha edilir. Aşılar için kullanılan aletler %3 karbolik asit solüsyonu veya %1 formaldehit solüsyonu ile yıkanır ve kaynatılarak sterilize edilir.

Deve inek çiçeğine karşı bağışık değilse, aşılamadan sonraki 5-7. günde, skarlaşma bölgesinde papüller görünmelidir. Bunlar yoksa aşı tekrarlanır, ancak boynun karşı tarafında ve farklı bir serinin aşısı ile. Çiçek hastalığına karşı bağışıklığı olan ve kişisel hijyen kurallarına aşina olan kişilerin aşılı ve hasta develere bakmasına izin verilir. Genç hayvanlar, özellikle zayıf gruptan, bazen aşıya güçlü tepki verebilir ve belirgin çiçek hastalığı belirtileri ile hastalanabilir.

Hasta ve yüksek düzeyde tepki veren develer izole edilir ve tedavi edilir (yukarıya bakın). Çiçek hastalığı virüsü ile kontamine olmuş hayvancılık binalarının ve yerlerinin, %2-4'lük sıcak kostik soda ve kostik potas solüsyonları, %3'lük bir kükürt-karbolik karışım solüsyonu veya %2-3'lük sülfürik asit solüsyonları veya berraklaştırılmış solüsyonlarla dezenfekte edilmesi önerilir. çiçek hastalığı virüsünü 2-3 saat içinde etkisiz hale getiren %2-6 aktif klor içeren ağartıcı (O. Trabaev, 1970). Ayrıca %3-5 kloramin solüsyonları ve %2 formaldehit solüsyonu da kullanabilirsiniz. Gübre yakılmalı veya biyotermal olarak dezenfekte edilmelidir. Klinik çiçek hastalığı belirtileri gösteren develerin cesetleri yakılmalıdır. Hasta ve çiçek hastalığından şüphelenilen develerden elde edilen süt, irin safsızlıkları içermiyorsa ve başka herhangi bir nedenle kontrendike değilse, ancak 5 dakika kaynatıldıktan veya 85 ° -30 dakika pastörizasyondan sonra yenebilir. Çiçek hastalığı çiftlikleri için sorunlu dönemde öldürülen develerin yünü ve derisi, hayvansal kaynaklı hammaddelerin dezenfeksiyon talimatlarına göre işlenir.

Çiçek hastalığı için elverişsiz olan çiftliklerden ve yerleşim yerlerinden kısıtlamaların, tüm hayvanların ve çiçek hastalığı olan kişilerin iyileşmesinden ve kapsamlı bir son dezenfeksiyondan sonra en geç 20 gün içinde kaldırılması önerilir.

134. Virüslerin kimyasal bileşimi ve biyokimyasal özellikleri

1.1 Virionların yapısı ve kimyasal bileşimi.

En büyük virüsler (çiçek virüsleri) boyut olarak küçük bakterilere, en küçükleri (ensefalit, çocuk felci, ayak ve ağız hastalığına neden olan ajanlar) kan hemoglobin moleküllerine yönelik büyük protein moleküllerine yakındır. Başka bir deyişle, virüsler arasında devler ve cüceler vardır. Virüsleri ölçmek için nanometre (nm) adı verilen koşullu bir değer kullanılır. Bir nm, milimetrenin milyonda biridir. Farklı virüslerin boyutları 20 ila birkaç yüz 1 nm arasında değişir.

Basit virüsler proteinlerden ve nükleik asitlerden oluşur. Bir virüs parçacığının en önemli parçası olan nükleik asit, genetik bilginin taşıyıcısıdır. İnsanların, hayvanların, bitkilerin ve bakterilerin hücreleri her zaman iki tür nükleik asit içeriyorsa - deoksiribonükleik asit DNA ve ribonükleik RNA, farklı virüslerde sınıflandırmalarının temeli olan yalnızca bir DNA veya RNA türü bulunur. Virionun ikinci zorunlu bileşeni olan proteinler, farklı virüslerde farklılık gösterir ve bu, immünolojik reaksiyonlar kullanılarak tanınmalarını sağlar.

Yapıda daha karmaşık olan virüsler, proteinlere ve nükleik asitlere ek olarak karbonhidratlar ve lipitler içerir. Her virüs grubunun kendi proteinleri, yağları, karbonhidratları ve nükleik asitleri vardır. Bazı virüsler enzimler içerir. Virionların her bileşeninin belirli işlevleri vardır: protein kabuğu onları olumsuz etkilerden korur, nükleik asit kalıtsal ve bulaşıcı özelliklerden sorumludur ve virüslerin değişkenliğinde lider bir rol oynar ve enzimler üremelerinde rol oynar. Genellikle, nükleik asit viryonun merkezinde bulunur ve sanki içine giydirilmiş gibi bir protein kabuğu (kapsid) ile çevrilidir.

Kapsid, virüsün nükleik asidi (nükleokapsid) ile yerinde simetrik geometrik şekiller oluşturan, belirli bir şekilde düzenlenmiş benzer protein moleküllerinden (kapsomerler) oluşur. Nükleokapsidin kübik simetrisi durumunda, nükleik asit ipliği bir top şeklinde sarılır ve kapsomerler sıkıca onun etrafına sarılır. Çocuk felci, şap hastalığı vb. virüsleri bu şekildedir.

Nükleokapsidin sarmal (çubuk biçimli) simetrisi ile virüs ipliği bir spiral şeklinde bükülür, bobinlerinin her biri birbirine karanlık bir şekilde bitişik kapsomerlerle kaplıdır. Kapsomerlerin yapısı ve viryonların görünümü elektron mikroskobu kullanılarak gözlemlenebilir.

İnsanlarda ve hayvanlarda enfeksiyona neden olan virüslerin çoğu kübik simetri tipine sahiptir. Kapsid neredeyse her zaman on iki köşesi ve eşkenar üçgen yüzleri olan bir ikosahedral düzenli yirmi kenarlı altı yüzlü şeklindedir.

Birçok virüsün protein kapsidine ek olarak bir dış kabuğu vardır. Viral proteinlere ve glikoproteinlere ek olarak, konakçı hücrenin plazma zarından ödünç alınan lipidleri de içerir. İnfluenza virüsü, kübik simetri tipine sahip sarmal zarflı bir virion örneğidir.

Virüslerin modern sınıflandırması, nükleik asitlerinin tipine ve şekline, simetri tipine ve bir dış kabuğun varlığına veya yokluğuna dayanmaktadır.

Biyokimyasal özellikler - bkz. Manuel!!!

135. İn vitro fonksiyonel ve çoğalma aktivitesini koruyan organ parçaları

Hücre kültürü

özel bir besin ortamı ile doldurulmuş cam veya plastik bir yüzey üzerinde yapay koşullar altında tek tabaka halinde büyüyebilen herhangi bir hayvan dokusunun hücreleri. Hücrelerin kaynağı taze elde edilmiş hayvan dokusudur - birincil hücreler, laboratuvar hücre suşları - ry'ye nakledildi. hücreler. Embriyonik ve tümör hücreleri, yapay koşullar altında büyümek için en iyi yeteneğe sahiptir. İnsan ve maymun hücrelerinin diploid to-ra'sı sınırlı sayıda pasajlanır, bu nedenle bazen denir. hücre sürüsüne yarı nakledilebilir. Hücrelerin to-ry alma aşamaları: bir kaynağın ezilmesi; tripsin tedavisi; döküntüden salıverme; antibiyotiklerle bir besin ortamında süspanse edilen hücre sayısının standardizasyonu; hücrelerin duvarlara veya tabana yerleştiği ve çoğalmaya başladığı test tüplerine veya şişelere dökülmesi; tek tabakanın oluşumu üzerinde kontrol. To-ry hücreleri, virüsü çalışmadan izole etmek için kullanılır. materyal, viral süspansiyonun birikmesi için, St. in. Son zamanlarda bakteriyolojide kullanılmaya başlanmıştır.

136. Parasteziler. Ne olduğunu?

parestezi(Yunanca para-yakından, aisthesis-sensasyonun aksine), bazen disestezi olarak da adlandırılır, dış tahriş, uyuşukluk, karıncalanma, tüylerin diken diken olması (mirmeciasis, myrmecismus, formicatio), yanma, kaşıntı, ağrılı soğuk (yani n psikroestezi), hareketler, vb., amputelerde (pseudomelia paraesthetica) görünüşte korunmuş uzuvlardaki duyumlar. P.'nin nedenleri farklı olabilir. P., kan dolaşımındaki lokal değişikliklerin bir sonucu olarak, Renaud hastalığı ile, eritromelalji ile, akroparestezi ile, endarterit ile, spontan kangrenin ilk belirtisi olarak ortaya çıkabilir. Bazen sinir sistemine zarar vererek, travmatik nevrit ile (bkz. tipik. P. sulkus olecrani bölgesinde n. ulnaris'in bir çürüğü ile), toksik ve enfeksiyöz nevrit ile, radikülit ile, spinal pachymenenjit ile (sıkıştırma) kökler), akut ve hron ile. miyelit, özellikle omuriliğin sıkışması (omurilik tümörleri) ve tabes dorsalis ile. Tüm bu vakalardaki tanı değerleri, ağrı, anestezi ve hiperestezinin tanı değeri ile aynıdır: belirli alanlarda, bir veya başka bir periferik sinirin yolu boyunca veya bir veya daha fazla radiküler innervasyon alanında ortaya çıkabilirler. patolojinin yeri hakkında değerli göstergeler verir. . işlem. Öğeler, beyin hasarının belirtileri olarak da mümkündür. Bu nedenle, kortikal epilepsi ile nöbetler genellikle konvülsiyonların başladığı uzuvda lokalize olan P. ile başlar. Genellikle serebral arterioskleroz veya serebral sifilizde de gözlenirler ve bazen apoplektik inmenin habercisidirler. zihinsel P., yani. psikojenik, hipokondriyal kökenli P., özellikle organik gibi temel değil, karmaşık bir karaktere sahip olmaları - “kafa derisinin altında solucanların sürünmesi”, “karından bir top kaldırma” boyuna” (Oppenheim), vb. Teşhis değerleri elbette organik P'den tamamen farklıdır.

137. Virüs içeren malzemelerle çalışma kuralları ve güvenlik önlemleri

138. Bulaşıcı sığır rinotracheitis virüsü

bulaşıcı rinotracheitis(lat. - Rhinotracheitis infectiosa bovum; İngilizce - Bulaşıcı sığır rhinotracheites; IRT, kabarcıklı döküntü, bulaşıcı vulvovajinit, bulaşıcı rinit, "kırmızı burun", üst solunum yollarının bulaşıcı nezlesi), esas olarak nezle ile karakterize edilen akut bulaşıcı bir sığır hastalığıdır. solunum yolu nekrotik lezyonları, ateş, genel depresyon ve konjonktivitin yanı sıra püstüler vulvovajinit ve kürtaj.

IRT - Herpesvirus bovis 1'in etken maddesi, DNA içeren herpesvirüs ailesine aittir, viryonun çapı 120 ... 140 nm'dir. Bu virüsün 9 yapısal proteini izole edilmiş ve karakterize edilmiştir.

RTI virüsü, bir dizi hücre kültüründe kolaylıkla ekilir ve CPP'ye neden olur. Virüsün üremesine, mitotik hücre bölünmesinin baskılanması ve intranükleer inklüzyonların oluşumu eşlik eder. Ayrıca solunum ve üreme organlarının hücreleri için hemaglütinasyon özellikleri ve tropizmi vardır ve mukoza zarlarından merkezi sinir sistemine göç edebilir, gebeliğin ilk ve ikinci yarısının sonunda fetüse bulaşabilir.

-60 ... -70 "C'de, virüs 7 ... 9 ay hayatta kalır, 56 °C'de 20 dakika sonra, 37 °C'de - 4 ... 10 gün sonra, 22 °C'de - 50 gün sonra. 4'te "Virüsün aktivitesi biraz azalır. Dondurma ve çözme, virülansını ve immünojenik aktivitesini azaltır.

Formalin solüsyonları 1: 500, 24 saat sonra virüsü inaktive eder, 1: 4000 - 46 saat sonra, 1: 5000 - 96 saat sonra Asidik bir ortamda virüs aktivitesini hızla kaybeder, uzun süre kalır (9'a kadar) ay) pH 6.0 ... 9.0'da ve 4 °C sıcaklıkta. Kuru buz sıcaklığında 4 ... 12 ay ve sıvı nitrojende - 1 yıl saklanan boğa sperminde virüsün hayatta kaldığına dair bilgiler var. Boğa sperminde virüs inaktivasyonu olasılığı, %0.3 tripsin solüsyonu ile tedavi edildiğinde gösterildi.

Enfeksiyona neden olan ajanın kaynakları hasta hayvanlar ve gizli virüs taşıyıcılarıdır. Virülan bir suş ile enfeksiyondan sonra, tüm hayvanlar virüsün gizli taşıyıcıları haline gelir. Damızlık boğalar çok tehlikelidir çünkü hastalandıktan sonra 6 ay boyunca virüsü salgılarlar ve çiftleşme sırasında inekleri enfekte edebilirler. Virüs, burun salgıları, göz ve cinsel organlardan akıntı, süt, idrar, dışkı ve meni ile çevreye salınır. Antilopların Afrika ülkelerinde RTI virüsünün rezervuarı olduğuna inanılıyor. Ayrıca virüs, sığırlarda hastalığa neden olmada önemli bir rol oynayan kenelerde çoğalabilir.

Virüsün bulaşma faktörleri hava, yem, meni, araçlar, bakım ürünleri, kuşlar, böcekler ve ayrıca insanlardır (çiftlik işçileri). İletim yolları - temas, hava yoluyla, bulaşıcı, beslenme.

Duyarlı hayvanlar, cinsiyet ve yaştan bağımsız olarak sığırlardır. Hastalık en çok besi sığırlarında görülür. Deneyde koyunları, keçileri, domuzları ve geyikleri enfekte etmek mümkün oldu. Hayvanlar genellikle işlevsiz bir çiftliğe girdikten 10...15 gün sonra hastalanır.

RTI insidansı %30...100, mortalite - %1...15, hastalık diğer solunum yolu enfeksiyonları ile komplike ise daha yüksek olabilir.

Birincil odaklarda hastalık neredeyse tüm çiftlik hayvanlarını etkilerken, ölüm oranı %18'e ulaşıyor. IRT, genellikle endüstriyel tip çiftliklerde, farklı çiftliklerden getirilen hayvan gruplarını tamamlarken ortaya çıkar.

Solunum veya genital sistemin mukoza zarlarına girdiğinde virüs, çoğaldığı epitel hücrelerini istila ederek ölümlerine ve pul pul dökülmelerine neden olur. Daha sonra solunum yolunun mukoza zarının yüzeyinde ülserler oluşur ve genital sistemde nodüller ve püstüller oluşur. Birincil lezyonlardan virüs bronşlara hava ile girer ve üst solunum yolundan konjonktivaya girebilir, burada etkilenen hücrelerde vücudun enflamatuar bir tepkisini tetikleyen dejeneratif değişikliklere neden olur. Daha sonra virüs lökositler tarafından emilir ve lenf düğümlerine yayılır ve oradan kana girer. Viremiye hayvanın genel depresyonu, ateş eşlik eder. Buzağılarda virüs kan yoluyla parankimal organlara taşınabilir ve burada çoğalarak dejeneratif değişikliklere neden olabilir. Virüs kan-beyin ve plasenta bariyerlerini geçtiğinde beyin, plasenta, rahim ve fetüste patolojik değişiklikler ortaya çıkar. Patolojik süreç ayrıca büyük ölçüde mikrofloranın neden olduğu komplikasyonlara da bağlıdır.

Kuluçka süresi ortalama 2-4 gündür, çok nadiren daha fazladır. Temel olarak, hastalık akuttur. IRT'nin beş formu vardır: üst solunum yolu enfeksiyonları, vajinit, ensefalit, konjonktivit ve artrit.

Solunum organlarının yenilgisiyle, buzağıların yaklaşık% 20'sinin öldüğü kronik seröz-pürülan pnömoni mümkündür. Genital formda dış genital organlar etkilenir, bazen ineklerde endometrit, babalarda orşit gelişir ve bu da kısırlığa neden olabilir. Suni tohumlama için kullanılan boğalarda, IRT perine, kalça, anüs çevresinde, bazen kuyrukta, skrotumda tekrarlayan dermatit ile kendini gösterir. Virüs bulaşmış semen, ineklerde endometrit ve kısırlığa neden olabilir.

Rahimdeki fetüsün kürtaj ve ölümü, enfeksiyondan 3 hafta sonra not edilir; bu, varlığı rahimde kürtaj ve fetal ölümü engellemeyen hamile iyileşen ineklerin kanındaki antikor titresindeki bir artışla çakışır.

IRT'nin gizli bir kursa eğilimi ile not edildi cinsel form. Vajinanın mukoza zarının epitelinde, girişinde ve vulvasında, farklı boyutlarda çok sayıda püstül oluşur (püstüler vulvovajinit). Yerlerinde erozyonlar ve yaralar belirir. Ülseratif lezyonların iyileşmesinden sonra, uzun süre mukoza zarında hiperemik nodüller kalır. Hasta boğalarda süreç prepus ve peniste lokalizedir. Püstül ve vezikül oluşumu karakteristiktir. Gebe ineklerin küçük bir kısmında abortus, fetüsün emilmesi veya erken doğum mümkündür. Durdurulan hayvanlar, kural olarak, daha önce rinotracheitis veya konjonktivit geçirmişti. Abort edilen inekler arasında metritis ve fetal dekompozisyona bağlı ölümcül sonuçlar hariç tutulmamaktadır. Bununla birlikte, ineğin rahminin mukoza zarında iltihaplı süreçlerin yokluğunda düşük vakaları nadir değildir. IRT ile akut mastitis vakaları vardır. Meme keskin bir şekilde iltihaplanır ve büyür, palpasyonda ağrılıdır. Süt verimi keskin bir şekilde azalır.

saat meningoensefalit baskı ile birlikte, bir motor fonksiyon bozukluğu ve bir dengesizlik not edilir. Hastalığa kas titremesi, alçalma, diş gıcırdatması, kasılmalar, tükürük eşlik eder. Hastalığın bu formu esas olarak 2-6 aylık buzağıları etkiler.

solunum formu enfeksiyon, vücut ısısında 41 ... 42 "C'ye kadar ani bir artış, nazal mukoza, nazofarenks ve trakeanın hiperemi, depresyon, kuru ağrılı öksürük, burundan bol seröz-mukus akıntısı (rinit) ve köpüklü tükürük ile karakterizedir. Hastalık geliştikçe, mukus kalınlaşır, solunum yolunda mukus tıkaçları ve nekroz odakları oluşur. Şiddetli hastalıkta asfiksi belirtileri not edilir. Hiperemi burun aynasına ("kırmızı burun") uzanır. IRT virüsünün genç sığırların kitlesel keratokonjonktivitinde olduğu kanıtlanmıştır.Genç sığırlarda hastalık bazen kendini şu şekilde gösterir: ensefalit. Ani heyecan, isyan ve saldırganlık, hareketlerin bozulmuş koordinasyonu ile başlar. Vücut ısısı normaldir. Genç buzağılarda, RTI virüsünün bazı suşları akut gastrointestinal hastalığa neden olur.

Genel olarak, hasta hayvanlarda solunum formu klinik olarak açıkça ifade edilir, genital form genellikle fark edilmez.

Akut solunum biçiminde öldürülen veya ölen hayvanların otopsisi, genellikle seröz konjonktivit, nezle-pürülan rinit, larenjit ve tracheitis belirtilerinin yanı sıra adneksiyal boşlukların mukoza zarlarında hasar ortaya çıkarır. Konkaların mukoza zarı ödemli ve hiperemiktir, mukopürülan örtülerle kaplıdır. Yer yer çeşitli şekil ve boyutlarda aşındırıcı lezyonlar ortaya çıkar. Nazal ve adneksiyal boşluklarda pürülan eksüda birikir. Larinks ve trakeanın mukoza zarlarında peteşiyal kanamalar ve erozyonlar. Şiddetli vakalarda, trakea mukozası fokal nekroz geçirir, ölü hayvanlarda bronkopnömoni mümkündür. Akciğerlerde odak atelektazi alanları vardır. Etkilenen bölgelerdeki alveol ve bronşların lümeni seröz-pürülan eksüda ile doldurulur. İnterstisyel dokunun şiddetli şişmesi. Gözler etkilendiğinde, göz kapağının konjonktivası hiperemiktir ve ödem göz küresinin konjonktivasına da uzanır. Konjonktiva sebase plakla kaplıdır. Genellikle, yaklaşık 2 mm büyüklüğünde papiller tüberküller, üzerinde küçük erozyonlar ve yaralar oluşur.

Genital formda, farklı gelişim aşamalarında vajina ve vulvanın yüksek derecede iltihaplı mukoza zarında püstüller, erozyonlar ve yaralar görülür. Vulvovajinite ek olarak, sero-nezle veya pürülan servisit, endometrit ve çok daha az sıklıkla proktit tespit edilebilir. Babalarda, ağır vakalarda fimosis ve paraphimosis püstüler balanopostite katılır.

Taze abortlu fetüsler genellikle küçük otolitik fenomenlerle birlikte ödemlidir. Mukoza zarlarında ve seröz zarlarda küçük kanamalar. Fetüsün ölümünden uzun bir süre sonra değişiklikler daha şiddetlidir; kaslar arası bağ dokusunda ve vücut boşluklarında, parankimal organlarda - nekroz odaklarında koyu kırmızı bir sıvı birikir.

Meme etkilendiğinde seröz-pürülan yaygın mastit tespit edilir. Kesit yüzeyi ödemlidir, etkilenen lobüllerdeki artış nedeniyle belirgin şekilde granüle edilmiştir. Basıldığında, ondan bulutlu, irin benzeri bir sır akar. Sarnıcın mukoza zarı kanamalı, şişmiş, hiperemiktir. Beyindeki ensefalit ile kan damarlarının hiperemi, dokuların şişmesi ve küçük kanamalar tespit edilir.

IRT, klinik ve epizootolojik veriler, organ ve dokulardaki patolojik değişiklikler temelinde laboratuvar yöntemleriyle zorunlu doğrulama ile teşhis edilir. Gizli enfeksiyon sadece laboratuvar testleri ile belirlenir.

Laboratuvar teşhisi şunları içerir: 1) hücre kültüründe patolojik materyalden virüs izolasyonu ve RN veya RIF'de tanımlanması; 2) RIF kullanılarak patolojik materyalde RTI virüs antijenlerinin saptanması; 3) RN veya RIGA'da hasta ve iyileşmiş hayvanların kan serumunda antijenlerin tespiti (geriye dönük tanı).

Virolojik inceleme için hasta hayvanlardan burun boşluğundan, gözlerden, vajinadan, prepisyumdan mukus alınır; zorla öldürülen ve düşenlerden - nazal septum, trakea, akciğer, karaciğer, dalak, beyin, bölgesel lenf düğümlerinin parçaları, ölümden en geç 2 saat sonra alınır. Retrospektif serolojik tanı için kan serumu da alınır. Laboratuvar teşhisi için IRT RIGA'da enfeksiyonun serodiagnozu için bir dizi sığır IRT tanı aracı ve bir dizi eritrosit tanı aracı kullanın.

IRT'nin teşhisi, parainfluenza-3, adenovirüs enfeksiyonu, solunum sinsityal enfeksiyonu ve viral ishal materyalinin çalışmasına paralel olarak gerçekleştirilir.

Sığırlarda IRT için ön tanı, kullanılan patolojik materyalde antijen tespitinin pozitif sonuçları temelinde yapılır. KAYALIK patolojik değişikliklerin yanı sıra epizootolojik ve klinik verileri dikkate alarak. Nihai tanı, RIF sonuçlarının virüsün izolasyonu ve tanımlanması ile çakışması temelinde belirlenir.

Enfeksiyöz rinotracheitisin ayırıcı tanısında ayak ve ağız hastalığı, malign nezle, parainfluenza-3, adenovirüs ve klamidyal enfeksiyonlar, viral ishal, solunum sinsityal enfeksiyonu, pastörelloz dışlanmalıdır.

Hastalığa, kolostrum antikorları ile yavrulara bulaşabilen kalıcı ve uzun süreli bağışıklık eşlik eder. İyileşen hayvanların bağışıklığı en az 1.5...2 yıl sürer, ancak belirgin hümoral bağışıklık bile nekahat dönemindeki hayvanlarda virüsün kalıcılığını engellemez ve diğer hayvanlar için potansiyel bir enfeksiyon kaynağı olarak düşünülmelidir. Bu nedenle, RTI'ye karşı antikorları olan tüm hayvanlar, gizli virüsün taşıyıcıları olarak kabul edilmelidir.

139. Gelişmekte olan kuş embriyolarındaki besin deposu,

Kuşlarda karmaşık ve oldukça uzun embriyogenez süreci göz önüne alındığında, özel geçici ekstra embriyonik - geçici organlar oluşturmak gerekir. Bunlardan ilki yolk kesesini ve ardından geçici organların geri kalanını oluşturur: amniyotik zar (amniyon), seröz zar, allantois. Daha önceki evrimde, yolk kesesi yalnızca keskin bir telolecithal hücreye sahip olan mersin balıklarında bulunurdu ve embriyogenez süreci karmaşık ve uzundur. Yolk kesesinin oluşumu sırasında, yumurta sarısının ekstraembriyonik yaprak veya ekstraembriyonik malzeme dediğimiz yaprak kısımları ile tıkanması not edilir. Ancak ekstraembriyonik endoderm, yumurta sarısının kenarında büyümeye başlar. Ekstra embriyonik mezoderm 2 tabakaya ayrılır: visseral ve parietal, visseral tabaka ekstra embriyonik endoderme ve parietal - ekstra embriyonik ektoderme bitişiktir.

Ekstra-embriyonik ektoderm, proteini bir kenara iter ve ayrıca yumurta sarısını aşırı derecede büyütür. Yavaş yavaş, yumurta sarısı kütleleri, ekstra embriyonik endodermden ve ekstra embriyonik mezodermin visseral tabakasından oluşan bir duvarla tamamen çevrilidir - ilk geçici organ olan yumurta sarısı kesesi oluşur.

Yolk kesesinin işlevleri. Yolk kesesinin endoderm hücreleri, yumurta sarısı kütlelerini parçalayan hidrolitik enzimler salgılamaya başlar. Bölünme ürünleri emilir ve kan damarlarından embriyoya taşınır. Böylece yolk kesesi trofik işlev sağlar. Viseral mezodermden ilk kan damarları ve ilk kan hücreleri oluşur ve bu nedenle yolk kesesi de hematopoietik bir işlev görür. Kuşlarda ve memelilerde, yolk kesesi hücreleri arasında, genital tomurcuk hücreleri olan gonoblast erken bulunur.

140. Yeniden etkinleştirme. Ne olduğunu?

Genotip değiştirilerek mutasyonlar nokta (bireysel genlerde lokalize) ve gen (genomun daha geniş alanlarını etkileyen) olarak ikiye ayrılır.
Hassas hücrelerin virüs enfeksiyonu, doğada çoktur, yani. birkaç virion hücreye aynı anda girer. Bu durumda, replikasyon sürecindeki viral genomlar işbirliği yapabilir veya müdahale edebilir. Virüsler arasındaki işbirliğine dayalı etkileşimler, genetik rekombinasyon, genetik reaktivasyon, tamamlama ve fenotipik karıştırma ile temsil edilir.
Genetik rekombinasyon, DNA içeren virüslerde veya parçalanmış genomlu RNA içeren virüslerde (grip virüsü) daha yaygındır. Genetik rekombinasyon sırasında, viral genomların homolog bölgeleri arasında bir değişim meydana gelir.
Farklı genlerdeki mutasyonlarla ilişkili virüslerin genomları arasında genetik reaktivasyon gözlenir. Genetik materyal yeniden dağıtıldığında, tam teşekküllü bir genom oluşur.
Tamamlama, bir hücreyi enfekte eden virüslerden birinin bir mutasyon sonucu işlevsel olmayan bir proteini sentezlediğinde meydana gelir. Tam bir protein sentezleyen vahşi tip virüs, mutant virüste bunun yokluğunu telafi eder.

Vücut dışında yetişen organların temelleri (in vitro). Hücrelerin ve dokuların yetiştirilmesi, sterilitenin sıkı bir şekilde gözetilmesine ve kültürlenmiş hücrelerin hayati aktivitesinin korunmasını sağlayan ve hücrelerin vücutta etkileşime girdiği ortama mümkün olduğunca benzer olan özel besleyici ortamların kullanımına dayanır. Hücre ve doku kültürü elde etme yöntemi, deneysel biyolojideki en önemli yöntemlerden biridir. Hücre ve doku kültürleri sıvı nitrojen sıcaklığında (-196°C) dondurulabilir ve uzun süre saklanabilir. Hayvan hücrelerinin yetiştirilmesine ilişkin temel deney, 1907'de Amerikalı bilim adamı R. Harrison tarafından, bir kurbağa embriyosunun sinir sisteminin bir parçasının bir lenf pıhtına yerleştirilmesiyle gerçekleştirildi. Germ hücreleri birkaç hafta canlı kaldı, sinir lifleri onlardan çıktı. Zamanla, yöntem A. Carrel (Fransa), M. Burroughs (ABD), A. A. Maksimov (Rusya) ve kan plazmasını ve embriyonun dokularından bir besin ortamı olarak bir özü kullanan diğer bilim adamları tarafından geliştirildi. Hücre ve doku kültürlerinin elde edilmesindeki sonraki ilerleme, çeşitli hücre türlerinin kültürlenmesi için belirli bir kimyasal bileşime sahip ortamların geliştirilmesiyle ilişkilendirildi. Genellikle kültürün bakteri ve mikroskobik mantarlarla enfeksiyonunu önleyen tuzlar, amino asitler, vitaminler, glikoz, büyüme faktörleri, antibiyotikler içerirler. F. Steward (ABD), 1958'de bitkilerde (bir parça havuç floeminde) hücre ve doku kültürü için bir yöntemin oluşturulmasını başlattı.

Hayvan ve insan hücrelerinin ekimi için farklı kökene sahip hücreler kullanılabilir: epitelyal (karaciğer, akciğerler, meme bezi, cilt, mesane, böbrek), bağ dokusu (fibroblastlar), iskelet (kemik ve kıkırdak), kas (iskelet, kalp ve düz kaslar), sinir sistemi (glial hücreler ve nöronlar), hormon salgılayan glandüler hücreler (adrenaller, hipofiz bezleri, Langerhans adacıklarının hücreleri), melanositler ve çeşitli tümör hücreleri. Yetiştirmelerinin 2 yönü vardır: hücre kültürü ve organ kültürü (organ ve doku kültürü). Bir hücre kültürü elde etmek için - genetik olarak homojen, hızla çoğalan bir popülasyon - doku parçaları (genellikle yaklaşık 1 mm 3) vücuttan çıkarılır, uygun enzimlerle işlenir (hücreler arası temasları yok etmek için) ve elde edilen süspansiyon bir besin ortamına yerleştirilir. . Embriyonik dokulardan türetilen kültürler, yetişkin bir organizmadan alınan karşılık gelen dokulara kıyasla daha iyi hayatta kalma ve daha aktif büyüme (düşük farklılaşma seviyesi ve embriyolarda progenitör kök hücrelerin varlığından dolayı) ile karakterize edilir. Normal dokular, sınırlı bir ömre sahip kültürlere yol açar (Hayflick limiti olarak adlandırılır), tümörlerden türetilen kültürler ise süresiz olarak çoğalabilir. Ancak normal hücre kültüründe bile bazı hücreler kendiliğinden ölümsüzleşir, yani ölümsüzleşir. Hayatta kalırlar ve sınırsız bir ömre sahip hücre hatlarına yol açarlar. Orijinal hücre çizgisi, bir hücre popülasyonundan veya tek bir hücreden elde edilebilir. İkinci durumda, satır klon veya klon olarak adlandırılır. Çeşitli faktörlerin etkisi altında uzun süreli ekim ile normal hücrelerin özellikleri değişir, ana özellikleri hücre morfolojisinin ihlali, kromozom sayısında bir değişiklik (aneuploidi) olan dönüşüm meydana gelir. Yüksek derecede bir transformasyonda, bu tür hücrelerin bir hayvana dahil edilmesi, bir tümör oluşumuna neden olabilir. Organ kültüründe dokunun yapısal organizasyonu, hücreler arası etkileşimler korunur ve histolojik ve biyokimyasal farklılaşma korunur. Hormonlara bağımlı dokular duyarlılıklarını ve karakteristik tepkilerini korurlar, glandüler hücreler spesifik hormonları salgılamaya devam eder, vb. Bu tür kültürler, sallar (kağıt, milipor) veya besleyici ortamın yüzeyinde yüzen bir metal ağ üzerinde bir kültür kabında büyütülür.

Bitkilerde hücre kültürü, genel olarak hayvanlardakiyle aynı ilkelere dayanır. Yetiştirme yöntemlerindeki farklılıklar, bitki hücrelerinin yapısal ve biyolojik özellikleri ile belirlenir. Bitki doku hücrelerinin çoğu totipotenttir: belirli koşullar altında böyle bir hücreden tam teşekküllü bir bitki gelişebilir. Bir bitki hücre kültürü elde etmek için, içinde canlı hücrelerin bulunduğu herhangi bir doku (örneğin kallus) veya organın (kök, gövde, yaprak) bir parçası kullanılır. Mineral tuzlar, vitaminler, karbonhidratlar ve fitohormonlar (çoğunlukla sitokinler ve oksinler) içeren bir besin ortamına yerleştirilir. Bitki kültürleri, karanlıkta veya ışık altında 22 ila 27°C arasındaki sıcaklıklarda desteklenir.

Hücre ve doku kültürleri biyoloji ve tıbbın çeşitli alanlarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Vücut dışında somatik hücrelerin (cinsiyet hücreleri hariç tüm organ ve doku hücreleri) yetiştirilmesi, klasik genetik yöntemleriyle birlikte moleküler biyoloji yöntemlerini kullanarak daha yüksek organizmaların genetiğini incelemek için yeni yöntemler geliştirme olasılığını belirledi. . Memeli somatik hücrelerinin moleküler genetiği, insan hücreleriyle doğrudan deney yapma olasılığı ile ilişkili en büyük gelişmeyi almıştır. Hücre ve doku kültürü, gen ekspresyon mekanizmaları, erken embriyonik gelişim, farklılaşma ve çoğalma, çekirdek ve sitoplazmanın etkileşimi, hücrelerin çevre ile etkileşimi, çeşitli kimyasal ve fiziksel etkilere adaptasyon, yaşlanma, yaşlanma gibi genel biyolojik problemlerin çözümünde kullanılmaktadır. malign transformasyon vb. kalıtsal hastalıkları teşhis ve tedavi etmek için kullanılır. Test nesneleri olarak hücre kültürleri, yeni farmakolojik ajanların test edilmesinde hayvanların kullanımına bir alternatiftir. Transgenik bitkiler, klonal çoğaltma elde etmek için gereklidirler. Hücre kültürleri, biyoteknolojide hibritlerin yaratılmasında, aşıların ve biyolojik olarak aktif maddelerin üretiminde önemli bir rol oynamaktadır.

Ayrıca bkz. hücre mühendisliği.

Yanan: Hücre yetiştirme yöntemleri. L., 1988; Hayvan hücrelerinin kültürü. Yöntemler / Düzenleyen R. Freshni. M., 1989; Kültürlenmiş hücrelerin biyolojisi ve bitki biyoteknolojisi. M., 1991; Freshney R. I. Hayvan hücrelerinin kültürü: temel tekniğin bir el kitabı. 5. baskı. Hoboken, 2005.

O. P. Kisurina-Evgeniev.