Przygotowanie próbek do analiz mikrobiologicznych. Produkty spożywcze i aromatyzujące

1. Opakowanie próbki sprawdza się i stwierdza zgodność z napisem na odbitce litograficznej lub na etykiecie określonej w dokumencie towarzyszącym.

2. Opakowanie z próbką oczyszcza się z zanieczyszczeń. W przypadku otrzymania do analizy hermetycznie zamkniętych próbek produktu należy sprawdzić szczelność pojemnika. Hermetycznie zamknięte pojemniki szklane, metalowe lub polimerowe z produktem myje się wodą z detergentem, następnie płucze czystą wodą i suszy. Niezamknięte opakowanie z produktem przeciera się wacikiem zwilżonym alkoholem etylowym.

3. Analizę mikrobiologiczną próbek produktów o normalnym wyglądzie przeprowadza się w pudełku w warunkach aseptycznych. Opakowanie próbki produktu podejrzanego z wyglądu lub zepsutego otwierane jest w osobnym pomieszczeniu.

4. Przed przygotowaniem próbek z produktem zamrożonym próbkę rozmraża się w temperaturze (4±2) o C. Próbkę pobiera się bezpośrednio po rozmrożeniu, nie później jednak niż po 18 godzinach. Dopuszcza się rozmrażanie próbki produktu w temperaturze 18-20°C przez 1 godzinę. Próbki produktu o jednorodnej konsystencji można rozmrażać w termostacie w temperaturze 35°C, pod warunkiem, że całkowite rozmrożenie nastąpi w czasie nie dłuższym niż 15 minut.

5. Otwarcie opakowania z próbką produktu

5.1. Bezpośrednio przed otwarciem opakowania z próbką produktu w pojemniku konsumenckim produkty luzem lub w fazie ciekłej miesza się poprzez 10-krotne obrócenie pojemnika od dołu do pokrywy lub ruchem okrężnym.

5.2. Opakowanie z próbką produktu (z wyjątkiem konserw) przeciera się wacikiem nasączonym 70% alkoholem etylowym, następnie alkohol usuwa się poprzez swobodne odparowanie. Następnie otwiera się opakowanie, wypala szyjkę metalowego lub szklanego słoika i pobiera masę (objętość) produktu w ilości niezbędnej do przygotowania jednej lub kilku porcji.

5.3. Opakowanie z próbką (worki z folii, materiałów polimerowych lub papieru) otwiera się w miejscu uprzednio nasączonym wacikiem nasączonym alkoholem. Otwarcie opakowania zawierającego próbkę produktu odbywa się w taki sposób, aby wykluczyć możliwość zanieczyszczenia produktu i otaczających go przedmiotów.

Powierzchnię konserw o normalnym wyglądzie poddaje się działaniu alkoholu etylowego w jeden z następujących sposobów:

Powierzchnię wieczka przeciera się wacikiem nasączonym alkoholem, wacik pozostawia się na powierzchni i podpala przed otwarciem konserw;

Gumowe nasadki i wieczka koronowe, bekelit i plastikowe zamknięcia są traktowane w ten sam sposób, ale tampon nie ulega podpaleniu;

Metalową nasadkę (koniec) w zależności od celu analizy otwiera się lub przebija stemplem 1-4 razy w bezpośrednim sąsiedztwie płonącego wacika. Rozmiar otworu (średnica lub długość) powinien wynosić 1-3 cm.

5.4. Wybrane próbki produktu natychmiast wysiewa się do pożywek lub przenosi do roztworu soli peptonowej w celu przygotowania rozcieńczenia.

Przed otwarciem butelek lub tub z zakrętkami należy odkręcić obrobioną zakrętkę lub bouchon. Krawędzie butelki lub membrany rurki spalają się w płomieniu palnika; membranę przekłuwa się sterylnym skalpelem.

Przed otwarciem butelki zapieczętowanej korkiem koronowym lub foliowym okienko wypala się w płomieniu palnika, korek wyjmuje się sterylnym kluczem, a brzegi butelki wypala się ponownie w płomieniu palnika.

Podczas otwierania butelek z gumowym zamknięciem, zamknięcie potraktowane alkoholem etylowym jest usuwane bez wstępnego wypalania, a krawędzie butelki spalane są płomieniem palnika.

5.5. Konserwy o wadliwym wyglądzie umieszcza się na metalowej tacy. Bezpośrednio przed pobraniem próbki produktu powierzchnię wieczka (końca) poddaje się obróbce w sposób określony w p. 5.2, przy czym alkohol etylowy nie jest podpalany. Obrobioną pokrywkę (lub koniec) przykrywa się odwróconym, sterylnym metalowym lejkiem, tak że lejek całkowicie zakrywa powierzchnię. Przez wąski otwór lejka ostrożnie przekłuć pokrywkę (koniec) sterylnym stemplem, tworząc otwór na igłę.

Zamiast metalowego lejka można zastosować plastikową torebkę. Po obróbce wieczka (końca) konserwę umieszcza się w plastikowej torebce przetartej wcześniej alkoholem etylowym tak, aby spód torebki zakrywał powierzchnię, którą należy otworzyć. Dół torby jest ściśle wiązany. Ostrożnie, pod lekkim naciskiem stempla, wykonaj jednocześnie otwór w wieczku puszki i mocno do niej dociśniętym woreczku foliowym.

Po przestaniu wydobywania się gazu i produktu ze słoika z produktem, lejek i torebkę usuwa się, pokrywkę ponownie przeciera się sterylnym wacikiem, otwór poszerza się wybijakiem i natychmiast pobiera się próbkę produktu słoik do siewu lub przygotowania jego rozcieńczeń.

6. Dobór próbek i przygotowanie rozcieńczeń wstępnych

6.1. Z każdej próbki produktu, w zależności od oznaczanych wskaźników, wybiera się jedną lub więcej próbek w celu przygotowania rozcieńczeń i/lub wysiewu do pożywek.

6.2. Masę (objętość) próbki przeznaczonej do wysiewu na pożywki i/lub przygotowania jej rozcieńczenia należy ustalić w dokumentacji regulacyjnej i technicznej dla konkretnego rodzaju produktu lub metod analitycznych, ale wynosić co najmniej 10±0,1 g (cm3).

6.3. Próbkę do siewu wybiera się metodą wagową lub objętościową bezpośrednio po otwarciu próbki produktu. Otwarcie przeprowadza się w warunkach wykluczających zanieczyszczenie produktu mikroorganizmami, w bliskiej odległości od płomienia palnika, przy użyciu sterylnych narzędzi.

6.4. Próbkę produktu dobiera się tak, aby zawierała wszystkie jego składniki i w takich samych proporcjach jak w analizowanej próbce.

6,5. Do przygotowania rozcieńczeń odważonej porcji produktu stosuje się roztwór soli peptonowej. Zależność pomiędzy masą (objętością) próbki produktu a objętością roztworu pepton-sól fizjologiczną dla początkowego i kolejnych rozcieńczeń wynosi:

1:9 – dla 10-krotnego rozcieńczenia (dla produktów zawierających dużą ilość tłuszczu bez środków powierzchniowo czynnych 1:10);

1:5 - dla 6-krotnego rozcieńczenia;

1:3 - dla 4-krotnego rozcieńczenia;

1:1 - dla 2-krotnego rozcieńczenia.

Jeżeli konieczne jest rozcieńczenie próbki produktów zawierających dużą ilość tłuszczu, dopuszczalne jest stosowanie środków powierzchniowo czynnych (wodorowęglan sodu itp.), które nie mają działania przeciwdrobnoustrojowego.

Do przygotowania rozcieńczenia próbki produktów o wysokim ciśnieniu osmotycznym dopuszcza się użycie peptonu lub wody destylowanej.

6.6. Wstępne rozcieńczenie próbki produktu przygotowuje się w warunkach aseptycznych, stosując jedną z poniższych metod:

produkty rozpuszczające;

rozcieńczanie produktów zawierających fazę ciekłą;

zawiesina proszków, produktów o konsystencji pasty i kawałków produktu zanieczyszczonych powierzchniowo; homogenizacja produktów stałych.

6.7. Próbki produktów płynnych i lepkich pobiera się sterylną pipetą z bawełnianym korkiem poprzez wprowadzenie pipety w głąb produktu.

Część produktu pozostająca na powierzchni pipety może spłynąć do końcówki pipety. Powstałą kroplę usuwa się poprzez dotknięcie wewnętrznej ścianki naczynia lub pojemnika konsumenckiego nad powierzchnią produktu.

Lepkie produkty usuwa się z powierzchni pipety sterylnym wacikiem.

Odważoną porcję produktu przenosi się do pojemnika z roztworem soli peptonowej w celu przygotowania wstępnego rozcieńczenia tak, aby pipeta nie dotykała powierzchni roztworu soli peptonowej. Za pomocą innej sterylnej pipety dokładnie wymieszać produkt z roztworem soli peptonowej, napełniając i wyrzucając mieszaninę dziesięciokrotnie.

Podczas pracy z produktami lepkimi zaleca się szybkie wymieszanie ich z roztworem soli peptonowej poprzez umieszczenie w pojemniku kilku kulek szklanych.

6.8. Ciekły produkt, nasycony dwutlenkiem węgla (CO 2), przenosi się do sterylnej kolby stożkowej zamkniętej bawełnianym korkiem lub innym pojemnikiem i ogrzewa, często mieszając, ruchami okrężnymi w łaźni wodnej w temperaturze od 30 do 37 ° C aż do momentu, gdy nie będą już uwalniane pęcherzyki gazu.

Pobiera się część próbki produktu i przetwarza zgodnie z punktem 6.7.

6.9. Próbkę produktów sypkich lub sypkich pobiera się sterylną łyżką lub szpatułką z różnych miejsc produktu (w razie potrzeby przed pobraniem próbki usuwa się sterylną łyżką 2 cm wierzchniej warstwy produktu), następnie próbkę przenosi się do wstępnie zważonego sterylnego pojemnika z pokrywką i zważony. Do próbki dodaje się roztwór soli peptonowej w ilości potrzebnej do przygotowania wstępnego rozcieńczenia. Mieszaninę miesza się lub wytrząsa 25 razy ruchem okrężnym w promieniu 30 cm, aż do uzyskania jednorodnej konsystencji produktu.

Jeśli sproszkowany produkt nie jest rozpuszczony w wodzie, to po zmieszaniu go z roztworem soli peptonowej powstałą zawiesinę pozostawia się na 10 minut i ponownie energicznie wytrząsa przez 1 minutę.

6.10. Pobiera się próbkę produktów pęczniejących pod wpływem wody i przygotowuje wstępne rozcieńczenie zgodnie z wymaganiami dokumentacji regulacyjnej i technicznej dla konkretnego rodzaju produktu.

6.11. Próbkę stałych produktów rozpuszczalnych w wodzie pobiera się szpatułką lub łyżką po rozdrobnieniu, zmieleniu lub zmieleniu w warunkach aseptycznych, a następnie poddaje obróbce zgodnie z klauzulą ​​6.9.

Odważoną porcję próbek produktów stałych nierozpuszczalnych w wodzie homogenizuje się w przypadkach określonych w dokumentacji regulacyjnej i technicznej. Podczas homogenizacji produktu łączna liczba obrotów homogenizatora powinna wynosić 15-20 tys. Liczba obrotów homogenizatora nie powinna być mniejsza niż 8000 i większa niż 45000 obrotów na minutę.

Dopuszcza się homogenizację produktu niesterylizowanego poprzez rozdrobnienie go do uzyskania jednolitej konsystencji w sterylnym moździerzu z zachowaniem warunków aseptycznych.

6.12. Próbkę wyrobów o konsystencji pasty pobiera się po dokładnym wymieszaniu łyżką lub pałką szklaną i następnie poddaje obróbce zgodnie z pkt. 6.9.

6.13. Próbkę ciekłych tłuszczów pobiera się ciepłą pipetą podgrzaną przez flambirowanie. Po napełnieniu pipety produktem, pozostałości produktu usuwa się z powierzchni pipety za pomocą sterylnego wacika.

Produkt z pipety umieszcza się w pojemniku ze szlifowanym korkiem szklanym i rozcieńcza odpowiednią ilością roztworu soli peptonowej ogrzanej do temperatury 40-45°C; przy identyfikacji mikroorganizmów psychrofilnych temperatura nie powinna przekraczać 37°C. Pozostały tłuszcz przyklejony do pipety płucze się roztworem peptonowo-solnym, który jest kilkakrotnie zasysany i usuwany z pipety.

6.14. Próbkę tłuszczów stałych pobiera się po pocięciu produktu nożem lub drutem na kilka części. W razie potrzeby usuń górną warstwę.

Próbkę produktu pobiera się skalpelem z powierzchni skrawków w różnych miejscach i przenosi do zważonego pojemnika z pokrywką.

Pewną masę próbki przenosi się do pojemnika z szeroką szyjką i szlifowanym szklanym korkiem. Pozostały tłuszcz przyklejony do ścianek naczynia płucze się w tym samym naczyniu odpowiednią ilością roztworu soli peptonowej podgrzanej do temperatury 40-45°C, którą dodaje się do naczynia w ilości niezbędnej do uzyskania wstępnego rozcieńczenia.

Z tłuszczów stałych próbkę można wybrać objętościowo. Tłuszcze topi się w naczyniu z szeroką szyjką w łaźni wodnej w temperaturze nieprzekraczającej 45°C; przy identyfikacji mikroorganizmów psychrofilnych temperatura nie powinna przekraczać 37 o C.

Po wymieszaniu roztopionego tłuszczu ciepłą pipetą przenosi się go do pojemnika z szeroką szyjką ze szlifowaną szklaną pokrywką, zawierającego niezbędną ilość roztworu pepton-sól fizjologiczną do przygotowania wstępnego rozcieńczenia. Roztwór pepton-sól fizjologiczną podgrzewa się wstępnie do 40-45°C; przy identyfikacji mikroorganizmów psychrofilnych do 37°C.

6.15. Próbki produktów ubitych lub o konsystencji papkowatej zawierającej dużą ilość tłuszczu, po wymieszaniu pałką szklaną pobiera się łyżką do zważonego pojemnika i dodaje roztworem soli peptonowej podgrzanym do temperatury 40-45°C w ilości niezbędnej do przygotować początkowe rozcieńczenie.

6.16. Oznaczenie skażenia mikrobiologicznego powierzchni próbek wyrobów przeprowadza się poprzez płukanie wacikami bawełnianymi.

Sterylny wacik zwilża się roztworem soli peptonowej i przeciera nim w różnych miejscach powierzchnię różnych kawałków analizowanego produktu o łącznej powierzchni 100 cm2.

Powierzchnię poddawaną analizie mierzy się za pomocą sterylnych szablonów z otworami o odpowiedniej wielkości.

Tampon umieszcza się w pojemniku zawierającym co najmniej 100 cm3 roztworu soli peptonowej. Pojemnik zamyka się gumowym korkiem i potrząsa aż do rozbicia tamponów na pojedyncze włókna. Powstałą zawiesinę uważa się za początkowe rozcieńczenie.

7. Przygotowanie dziesięciokrotnych rozcieńczeń

7.1. Pierwsze dziesięciokrotne rozcieńczenie próbki jest rozcieńczeniem początkowym, rozcieńczenie wstępne przygotowuje się zgodnie z ust. 6. Z niego uzyskuje się kolejne rozcieńczenia.

7.2. Kolejne drugie rozcieńczenie przygotowuje się z jednej części pierwotnego rozcieńczenia i dziewięciu części roztworu pepton-sól fizjologiczna, mieszając w probówce.

Jeżeli do wymieszania początkowego rozcieńczenia użyto pipety, to tą samą pipetą dodaj 1 cm 3 pierwotnego rozcieńczenia do 9 cm 3 roztworu soli peptonowej, nie dotykając pipetą powierzchni roztworu. Rozcieńczenie miesza się inną pipetą poprzez dziesięciokrotne zasysanie i wydmuchanie zawartości probówki.

7.3. Trzecie i kolejne rozcieńczenia przygotowuje się w podobny sposób.

7.4. Przerwa pomiędzy przygotowaniem odważonych porcji produktu, ich rozcieńczeniem i zaszczepieniem w pożywce nie powinna przekraczać 30 minut.

GOST 26669-85

STANDARD MIĘDZYPAŃSTWOWY

PRODUKTY SPOŻYWCZE I SMAKOWE

PRZYGOTOWANIE PRÓBEK DO BADANIA MIKROBIOLOGICZNEGO
ANALIZA

Data wprowadzenia 01.07.86

Niniejsza norma dotyczy produktów spożywczych i aromatycznych i określa przygotowanie próbek do analiz mikrobiologicznych.

Terminy użyte w standardzie i ich objaśnienia podano w załączniku.

1. SPRZĘT, ODCZYNNIKI I MATERIAŁY

membranowe urządzenie filtrujące; palnik gazowy lub alkoholowy zgodnie z GOST 25336;

lejki metalowe; dziurkacz;

klucz do otwierania butelek; otwieracz do puszek;

nożyczki, skalpel, pęseta zgodnie z GOST 21241, szpatułka, łyżka;

szablony (szablon); probówki zgodnie z GOST 25336;

* GOST R 51652-2000 obowiązuje na terytorium Federacji Rosyjskiej.

70%; torby plastikowe; detergent;

pepton do celów bakteriologicznych zgodnie z GOST 13805.

Narzędzia i powierzchnię urządzeń mających bezpośredni kontakt z produktem należy sterylizować jedną z metod określonych w GOST 26668.

1.2. Przygotowanie roztworu soli peptonowej

Roztwór soli peptonowej przygotowuje się w następujący sposób: 8,5 g chlorku sodu i 1,0 g peptonu rozpuszcza się w 1 dm3 wody destylowanej, powoli ogrzewając. Powstały roztwór, jeśli to konieczne, przesącza się przez filtr papierowy, ustawia pH na 7,0 ± 0,1, rozlewa do kolb, probówek lub innych pojemników, zamyka i sterylizuje w temperaturze (121 ± 1) °C przez 30 minut.

Roztwór przechowuje się w ciemnym miejscu w temperaturze (4 ± 2) °C nie dłużej niż 30 dni w warunkach zapobiegających odparowaniu wilgoci.

Temperatura roztworu soli peptonowej musi odpowiadać temperaturze analizowanego produktu.

1.3. Przygotowanie wody peptonowej

Wodę peptonową przygotowuje się podobnie do roztworu soli peptonowej, bez dodatku chlorku sodu.

2. PRZYGOTOWANIE PRÓBEK DO ANALIZY

2.1. Opakowanie próbki podlega oględzinom i stwierdza się zgodność z napisem na odbitce litograficznej lub na etykiecie określonej w dokumencie towarzyszącym.

2.3. Analizę mikrobiologiczną próbek produktów o normalnym wyglądzie przeprowadza się w pudełku w warunkach aseptycznych. Opakowanie próbki produktu podejrzanego z wyglądu lub zepsutego otwierane jest w osobnym pomieszczeniu.

Przygotowanie do boksu opisano w załączniku.

2.2, 2.3. (Wydanie zmienione, zmiana nr 1).

2.4. Próbki z zamrożonym produktem rozmraża się w temperaturze (4 ± 2) °C przed przygotowaniem próbki. Próbkę pobiera się bezpośrednio po rozmrożeniu, jednak nie później niż 18 godzin od rozpoczęcia rozmrażania.

Dopuszcza się rozmrażanie próbki produktu w temperaturze 18 - 20°C przez 1 godzinę.

Próbki produktu o jednorodnej konsystencji można rozmrażać w termostacie w temperaturze 35°C, pod warunkiem, że całkowite rozmrożenie nastąpi w czasie nie dłuższym niż 15 minut.

2.5. Otwarcie opakowania z próbką produktu

2.5.1. Bezpośrednio przed otwarciem opakowania z próbką produktu w pojemniku konsumenckim, zarówno luzem, jak i posiadającym fazę ciekłą, wymieszać obracając pojemnik 10 razy od dołu do wieczka lub wykonując ruchy okrężne.

2.6.1. Z każdej próbki produktu, w zależności od oznaczanych wskaźników, wybiera się jedną lub więcej próbek w celu przygotowania rozcieńczeń i/lub wysiewu do pożywek.

2.6.2. Masę (objętość) próbki przeznaczonej do wysiewu do pożywek i/lub przygotowania jej rozcieńczeń należy określić w dokumentacji regulacyjnej i technicznej dla konkretnego rodzaju produktu lub metody analizy.

2.6.3. Próbkę do siewu wybiera się metodą wagową lub objętościową bezpośrednio po otwarciu próbki produktu. Otwarcie przeprowadza się w warunkach wykluczających zanieczyszczenie produktu mikroorganizmami, w bliskiej odległości od płomienia palnika, przy użyciu sterylnych narzędzi.

2.6.4. Próbkę produktu dobiera się tak, aby zawierała wszystkie jego składniki i w takich samych proporcjach jak w analizowanej próbce.

2.6.5. Do przygotowania rozcieńczeń odważonej porcji produktu stosuje się roztwór soli peptonowej.

Dopuszcza się wstępne rozcieńczenia produktów o ułamku masowym NaCl większym niż 5% przy użyciu wody peptonowej, a wstępne rozcieńczenia mięsa, ryb i produktów mlecznych - przy użyciu soli fizjologicznej.

Masa (objętość) próbki produktu przeznaczonej do przygotowania wstępnego rozcieńczenia lub homogenatu musi wynosić co najmniej (10 ± 0,1) g/cm 3 .

Zależność pomiędzy masą (objętością) próbki produktu a objętością roztworu pepton-sól fizjologiczną dla początkowego i kolejnych rozcieńczeń wynosi:

1:9 - dla 10-krotnego rozcieńczenia (dla produktów zawierających duże ilości tłuszczu bez środków powierzchniowo czynnych 1:10);

1:5 - dla 6-krotnego rozcieńczenia;

1:3 - dla 4-krotnego rozcieńczenia;

1:1 - dla 2-krotnego rozcieńczenia.

Jeżeli konieczne jest rozcieńczenie próbki produktów zawierających dużą ilość tłuszczu, dopuszczalne jest stosowanie środków powierzchniowo czynnych (wodorowęglan sodu itp.), które nie mają działania przeciwdrobnoustrojowego.

Do przygotowania rozcieńczenia próbki produktów o wysokim ciśnieniu osmotycznym dopuszcza się użycie peptonu lub wody destylowanej.

(Wydanie zmienione, zmiana nr 1).

2.6.6. Wstępne rozcieńczenie próbki produktu przygotowuje się w warunkach aseptycznych, stosując jedną z poniższych metod:

produkty rozpuszczające;

rozcieńczanie produktów zawierających fazę ciekłą;

zawiesiny proszków, produktów o konsystencji pasty i powierzchni kawałków produktu skażonych mikrobiologicznie;

homogenizacja produktów stałych.

Część produktu pozostająca na powierzchni pipety może spłynąć do końcówki pipety. Powstałą kroplę usuwa się poprzez dotknięcie wewnętrznej ścianki naczynia lub pojemnika konsumenckiego nad powierzchnią produktu.

Lepkie produkty usuwa się z powierzchni pipety sterylnym wacikiem.

Odważoną porcję produktu przenosi się do pojemnika z roztworem soli peptonowej w celu przygotowania wstępnego rozcieńczenia tak, aby pipeta nie dotykała powierzchni roztworu soli peptonowej. Za pomocą innej sterylnej pipety dokładnie wymieszać produkt z roztworem soli peptonowej, napełniając i wyrzucając mieszaninę dziesięciokrotnie.

Podczas pracy z produktami lepkimi zaleca się szybkie wymieszanie ich z roztworem soli peptonowej poprzez umieszczenie w pojemniku kilku kulek szklanych.

2.6.8. Ciekły produkt, nasycony dwutlenkiem węgla (CO 2), przenosi się do sterylnej kolby stożkowej zamkniętej bawełnianym korkiem lub innym pojemnikiem i ogrzewa, często mieszając, ruchami okrężnymi w łaźni wodnej w temperaturze od 30 do 37 ° C aż przestaną z niego wypływać ciecz.

Pobierana jest część próbki produktu i przetwarzana zgodnie z poz.

Odważoną porcję próbek produktów stałych nierozpuszczalnych w wodzie homogenizuje się w przypadkach określonych w dokumentacji regulacyjnej i technicznej. Podczas homogenizacji produktu łączna liczba obrotów homogenizatora powinna wynosić 15 - 20 tys. Liczba obrotów homogenizatora nie powinna być mniejsza niż 8000 i większa niż 45000 obrotów na minutę.

Jeżeli podczas homogenizacji produktu otrzyma się niejednorodną masę, pozostawia się ją na 15 minut do osadzenia, a supernatant wykorzystuje się do wysiewu i (lub) przygotowania rozcieńczeń.

Dopuszcza się homogenizację produktu niesterylizowanego poprzez rozdrobnienie go do uzyskania jednolitej konsystencji w sterylnym moździerzu z zachowaniem warunków aseptycznych.

(Wydanie zmienione, zmiana nr 1).

2.6.12. Próbkę produktów o konsystencji pasty pobiera się po dokładnym wymieszaniu ich łyżką lub pałką szklaną i następnie poddaje obróbce zgodnie z etapem.

2.6.13. Próbkę ciekłych tłuszczów pobiera się ciepłą pipetą podgrzaną przez flambirowanie. Po napełnieniu pipety produktem, pozostałości produktu usuwa się z powierzchni pipety za pomocą sterylnego wacika.

Produkt z pipety umieszcza się w pojemniku ze szlifowanym korkiem szklanym i rozcieńcza odpowiednią ilością roztworu soli peptonowej ogrzanej do temperatury 40 - 45°C; przy identyfikacji mikroorganizmów psychrofilnych temperatura nie powinna przekraczać 37°C. Pozostały tłuszcz przyklejony do pipety płucze się roztworem peptonowo-solnym, który jest kilkakrotnie zasysany i usuwany z pipety.

2.6.14. Próbkę tłuszczów stałych pobiera się po pocięciu produktu nożem lub drutem na kilka części. W razie potrzeby usuń górną warstwę.

Próbkę produktu pobiera się skalpelem z powierzchni skrawków w różnych miejscach i przenosi do zważonego pojemnika z pokrywką.

Pewną masę próbki przenosi się do pojemnika z szeroką szyjką i szlifowanym szklanym korkiem. Pozostały tłuszcz przyklejony do ścianek naczynia płucze się w tym samym naczyniu odpowiednią ilością roztworu soli peptonowej podgrzanej do temperatury 40 – 45°C, którą dodaje się do naczynia w ilości niezbędnej do uzyskania wstępnego rozcieńczenia.

Z tłuszczów stałych próbkę można wybrać objętościowo. Tłuszcze topi się w naczyniu z szeroką szyjką w łaźni wodnej w temperaturze nieprzekraczającej 45 °C; przy identyfikacji mikroorganizmów psychrofilnych temperatura nie powinna przekraczać 37°C.

Po wymieszaniu roztopionego tłuszczu ciepłą pipetą przenosi się go do pojemnika z szeroką szyjką ze szlifowaną szklaną pokrywką, zawierającego niezbędną ilość roztworu pepton-sól fizjologiczną do przygotowania wstępnego rozcieńczenia. Roztwór soli peptonowej podgrzewa się wstępnie do temperatury 40–45°C; przy identyfikacji mikroorganizmów psychrofilnych do 37°C.

2.6.15 Po wymieszaniu pałeczką szklaną odważone porcje próbek produktów ubitych lub o konsystencji papkowatej zawierającej dużą ilość tłuszczu pobiera się łyżką do odważonego pojemnika i dodaje roztwór soli peptonowej podgrzany do temperatury 40 - 45°C w ilości niezbędnej do przygotowania wstępnego rozcieńczenia.

2.6.16 Oznaczenie skażenia mikrobiologicznego powierzchni próbek wyrobów przeprowadza się poprzez płukanie wacikami bawełnianymi.

Sterylny wacik zwilża się roztworem soli peptonowej i przeciera nim w różnych miejscach powierzchnię różnych kawałków analizowanego produktu o łącznej powierzchni 100 cm2.

Powierzchnię poddawaną analizie mierzy się za pomocą sterylnych szablonów z otworami o odpowiedniej wielkości.

Tampon umieszcza się w probówce zawierającej 10 cm3 roztworu soli peptonowej. Zawartość probówki dokładnie wymieszać za pomocą pipety. Powstałą zawiesinę uważa się za początkowe rozcieńczenie.

(Wydanie zmienione, zmiana nr 1).

2.7. Przygotowanie dziesięciokrotnych rozcieńczeń

2.7.1. Pierwsze dziesięciokrotne rozcieńczenie próbki jest rozcieńczeniem początkowym; rozcieńczenie wstępne przygotowuje się zgodnie z ust. Otrzymuje się z niego kolejne rozcieńczenia.

2.7.2. Kolejne drugie rozcieńczenie przygotowuje się z jednej części pierwotnego rozcieńczenia i dziewięciu części roztworu pepton-sól fizjologiczna, mieszając w probówce.

Jeżeli do wymieszania początkowego rozcieńczenia użyto pipety, to tą samą pipetą dodaj 1 cm 3 pierwotnego rozcieńczenia do 9 cm 3 roztworu soli peptonowej, nie dotykając pipetą powierzchni roztworu. Roztwór miesza się inną pipetą poprzez dziesięciokrotne zasysanie i wydmuchanie zawartości probówki.

2.7.3. Trzecie i kolejne rozcieńczenia przygotowuje się w podobny sposób.

2.7.4. Przerwa pomiędzy przygotowaniem odważonych porcji produktu, ich rozcieńczeniem i zaszczepieniem w pożywce nie powinna przekraczać 30 minut.

ZAŁĄCZNIK 1
Informacja

TERMIN STOSOWANY W NORMIE I OBJAŚNIENIA DO NIEGO

(Wydanie zmienione, zmiana nr 1).

ZAŁĄCZNIK 2
Informacja

WADY KONSERWACJI W KONSERWACH

Za wady produktu konserwowego uważa się:

oznaki rozwoju mikroorganizmów widoczne gołym okiem: fermentacja, pleśń, śluz itp.;

osad na dnie słoika lub na styku powierzchni produktu z pojemnikiem („pierścień”);

zmętnienie fazy ciekłej;

koagulacja;

kwaśny;

obcy zapach i (lub) smak nie charakterystyczny dla produktu;

zmiana koloru.

Za wady wyglądu pojemników z zapakowanymi w nie produktami uważa się:

oznaki wycieku widoczne gołym okiem: dziury, pęknięcia, smugi lub ślady wyciekania produktu z puszki;

słoiki z wibrującymi końcówkami;

nieprawidłowo zaprojektowany szew puszek (języki, zęby, podcięcie, fałszywy szew, szew walcowany);

rdza, po usunięciu której pozostają skorupy;

deformacja korpusu, końców lub podłużnego szwu puszek w postaci ostrych krawędzi i „ptaków”;

skośne wieczka na słoikach szklanych, podcięte fałdy wieczek wzdłuż zwiniętej krawędzi, wystający gumowy pierścień („pętla”);

pęknięcia lub odpryski szkła na szwie, niepełne osadzenie wieczek względem szyjki słoika;

odkształcenie (wcięcie) pokrywek szklanych słoików, które spowodowało naruszenie szwu uszczelniającego;

wypukła elastyczna membrana (przycisk) na wieczku.

ZAŁĄCZNIK 3
Informacja

PRZYGOTOWANIE DO BOksu

Konserwy otwierane są w komorze specjalnie przystosowanej do analiz mikrobiologicznych. W boksie nie powinny znajdować się powierzchnie niedostępne do dezynfekcji na mokro i należy wykluczyć ruch powietrza wywołany przeciągami. Ściany, podłogi i sufity należy wyłożyć materiałem lub pomalować farbą odporną na działanie mokrych środków dezynfekcyjnych. Aby sterylizować powietrze, pudełko jest wyposażone w lampy ultrafioletowe o mocy 1,5–2,5 W na 1 m 3.

W pudełku powinien znajdować się wyłącznie mikrobiolog przeprowadzający analizę oraz, jeśli to konieczne, asystent.

W pudełku musi znajdować się stół i stołek. Nie powinno być żadnych zbędnych elementów innych niż te wymagane do analizy żywności w puszkach.

Na stole powinno być:

lampa alkoholowa lub palnik gazowy;

słoik z zakorkowanym korkiem zawierający alkohol;

słoik z pokrywką z przygotowanymi gęstymi, sterylnymi wacikami o wymiarach 3 ‒ 3 cm lub bawełnianymi pierścieniami;

słoiczki z roztworem dezynfekcyjnym (wysokość warstwy 3 cm) do umieszczenia pipet lub probówek używanych po analizie;

mała metalowa lub emaliowana taca, na której umieszczane są słoiki do analizy;

sterylne pipety lub probówki, za pomocą których pobierana jest próbka.

W szufladzie stołu należy przechowywać sprzęt pomocniczy: pęsetę i dziurkacz. Stempel powinien mieć kształt włóczni o przekroju w kształcie rombu o przekątnych 1 1,5 cm lub o przekroju w kształcie trójkąta równoramiennego.

Przy otwieraniu dużej ilości puszek należy zastosować przebijak zamontowany na statywie. W tym przypadku otwarcie następuje poprzez naciśnięcie stempla na wieczku słoiczka za pomocą dźwigni.

Przed otwarciem słoiczka poncz podpala się płomieniem tamponu.

Box jest myty i dezynfekowany bezpośrednio przed analizą (nie wcześniej niż 24 godziny przed jej rozpoczęciem) i po jej zakończeniu. Dezynfekcję przeprowadzamy poprzez przetarcie wszystkich powierzchni chlorem lub innymi środkami dezynfekcyjnymi zgodnie z instrukcją właściwą dla każdego leku. 45 minut przed rozpoczęciem pracy w pudełku lampy bakteriobójcze włączają się na (30 ± 5) minut.

Obecnie do analiz mikrobiologicznych wykorzystuje się okapy laminarne (kabiny ochronne ultraczystego powietrza). Skrzynki z przepływem laminarnym produkowane są przez fabrykę sprzętu medycznego w Użgorodzie „Laminar”, skrzynki marki BPV 1200 produkowane są na Węgrzech, skrzynki marki TVG-S II 1.14.1 produkowane są przez firmę Babcock – BSH (Niemcy).

ZAŁĄCZNIKI 2, 3. (Wprowadzono dodatkowo zmianę nr 1).

DANE INFORMACYJNE

1. OPRACOWANE I WPROWADZONE przez Państwowy Komitet Rolno-Przemysłowy ZSRR

2. ZATWIERDZONE I WPROWADZONE W ŻYCIE Uchwałą Państwowego Komitetu ds. Standardów ZSRR z dnia 4 grudnia 1985 r. nr 3810

3. Norma jest w pełni zgodna z ST SEV 3014-81

4. Do normy wprowadzono międzynarodowe standardy: ISO 6887-83 (E) i ISO 7218-85

5. ZAMIAST GOST 10444.0-75

6. PRZYWOŁANE DOKUMENTY PRZEPISOWE I TECHNICZNE

strona 1

strona 2

strona 3

strona 4

strona 5

strona 6

strona 7

strona 8

strona 9

strona 10

STANDARD MIĘDZYPAŃSTWOWY

PRODUKTY SPOŻYWCZE I SMAKOWE

PRZYGOTOWANIE PRÓBEK DO BADANIA MIKROBIOLOGICZNEGO
ANALIZA

Data wprowadzenia 01.07.86

Niniejsza norma dotyczy produktów spożywczych i aromatycznych i określa przygotowanie próbek do analiz mikrobiologicznych.

Terminy użyte w standardzie i ich objaśnienia podano w Załączniku nr 1.

1. SPRZĘT, ODCZYNNIKI I MATERIAŁY

1.1. Podczas przygotowywania próbek do analizy stosuje się następujący sprzęt, odczynniki i materiały:

kąpiel wodna;

homogenizator, mieszalnik laboratoryjny lub zaprawa porcelanowa zgodnie z GOST 9147;

membranowe urządzenie filtrujące; palnik gazowy lub alkoholowy zgodnie z GOST 25336;

lejki metalowe; dziurkacz;

klucz do otwierania butelek; otwieracz do puszek;

nożyczki, skalpel, pęseta zgodnie z GOST 21241, szpatułka, łyżka;

szablony (szablon); probówki zgodnie z GOST 25336;

* GOST R 51652-2000 obowiązuje na terytorium Federacji Rosyjskiej.

70%; torby plastikowe; detergent;

pepton do celów bakteriologicznych zgodnie z GOST 13805.

Narzędzia i powierzchnię urządzeń mających bezpośredni kontakt z produktem należy sterylizować jedną z metod określonych w GOST 26668.

1.2. Przygotowanie roztworu soli peptonowej

Roztwór soli peptonowej przygotowuje się w następujący sposób: 8,5 g chlorku sodu i 1,0 g peptonu rozpuszcza się w 1 dm3 wody destylowanej, powoli ogrzewając. Powstały roztwór, jeśli to konieczne, przesącza się przez filtr papierowy, ustawia pH na 7,0 ± 0,1, rozlewa do kolb, probówek lub innych pojemników, zamyka i sterylizuje w temperaturze (121 ± 1) °C przez 30 minut.

Roztwór przechowuje się w ciemnym miejscu w temperaturze (4 ± 2) °C nie dłużej niż 30 dni w warunkach zapobiegających odparowaniu wilgoci.

Temperatura roztworu soli peptonowej musi odpowiadać temperaturze analizowanego produktu.

1.3. Przygotowanie wody peptonowej

Wodę peptonową przygotowuje się podobnie do roztworu soli peptonowej, bez dodatku chlorku sodu.

2. PRZYGOTOWANIE PRÓBEK DO ANALIZY

2.1. Opakowanie próbki podlega oględzinom i stwierdza się zgodność z napisem na odbitce litograficznej lub na etykiecie określonej w dokumencie towarzyszącym.

2.2. Opakowanie próbki zostaje oczyszczone z zanieczyszczeń. W przypadku otrzymania do analizy hermetycznie zamkniętych próbek produktu należy sprawdzić szczelność pojemnika. Szczelność konserw określa się według GOST 8756.18, szczelność pojemników polimerowych z produktem, a także konserw zamkniętych wieczkami z elastyczną membraną (przyciskiem) - wizualnie. Powierzchnia elastycznej membrany powinna być wklęsła do wewnątrz. Hermetycznie zamknięte pojemniki szklane, metalowe lub polimerowe z produktem myje się wodą z detergentem, następnie płucze czystą wodą i suszy. Niezamknięte opakowanie z produktem przeciera się wacikiem zwilżonym alkoholem etylowym.

Konserwy są termostatowane bezpośrednio przed analizą mikrobiologiczną.

Termostatowi poddawane są następujące konserwy:

hermetycznie zamknięte, pozbawione wad wyglądu, przeznaczone do określenia sterylności przemysłowej produktu konserwowego i stabilności mikrobiologicznej konserw;

z wibrującymi końcami i krakersami w hermetycznie zamkniętych pojemnikach, przeznaczone do identyfikacji przyczyn tych wad.

Konserwy przeznaczone do wykrywania w nich toksyny botulinowej, zbombardowane, noszące znamiona zepsucia mikrobiologicznego i niehermetycznie zamknięte, nie podlegają termostatowaniu.

Aby wykazać aktywność życiową mikroorganizmów mezofilnych tlenowych, fakultatywnie beztlenowych i beztlenowych, konserwy termostatuje się w temperaturze 30 - 37°C w pojemnikach o pojemności do 1 dm 3 włącznie przez co najmniej 5 dni, w pojemnikach o pojemności większej niż 1 dm 3 - przez co najmniej 7 dni.

Aby wykazać żywotną aktywność termofilnych mikroorganizmów tlenowych, fakultatywnie beztlenowych i beztlenowych, konserwy w pojemnikach o dowolnej pojemności termostatuje się w temperaturze 55–62 ° C przez co najmniej 3 dni. Podczas termostatowania konserwy są codziennie sprawdzane. Konserwy z ujawnionymi wadami opakowania są natychmiast po ich wykryciu usuwane z termostatu i przechowywane przez 24 godziny w temperaturze pokojowej, po czym sprawdzany jest stan opakowania i, jeśli to możliwe, wygląd produktu. Konserwy w pojemnikach, które po schłodzeniu w temperaturze pokojowej przyjmują normalny wygląd, uważa się za wolne od wad i termostatowanie jest kontynuowane.

Po termostatowaniu konserw i ochłodzeniu ich do temperatury pokojowej przez 24 godziny należy zwrócić uwagę na stan pojemnika i, jeśli to możliwe, wygląd produktu.

Wady konserw konserwowych podano w Załączniku nr 2.

2.3. Analizę mikrobiologiczną próbek produktów o normalnym wyglądzie przeprowadza się w pudełku w warunkach aseptycznych. Opakowanie próbki produktu podejrzanego z wyglądu lub zepsutego otwierane jest w osobnym pomieszczeniu.

Przygotowanie pudełka opisano w Załączniku 3.

2.2, 2.3. (Wydanie zmienione, zmiana nr 1).

2.4. Próbki z zamrożonym produktem rozmraża się w temperaturze (4 ± 2) °C przed przygotowaniem próbki. Próbkę pobiera się bezpośrednio po rozmrożeniu, jednak nie później niż 18 godzin od rozpoczęcia rozmrażania.

Dopuszcza się rozmrażanie próbki produktu w temperaturze 18 - 20°C przez 1 godzinę.

Próbki produktu o jednorodnej konsystencji można rozmrażać w termostacie w temperaturze 35°C, pod warunkiem, że całkowite rozmrożenie nastąpi w czasie nie dłuższym niż 15 minut.

2.5. Otwarcie opakowania z próbką produktu

2.5.1. Bezpośrednio przed otwarciem opakowania z próbką produktu w pojemniku konsumenckim, zarówno luzem, jak i posiadającym fazę ciekłą, wymieszać obracając pojemnik 10 razy od dołu do wieczka lub wykonując ruchy okrężne.

2.5.2. Opakowanie z próbką produktu (z wyjątkiem konserw) przeciera się wacikiem nasączonym 70% alkoholem etylowym, alkohol spala się lub usuwa poprzez swobodne odparowanie. Następnie otwiera się opakowanie, wypala szyjkę metalowego lub szklanego słoika i pobiera masę (objętość) produktu w ilości niezbędnej do przygotowania jednej lub większej liczby porcji.

2.5.3. Opakowanie z próbką (worki z folii, materiałów polimerowych lub papieru) otwiera się w miejscu uprzednio nasączonym wacikiem nasączonym alkoholem. Otwarcie opakowania zawierającego próbkę produktu następuje w taki sposób, aby wykluczyć możliwość skażenia produktu, otaczających go przedmiotów i środowiska.

2.5.4. Przed otwarciem powierzchnię konserwy o normalnym wyglądzie poddaje się działaniu alkoholu etylowego w jeden z następujących sposobów:

W przypadku słoików szklanych poddaje się obróbce pokrywkę, w przypadku słoików metalowych przetwarzany jest koniec przeciwny do zaznaczonego.

Powierzchnię wieczka przeciera się wacikiem nasączonym alkoholem, wacik pozostawia się na powierzchni i zapala przed otwarciem konserw;

poddaje się również obróbce gumowe nasadki i wieczka koronowe, bekelit i plastikowe zamknięcia, ale tampon nie ulega zapaleniu;

Metalową nasadkę (koniec) w zależności od celu analizy otwiera się lub przebija przebijakiem 1 - 4 razy w bezpośrednim sąsiedztwie płonącego wacika. Rozmiar otworu (średnica lub długość) powinien wynosić 1 - 3 cm.

Wybrane próbki produktu natychmiast wysiewa się do pożywek lub przenosi do roztworu soli peptonowej w celu przygotowania rozcieńczenia;

Przed otwarciem butelek lub tub z zakrętkami należy odkręcić obrobioną zakrętkę lub bouchon. Krawędzie butelki lub membrany rurki spalają się w płomieniu palnika; membranę przekłuwa się sterylnym skalpelem.

Przed otwarciem butelki zapieczętowanej korkiem koronowym lub foliowym okienko wypala się w płomieniu palnika, korek wyjmuje się sterylnym kluczem, a brzegi butelki wypala się ponownie w płomieniu palnika.

Podczas otwierania butelek z gumowym zamknięciem, zamknięcie potraktowane alkoholem etylowym jest usuwane bez wstępnego wypalania, a krawędzie butelki wypalane są płomieniem palnika.

2.5.5. Konserwy o wadliwym wyglądzie umieszcza się na metalowej tacy. Bezpośrednio przed pobraniem próbki produktu powierzchnię wieczka (końca) poddaje się obróbce w sposób określony w pkt 2.5.2, ale alkohol etylowy nie podpala się. Obrobioną pokrywkę (lub koniec) przykrywa się odwróconym, sterylnym metalowym lejkiem, tak że lejek całkowicie zakrywa powierzchnię. Przez wąski otwór lejka ostrożnie przekłuć pokrywkę (koniec) sterylnym stemplem, tworząc otwór na igłę.

Zamiast metalowego lejka można zastosować plastikową torebkę. Po obróbce wieczka (końca) konserwę umieszcza się w plastikowej torebce przetartej wcześniej alkoholem etylowym tak, aby spód torebki zakrywał powierzchnię, którą należy otworzyć. Dół torby jest ściśle wiązany. Ostrożnie, pod lekkim naciskiem stempla, wykonaj jednocześnie otwór w wieczku puszki i mocno do niej dociśniętym woreczku foliowym.

Po przestaniu wydobywania się gazu i produktu ze słoika z produktem, lejek i torebkę usuwa się, pokrywkę ponownie przeciera się sterylnym wacikiem, otwór poszerza się wybijakiem i natychmiast pobiera się próbkę produktu słoik do siewu lub przygotowania jego rozcieńczeń.

2.6. Dobór próbek i przygotowanie wstępnego rozcieńczenia

2.6.1. Z każdej próbki produktu, w zależności od oznaczanych wskaźników, wybiera się jedną lub więcej próbek w celu przygotowania rozcieńczeń i/lub wysiewu do pożywek.

2.6.2. Masę (objętość) próbki przeznaczonej do wysiewu do pożywek i/lub przygotowania jej rozcieńczeń należy określić w dokumentacji regulacyjnej i technicznej dla konkretnego rodzaju produktu lub metody analizy.

2.6.3. Próbkę do siewu wybiera się metodą wagową lub objętościową bezpośrednio po otwarciu próbki produktu. Otwarcie przeprowadza się w warunkach wykluczających zanieczyszczenie produktu mikroorganizmami, w bliskiej odległości od płomienia palnika, przy użyciu sterylnych narzędzi.

2.6.4. Próbkę produktu dobiera się tak, aby zawierała wszystkie jego składniki i w takich samych proporcjach jak w analizowanej próbce.

2.6.5. Do przygotowania rozcieńczeń odważonej porcji produktu stosuje się roztwór soli peptonowej.

Dopuszcza się wstępne rozcieńczenia produktów o ułamku masowym NaCl większym niż 5% przy użyciu wody peptonowej, a wstępne rozcieńczenia mięsa, ryb i produktów mlecznych - przy użyciu soli fizjologicznej.

Masa (objętość) próbki produktu przeznaczonej do przygotowania wstępnego rozcieńczenia lub homogenatu musi wynosić co najmniej (10 ± 0,1) g/cm 3 .

Zależność pomiędzy masą (objętością) próbki produktu a objętością roztworu pepton-sól fizjologiczną dla początkowego i kolejnych rozcieńczeń wynosi:

1:9 - dla 10-krotnego rozcieńczenia (dla produktów zawierających duże ilości tłuszczu bez środków powierzchniowo czynnych 1:10);

1:5 - dla 6-krotnego rozcieńczenia;

1:3 - dla 4-krotnego rozcieńczenia;

1:1 - dla 2-krotnego rozcieńczenia.

Jeżeli konieczne jest rozcieńczenie próbki produktów zawierających dużą ilość tłuszczu, dopuszczalne jest stosowanie środków powierzchniowo czynnych (wodorowęglan sodu itp.), które nie mają działania przeciwdrobnoustrojowego.

Do przygotowania rozcieńczenia próbki produktów o wysokim ciśnieniu osmotycznym dopuszcza się użycie peptonu lub wody destylowanej.

(Wydanie zmienione, zmiana nr 1).

2.6.6. Wstępne rozcieńczenie próbki produktu przygotowuje się w warunkach aseptycznych, stosując jedną z poniższych metod:

produkty rozpuszczające;

rozcieńczanie produktów zawierających fazę ciekłą;

zawiesiny proszków, produktów o konsystencji pasty i powierzchni kawałków produktu skażonych mikrobiologicznie;

homogenizacja produktów stałych.

2.6.7. Próbki produktów płynnych i lepkich pobiera się sterylną pipetą z bawełnianym korkiem poprzez wprowadzenie pipety w głąb produktu.

Część produktu pozostająca na powierzchni pipety może spłynąć do końcówki pipety. Powstałą kroplę usuwa się poprzez dotknięcie wewnętrznej ścianki naczynia lub pojemnika konsumenckiego nad powierzchnią produktu.

Lepkie produkty usuwa się z powierzchni pipety sterylnym wacikiem.

Odważoną porcję produktu przenosi się do pojemnika z roztworem soli peptonowej w celu przygotowania wstępnego rozcieńczenia tak, aby pipeta nie dotykała powierzchni roztworu soli peptonowej. Za pomocą innej sterylnej pipety dokładnie wymieszać produkt z roztworem soli peptonowej, napełniając i wyrzucając mieszaninę dziesięciokrotnie.

Podczas pracy z produktami lepkimi zaleca się szybkie wymieszanie ich z roztworem soli peptonowej poprzez umieszczenie w pojemniku kilku kulek szklanych.

2.6.8. Ciekły produkt, nasycony dwutlenkiem węgla (CO 2), przenosi się do sterylnej kolby stożkowej zamkniętej bawełnianym korkiem lub innym pojemnikiem i ogrzewa, często mieszając, ruchami okrężnymi w łaźni wodnej w temperaturze od 30 do 37 ° C aż przestaną z niego wypływać ciecz.

Pobiera się część próbki produktu i przetwarza zgodnie z punktem 2.6.7.

2.6.9. Próbkę produktów sypkich lub sypkich pobiera się sterylną łyżką lub szpatułką z różnych miejsc produktu (w razie potrzeby przed pobraniem próbki usuwa się sterylną łyżką 2 cm wierzchniej warstwy produktu), następnie próbkę przenosi się do wstępnie zważonego sterylnego pojemnika z pokrywką i zważony. Do próbki dodaje się roztwór soli peptonowej w ilości potrzebnej do przygotowania wstępnego rozcieńczenia. Mieszaninę miesza się lub wytrząsa 25 razy ruchem okrężnym w promieniu 30 cm, aż do uzyskania jednorodnej konsystencji produktu.

Jeżeli sproszkowany produkt nie jest rozpuszczalny w wodzie, to po zmieszaniu go z roztworem soli peptonowej powstałą zawiesinę pozostawia się na 10 minut i ponownie energicznie wytrząsa przez 1 minutę.

2.6.10. Pobiera się próbkę produktów pęczniejących pod wpływem wody i przygotowuje wstępne rozcieńczenie zgodnie z wymaganiami dokumentacji regulacyjnej i technicznej dla konkretnego rodzaju produktu.

2.6.11. Próbkę stałych produktów rozpuszczalnych w wodzie pobiera się szpatułką lub łyżką, po rozdrobnieniu, zmieleniu lub zmieleniu w warunkach aseptycznych, a następnie poddaje obróbce w ten sam sposób. 2.6.9.

Odważoną porcję próbek produktów stałych nierozpuszczalnych w wodzie homogenizuje się w przypadkach określonych w dokumentacji regulacyjnej i technicznej. Podczas homogenizacji produktu łączna liczba obrotów homogenizatora powinna wynosić 15 - 20 tys. Liczba obrotów homogenizatora nie powinna być mniejsza niż 8000 i większa niż 45000 obrotów na minutę.

Jeżeli podczas homogenizacji produktu otrzyma się niejednorodną masę, pozostawia się ją na 15 minut do osadzenia, a supernatant wykorzystuje się do wysiewu i (lub) przygotowania rozcieńczeń.

Dopuszcza się homogenizację produktu niesterylizowanego poprzez rozdrobnienie go do uzyskania jednolitej konsystencji w sterylnym moździerzu z zachowaniem warunków aseptycznych.

(Wydanie zmienione, zmiana nr 1).

2.6.12. Próbkę wyrobów o konsystencji pasty pobiera się po dokładnym wymieszaniu łyżką lub pałką szklaną i następnie poddaje obróbce zgodnie z pkt. 2.6.9.

2.6.13. Próbkę ciekłych tłuszczów pobiera się ciepłą pipetą podgrzaną przez flambirowanie. Po napełnieniu pipety produktem, pozostałości produktu usuwa się z powierzchni pipety za pomocą sterylnego wacika.

Produkt z pipety umieszcza się w pojemniku ze szlifowanym korkiem szklanym i rozcieńcza odpowiednią ilością roztworu soli peptonowej ogrzanej do temperatury 40 - 45°C; przy identyfikacji mikroorganizmów psychrofilnych temperatura nie powinna przekraczać 37°C. Pozostały tłuszcz przyklejony do pipety płucze się roztworem peptonowo-solnym, który jest kilkakrotnie zasysany i usuwany z pipety.

2.6.14. Próbkę tłuszczów stałych pobiera się po pocięciu produktu nożem lub drutem na kilka części. W razie potrzeby usuń górną warstwę.

Próbkę produktu pobiera się skalpelem z powierzchni skrawków w różnych miejscach i przenosi do zważonego pojemnika z pokrywką.

Pewną masę próbki przenosi się do pojemnika z szeroką szyjką i szlifowanym szklanym korkiem. Pozostały tłuszcz przyklejony do ścianek naczynia płucze się w tym samym naczyniu odpowiednią ilością roztworu soli peptonowej podgrzanej do temperatury 40 – 45°C, którą dodaje się do naczynia w ilości niezbędnej do uzyskania wstępnego rozcieńczenia.

Z tłuszczów stałych próbkę można wybrać objętościowo. Tłuszcze topi się w naczyniu z szeroką szyjką w łaźni wodnej w temperaturze nieprzekraczającej 45 °C; przy identyfikacji mikroorganizmów psychrofilnych temperatura nie powinna przekraczać 37°C.

Po wymieszaniu roztopionego tłuszczu ciepłą pipetą przenosi się go do pojemnika z szeroką szyjką ze szlifowaną szklaną pokrywką, zawierającego niezbędną ilość roztworu pepton-sól fizjologiczną do przygotowania wstępnego rozcieńczenia. Roztwór soli peptonowej podgrzewa się wstępnie do temperatury 40–45°C; przy identyfikacji mikroorganizmów psychrofilnych do 37°C.

2.6.15 Po wymieszaniu pałeczką szklaną odważone porcje próbek produktów ubitych lub o konsystencji papkowatej zawierającej dużą ilość tłuszczu pobiera się łyżką do odważonego pojemnika i dodaje roztwór soli peptonowej podgrzany do temperatury 40 - 45°C w ilości niezbędnej do przygotowania wstępnego rozcieńczenia.

2.6.16 Oznaczenie skażenia mikrobiologicznego powierzchni próbek wyrobów przeprowadza się poprzez płukanie wacikami bawełnianymi.

Sterylny wacik zwilża się roztworem soli peptonowej i przeciera nim w różnych miejscach powierzchnię różnych kawałków analizowanego produktu o łącznej powierzchni 100 cm2.

Powierzchnię poddawaną analizie mierzy się za pomocą sterylnych szablonów z otworami o odpowiedniej wielkości.

Tampon umieszcza się w probówce zawierającej 10 cm3 roztworu soli peptonowej. Zawartość probówki dokładnie wymieszać za pomocą pipety. Powstałą zawiesinę uważa się za początkowe rozcieńczenie.

(Wydanie zmienione, zmiana nr 1).

2.7. Przygotowanie dziesięciokrotnych rozcieńczeń

2.7.1. Pierwsze dziesięciokrotne rozcieńczenie próbki jest rozcieńczeniem początkowym; rozcieńczenie wstępne przygotowuje się zgodnie z pkt 2.6. Otrzymuje się z niego kolejne rozcieńczenia.

2.7.2. Kolejne drugie rozcieńczenie przygotowuje się z jednej części pierwotnego rozcieńczenia i dziewięciu części roztworu pepton-sól fizjologiczna, mieszając w probówce.

Jeżeli do wymieszania początkowego rozcieńczenia użyto pipety, to tą samą pipetą dodaj 1 cm 3 pierwotnego rozcieńczenia do 9 cm 3 roztworu soli peptonowej, nie dotykając pipetą powierzchni roztworu. Roztwór miesza się inną pipetą poprzez dziesięciokrotne zasysanie i wydmuchanie zawartości probówki.

2.7.3. Trzecie i kolejne rozcieńczenia przygotowuje się w podobny sposób.

2.7.4. Przerwa pomiędzy przygotowaniem odważonych porcji produktu, ich rozcieńczeniem i zaszczepieniem w pożywce nie powinna przekraczać 30 minut.

ZAŁĄCZNIK 1
Informacja

TERMIN STOSOWANY W NORMIE I OBJAŚNIENIA DO NIEGO

(Wydanie zmienione, zmiana nr 1).

ZAŁĄCZNIK 2
Informacja

WADY KONSERWACJI W KONSERWACH

Za wady produktu konserwowego uważa się:

oznaki rozwoju mikroorganizmów widoczne gołym okiem: fermentacja, pleśń, śluz itp.;

osad na dnie słoika lub na styku powierzchni produktu z pojemnikiem („pierścień”);

zmętnienie fazy ciekłej;

koagulacja;

kwaśny;

obcy zapach i (lub) smak nie charakterystyczny dla produktu;

zmiana koloru.

Za wady wyglądu pojemników z zapakowanymi w nie produktami uważa się:

oznaki wycieku widoczne gołym okiem: dziury, pęknięcia, smugi lub ślady wyciekania produktu z puszki;

słoiki z wibrującymi końcówkami;

nieprawidłowo zaprojektowany szew puszek (języki, zęby, podcięcie, fałszywy szew, szew walcowany);

rdza, po usunięciu której pozostają skorupy;

deformacja korpusu, końców lub podłużnego szwu puszek w postaci ostrych krawędzi i „ptaków”;

skośne wieczka na słoikach szklanych, podcięte fałdy wieczek wzdłuż zwiniętej krawędzi, wystający gumowy pierścień („pętla”);

pęknięcia lub odpryski szkła na szwie, niepełne osadzenie wieczek względem szyjki słoika;

odkształcenie (wcięcie) pokrywek szklanych słoików, które spowodowało naruszenie szwu uszczelniającego;

wypukła elastyczna membrana (przycisk) na wieczku.

ZAŁĄCZNIK 3
Informacja

PRZYGOTOWANIE DO BOksu

Konserwy otwierane są w komorze specjalnie przystosowanej do analiz mikrobiologicznych. W boksie nie powinny znajdować się powierzchnie niedostępne do dezynfekcji na mokro i należy wykluczyć ruch powietrza wywołany przeciągami. Ściany, podłogi i sufity należy wyłożyć materiałem lub pomalować farbą odporną na działanie mokrych środków dezynfekcyjnych. Aby sterylizować powietrze, pudełko jest wyposażone w lampy ultrafioletowe o mocy 1,5–2,5 W na 1 m 3.

W pudełku powinien znajdować się wyłącznie mikrobiolog przeprowadzający analizę oraz, jeśli to konieczne, asystent.

W pudełku musi znajdować się stół i stołek. Nie powinno być żadnych zbędnych elementów innych niż te wymagane do analizy żywności w puszkach.

Na stole powinno być:

lampa alkoholowa lub palnik gazowy;

słoik z zakorkowanym korkiem zawierający alkohol;

słoik z pokrywką z przygotowanymi gęstymi, sterylnymi wacikami o wymiarach 3 ‒ 3 cm lub bawełnianymi pierścieniami;

słoiczki z roztworem dezynfekcyjnym (wysokość warstwy 3 cm) do umieszczenia pipet lub probówek używanych po analizie;

mała metalowa lub emaliowana taca, na której umieszczane są słoiki do analizy;

sterylne pipety lub probówki, za pomocą których pobierana jest próbka.

W szufladzie stołu należy przechowywać sprzęt pomocniczy: pęsetę i dziurkacz. Stempel powinien mieć kształt włóczni o przekroju w kształcie rombu o przekątnych 1 1,5 cm lub o przekroju w kształcie trójkąta równoramiennego.

Przy otwieraniu dużej ilości puszek należy zastosować przebijak zamontowany na statywie. W tym przypadku otwarcie następuje poprzez naciśnięcie stempla na wieczku słoiczka za pomocą dźwigni.

Przed otwarciem słoiczka poncz podpala się płomieniem tamponu.

Box jest myty i dezynfekowany bezpośrednio przed analizą (nie wcześniej niż 24 godziny przed jej rozpoczęciem) i po jej zakończeniu. Dezynfekcję przeprowadzamy poprzez przetarcie wszystkich powierzchni chlorem lub innymi środkami dezynfekcyjnymi zgodnie z instrukcją właściwą dla każdego leku. 45 minut przed rozpoczęciem pracy w pudełku lampy bakteriobójcze włączają się na (30 ± 5) minut.

Obecnie do analiz mikrobiologicznych wykorzystuje się okapy laminarne (kabiny ochronne ultraczystego powietrza). Skrzynki z przepływem laminarnym produkowane są przez fabrykę sprzętu medycznego w Użgorodzie „Laminar”, skrzynki marki BPV 1200 produkowane są na Węgrzech, skrzynki marki TVG-S II 1.14.1 produkowane są przez firmę Babcock – BSH (Niemcy).

ZAŁĄCZNIKI 2, 3. (Wprowadzono dodatkowo zmianę nr 1).

DANE INFORMACYJNE

1. OPRACOWANE I WPROWADZONE przez Państwowy Komitet Rolno-Przemysłowy ZSRR

2. ZATWIERDZONE I WPROWADZONE W ŻYCIE Uchwałą Państwowego Komitetu ds. Standardów ZSRR z dnia 4 grudnia 1985 r. nr 3810

3. Norma jest w pełni zgodna z ST SEV 3014-81

4. Do normy wprowadzono międzynarodowe standardy: ISO 6887-83 (E) i ISO 7218-85

6. PRZYWOŁANE DOKUMENTY PRZEPISOWE I TECHNICZNE

Ukierunkowana kontrola sanitarno-bakteriologiczna produktów spożywczych, wymywania z obiektów środowiskowych i wody umożliwia skuteczne prowadzenie bieżącego nadzoru sanitarno-epidemiologicznego oraz pozwala na obiektywną ocenę przestrzegania reżimu. Pomaga w wyjaśnieniu dróg przenoszenia chorób zakaźnych. Błędy w pobraniu próbek mogą prowadzić do nieprawidłowej oceny higienicznej badanych próbek przy użyciu najbardziej czułych i dokładnych metod badawczych, a w konsekwencji do nieodpowiedniej oceny samego obiektu.

Dlatego jedną z podstawowych zasad badań mikrobiologicznych jest prawidłowe pobieranie próbek, ścisłe przestrzeganie zasad pobierania próbek i ich stosunku ilościowego.

Głównymi dokumentami dotyczącymi pobierania próbek produktów spożywczych do badań mikrobiologicznych są:

GOST R 54004-2010 „Produkty spożywcze. Metody pobierania próbek do badań mikrobiologicznych”
GOST R 53430-2009 „Mleko i produkty przetwórstwa mleka. Metody analizy mikrobiologicznej”
GOST R ISO 707 - 2010 „Mleko i produkty mleczne. Przewodnik po próbkach”

Cechy pobierania próbek żywności zgodnie z GOST R 54004-2010:

1. Przed pobraniem próbek, na podstawie oględzin, jednostki opakowaniowe lub produkty dzieli się na 3 grupy, a pobieranie próbek przeprowadza się dla każdej grupy oddzielnie:

Normalny wygląd (brak oznak psucia się mikrobiologicznego)
- podejrzane (z objawami nieprawidłowości, które mogą powstać zarówno w wyniku psucia się mikrobiologicznie, jak i w wyniku reakcji chemicznych lub biochemicznych zachodzących w produkcie)
- produkty zepsute, po sprawdzeniu których stwierdzono oczywiste wady produktu (bombardowanie, pleśń, śluz itp.). Do badań nie wybiera się produktów, których termin przydatności do spożycia minął.

2. Próbki pobiera się za pomocą sterylnych narzędzi do sterylnych pojemników, których szyjka jest spalana płomieniem palnika (sterylne słoiki lub sterylne torby, sterylne pojemniki plastikowe).

W przypadku rutynowego pobierania próbek i pobierania jednej próbki, pobranie próbek do badań mikrobiologicznych powinno poprzedzać pobranie próbek do badań organoleptycznych i fizykochemicznych, z zachowaniem zasad aseptyki wykluczających zanieczyszczenie w momencie pobierania próbek.

3. Objętość (wagę) próbki ustala się zgodnie z dokumentacją normatywno-techniczną dla tego typu produktu. Liczbę jednostek opakowaniowych ustalają obowiązujące normy, OST, TU itp. dla odpowiednich produktów.

4. Jeżeli masa próbki jest równa masie produktu w opakowaniu konsumenckim, należy wykorzystać całe opakowanie. Jeżeli masa próbki wynosi więcej niż jedno opakowanie, pobiera się kilka opakowań, w przeciwnym razie (w przypadku braku opakowania) próbkę pobiera się poprzez pobranie próbek punktowych z różnych miejsc.

5. Jeżeli dokumentacja prawna nie określa masy (objętości) produktu, należy pobrać co najmniej 1 próbkę dla produktów w opakowaniach konsumenckich i do 1000 g (cm3) dla produktów w opakowaniach transportowych (grudkowatych, płynnych, o konsystencji pasty, sypkich). i mieszana konsystencja). Przy pobieraniu próbek produktów ryczałtowych o masie większej niż 1000 g stosuje się jedną z następujących metod:

• odciąć lub wyciąć część produktu nożem lub innym narzędziem, przy czym w przypadku produktów o kształcie prostokątnym cięcie wykonuje się prostopadle do osi podłużnej, a w przypadku produktów kulistych - w kształcie klina;
• produkt przecina się nożem w kilku miejscach, a następnie z powierzchni cięcia i z głębi pobiera się skalpelem odpowiednią liczbę kawałków, które przenosi się pęsetą do pojemnika z szeroką szyjką;
• odciąć wierzchnią warstwę produktu na grubość 0,5 - 1 cm i za pomocą sondy lub specjalnego narzędzia wycisnąć produkt do pojemnika z szeroką szyjką.

6. Próbki produktów mrożonych umieszcza się w izolowanych pojemnikach lub z czynnikami chłodniczymi. Temperatura takich próbek podczas transportu nie powinna przekraczać minus 150°C. Próbki produktów łatwo psujących się transportujemy w temperaturze 50°C w workach chłodniczych z czynnikami chłodniczymi nie dłużej niż 6 godzin. W pozostałych przypadkach kierują się dokumentacją normatywną i techniczną dla każdego rodzaju produktu.

7. Pobieranie próbek mleka i przetworów mlecznych przeprowadza się zgodnie z: GOST 26809-86 „Mleko i przetwory mleczne. Zasady przyjęcia, metody pobierania próbek i przygotowanie próbek do analizy.” Jeżeli produkt prezentowany jest w opakowaniu konsumenckim, wybierana jest 1 sztuka opakowania konsumenckiego. Przy kompletowaniu próbki łączonej, np. twarogu: z każdej jednostki pojemnika transportowego pobiera się 3 próbki punktowe: 1 ze środka, 2 pozostałe w odległości 5 cm od bocznej ściany. Wybraną masę przenosi się do sterylnego pojemnika, tworząc łączną próbkę o masie 500 g. Do określenia liczby bifidobakterii w fermentowanych produktach mlecznych wybiera się losowo 3 jednostki opakowań konsumenckich. Badania mikrobiologiczne należy rozpocząć nie później niż 4 godziny po pobraniu próbki, jeżeli próbki transportowano w temperaturze nie wyższej niż 6 0 C, a próbki lodów – nie wyższej niż 2 0 C.

8. Pobieranie próbek produktów rybnych - zgodnie z GOST 31339-2006 „Ryby, przedmioty nierybne i produkty z nich”

9. Przetwory mięsne wg GOST R 51447-99 „Mięso i przetwory mięsne”

10. Mięso drobiowe, produkty uboczne i półprodukty drobiowe zgodnie z GOST R 50396.0-92 „Mięso drobiowe, produkty uboczne i półprodukty drobiowe”.

9. Przy pobieraniu próbek produktów w zakładach gastronomii należy kierować się przepisami UJ nr 2657 „O kontroli sanitarnej i bakteriologicznej w zakładach gastronomii i zakładach sprzedaży detalicznej żywności”.

Jeżeli ze stanowiska do serwowania zostanie pobrana próbka dania, wówczas cała porcja zostaje przeniesiona z talerza do słoika; jeśli w kuchni zostanie pobrana próbka z dużej masy produktu (z patelni, z dużego kawałka mięsa), wówczas pobiera się próbkę o masie około 200 g (naczynia płynne - po dokładnym wymieszaniu; gęste - z różnych miejsc głęboko w kawałku). Napoje mineralne, bezalkoholowe i piwo wybierane są w ilości 1 butelki opakowania fabrycznego lub 200 ml napoju wyprodukowanego w przedsiębiorstwie.

Pobierając próbkę produktu o złożonej konsystencji, musi on zawierać wszystkie składniki w takich samych proporcjach jak w produkcie oryginalnym. W razie potrzeby każdy komponent jest wybierany osobno.

Produkty masowe przed pobraniem próbek są dokładnie mieszane lub próbka składa się z próbek punktowych.

10. Wszystkie próbki dostarczane są z etykietami, które oprócz numeru próbki i nazwy produktu muszą zawierać datę i godzinę pobrania próbki, datę i godzinę produkcji oraz termin przydatności produktu do spożycia. Próbki są zapieczętowane lub zapieczętowane.

11. W trakcie pobierania próbek sporządza się protokół pobierania próbek oraz skierowanie na badania, wskazując przyczynę pobrania próbki (planowe, nieplanowane, badania epidemiologiczne itp.) oraz wskazując cel badania zgodności:

Ujednolicone wymagania sanitarno-epidemiologiczne i higieniczne dla zatwierdzonych towarów. 28.05.2010 dla nr 299

TR CU 02\2011 „w sprawie bezpieczeństwa żywności”

SanPiN 2.3.2.1078-01 „Wymagania higieniczne dotyczące bezpieczeństwa i wartości odżywczej produktów spożywczych”

Przepisy techniczne prawa federalnego dotyczące mleka i produktów mlecznych nr 88-FZ z dnia 12 czerwca 2008 r.

Przepisy techniczne prawa federalnego dotyczące produktów olejowych i tłuszczowych

Przepisy techniczne prawa federalnego dotyczące soków z owoców i warzyw nr 178-FZ z dnia 27 października 2008 r.

Instrukcja dotycząca trybu badania, rejestrowania i przeprowadzania badań laboratoryjnych w instytucjach służby sanitarno-epidemiologicznej w kierunku zatruć pokarmowych nr 1135-73 g

W celu realizacji postanowień Porozumienia o Unii Celnej w sprawie środków sanitarnych z dnia 11 grudnia 2009 roku opracowano jednolite wymagania sanitarno-epidemiologiczne i higieniczne dla towarów podlegających dozorowi sanitarno-epidemiologicznemu (kontroli).

Rumieni się.

Według UM nr 2657 z dnia 31 grudnia 1982 r. „W sprawie kontroli sanitarnej i bakteriologicznej w zakładach żywienia zbiorowego i handlu żywnością”.

W praktyce bieżącego nadzoru sanitarnego jednostek gastronomicznych placówek dziecięcych, przedszkolnych i młodzieżowych, a także bufetów, metoda wymywania jest szeroko stosowana w celu monitorowania skuteczności przetwarzania sanitarnego sprzętu, wyposażenia, przyborów, odzieży sanitarnej i personelu siła robocza. Metoda wymazowa pozwala obiektywnie ocenić stan sanitarny badanych instytucji.

Podczas wykonywania myć szczególną uwagę zwraca się na monitorowanie urządzeń i aparatury wykorzystywanej w procesie technologicznym przygotowania wyrobów nie poddawanych dalszej obróbce cieplnej (chłodni).

Kontrola bakteriologiczna metodą zmywania z powierzchni inwentarza, sprzętu, rąk i odzieży sanitarnej personelu może realizować dwa cele:

a) ustalić skuteczność dezynfekcji; w tym celu sprzęt, ręce i odzież sanitarną personelu zmywa się przed rozpoczęciem pracy, a jeżeli nie jest to możliwe, w czasie przerw, po uprzednim zdezynfekowaniu rąk i sprzętu, tj. wymazy wykonuje się z czystych przedmiotów.

b) określić rolę sprzętu i rąk personelu w skażeniu bakteryjnym produktu lub dania gotowego w procesie produkcyjnym, zwracając szczególną uwagę na wytwarzanie produktów i dań gotowych, które zostały poddane obróbce cieplnej lub są spożywane bez wstępnego przygotowania -leczenie (niektóre warzywa, produkty gastronomiczne, sałatki, winegrety itp.). Aby rozwiązać ten problem, równolegle z pobieraniem wymazów pobiera się wielokrotnie próbki produktów spożywczych (wymazy pobiera się z nietraktowanych dłoni i powierzchni).

Płukanie powierzchni odbywa się za pomocą zwilżonego sterylnego wacika bawełnianego umieszczonego na szklanym lub metalowym uchwycie zamontowanym w korku probówki z gazy bawełnianej. Probówka zawiera sterylne podłoże. Bezpośrednio przed myciem wacik zwilża się poprzez zanurzenie wacika w płynie. Podczas pobierania wymazów należy wziąć pod uwagę następujące zalecenia:

• Jeśli chodzi o wyposażenie, warto zwrócić uwagę na deski do krojenia, maszynki do mielenia mięsa i stoły produkcyjne do gotowych produktów.
• Środki do mycia rąk, odzież sanitarna i ręczniki pobierane są od pracowników mających kontakt z produktami niepoddawanymi dalszej obróbce cieplnej.
• Wypłukania z dużych urządzeń pobierane są z powierzchni 100 cm2. Szablon o powierzchni 25 cm2 przykleja się w 4 różnych miejscach na powierzchnię kontrolowanego obiektu.

Podczas pobierania wymazów z małych przedmiotów zmywana jest cała powierzchnia. Uderzenia są podejmowane:

• jeden wymaz z 3 przedmiotów o tej samej nazwie (talerze, łyżki itp.). Okulary przeciera się od wewnętrznej powierzchni i górnej zewnętrznej krawędzi 2 cm w dół.
• Podczas pobierania wymazu z dłoni należy przetrzeć wacikiem powierzchnie dłoniowe obu dłoni, przesuwając je co najmniej 5 razy po każdej dłoni i palcach, a następnie przetrzeć przestrzenie międzypalcowe, paznokcie i przestrzenie podpaznokciowe.
• Podczas prania odzieży sanitarnej wytrzyj 4 obszary o powierzchni 25 cm2 - dolną część każdego rękawa oraz 2 obszary z górnej i środkowej części frontowych podłóg. Ręczniki – 4 obszary po 25 cm2.

Podczas pobierania wymazu należy zapisać w kolejności numer próbki oraz miejsce, w którym pobrano wymaz. Akt pobrania wymazu sporządza się w 2 egzemplarzach.

Czas dostawy - nie więcej niż 2 godziny. Jeżeli czas się wydłuży, dostawa w kontenerach termicznych.

Pobieranie próbek wody do badań mikrobiologicznych

Selekcja, konserwacja, przechowywanie i transport próbek wody przeprowadzana jest:

Według GOST R 53415-2009 „Woda. Pobieranie próbek do analizy mikrobiologicznej”;

Według GOST 31942-2012 „Woda. Pobieranie próbek do analizy mikrobiologicznej”;

Według GOST R 51592-2000 „Woda. Ogólne wymagania dotyczące pobierania próbek” cała woda jest wybierana i dostarczana do laboratorium mikrobiologicznego w celu zbadania;

Według GOST R 51593-2000 „Woda pitna. Pobieranie próbek” dotyczy wyłącznie wody wodociągowej pochodzącej ze scentralizowanych systemów zaopatrzenia w wodę;

Zgodnie z wymaganiami norm i innych dokumentów normatywnych dotyczących metod oznaczania;

Wskaźniki szczegółowe i przeznaczone dla niektórych rodzajów wody.

Na przykład pobieranie próbek wody ze scentralizowanych systemów zaopatrzenia w wodę pitną odbywa się zgodnie z trzema dokumentami regulacyjnymi:

- GOST R 51593-2000 „Woda pitna. Próbowanie",
- MUK 4.2.1018-01 „Analiza sanitarna i mikrobiologiczna wody pitnej.”

Warunki pobierania próbek wody do badań mikrobiologicznych powinny być zbliżone do aseptycznych, tj. nie zapomnij spalić kranu, spuść wodę z tego kranu na 10 minut i dopiero wtedy zbierz wodę do sterylnego pojemnika. Pojemnik otwiera się bezpośrednio przed pobraniem próbki poprzez zdjęcie korka wraz ze sterylną nakrętką. Podczas pobierania próbki korek i krawędzie pojemnika nie powinny niczego dotykać. Obecnie stosuje się jednorazowe worki do pobierania próbek wody z tabletką tiosiarczanu sodu lub bez niej. Nie płucz naczyń. Próbkę pobiera się bezpośrednio z kranu, bez węży gumowych, sieci rozprowadzających wodę i innych przystawek. W przypadku stałego przepływu wody przez kran do pobierania próbek pobieranie próbek odbywa się bez wstępnego odpalenia, bez zmiany ciśnienia wody i istniejącej konstrukcji (jeśli występują węże silikonowe lub gumowe).

Próbki wody ze scentralizowanych i niescentralizowanych źródeł zaopatrzenia w wodę pobierane są zgodnie z GOST R 51592-2000 „Woda. Ogólne wymagania dotyczące pobierania próbek.”

Wodę z niecki basenowej dobiera się według następujących dokumentów:

GOST R 51592-2000 „Woda. Ogólne wymagania dotyczące pobierania próbek”,
- SanPiN 2.1.2.1188-03 „Baseny. Wymagania higieniczne dotyczące projektu, działania i jakości wody. Kontrola jakości.”

Próbki wody do analizy pobiera się co najmniej w 2 punktach: z warstwy powierzchniowej o grubości 0,5–1,0 cm i z głębokości 25–30 cm od powierzchni lustra wody. Monitorowanie jakości wody w wannie basenowej według podstawowych wskaźników mikrobiologicznych należy przeprowadzać 2 razy w miesiącu.

Analizę próbki w laboratorium należy przeprowadzić możliwie jak najszybciej od momentu pobrania. W przypadku braku chłodzenia analizę przeprowadza się nie później niż 2 godziny po pobraniu próbki, a po schłodzeniu do temperatury 4-10˚ C okres przechowywania próbki wydłuża się do 6 godzin. Dlatego też próbki do laboratorium należy transportować w pojemnikach termicznych (unikać zamrażania, gdyż zamrożenie próbki zabija ponad 99% bakterii).

Ponieważ liczbę mikroorganizmów w próbce można zmniejszyć o połowę w czasie krótszym niż 20 minut, dzięki działaniu resztkowych ilości środków dezynfekcyjnych (chlor w ciągu kilku sekund), stosuje się je w pojemniku z tiosiarczanem sodu (w ilości 10 mg na 500 ml wody) do neutralizacji wody chlorowanej i bromowanej.

Liczbę próby ustala się w zależności od liczby wyznaczanych wskaźników i rodzaju analizy zgodnie z ND dotyczącą sposobu wyznaczania wskaźników. Przykładowo objętość próbki przy analizie wody wodociągowej i studziennej na obecność mikroorganizmów wskaźnikowych wynosi 350 ml wody, a dla mikroorganizmów wskaźnikowych i flory chorobotwórczej - 1350 ml, objętość próbek wody basenowej wynosi odpowiednio 500 ml i 1500 ml.

SanPiN 2.1.4.1116-02 „Woda pitna. Wymagania higieniczne dotyczące jakości wody pakowanej w opakowania. Kontrola jakości”, MU 2.1.4.1184-03 „Wytyczne dotyczące wdrażania i stosowania zasad i przepisów sanitarno-epidemiologicznych SanPiN 2.1.4.1116-02 „Woda pitna. Wymagania higieniczne dotyczące jakości wody pakowanej w opakowania. Kontrola jakości”

Wodę pitną pakowaną w pojemniki pobiera się w objętości 2,5 litra, ponieważ Samo oznaczenie Pseudomonas aeruginosa i colifagów wymaga 1,0 litra wody.

Pobieranie próbek gleby przeprowadza się zgodnie z GOST 17.4.3.01-83 „Ogólne wymagania dotyczące pobierania próbek gleby”, GOST 17.4.4.02-84 „Metody pobierania próbek i przygotowania próbek do analizy chemicznej, bakteriologicznej i helmintologicznej”.

Stanowisko badawcze to część obszaru badawczego charakteryzująca się podobnymi warunkami (topografia, jednorodność struktury gleby i szaty roślinnej, charakter użytkowania gospodarczego).

Miejsce badań powinno znajdować się w lokalizacji typowej dla obszaru badań. Jedna działka testowa o powierzchni 25 m jest ułożona na powierzchni 100 m2.

Próbka punktowa – materiał pobrany z jednego miejsca w horyzoncie lub z jednej warstwy profilu glebowego, typowy dla tego poziomu lub warstwy.

Próbki punktowe pobiera się na poletku próbnym z jednej lub kilku warstw lub horyzontów, stosując metodę obwiedni. Wykop dół o wymiarach 0,3 m x 0,3 m i głębokości 0,2 m. Powierzchnię jednej ze ścian wykopu czyści się sterylnym nożem. Następnie z tej ściany wycina się próbkę gleby, której wielkość jest określona przez daną próbkę, więc jeśli konieczne jest wybranie 200 g gleby, wielkość próbki wynosi 20cm x 3cm x 3cm, 500g - 20cm x 5cm x 3cm.

Próbki punktowe pobiera się za pomocą noża, szpatułki lub wiertarki do gleby.

Próbkę zbiorczą przygotowuje się poprzez zmieszanie próbek punktowych pobranych z jednego obszaru pobierania próbek.

Do analizy bakteriologicznej pobiera się 10 połączonych próbek z jednego miejsca pobrania. Każdą próbkę łączoną tworzą trzypunktowe próbki o masie od 200 do 250 g każda, wybrane warstwa po warstwie z głębokości od 0 do 5 cm, od 5 do 20 cm.

Aby zapobiec wtórnemu zanieczyszczeniu, próbki gleby przeznaczone do badań bakteriologicznych należy pobierać z zachowaniem zasad aseptyki: sterylnymi instrumentami, wymieszać na sterylnej powierzchni, umieścić w sterylnym pojemniku. Czas od pobrania próbek do rozpoczęcia badań nie powinien przekraczać 1 dnia.

Podczas monitorowania stanu sanitarnego gleb na terenach placówek dziecięcych i placów zabaw pobieranie próbek odbywa się oddzielnie od piaskownic i od terytorium ogólnego na głębokości 0–10 cm.

Z każdej piaskownicy pobierana jest jedna próbka łączna, złożona z 5 próbek punktowych. W razie potrzeby możliwe jest pobranie jednej próby łączonej ze wszystkich piaskownic każdej grupy wiekowej, składającej się z 8-10 prób punktowych.

Próbki gleby pobierane są albo z placów zabaw każdej grupy (jedna próbka składająca się z co najmniej pięciu próbek punktowych) albo jedna próbka łączna z całego obszaru obejmującego 10 punktów punktowych i należy wziąć pod uwagę najbardziej prawdopodobne miejsca skażenia gleby.

Podczas monitorowania gleb w obszarze punktowych źródeł zanieczyszczeń (szambo, kosze na śmieci itp.) Pola próbne o wymiarach nie większych niż 5 x 5 m układa się w różnych odległościach od źródła i w stosunkowo czystym miejscu (kontrolne ).

Przy badaniu zanieczyszczenia gleby przez autostrady komunikacyjne miejsca badawcze wyznacza się na pasach przydrożnych, biorąc pod uwagę ukształtowanie terenu, szatę roślinną, warunki meteorologiczne i hydrologiczne.

Próbki gleby pobiera się z wąskich pasów o długości 200–500 m w odległości 0–10, 10–50, 50–100 m od nawierzchni drogi. Jedna próbka mieszana składa się z 20-25 próbek punktowych pobranych z głębokości 0-10 cm.

Do oceny gleb na terenach rolniczych próbki gleby pobiera się 2 razy w roku (wiosna, jesień) z głębokości 0-25 cm. Na każde 0-15 ha przypada co najmniej 1 działka o powierzchni 100-200 m2, w zależności od ukształtowania terenu i warunków użytkowania terenu.

Aby przygotować średnią próbkę o objętości 0,5 kg, glebę wszystkich próbek z jednego obszaru wylewa się na sterylną, grubą kartkę papieru, dokładnie miesza sterylną szpatułką, usuwając kamienie i inne stałe przedmioty. Następnie glebę rozprowadza się na arkuszu równą cienką warstwą w kształcie kwadratu.

Glebę dzieli się na 4 trójkąty za pomocą przekątnych. Glebę z dwóch przeciwległych trójkątów odrzuca się, resztę ponownie miesza się, ponownie rozprowadza w cienkiej warstwie i dzieli przekątnymi, aż pozostanie około 0,5 kg gleby.

Następnie próbka dostarczana jest do laboratorium wraz z instrukcją i certyfikatem pobrania próbki.

rozmiar czcionki

METODY MIKROBIOLOGICZNEJ KONTROLI GLEBY – ZALECENIA METODOLOGICZNE (zatwierdzone przez Głównego Państwowego Lekarza Sanitarnego Federacji Rosyjskiej... Obowiązuje w 2018 roku

4. Pobieranie próbek do analizy bakteriologicznej

Kontrola zanieczyszczeń gleb na obszarach zaludnionych prowadzona jest z uwzględnieniem stref funkcjonalnych miasta. Miejsca poboru próbek są wstępnie oznaczone na mapie odzwierciedlającej strukturę krajobrazu miejskiego. Pobieranie próbek odbywa się zgodnie z GOST 17.4.4.01-83 „Ogólne wymagania dotyczące pobierania próbek gleby”; GOST 17.4.4.02-84 „Metody pobierania próbek i przygotowania próbek do analizy chemicznej, bakteriologicznej i helmintologicznej”. Sporządza się opis monitorowanego terytorium, wskazując adres, punkt poboru próbek, ogólną topografię dzielnicy, lokalizację punktów poboru próbek i źródła zanieczyszczeń, szatę roślinną, użytkowanie terenu, poziom wód gruntowych, rodzaj gleby i inne dane niezbędne do prawidłową ocenę i interpretację wyników badań próbek.

Pobieranie próbek do badań bakteriologicznych odbywa się co najmniej raz w roku w miejscach, w których mogą przebywać ludzie i zwierzęta oraz w miejscach, w których występuje zanieczyszczenie odpadami organicznymi. Badając dynamikę samooczyszczania gleby, pobieranie próbek odbywa się co tydzień przez pierwszy miesiąc, a następnie co miesiąc w okresie wegetacyjnym aż do zakończenia aktywnej fazy samooczyszczania.

Stanowisko badawcze to część obszaru badawczego, charakteryzująca się podobnymi warunkami (rzeźba terenu, jednorodność struktury gleby i pokrywy roślinnej, charakter użytkowania gospodarczego).

Miejsce badań powinno znajdować się w lokalizacji typowej dla obszaru badań. Na powierzchni 100 mkw. m, kładzie się jedno miejsce testowe o długości 25 m. Jeśli relief jest niejednorodny, miejsca wybiera się zgodnie z elementami reliefu.

Próbka punktowa – materiał pobrany z jednego miejsca w horyzoncie lub z jednej warstwy profilu glebowego, typowy dla tego poziomu lub warstwy.

Próbki punktowe pobiera się na poletku próbnym z jednej lub kilku warstw lub horyzontów, stosując metodę obwiedni. Wykopuje się dół o wymiarach 0,3 m x 0,3 m i głębokości 0,2 m. Powierzchnię jednej ze ścian wykopu czyści się sterylnym nożem. Następnie z tej ściany wycina się próbkę gleby, której wielkość jest określona przez daną próbkę, więc jeśli konieczne jest wybranie 200 g gleby, wielkość próbki wynosi 20 cm x 3 cm x 3 cm, 500 g - 20 cm x 5 cm x 3 cm.

Próbki punktowe pobiera się za pomocą noża, szpatułki lub wiertarki do gleby.

Próbkę zbiorczą przygotowuje się poprzez zmieszanie próbek punktowych pobranych z jednego obszaru pobierania próbek.

Do analizy bakteriologicznej pobiera się 10 połączonych próbek z jednego miejsca pobrania. Każdą próbkę łączoną tworzą trzypunktowe próbki o masie od 200 do 250 g każda, wybrane warstwa po warstwie z głębokości od 0 do 5 cm, od 5 cm do 20 cm.

Aby zapobiec wtórnemu zanieczyszczeniu, próbki gleby przeznaczone do badań bakteriologicznych należy pobierać z zachowaniem zasad aseptyki: pobierać sterylnymi narzędziami, wymieszać na sterylnej powierzchni, umieścić w sterylnym pojemniku. Czas od pobrania próbek do rozpoczęcia badań nie powinien przekraczać 1 dnia.

Podczas badania wpływu pestycydów i innych środków chemicznych na mikroflorę oraz procesów samooczyszczania w głębszych warstwach gleby, do pobierania próbek gleby o głębokości do 1 m pobiera się próbki gleby ze ściany wykopu za pomocą sterylnego instrumentu 10 cm.

W celu monitorowania stanu sanitarnego gleb w przedszkolach, szkołach i placówkach medycznych, na placach zabaw i terenach rekreacyjnych pobieranie próbek odbywa się co najmniej 2 razy w roku – wiosną i jesienią. Rozmiar obszaru testowego nie powinien być większy niż 5 x 5 m.

Podczas monitorowania stanu sanitarnego gleb na terenach placówek dziecięcych i placów zabaw pobieranie próbek odbywa się oddzielnie od piaskownic i od terytorium ogólnego na głębokości 0–10 cm.

Z każdej piaskownicy pobierana jest jedna próbka łączna, złożona z 5 próbek punktowych. W razie potrzeby istnieje możliwość pobrania jednej próby łączonej ze wszystkich piaskownic każdej grupy wiekowej, składającej się z 8 – 10 próbek punktowych.

Próbki gleby pobierane są albo z placów zabaw każdej grupy (jedna próbka składająca się z co najmniej pięciu próbek punktowych) albo jedna próbka łączna z całego obszaru obejmującego 10 punktów punktowych i należy wziąć pod uwagę najbardziej prawdopodobne miejsca skażenia gleby.

Podczas monitorowania gleb w obszarze punktowych źródeł zanieczyszczeń (szambo, wysypiska śmieci itp.) Pola próbne o wymiarach nie większych niż 5 x 5 m układa się w różnych odległościach od źródła i w stosunkowo czystym miejscu (kontrola ).

Przy badaniu zanieczyszczenia gleby przez autostrady komunikacyjne miejsca badawcze wyznacza się na pasach przydrożnych, biorąc pod uwagę ukształtowanie terenu, szatę roślinną, warunki meteorologiczne i hydrologiczne.

Próbki gleby pobiera się z wąskich pasów o długości 200 - 500 m w odległości 0 - 10, 10 - 50, 50 - 100 m od nawierzchni drogi. Jedna próbka mieszana składa się z 20 – 25 próbek punktowych pobranych z głębokości 0 – 10 cm.

Przy ocenie gleb na terenach rolniczych próbki gleby pobiera się 2 razy w roku (wiosną, jesienią) z głębokości 0–25 cm. Na każde 0–15 hektarów układa się co najmniej 1 stanowisko o powierzchni 100–200 m2. m w zależności od terenu i warunków użytkowania terenu.

W dużych miastach z licznymi źródłami zanieczyszczeń mapowanie geochemiczne przeprowadza się za pomocą sieci badawczej. Aby zidentyfikować ogniska skażenia, zaleca się gęstość pobierania próbek wynoszącą 1–5 próbek na 1 metr kwadratowy. km przy odległości między punktami poboru próbek wynoszącej 400–1000 m W celu dalszej identyfikacji terytorium o maksymalnym stopniu zanieczyszczenia sieć testową zagęszcza się do 25–30 próbek na 1 kwadrat. km przy odległości pomiędzy punktami poboru próbek około 200 m. Próby pobierane są z głębokości 0 – 5 cm.

Pobrane próbki muszą być ponumerowane i zarejestrowane w dzienniku, z podaniem następujących danych: numer seryjny i miejsce pobrania, ukształtowanie terenu, rodzaj gleby, przeznaczenie terenu, rodzaj zanieczyszczenia, data pobrania próbki.

Próbki muszą być opatrzone etykietą wskazującą miejsce i datę pobrania, numer przekroju gleby, różnicę gleby, horyzont i głębokość pobierania próbek oraz nazwisko badacza.