Voorbereiding van monsters voor microbiologische analyses. Voedsel- en smaakstoffen

1. De monsterverpakking wordt geïnspecteerd en er wordt vastgesteld dat wordt voldaan aan de inscriptie op de lithografische afdruk of op het etiket vermeld in het begeleidende document.

2. De verpakking met het monster wordt ontdaan van verontreinigingen. Als er hermetisch afgesloten productmonsters worden ontvangen voor analyse, controleer dan de dichtheid van de container. Hermetisch afgesloten glazen, metalen of polymeercontainers met het product worden gewassen met water en reinigingsmiddel, vervolgens gespoeld met schoon water en gedroogd. Niet-verzegelde verpakkingen met het product worden afgeveegd met een wattenstaafje bevochtigd met ethylalcohol.

3. Microbiologische analyse van productmonsters die er normaal uitzien, wordt uitgevoerd in een doos onder aseptische omstandigheden. De verpakking van een monster van een product dat er verdacht uitziet of bedorven is, wordt in een aparte ruimte geopend.

4. Voordat monsters met een bevroren product worden bereid, wordt het monster ontdooid bij een temperatuur van (4±2) o C. Het monster wordt direct na het ontdooien genomen, maar uiterlijk binnen 18 uur. Het is toegestaan ​​om een ​​productmonster te ontdooien bij een temperatuur van 18-20°C gedurende 1 uur. Productmonsters met een homogene consistentie mogen worden ontdooid in een thermostaat op 35°C, op voorwaarde dat volledige ontdooiing in maximaal 15 minuten wordt bereikt. .

5. Het pakket openen met een productmonster

5.1. Onmiddellijk voordat de verpakking wordt geopend met een monster van het product in de consumentencontainer, worden bulkproducten of producten in de vloeibare fase gemengd door de container 10 keer van de bodem naar het deksel te draaien of in een cirkelvormige beweging.

5.2. De verpakking met een monster van het product (behalve ingeblikt voedsel) wordt afgeveegd met een wattenstaafje gedrenkt in 70% ethylalcohol, waarna de alcohol wordt verwijderd door vrije verdamping. Vervolgens wordt de verpakking geopend, wordt de hals van de metalen of glazen potten gebakken en wordt de massa (volume) van het product genomen in de hoeveelheid die nodig is om een ​​of meerdere porties te bereiden.

5.3. De verpakking met het monster (zakken gemaakt van folie, polymere materialen of papier) wordt geopend op een plaats die vooraf is behandeld met een in alcohol gedrenkt wattenstaafje. Het openen van de verpakking met het productmonster wordt zodanig uitgevoerd dat de mogelijkheid van besmetting van het product en de omliggende voorwerpen wordt uitgesloten.

Het oppervlak van ingeblikt voedsel dat er normaal uitziet, wordt op een van de volgende manieren behandeld met ethylalcohol:

Het oppervlak van het deksel wordt afgeveegd met een alcoholdoekje, het wattenstaafje wordt op het oppervlak gelaten en in brand gestoken voordat het ingeblikte voedsel wordt geopend;

Rubberen doppen en kroondeksels, bekeliet- en plastic sluitingen worden op dezelfde manier behandeld, maar de tampon wordt niet in brand gestoken;

De metalen dop (uiteinde) wordt, afhankelijk van het doel van de analyse, 1-4 keer geopend of doorboord met een stomp in de directe omgeving van het brandende wattenstaafje. De gatgrootte (diameter of lengte) moet 1-3 cm zijn.

5.4. Geselecteerde monsters van het product worden onmiddellijk in voedingsmedia gezaaid of overgebracht naar een pepton-zoutoplossing om een ​​verdunning te bereiden.

Voordat flessen of tubes met schroefdoppen worden geopend, wordt de behandelde dop of bouchon losgeschroefd. De randen van de fles of het buismembraan worden verbrand in een brandervlam; het membraan wordt doorboord met een steriel scalpel.

Voordat een fles wordt geopend die is afgesloten met een kroon of een foliestop, wordt de sluiter in een brandervlam afgevuurd, wordt de stop verwijderd met een steriele sleutel en worden de randen van de fles opnieuw in een brandervlam afgevuurd.

Bij het openen van flessen met een rubberen sluiting wordt de met ethylalcohol behandelde sluiting verwijderd zonder voorafgaand bakken en worden de randen van de fles verbrand met een brandervlam.

5.5. Ingeblikt voedsel dat er niet goed uitziet, wordt op een metalen bakje geplaatst. Onmiddellijk voordat een monster van het product wordt geselecteerd, wordt het oppervlak van het deksel (uiteinde) behandeld op de manier zoals gespecificeerd in artikel 5.2, maar de ethylalcohol wordt niet in brand gestoken. Het behandelde deksel (of uiteinde) wordt afgedekt met een omgekeerde steriele metalen trechter, zodat de trechter het oppervlak volledig bedekt. Door de smalle opening van de trechter prikt u voorzichtig het deksel (uiteinde) met een steriele pons, waardoor een naaldgat ontstaat.

In plaats van een metalen trechter kan een plastic zak worden gebruikt. Na verwerking van het deksel (uiteinde) wordt het ingeblikte voedsel in een plastic zak geplaatst die vooraf is afgeveegd met ethylalcohol, zodat de onderkant van de zak het te openen oppervlak bedekt. De onderkant van de tas is stevig vastgebonden. Maak voorzichtig, met een lichte druk van de pons, tegelijkertijd een gat in het deksel van het blik en in de plastic zak die er strak tegenaan wordt gedrukt.

Nadat er geen gas en product meer uit de pot met het product komen, worden de trechter en de zak verwijderd, wordt het deksel opnieuw afgeveegd met een steriel wattenstaafje, wordt het gat groter gemaakt met een pons en wordt er onmiddellijk een monster van het product uit de pot genomen. pot om te zaaien of om de verdunningen ervan te bereiden.

6. Selectie van monsters en voorbereiding van de initiële verdunning

6.1 Van elk productmonster worden, afhankelijk van de te bepalen indicatoren, één of meerdere monsters geselecteerd voor het bereiden van verdunningen en/of het inzaaien in voedingsbodems.

6.2. Het gewicht (volume) van een monster dat bedoeld is om in voedingsbodems te worden gezaaid en/of om de verdunning ervan te bereiden, moet worden vastgelegd in de wettelijke en technische documentatie voor een specifiek type product of analysemethoden, maar ten minste 10±0,1 g (cm3) zijn.

6.3. Het te zaaien monster wordt onmiddellijk na opening van het productmonster geselecteerd op basis van gewicht of volumetrische methode. Het openen wordt uitgevoerd onder omstandigheden die besmetting van het product door micro-organismen uitsluiten, in de nabijheid van de brandervlam met behulp van steriele instrumenten.

6.4. Er wordt een monster van het product zo geselecteerd dat het alle componenten bevat en in dezelfde verhouding als in het geanalyseerde monster.

6.5. Om verdunningen van een afgewogen portie van het product te bereiden, wordt een pepton-zoutoplossing gebruikt. De relatie tussen de massa (volume) van een monster van het product en het volume van de pepton-zoutoplossing voor de initiële en daaropvolgende verdunningen is:

1: 9 – voor een 10-voudige verdunning (voor producten die een grote hoeveelheid vet bevatten zonder oppervlakteactieve stoffen 1:10);

1:5 - voor 6-voudige verdunning;

1:3 - voor viervoudige verdunning;

1:1 - voor tweevoudige verdunning.

Als het nodig is een monster van producten die een grote hoeveelheid vet bevatten te verdunnen, mogen oppervlakteactieve stoffen (natriumbicarbonaat, enz.) worden gebruikt die geen antimicrobiële activiteit hebben.

Om een ​​verdunning van een monster van producten met hoge osmotische druk te bereiden, is het toegestaan ​​pepton of gedestilleerd water te gebruiken.

6.6. De initiële verdunning van een monster van het product wordt bereid onder aseptische omstandigheden met behulp van een van de volgende methoden:

oplossende producten;

verdunningsproducten die een vloeibare fase hebben;

suspensie van poeders, pasta-achtige producten en aan het oppervlak verontreinigde productstukken; homogenisatie van vaste producten.

6.7. Monsters van vloeibare en stroperige producten worden genomen met een steriele pipet met een katoenen stop door de pipet in de diepte van het product te steken.

Het deel van het product dat op het oppervlak van de pipet achterblijft, mag naar de punt van de pipet stromen. De resulterende druppel wordt verwijderd door de binnenwand van de schaal of consumentencontainer boven het oppervlak van het product aan te raken.

Viskeuze producten worden met een steriel wattenstaafje van het oppervlak van de pipet verwijderd.

Een afgewogen portie van het product wordt overgebracht naar een houder met een pepton-zoutoplossing om de initiële verdunning te bereiden, zodat de pipet het oppervlak van de pepton-zoutoplossing niet raakt. Meng het product met een andere steriele pipet grondig met de pepton-zoutoplossing door het mengsel tien keer te vullen en uit te werpen.

Bij het werken met stroperige producten is het raadzaam deze snel te mengen met de pepton-zoutoplossing door meerdere glaskralen in een kom te plaatsen.

6.8. Het vloeibare product, verzadigd met kooldioxide (CO 2), wordt overgebracht naar een steriele erlenmeyer afgesloten met een katoenen stop of een andere houder en onder veelvuldig roeren in een cirkelvormige beweging verwarmd in een waterbad bij een temperatuur van 30 tot 37 ° C totdat er geen gasbellen meer vrijkomen.

Een deel van het productmonster wordt genomen en verwerkt volgens artikel 6.7.

6.9. Er wordt een monster van poedervormige of bulkproducten genomen met een steriele lepel of spatel op verschillende plaatsen van het product (indien nodig wordt vóór de bemonstering 2 cm van de bovenste laag van het product verwijderd met een steriele lepel), waarna het monster wordt overgebracht naar een vooraf gewogen steriele container met deksel en gewogen. Een pepton-zoutoplossing wordt aan het monster toegevoegd in de hoeveelheid die nodig is om de initiële verdunning te bereiden. Het mengsel wordt 25 keer geroerd of geschud in een cirkelvormige beweging met een straal van 30 cm totdat een homogene consistentie van het product is verkregen.

Als het poedervormige product niet in water wordt opgelost, laat men de resulterende suspensie, na het te mengen met de pepton-zoutoplossing, 10 minuten staan ​​en wordt opnieuw krachtig geschud gedurende 1 minuut.

6.10. Er wordt een monster genomen van waterzwellende producten en een eerste verdunning wordt bereid in overeenstemming met de vereisten van de wettelijke en technische documentatie voor een specifiek type product.

6.11. Van de vaste, in water oplosbare producten wordt na het pletten, malen of vermalen onder aseptische omstandigheden met een spatel of lepel een monster genomen en vervolgens verwerkt overeenkomstig artikel 6.9.

Een gewogen deel van de monsters van in water onoplosbare vaste producten wordt gehomogeniseerd in de gevallen gespecificeerd in de regelgevende en technische documentatie. Bij het homogeniseren van een product moet het totale aantal omwentelingen van de homogenisator 15-20 duizend zijn. Het aantal omwentelingen van de homogenisator mag niet minder zijn dan 8000 en meer dan 45.000 omwentelingen per minuut.

Het is toegestaan ​​een niet-gesteriliseerd product te homogeniseren door het te vermalen tot een homogene consistentie is bereikt in een steriele mortel onder aseptische omstandigheden.

6.12. Van de pasta-achtige producten wordt een monster genomen nadat deze grondig zijn gemengd met een lepel of glazen staaf, en vervolgens verwerkt volgens artikel 6.9.

6.13. Er wordt een monster vloeibare vetten genomen met een warme pipet die wordt verwarmd door flamberen. Nadat de pipet met het product is gevuld, wordt het resterende product met een steriel wattenstaafje van het oppervlak van de pipet verwijderd.

Het product uit de pipet wordt in een bakje met een ingeslepen glazen stop gedaan en verdund met de benodigde hoeveelheid pepton-zoutoplossing, verwarmd tot 40-45°C; bij het identificeren van psychrofiele micro-organismen mag de temperatuur niet hoger zijn dan 37°C. Het eventueel aan de pipet vastzittende vet wordt gespoeld met een pepton-zoutoplossing, die meerdere keren in en uit de pipet wordt gezogen.

6.14. Nadat het product met een mes of draad in meerdere delen is gesneden, wordt een monster van de vaste vetten genomen. Verwijder indien nodig de bovenste laag.

Een monster van het product wordt met een scalpel van het oppervlak van de secties op verschillende plaatsen genomen en overgebracht naar een gewogen container met deksel.

Een bepaalde massa van het monster wordt overgebracht naar een container met wijde hals en een geslepen glazen stop. Het resterende vet dat aan de wanden van de schaal kleeft, wordt in dezelfde kom gespoeld met een bepaalde hoeveelheid pepton-zoutoplossing, verwarmd tot 40-45°C, die aan de schaal wordt toegevoegd in de hoeveelheid die nodig is om de initiële verdunning te verkrijgen.

Van vaste vetten kan het monster op volume worden geselecteerd. Vetten worden gesmolten in een container met wijde hals in een waterbad bij een temperatuur van maximaal 45°C; bij het identificeren van psychrofiele micro-organismen mag de temperatuur niet hoger zijn dan 37 o C.

Na het mengen van het gesmolten vet wordt het met een warme pipet overgebracht naar een container met wijde hals en een deksel van gemalen glas, die de benodigde hoeveelheid pepton-zoutoplossing bevat om de initiële verdunning te bereiden. De pepton-zoutoplossing wordt voorverwarmd tot 40-45°C; bij het identificeren van psychrofiele micro-organismen tot 37°C.

6.15. Monsters van opgeklopte producten of een papperige consistentie die een grote hoeveelheid vet bevatten, worden, na mengen met een glazen staaf, met een lepel in een gewogen container genomen en een tot 40-45°C verwarmde pepton-zoutoplossing wordt toegevoegd in de hoeveelheid die nodig is om bereid de eerste verdunning voor.

6.16. Bepaling van microbiële besmetting van het oppervlak van productmonsters wordt uitgevoerd door spoelen met wattenstaafjes.

Een steriel wattenstaafje wordt bevochtigd met een pepton-zoutoplossing en daarmee op verschillende plaatsen op het oppervlak van verschillende stukken van het geanalyseerde product met een totale oppervlakte van 100 cm2 afgeveegd.

Het te analyseren oppervlak wordt gemeten met behulp van steriele sjablonen met gaten van de juiste grootte.

De tampon wordt in een houder geplaatst die ten minste 100 cm3 pepton-zoutoplossing bevat. De container wordt afgesloten met een rubberen stop en geschud totdat de tampons uiteenvallen in afzonderlijke vezels. De resulterende suspensie wordt beschouwd als de initiële verdunning.

7. Bereiding van tienvoudige verdunningen

7.1. De eerste tienvoudige verdunning van het monster is de eerste, de initiële verdunning wordt bereid in overeenstemming met paragraaf 6. Hieruit worden daaropvolgende verdunningen verkregen.

7.2. De daaropvolgende tweede verdunning wordt bereid uit één deel van de oorspronkelijke verdunning en negen delen pepton-zoutoplossing door in een reageerbuis te mengen.

Als er een pipet werd gebruikt om de initiële verdunning te mengen, voeg dan met dezelfde pipet 1 cm3 van de oorspronkelijke verdunning toe aan 9 cm3 pepton-zoutoplossing, zonder het oppervlak van de oplossing met de pipet aan te raken. De verdunning wordt met een andere pipet gemengd door de inhoud van de reageerbuis tien keer op te zuigen en uit te blazen.

7.3. De derde en daaropvolgende verdunningen worden op een vergelijkbare manier bereid.

7.4. Het interval tussen het bereiden van afgewogen porties van het product, het verdunnen ervan en het enten ervan in voedingsmedia mag niet langer zijn dan 30 minuten.

GOST 26669-85

INTERSTAATSSTANDAARD

VOEDSEL- EN SMAAKPRODUCTEN

BEREIDING VAN MONSTERS VOOR MICROBIOLOGISCHE
ANALYSE

Datum van introductie 01.07.86

Deze norm is van toepassing op voedingsmiddelen en smaakstoffen en specificeert de voorbereiding van monsters voor microbiologische analyses.

De in de standaard gebruikte termen en hun uitleg zijn aangegeven in de bijlage.

1. APPARATUUR, REAGENTIA EN MATERIALEN

membraanfiltratie-apparaat; gas- of alcoholbrander volgens GOST 25336;

metalen trechters; stomp;

sleutel voor het openen van flessen; blikopener;

schaar, scalpel, pincet volgens GOST 21241, spatel, lepel;

stencils (sjabloon); reageerbuisjes volgens GOST 25336;

* GOST R 51652-2000 is van kracht op het grondgebied van de Russische Federatie.

70%; plastic zakken; wasmiddel;

pepton voor bacteriologische doeleinden volgens GOST 13805.

Gereedschappen en het oppervlak van apparaten die in direct contact komen met het product moeten worden gesteriliseerd met behulp van een van de methoden gespecificeerd in GOST 26668.

1.2. Bereiding van pepton-zoutoplossing

De pepton-zoutoplossing wordt als volgt bereid: 8,5 g natriumchloride en 1,0 g pepton worden onder langzaam verwarmen opgelost in 1 dm3 gedestilleerd water. De resulterende oplossing wordt, indien nodig, gefiltreerd door een papieren filter, de pH wordt ingesteld op 7,0 ± 0,1, in kolven, reageerbuizen of andere containers gegoten, afgesloten en gesteriliseerd bij een temperatuur van (121 ± 1) °C gedurende 30 minuten .

De oplossing wordt op een donkere plaats bewaard bij een temperatuur van (4 ± 2) °C gedurende maximaal 30 dagen onder omstandigheden die verdamping van vocht voorkomen.

De temperatuur van de pepton-zoutoplossing moet overeenkomen met de temperatuur van het te analyseren product.

1.3. Bereiding van peptonwater

Peptonwater wordt op dezelfde manier bereid als een pepton-zoutoplossing zonder toevoeging van natriumchloride.

2. BEREIDING VAN MONSTERS VOOR ANALYSE

2.1. De monsterverpakking wordt geïnspecteerd en er wordt vastgesteld dat deze overeenkomt met de inscriptie op de lithografische afdruk of op het etiket vermeld in het begeleidende document.

2.3. Microbiologische analyse van productmonsters die er normaal uitzien, wordt onder aseptische omstandigheden in een doos uitgevoerd. De verpakking van een monster van een product dat er verdacht uitziet of bedorven is, wordt in een aparte ruimte geopend.

De boksvoorbereiding wordt beschreven in de bijlage.

2.2, 2.3. (Gewijzigde editie, amendement nr. 1).

2.4. Monsters met bevroren product worden ontdooid bij een temperatuur van (4 ± 2) °C voordat het monster wordt bereid. Het monster wordt onmiddellijk na het ontdooien genomen, maar uiterlijk 18 uur na het begin van het ontdooien.

Het is toegestaan ​​een productmonster gedurende 1 uur te ontdooien bij een temperatuur van 18 - 20 °C.

Productmonsters met een homogene consistentie mogen worden ontdooid in een thermostaat bij 35 °C, op voorwaarde dat het volledige ontdooien binnen maximaal 15 minuten plaatsvindt.

2.5. Het pakket openen met een monster van het product

2.5.1. Onmiddellijk voordat u de verpakking opent met een monster van het product in een consumentenverpakking, hetzij in bulk of in vloeibare fase, mengt u door de container 10 keer van de bodem naar het deksel te draaien of in een cirkelvormige beweging.

2.6.1. Van elk productmonster worden, afhankelijk van de te bepalen indicatoren, één of meerdere monsters geselecteerd voor het bereiden van verdunningen en/of het inzaaien in voedingsbodems.

2.6.2. Het gewicht (volume) van een monster dat bedoeld is om in voedingsmedia te worden gezaaid en/of om de verdunningen ervan te bereiden, moet worden vastgelegd in de wettelijke en technische documentatie voor een specifiek type product of analysemethode.

2.6.3. Het te zaaien monster wordt onmiddellijk na opening van het productmonster geselecteerd op basis van gewicht of volumetrische methode. Het openen wordt uitgevoerd onder omstandigheden die besmetting van het product door micro-organismen uitsluiten, in de nabijheid van de brandervlam met behulp van steriele instrumenten.

2.6.4. Er wordt een monster van het product zo geselecteerd dat het alle componenten bevat en in dezelfde verhouding als in het geanalyseerde monster.

2.6.5. Om verdunningen van een afgewogen portie van het product te bereiden, wordt een pepton-zoutoplossing gebruikt.

Het is toegestaan ​​om initiële verdunningen van producten met een massafractie NaCl van meer dan 5% te bereiden met behulp van peptonwater, en initiële verdunningen van vlees, vis en zuivelproducten - met behulp van zoutoplossing.

De massa (volume) van een monster van het product dat bestemd is voor de bereiding van de initiële verdunning of het homogenaat moet ten minste (10 ± 0,1) g/cm 3 bedragen.

De relatie tussen de massa (volume) van een monster van het product en het volume van de pepton-zoutoplossing voor de initiële en daaropvolgende verdunningen is:

1:9 - voor 10-voudige verdunning (voor producten die grote hoeveelheden vet bevatten zonder oppervlakteactieve stoffen 1:10);

1:5 - voor 6-voudige verdunning;

1:3 - voor viervoudige verdunning;

1:1 - voor tweevoudige verdunning.

Als het nodig is een monster van producten die een grote hoeveelheid vet bevatten te verdunnen, mogen oppervlakteactieve stoffen (natriumbicarbonaat, enz.) worden gebruikt die geen antimicrobiële activiteit hebben.

Om een ​​verdunning van een monster van producten met hoge osmotische druk te bereiden, is het toegestaan ​​pepton of gedestilleerd water te gebruiken.

(Gewijzigde editie, amendement nr. 1).

2.6.6. De initiële verdunning van een monster van het product wordt bereid onder aseptische omstandigheden met behulp van een van de volgende methoden:

oplossende producten;

verdunningsproducten die een vloeibare fase hebben;

suspensie van poeders, pasta-achtige producten en het oppervlak van microbieel verontreinigde productstukken;

homogenisatie van vaste producten.

Het deel van het product dat op het oppervlak van de pipet achterblijft, mag naar de punt van de pipet stromen. De resulterende druppel wordt verwijderd door de binnenwand van de schaal of consumentencontainer boven het oppervlak van het product aan te raken.

Viskeuze producten worden met een steriel wattenstaafje van het oppervlak van de pipet verwijderd.

Een afgewogen portie van het product wordt overgebracht naar een houder met een pepton-zoutoplossing om de initiële verdunning te bereiden, zodat de pipet het oppervlak van de pepton-zoutoplossing niet raakt. Meng het product met een andere steriele pipet grondig met de pepton-zoutoplossing door het mengsel tien keer te vullen en uit te werpen.

Bij het werken met stroperige producten is het raadzaam deze snel te mengen met de pepton-zoutoplossing door meerdere glaskralen in een bakje te plaatsen.

2.6.8. Het vloeibare product, verzadigd met kooldioxide (CO 2), wordt overgebracht naar een steriele erlenmeyer afgesloten met een katoenen stop of een andere houder en onder veelvuldig roeren in een cirkelvormige beweging verwarmd in een waterbad bij een temperatuur van 30 tot 37 ° C totdat er geen gasbellen meer vrijkomen.

Een deel van het productmonster wordt per artikel genomen en verwerkt.

Een gewogen deel van de monsters van in water onoplosbare vaste producten wordt gehomogeniseerd in de gevallen gespecificeerd in de regelgevende en technische documentatie. Bij het homogeniseren van een product mag het totale aantal omwentelingen van de homogenisator 15 - 20 duizend omwentelingen per minuut zijn.

Als tijdens het homogeniseren van het product een heterogene massa wordt verkregen, laat men deze gedurende 15 minuten bezinken en wordt het supernatant gebruikt voor het zaaien en (of) het bereiden van verdunningen.

Het is toegestaan ​​om een ​​niet-gesteriliseerd product te homogeniseren door het te malen tot een homogene consistentie is bereikt in een steriele mortel onder aseptische omstandigheden.

(Gewijzigde editie, amendement nr. 1).

2.6.12. Van de pasta-achtige producten wordt een monster genomen nadat deze grondig zijn gemengd met een lepel of glazen staaf, en vervolgens stapsgewijs verwerkt.

2.6.13. Er wordt een monster vloeibare vetten genomen met een warme pipet die wordt verwarmd door flamberen. Nadat de pipet met het product is gevuld, wordt het resterende product met een steriel wattenstaafje van het oppervlak van de pipet verwijderd.

Het product uit de pipet wordt in een bakje met een ingeslepen glazen stop gedaan en verdund met de benodigde hoeveelheid pepton-zoutoplossing, verwarmd tot 40 - 45 °C; bij het identificeren van psychrofiele micro-organismen mag de temperatuur niet hoger zijn dan 37 °C. Eventueel achtergebleven vet dat aan de pipet vastzit, wordt gespoeld met een pepton-zoutoplossing, die meerdere keren in en uit de pipet wordt gezogen.

2.6.14. Nadat het product met een mes of draad in verschillende delen is gesneden, wordt een monster van de vaste vetten genomen. Verwijder indien nodig de bovenste laag.

Een monster van het product wordt met een scalpel van het oppervlak van de secties op verschillende plaatsen genomen en overgebracht naar een gewogen container met deksel.

Een bepaalde massa van het monster wordt overgebracht naar een container met wijde hals en een geslepen glazen stop. Het resterende vet dat aan de wanden van de schaal kleeft, wordt in dezelfde kom gespoeld met een bepaalde hoeveelheid pepton-zoutoplossing, verwarmd tot 40 - 45 ° C, die aan de schaal wordt toegevoegd in de hoeveelheid die nodig is om de initiële verdunning te verkrijgen.

Van vaste vetten kan het monster op volume worden geselecteerd. Vetten worden gesmolten in een recipiënt met wijde hals in een waterbad bij een temperatuur van maximaal 45 °C; bij het identificeren van psychrofiele micro-organismen mag de temperatuur niet hoger zijn dan 37 °C.

Na het mengen van het gesmolten vet wordt het met een warme pipet overgebracht naar een container met wijde hals en een deksel van gemalen glas, die de benodigde hoeveelheid pepton-zoutoplossing bevat om de initiële verdunning te bereiden. De pepton-zoutoplossing wordt voorverwarmd tot 40 - 45 °C; bij het identificeren van psychrofiele micro-organismen tot 37 °C.

2.6.15 Na het mengen met een glazen staaf worden afgewogen porties van monsters van opgeklopte producten of papperige consistentie die een grote hoeveelheid vet bevatten met een lepel in een gewogen container gedaan en wordt een tot 40 - 45 °C verwarmde pepton-zoutoplossing toegevoegd in de hoeveelheid die nodig is om de initiële verdunning te bereiden.

2.6.16 Bepaling van microbiële besmetting van het oppervlak van productmonsters wordt uitgevoerd door spoelen met wattenstaafjes.

Een steriel wattenstaafje wordt bevochtigd met een pepton-zoutoplossing en daarmee op verschillende plaatsen op het oppervlak van verschillende stukken van het geanalyseerde product met een totale oppervlakte van 100 cm2 afgeveegd.

Het te analyseren oppervlak wordt gemeten met behulp van steriele sjablonen met gaten van de juiste grootte.

De tampon wordt in een reageerbuisje geplaatst met daarin 10 cm3 pepton-zoutoplossing. De inhoud van de buis wordt grondig gemengd met een pipet. De resulterende suspensie wordt beschouwd als de initiële verdunning.

(Gewijzigde editie, amendement nr. 1).

2.7. Bereiding van tienvoudige verdunningen

2.7.1. De eerste tienvoudige verdunning van het monster is de initiële verdunning die wordt bereid in overeenstemming met paragraaf. Daaruit worden daaropvolgende verdunningen verkregen.

2.7.2. De daaropvolgende tweede verdunning wordt bereid uit één deel van de oorspronkelijke verdunning en negen delen pepton-zoutoplossing door in een reageerbuis te mengen.

Als er een pipet werd gebruikt om de initiële verdunning te mengen, voeg dan met dezelfde pipet 1 cm3 van de oorspronkelijke verdunning toe aan 9 cm3 pepton-zoutoplossing, zonder het oppervlak van de oplossing met de pipet aan te raken. De verdunning wordt met een andere pipet gemengd door de inhoud van de reageerbuis tien keer op te zuigen en uit te blazen.

2.7.3. De derde en daaropvolgende verdunningen worden op een vergelijkbare manier bereid.

2.7.4. Het interval tussen het bereiden van afgewogen porties van het product, het verdunnen ervan en het enten ervan in voedingsmedia mag niet langer zijn dan 30 minuten.

BIJLAGE 1
Informatie

TERM GEBRUIKT IN DE STANDAARD EN UITLEG ERVAN

(Gewijzigde editie, amendement nr. 1).

BIJLAGE 2
Informatie

GEBREKEN VAN INGEBLIKTE CONSERVATIES

Het volgende wordt beschouwd als gebreken in een ingeblikt product:

tekenen van ontwikkeling van micro-organismen zichtbaar voor het blote oog: fermentatie, schimmel, slijm, enz.;

bezinksel op de bodem van de pot of op het grensvlak tussen het oppervlak van het product en de container (“ring”);

troebelheid van de vloeibare fase;

coagulatie;

verzuren;

vreemde geur en (of) smaak die niet kenmerkend is voor het product;

kleurverandering.

Als gebreken in het uiterlijk van containers met daarin verpakte producten worden beschouwd:

tekenen van lekkage die met het blote oog zichtbaar zijn: gaten, scheuren, vlekken of sporen van product dat uit het blik lekt;

potten met trillende uiteinden;

verkeerd ontworpen naad van blikjes (tongen, tanden, ondersnijding, valse naad, opgerolde naad);

roest, na verwijdering waarvan de schelpen achterblijven;

vervorming van het lichaam, de uiteinden of de langsnaad van blikjes in de vorm van scherpe randen en "vogels";

scheve deksels op glazen potten, ondersneden ribbels van deksels langs de opgerolde rand, uitstekende rubberen ring ("lus");

scheuren of afgebroken glas bij de naad, onvolledige plaatsing van de deksels ten opzichte van de hals van de pot;

vervorming (inkeping) van de deksels van glazen potten, waardoor de afdichtingsnaad werd geschonden;

een bol elastisch membraan (knop) op het deksel.

BIJLAGE 3
Informatie

BOKSEN VOORBEREIDING

Ingeblikt voedsel wordt geopend in een speciaal voor microbiologische analyse aangepaste opslagruimte. Er mogen geen oppervlakken in de box aanwezig zijn die niet toegankelijk zijn voor natte desinfectie en luchtbeweging veroorzaakt door tocht moet worden uitgesloten. Muren, vloeren en plafonds moeten worden bekleed met materiaal of geverfd met verf die bestand is tegen natte behandeling met ontsmettingsmiddelen. Om de lucht te steriliseren, is de doos uitgerust met ultraviolette lampen met een snelheid van 1,5 - 2,5 W per 1 m 3.

In de box mag alleen de microbioloog die de analyse uitvoert en indien nodig een assistent aanwezig zijn.

De doos moet een tafel en een kruk hebben. Er mogen geen andere onnodige items aanwezig zijn dan die welke nodig zijn voor de analyse van ingeblikt voedsel.

Op tafel moet staan:

alcohollamp of gasbrander;

een pot met een gemalen stop die alcohol bevat;

een pot met deksel met kant-en-klare, dichte steriele wattenstaafjes van 3 ´ 3 cm of wattenringen;

potten met een desinfecterende oplossing (laaghoogte 3 cm) voor het plaatsen van pipetten of buisjes die na analyse worden gebruikt;

een klein metalen of geëmailleerde bakje waarop de te analyseren potten worden geplaatst;

steriele pipetten of buisjes waarmee het monster wordt genomen.

Hulpapparatuur moet in de lade van de tafel worden opgeborgen: een pincet en een pons. De stoot moet de vorm hebben van een speer met een dwarsdoorsnede in de vorm van een ruit met diagonalen van 1 ´ 1,5 cm of met een dwarsdoorsnede in de vorm van een gelijkbenige driehoek.

Gebruik bij het openen van een groot aantal blikjes een pons die op een statief is gemonteerd. In dit geval wordt het openen uitgevoerd door met een hendel op de stempel op het deksel van de pot te drukken.

Voordat de pot wordt geopend, wordt de punch gevlamd in de vlam van de tampon.

De box wordt direct vóór de analyse (niet eerder dan 24 uur voor aanvang) en na afloop gewassen en gedesinfecteerd. Desinfectie wordt uitgevoerd door alle oppervlakken af ​​te vegen met chloor of andere ontsmettingsmiddelen volgens de instructies die voor elk medicijn gelden. 45 minuten voordat met de werkzaamheden in de box wordt begonnen, worden bacteriedodende lampen gedurende (30 ± 5) minuten ingeschakeld.

Momenteel worden laminaire stromingskappen (beschermende ultraschone luchtcabines) gebruikt voor microbiologische analyses. Laminaire stroomkasten worden geproduceerd door de medische apparatuurfabriek "Laminar" in Uzhgorod, dozen van het merk BPV 1200 worden geproduceerd in Hongarije, dozen van het merk TVG-S II 1.14.1 worden geproduceerd door Babcock - BSH (Duitsland).

BIJLAGEN 2, 3. (Aanvullend geïntroduceerd, amendement nr. 1).

INFORMATIEGEGEVENS

1. ONTWIKKELD EN GEÏNTEGREERD door het Staats Agro-Industrieel Comité van de USSR

2. GOEDGEKEURD EN IN WERKING GEDAAN bij resolutie van het Staatscomité voor Normen van de USSR van 4 december 1985 nr. 3810

3. De standaard voldoet volledig aan ST SEV 3014-81

4. Er zijn internationale normen in de norm opgenomen: ISO 6887-83 (E) en ISO 7218-85

5. IN PLAATS VAN GOST 10444.0-75

6. REFERENTIE REGELGEVENDE EN TECHNISCHE DOCUMENTEN

pagina 1

pagina 2

pagina 3

pagina 4

pagina 5

pagina 6

pagina 7

pagina 8

pagina 9

pagina 10

INTERSTAATSSTANDAARD

VOEDSEL- EN SMAAKPRODUCTEN

BEREIDING VAN MONSTERS VOOR MICROBIOLOGISCHE
ANALYSE

Datum van introductie 01-07-1986

Deze norm is van toepassing op voedingsmiddelen en smaakstoffen en specificeert de voorbereiding van monsters voor microbiologische analyses.

De in de standaard gebruikte termen en hun uitleg zijn gespecificeerd in bijlage 1.

1. APPARATUUR, REAGENTIA EN MATERIALEN

1.1. Bij het voorbereiden van monsters voor analyse worden de volgende apparatuur, reagentia en materialen gebruikt:

waterbad;

homogenisator, laboratoriummixer of porseleinen mortel volgens GOST 9147;

membraanfiltratie-apparaat; gas- of alcoholbrander volgens GOST 25336;

metalen trechters; stomp;

sleutel voor het openen van flessen; blikopener;

schaar, scalpel, pincet volgens GOST 21241, spatel, lepel;

stencils (sjabloon); reageerbuisjes volgens GOST 25336;

* GOST R 51652-2000 is van kracht op het grondgebied van de Russische Federatie.

70%; plastic zakken; wasmiddel;

pepton voor bacteriologische doeleinden volgens GOST 13805.

Gereedschappen en het oppervlak van apparaten die in direct contact komen met het product moeten worden gesteriliseerd met behulp van een van de methoden gespecificeerd in GOST 26668.

1.2. Bereiding van pepton-zoutoplossing

De pepton-zoutoplossing wordt als volgt bereid: 8,5 g natriumchloride en 1,0 g pepton worden onder langzaam verwarmen opgelost in 1 dm3 gedestilleerd water. De resulterende oplossing wordt, indien nodig, gefiltreerd door een papieren filter, de pH wordt ingesteld op 7,0 ± 0,1, in kolven, reageerbuizen of andere containers gegoten, afgesloten en gesteriliseerd bij een temperatuur van (121 ± 1) °C gedurende 30 minuten .

De oplossing wordt op een donkere plaats bewaard bij een temperatuur van (4 ± 2) °C gedurende maximaal 30 dagen onder omstandigheden die verdamping van vocht voorkomen.

De temperatuur van de pepton-zoutoplossing moet overeenkomen met de temperatuur van het te analyseren product.

1.3. Bereiding van peptonwater

Peptonwater wordt op dezelfde manier bereid als een pepton-zoutoplossing zonder toevoeging van natriumchloride.

2. BEREIDING VAN MONSTERS VOOR ANALYSE

2.1. De monsterverpakking wordt geïnspecteerd en er wordt vastgesteld dat deze overeenkomt met de inscriptie op de lithografische afdruk of op het etiket vermeld in het begeleidende document.

2.2. Het monsterpakket wordt ontdaan van vervuiling. Als er hermetisch afgesloten productmonsters worden ontvangen voor analyse, controleer dan de dichtheid van de container. De dichtheid van ingeblikt voedsel wordt bepaald volgens GOST 8756.18, de dichtheid van polymeercontainers met een product, evenals ingeblikt voedsel verzegeld met deksels met een elastisch membraan (knop) - visueel. Het oppervlak van het elastische membraan moet naar binnen hol zijn. Hermetisch afgesloten glazen, metalen of polymeercontainers met het product worden gewassen met water en reinigingsmiddel, vervolgens gespoeld met schoon water en gedroogd. Niet-verzegelde verpakkingen met het product worden afgeveegd met een wattenstaafje bevochtigd met ethylalcohol.

Ingeblikt voedsel wordt onmiddellijk vóór de microbiologische analyse op de thermostaat gezet.

De volgende ingeblikte voedingsmiddelen zijn onderhevig aan thermostatisering:

hermetisch afgesloten, uiterlijk zonder gebreken, bestemd voor het bepalen van de industriële steriliteit van een ingeblikt product en de microbiologische stabiliteit van ingeblikt voedsel;

met trillende uiteinden en crackers in hermetisch afgesloten containers, ontworpen om de oorzaken van deze defecten te identificeren.

Ingeblikt voedsel dat is ontworpen om botulinumtoxinen erin te detecteren, gebombardeerd, met tekenen van microbiologisch bederf en niet hermetisch afgesloten, is niet onderhevig aan thermostatisering.

Om de vitale activiteit van mesofiele aerobe, facultatief anaerobe en anaerobe micro-organismen aan te tonen, wordt ingeblikt voedsel gedurende ten minste 5 dagen op een temperatuur van 30 - 37 ° C gehouden in containers met een capaciteit tot en met 1 dm 3 , in containers met een capaciteit van meer dan 5 dagen. dan 1 dm 3 - gedurende minimaal 7 dagen.

Om de vitale activiteit van thermofiele aerobe, facultatieve anaerobe en anaerobe micro-organismen aan te tonen, wordt ingeblikt voedsel in containers van welke capaciteit dan ook gedurende ten minste 3 dagen op een temperatuur van 55 - 62 ° C gehouden. Tijdens het thermostatiseren wordt ingeblikt voedsel dagelijks geïnspecteerd. Ingeblikte goederen met containerdefecten worden na detectie onmiddellijk uit de thermostaat verwijderd en 24 uur bij kamertemperatuur bewaard, waarna de staat van de container en, indien mogelijk, het uiterlijk van het product wordt genoteerd. Ingeblikt voedsel in containers die na afkoeling bij kamertemperatuur een normaal uiterlijk krijgen, worden als defectvrij beschouwd en het thermostatiseren gaat door.

Nadat u het ingeblikte voedsel op de thermostaat heeft gezet en het gedurende 24 uur tot kamertemperatuur heeft afgekoeld, noteert u de staat van de verpakking en, indien mogelijk, het uiterlijk van het product.

Defecten van ingeblikt voedsel worden gegeven in bijlage 2.

2.3. Microbiologische analyse van productmonsters die er normaal uitzien, wordt onder aseptische omstandigheden in een doos uitgevoerd. De verpakking van een monster van een product dat er verdacht uitziet of bedorven is, wordt in een aparte ruimte geopend.

Het voorbereiden van de doos wordt beschreven in bijlage 3.

2.2, 2.3. (Gewijzigde editie, amendement nr. 1).

2.4. Monsters met bevroren product worden ontdooid bij een temperatuur van (4 ± 2) °C voordat het monster wordt bereid. Het monster wordt onmiddellijk na het ontdooien genomen, maar uiterlijk 18 uur na het begin van het ontdooien.

Het is toegestaan ​​een productmonster gedurende 1 uur te ontdooien bij een temperatuur van 18 - 20 °C.

Productmonsters met een homogene consistentie mogen worden ontdooid in een thermostaat bij 35 °C, op voorwaarde dat het volledige ontdooien binnen maximaal 15 minuten plaatsvindt.

2.5. Het pakket openen met een monster van het product

2.5.1. Onmiddellijk voordat u de verpakking opent met een monster van het product in een consumentenverpakking, hetzij in bulk of in vloeibare fase, mengt u door de container 10 keer van de bodem naar het deksel te draaien of in een cirkelvormige beweging.

2.5.2. De verpakking met een monster van het product (behalve ingeblikt voedsel) wordt afgeveegd met een wattenstaafje gedrenkt in 70% ethylalcohol, de alcohol wordt verbrand of verwijderd door vrije verdamping. Vervolgens wordt de verpakking geopend, wordt de hals van de metalen of glazen potten gebakken en wordt de massa (volume) van het product genomen in de hoeveelheid die nodig is om een ​​of meer porties te bereiden.

2.5.3. De verpakking met het monster (zakken gemaakt van folie, polymeermateriaal of papier) wordt geopend op een plaats die eerder is behandeld met een in alcohol gedrenkt wattenstaafje. Het openen van de verpakking met het productmonster wordt zodanig uitgevoerd dat de mogelijkheid van besmetting van het product, de omringende voorwerpen en de omgeving wordt uitgesloten.

2.5.4. Voordat het wordt geopend, wordt het oppervlak van ingeblikt voedsel dat er normaal uitziet, op een van de volgende manieren behandeld met ethylalcohol:

Bij glazen potten wordt het deksel behandeld; bij metalen potten wordt het uiteinde tegenover het gemarkeerde verwerkt.

Het oppervlak van het deksel wordt afgeveegd met een alcoholdoekje, het wattenstaafje wordt op het oppervlak gelaten en aangestoken voordat het ingeblikte voedsel wordt geopend;

rubberen doppen en kroondeksels, bekeliet- en plastic sluitingen worden ook behandeld, maar de tampon wordt niet ontstoken;

De metalen dop (uiteinde) wordt, afhankelijk van het doel van de analyse, 1 - 4 keer geopend of doorboord met een stomp in de directe omgeving van het brandende wattenstaafje. De gatgrootte (diameter of lengte) moet 1 - 3 cm zijn.

Geselecteerde monsters van het product worden onmiddellijk in voedingsmedia gezaaid of overgebracht naar een pepton-zoutoplossing om een ​​verdunning te bereiden;

Voordat flessen of tubes met schroefdoppen worden geopend, wordt de behandelde dop of bouchon losgeschroefd. De randen van de fles of het buismembraan worden verbrand in een brandervlam; het membraan wordt doorboord met een steriel scalpel.

Voordat een fles wordt geopend die is afgesloten met een kroon of een foliestop, wordt de sluiter in een brandervlam afgevuurd, wordt de stop verwijderd met een steriele sleutel en worden de randen van de fles opnieuw in een brandervlam afgevuurd.

Bij het openen van flessen met een rubberen sluiting wordt de met ethylalcohol behandelde sluiting verwijderd zonder voorafgaand bakken en worden de randen van de fles verbrand met een brandervlam.

2.5.5. Ingeblikt voedsel dat er niet goed uitziet, wordt op een metalen bakje geplaatst. Onmiddellijk voordat een monster van het product wordt geselecteerd, wordt het oppervlak van het deksel (uiteinde) behandeld op de manier gespecificeerd in artikel 2.5.2, maar de ethylalcohol wordt niet in brand gestoken. Het behandelde deksel (of uiteinde) wordt afgedekt met een omgekeerde steriele metalen trechter, zodat de trechter het oppervlak volledig bedekt. Door de smalle opening van de trechter prikt u voorzichtig het deksel (uiteinde) met een steriele pons, waardoor een naaldgat ontstaat.

In plaats van een metalen trechter kan een plastic zak worden gebruikt. Na verwerking van het deksel (uiteinde) wordt het ingeblikte voedsel in een plastic zak geplaatst die vooraf is afgeveegd met ethylalcohol, zodat de onderkant van de zak het te openen oppervlak bedekt. De onderkant van de tas is stevig vastgebonden. Maak voorzichtig, met een lichte druk van de pons, tegelijkertijd een gat in het deksel van het blik en in de plastic zak die er strak tegenaan wordt gedrukt.

Nadat er geen gas en product meer uit de pot met het product komen, worden de trechter en de zak verwijderd, wordt het deksel opnieuw afgeveegd met een steriel wattenstaafje, wordt het gat groter gemaakt met een pons en wordt er onmiddellijk een monster van het product uit de pot genomen. pot om te zaaien of om de verdunningen ervan te bereiden.

2.6. Selectie van monsters en voorbereiding van de initiële verdunning

2.6.1. Van elk productmonster worden, afhankelijk van de te bepalen indicatoren, één of meerdere monsters geselecteerd voor het bereiden van verdunningen en/of het inzaaien in voedingsbodems.

2.6.2. Het gewicht (volume) van een monster dat bedoeld is om in voedingsmedia te worden gezaaid en/of om de verdunningen ervan te bereiden, moet worden vastgelegd in de wettelijke en technische documentatie voor een specifiek type product of analysemethode.

2.6.3. Het te zaaien monster wordt onmiddellijk na opening van het productmonster geselecteerd op basis van gewicht of volumetrische methode. Het openen wordt uitgevoerd onder omstandigheden die besmetting van het product door micro-organismen uitsluiten, in de nabijheid van de brandervlam met behulp van steriele instrumenten.

2.6.4. Er wordt een monster van het product zo geselecteerd dat het alle componenten bevat en in dezelfde verhouding als in het geanalyseerde monster.

2.6.5. Om verdunningen van een afgewogen portie van het product te bereiden, wordt een pepton-zoutoplossing gebruikt.

Het is toegestaan ​​om initiële verdunningen van producten met een massafractie NaCl van meer dan 5% te bereiden met behulp van peptonwater, en initiële verdunningen van vlees, vis en zuivelproducten - met behulp van zoutoplossing.

De massa (volume) van een monster van het product dat bestemd is voor de bereiding van de initiële verdunning of het homogenaat moet ten minste (10 ± 0,1) g/cm 3 bedragen.

De relatie tussen de massa (volume) van een monster van het product en het volume van de pepton-zoutoplossing voor de initiële en daaropvolgende verdunningen is:

1:9 - voor 10-voudige verdunning (voor producten die grote hoeveelheden vet bevatten zonder oppervlakteactieve stoffen 1:10);

1:5 - voor 6-voudige verdunning;

1:3 - voor viervoudige verdunning;

1:1 - voor tweevoudige verdunning.

Als het nodig is een monster van producten die een grote hoeveelheid vet bevatten te verdunnen, mogen oppervlakteactieve stoffen (natriumbicarbonaat, enz.) worden gebruikt die geen antimicrobiële activiteit hebben.

Om een ​​verdunning van een monster van producten met hoge osmotische druk te bereiden, is het toegestaan ​​pepton of gedestilleerd water te gebruiken.

(Gewijzigde editie, amendement nr. 1).

2.6.6. De initiële verdunning van een monster van het product wordt bereid onder aseptische omstandigheden met behulp van een van de volgende methoden:

oplossende producten;

verdunningsproducten die een vloeibare fase hebben;

suspensie van poeders, pasta-achtige producten en het oppervlak van microbieel verontreinigde productstukken;

homogenisatie van vaste producten.

2.6.7. Monsters van vloeibare en stroperige producten worden genomen met een steriele pipet met een katoenen stop door de pipet in de diepte van het product te steken.

Het deel van het product dat op het oppervlak van de pipet achterblijft, mag naar de punt van de pipet stromen. De resulterende druppel wordt verwijderd door de binnenwand van de schaal of consumentencontainer boven het oppervlak van het product aan te raken.

Viskeuze producten worden met een steriel wattenstaafje van het oppervlak van de pipet verwijderd.

Een afgewogen portie van het product wordt overgebracht naar een houder met een pepton-zoutoplossing om de initiële verdunning te bereiden, zodat de pipet het oppervlak van de pepton-zoutoplossing niet raakt. Meng het product met een andere steriele pipet grondig met de pepton-zoutoplossing door het mengsel tien keer te vullen en uit te werpen.

Bij het werken met stroperige producten is het raadzaam deze snel te mengen met de pepton-zoutoplossing door meerdere glaskralen in een bakje te plaatsen.

2.6.8. Het vloeibare product, verzadigd met kooldioxide (CO 2), wordt overgebracht naar een steriele erlenmeyer afgesloten met een katoenen stop of een andere houder en onder veelvuldig roeren in een cirkelvormige beweging verwarmd in een waterbad bij een temperatuur van 30 tot 37 ° C totdat er geen gasbellen meer vrijkomen.

Een deel van het productmonster wordt genomen en verwerkt volgens artikel 2.6.7.

2.6.9. Er wordt een monster van poedervormige of bulkproducten genomen met een steriele lepel of spatel op verschillende plaatsen van het product (indien nodig wordt vóór de bemonstering 2 cm van de bovenste laag van het product verwijderd met een steriele lepel), waarna het monster wordt overgebracht naar een vooraf gewogen steriele container met deksel en gewogen. Een pepton-zoutoplossing wordt aan het monster toegevoegd in de hoeveelheid die nodig is om de initiële verdunning te bereiden. Het mengsel wordt 25 keer geroerd of geschud in een cirkelvormige beweging met een straal van 30 cm totdat een homogene consistentie van het product is verkregen.

Als het poedervormige product niet oplosbaar is in water, laat men de resulterende suspensie, na het te mengen met de pepton-zoutoplossing, gedurende 10 minuten staan ​​en wordt opnieuw gedurende 1 minuut krachtig geschud.

2.6.10. Er wordt een monster genomen van waterzwellende producten en een eerste verdunning wordt bereid in overeenstemming met de vereisten van de wettelijke en technische documentatie voor een specifiek type product.

2.6.11. Van de vaste, in water oplosbare producten wordt met een spatel of lepel een monster genomen, nadat ze onder aseptische omstandigheden zijn fijngemaakt, vermalen of vermalen, en vervolgens verwerkt met t.s. 2.6.9.

Een gewogen deel van de monsters van in water onoplosbare vaste producten wordt gehomogeniseerd in de gevallen gespecificeerd in de regelgevende en technische documentatie. Bij het homogeniseren van een product mag het totale aantal omwentelingen van de homogenisator 15 - 20 duizend omwentelingen per minuut zijn.

Als tijdens het homogeniseren van het product een heterogene massa wordt verkregen, laat men deze gedurende 15 minuten bezinken en wordt het supernatant gebruikt voor het zaaien en (of) het bereiden van verdunningen.

Het is toegestaan ​​om een ​​niet-gesteriliseerd product te homogeniseren door het te malen tot een homogene consistentie is bereikt in een steriele mortel onder aseptische omstandigheden.

(Gewijzigde editie, amendement nr. 1).

2.6.12. Van de pasta-achtige producten wordt een monster genomen nadat deze grondig zijn gemengd met een lepel of glazen staaf, en vervolgens verwerkt volgens artikel 2.6.9.

2.6.13. Er wordt een monster vloeibare vetten genomen met een warme pipet die wordt verwarmd door flamberen. Nadat de pipet met het product is gevuld, wordt het resterende product met een steriel wattenstaafje van het oppervlak van de pipet verwijderd.

Het product uit de pipet wordt in een bakje met een ingeslepen glazen stop gedaan en verdund met de benodigde hoeveelheid pepton-zoutoplossing, verwarmd tot 40 - 45 °C; bij het identificeren van psychrofiele micro-organismen mag de temperatuur niet hoger zijn dan 37 °C. Eventueel achtergebleven vet dat aan de pipet vastzit, wordt gespoeld met een pepton-zoutoplossing, die meerdere keren in en uit de pipet wordt gezogen.

2.6.14. Nadat het product met een mes of draad in verschillende delen is gesneden, wordt een monster van de vaste vetten genomen. Verwijder indien nodig de bovenste laag.

Een monster van het product wordt met een scalpel van het oppervlak van de secties op verschillende plaatsen genomen en overgebracht naar een gewogen container met deksel.

Een bepaalde massa van het monster wordt overgebracht naar een container met wijde hals en een geslepen glazen stop. Het resterende vet dat aan de wanden van de schaal kleeft, wordt in dezelfde kom gespoeld met een bepaalde hoeveelheid pepton-zoutoplossing, verwarmd tot 40 - 45 ° C, die aan de schaal wordt toegevoegd in de hoeveelheid die nodig is om de initiële verdunning te verkrijgen.

Van vaste vetten kan het monster op volume worden geselecteerd. Vetten worden gesmolten in een recipiënt met wijde hals in een waterbad bij een temperatuur van maximaal 45 °C; bij het identificeren van psychrofiele micro-organismen mag de temperatuur niet hoger zijn dan 37 °C.

Na het mengen van het gesmolten vet wordt het met een warme pipet overgebracht naar een container met wijde hals en een deksel van gemalen glas, die de benodigde hoeveelheid pepton-zoutoplossing bevat om de initiële verdunning te bereiden. De pepton-zoutoplossing wordt voorverwarmd tot 40 - 45 °C; bij het identificeren van psychrofiele micro-organismen tot 37 °C.

2.6.15 Na het mengen met een glazen staaf worden afgewogen porties van monsters van opgeklopte producten of papperige consistentie die een grote hoeveelheid vet bevatten met een lepel in een gewogen container gedaan en wordt een tot 40 - 45 °C verwarmde pepton-zoutoplossing toegevoegd in de hoeveelheid die nodig is om de initiële verdunning te bereiden.

2.6.16 Bepaling van microbiële besmetting van het oppervlak van productmonsters wordt uitgevoerd door spoelen met wattenstaafjes.

Een steriel wattenstaafje wordt bevochtigd met een pepton-zoutoplossing en daarmee op verschillende plaatsen op het oppervlak van verschillende stukken van het geanalyseerde product met een totale oppervlakte van 100 cm2 afgeveegd.

Het te analyseren oppervlak wordt gemeten met behulp van steriele sjablonen met gaten van de juiste grootte.

De tampon wordt in een reageerbuisje geplaatst met daarin 10 cm3 pepton-zoutoplossing. De inhoud van de buis wordt grondig gemengd met een pipet. De resulterende suspensie wordt beschouwd als de initiële verdunning.

(Gewijzigde editie, amendement nr. 1).

2.7. Bereiding van tienvoudige verdunningen

2.7.1. De eerste tienvoudige verdunning van het monster is de initiële verdunning die wordt bereid overeenkomstig punt 2.6. Daaruit worden daaropvolgende verdunningen verkregen.

2.7.2. De daaropvolgende tweede verdunning wordt bereid uit één deel van de oorspronkelijke verdunning en negen delen pepton-zoutoplossing door in een reageerbuis te mengen.

Als er een pipet werd gebruikt om de initiële verdunning te mengen, voeg dan met dezelfde pipet 1 cm3 van de oorspronkelijke verdunning toe aan 9 cm3 pepton-zoutoplossing, zonder het oppervlak van de oplossing met de pipet aan te raken. De verdunning wordt met een andere pipet gemengd door de inhoud van de reageerbuis tien keer op te zuigen en uit te blazen.

2.7.3. De derde en daaropvolgende verdunningen worden op een vergelijkbare manier bereid.

2.7.4. Het interval tussen het bereiden van afgewogen porties van het product, het verdunnen ervan en het enten ervan in voedingsmedia mag niet langer zijn dan 30 minuten.

BIJLAGE 1
Informatie

TERM GEBRUIKT IN DE STANDAARD EN UITLEG ERVAN

(Gewijzigde editie, amendement nr. 1).

BIJLAGE 2
Informatie

GEBREKEN VAN INGEBLIKTE CONSERVATIES

Het volgende wordt beschouwd als gebreken in een ingeblikt product:

tekenen van ontwikkeling van micro-organismen zichtbaar voor het blote oog: fermentatie, schimmel, slijm, enz.;

bezinksel op de bodem van de pot of op het grensvlak tussen het oppervlak van het product en de container (“ring”);

troebelheid van de vloeibare fase;

coagulatie;

verzuren;

vreemde geur en (of) smaak die niet kenmerkend is voor het product;

kleurverandering.

Als gebreken in het uiterlijk van containers met daarin verpakte producten worden beschouwd:

tekenen van lekkage die met het blote oog zichtbaar zijn: gaten, scheuren, vlekken of sporen van product dat uit het blik lekt;

potten met trillende uiteinden;

verkeerd ontworpen naad van blikjes (tongen, tanden, ondersnijding, valse naad, opgerolde naad);

roest, na verwijdering waarvan de schelpen achterblijven;

vervorming van het lichaam, de uiteinden of de langsnaad van blikjes in de vorm van scherpe randen en "vogels";

scheve deksels op glazen potten, ondersneden ribbels van deksels langs de opgerolde rand, uitstekende rubberen ring ("lus");

scheuren of afgebroken glas bij de naad, onvolledige plaatsing van de deksels ten opzichte van de hals van de pot;

vervorming (inkeping) van de deksels van glazen potten, waardoor de afdichtingsnaad werd geschonden;

een bol elastisch membraan (knop) op het deksel.

BIJLAGE 3
Informatie

BOKSEN VOORBEREIDING

Ingeblikt voedsel wordt geopend in een speciaal voor microbiologische analyse aangepaste opslagruimte. Er mogen geen oppervlakken in de box aanwezig zijn die niet toegankelijk zijn voor natte desinfectie en luchtbeweging veroorzaakt door tocht moet worden uitgesloten. Muren, vloeren en plafonds moeten worden bekleed met materiaal of geverfd met verf die bestand is tegen natte behandeling met ontsmettingsmiddelen. Om de lucht te steriliseren, is de doos uitgerust met ultraviolette lampen met een snelheid van 1,5 - 2,5 W per 1 m 3.

In de box mag alleen de microbioloog die de analyse uitvoert en indien nodig een assistent aanwezig zijn.

De doos moet een tafel en een kruk hebben. Er mogen geen andere onnodige items aanwezig zijn dan die welke nodig zijn voor de analyse van ingeblikt voedsel.

Op tafel moet staan:

alcohollamp of gasbrander;

een pot met een gemalen stop die alcohol bevat;

een pot met deksel met kant-en-klare, dichte steriele wattenstaafjes van 3 ´ 3 cm of wattenringen;

potten met een desinfecterende oplossing (laaghoogte 3 cm) voor het plaatsen van pipetten of buisjes die na analyse worden gebruikt;

een klein metalen of geëmailleerde bakje waarop de te analyseren potten worden geplaatst;

steriele pipetten of buisjes waarmee het monster wordt genomen.

Hulpapparatuur moet in de lade van de tafel worden opgeborgen: een pincet en een pons. De stoot moet de vorm hebben van een speer met een dwarsdoorsnede in de vorm van een ruit met diagonalen van 1 ´ 1,5 cm of met een dwarsdoorsnede in de vorm van een gelijkbenige driehoek.

Gebruik bij het openen van een groot aantal blikjes een pons die op een statief is gemonteerd. In dit geval wordt het openen uitgevoerd door met een hendel op de stempel op het deksel van de pot te drukken.

Voordat de pot wordt geopend, wordt de punch gevlamd in de vlam van de tampon.

De box wordt direct vóór de analyse (niet eerder dan 24 uur voor aanvang) en na afloop gewassen en gedesinfecteerd. Desinfectie wordt uitgevoerd door alle oppervlakken af ​​te vegen met chloor of andere ontsmettingsmiddelen volgens de instructies die voor elk medicijn gelden. 45 minuten voordat met de werkzaamheden in de box wordt begonnen, worden bacteriedodende lampen gedurende (30 ± 5) minuten ingeschakeld.

Momenteel worden laminaire stromingskappen (beschermende ultraschone luchtcabines) gebruikt voor microbiologische analyses. Laminaire stroomkasten worden geproduceerd door de medische apparatuurfabriek "Laminar" in Uzhgorod, dozen van het merk BPV 1200 worden geproduceerd in Hongarije, dozen van het merk TVG-S II 1.14.1 worden geproduceerd door Babcock - BSH (Duitsland).

BIJLAGEN 2, 3. (Aanvullend geïntroduceerd, amendement nr. 1).

INFORMATIEGEGEVENS

1. ONTWIKKELD EN GEÏNTEGREERD door het Staats Agro-Industrieel Comité van de USSR

2. GOEDGEKEURD EN IN WERKING GEDAAN bij resolutie van het Staatscomité voor Normen van de USSR van 4 december 1985 nr. 3810

3. De standaard voldoet volledig aan ST SEV 3014-81

4. Er zijn internationale normen in de norm opgenomen: ISO 6887-83 (E) en ISO 7218-85

6. REFERENTIE REGELGEVENDE EN TECHNISCHE DOCUMENTEN

De gerichte sanitaire en bacteriologische controle van voedselproducten, uitspoelingen van omgevingsobjecten en water maakt het mogelijk om effectief doorlopend sanitair en epidemiologisch toezicht uit te voeren en zorgt voor een objectieve beoordeling van de naleving van het regime. Helpt bij het ophelderen van de routes van overdracht van infectieziekten. Fouten bij de monstername kunnen leiden tot een onjuiste hygiënische beoordeling van de onderzochte monsters met behulp van de meest gevoelige en nauwkeurige onderzoeksmethoden, en als gevolg daarvan tot een inadequate beoordeling van het object zelf.

Daarom is een van de basisprincipes van microbiologisch onderzoek de juiste bemonstering, waarbij de regels voor bemonstering en hun kwantitatieve verhouding strikt worden nageleefd.

De belangrijkste documenten voor het bemonsteren van voedingsproducten voor microbiologisch onderzoek zijn:

GOST R 54004-2010 “Voedingsproducten. Bemonsteringsmethoden voor microbiologische tests"
GOST R 53430-2009 “Melk en melkverwerkingsproducten. Methoden voor microbiologische analyse"
GOST R ISO 707 - 2010 “Melk en zuivelproducten. Bemonsteringsgids"

Kenmerken van voedselbemonstering volgens GOST R 54004-2010:

1. Vóór de bemonstering worden verpakkingseenheden of producten op basis van visuele inspectie in 3 groepen verdeeld en wordt de bemonstering voor elke groep afzonderlijk uitgevoerd:

Normaal uiterlijk (geen tekenen van microbieel bederf)
- verdacht (met tekenen van afwijkingen die kunnen ontstaan ​​als gevolg van microbieel bederf en als gevolg van chemische of biochemische reacties in het product)
- bedorven producten bij inspectie waarbij duidelijke productdefecten werden ontdekt (bombardementen, schimmels, slijm, enz.). Producten met een verlopen houdbaarheidsdatum worden niet geselecteerd voor onderzoek.

2. Monsters worden met steriele instrumenten genomen in steriele containers, waarvan de hals in een brandervlam wordt verbrand (steriele potten of steriele zakken, steriele plastic containers).

Als er routinematige bemonstering wordt uitgevoerd en er één monster wordt gevormd, moet de bemonstering voor microbiologische analyse voorafgaan aan de bemonstering voor organoleptische en fysisch-chemische onderzoeken, waarbij aseptische regels in acht worden genomen die contaminatie op het moment van monsterafname uitsluiten.

3. Het volume (gewicht) van het monster wordt bepaald in overeenstemming met de normatieve en technische documentatie voor dit type product. Het aantal verpakkingseenheden wordt bepaald door de huidige normen, OST, TU, enz. voor de bijbehorende producten.

4. Indien het monstergewicht gelijk is aan het gewicht van het product in de consumentenverpakking, gebruik dan de gehele verpakking. Als het monstergewicht meer dan één pakket bedraagt, worden er meerdere pakketten genomen, anders (bij gebrek aan verpakking) wordt het monster genomen door puntmonsters op verschillende plaatsen te nemen.

5. Als de massa (volume) van het product niet is vastgelegd in de wettelijke documentatie, neem dan minimaal 1 monster van producten in consumentenverpakkingen en maximaal 1000 g (cm3) van producten in transportcontainers (klonterig, vloeibaar, pasteuze, korrelige en gemengde consistentie). Bij het nemen van monsters van klompproducten met een gewicht van meer dan 1000 g wordt een van de volgende methoden gebruikt:

• snijd een deel van het product af of snij het uit met een mes of ander gereedschap, terwijl voor rechthoekige producten de snede loodrecht op de lengteas wordt gemaakt, en voor bolvormige producten - wigvormig;
• het product wordt op verschillende plaatsen met een mes gesneden en vervolgens wordt het vereiste aantal stukken met een scalpel van het snijoppervlak en uit de diepte gehaald, die met een pincet in een container met brede opening worden overgebracht;
• snijd de oppervlaktelaag van het product af tot een dikte van 0,5 - 1 cm en knijp het product met behulp van een sonde of speciaal gereedschap in een container met wijde hals.

6. Monsters van bevroren producten worden in geïsoleerde containers of met koelmiddelen geplaatst. De temperatuur van dergelijke monsters mag tijdens transport niet hoger zijn dan min 150C. Monsters van bederfelijke producten worden gedurende maximaal 6 uur bij 50°C in koelzakken met koelmiddelen vervoerd. In andere gevallen laten ze zich leiden door de normatieve en technische documentatie voor elk type product.

7. Bemonstering van melk en zuivelproducten wordt uitgevoerd in overeenstemming met: GOST 26809-86 “Melk en zuivelproducten. Acceptatieregels, bemonsteringsmethoden en monstervoorbereiding voor analyse.” Indien het product in een consumentenverpakking wordt aangeboden, wordt er gekozen voor 1 eenheid consumentenverpakking. Bij het samenstellen van een verzamelmonster, bijvoorbeeld kwark: Van elke eenheid transportcontainer worden 3 puntmonsters genomen: 1 vanuit het midden, 2 andere op een afstand van 5 cm van de zijwand. De geselecteerde massa wordt overgebracht naar een steriele container, waaruit een gezamenlijk monster bestaat van 500 g. Bij het bepalen van het aantal bifidobacteriën in gefermenteerde melkproducten worden door middel van steekproeven 3 eenheden consumentenverpakkingen geselecteerd. Microbiologisch onderzoek mag niet later dan 4 uur na de bemonstering beginnen, als de monsters zijn vervoerd bij een temperatuur niet hoger dan 6 0 C, en ijsmonsters - niet hoger dan 2 0 C.

8. Bemonstering van visproducten - in overeenstemming met GOST 31339-2006 "Vis, niet-visvoorwerpen en producten daarvan"

9. Vleesproducten volgens GOST R 51447-99 "Vlees en vleesproducten"

10. Pluimveevlees, bijproducten en halffabrikaten van pluimvee in overeenstemming met GOST R 50396.0-92 "Pluimveevlees, bijproducten en halffabrikaten van pluimvee."

9. Bij het bemonsteren van producten in openbare horecagelegenheden moet men zich laten leiden door MU nr. 2657 “Over sanitaire en bacteriologische controle bij openbare horeca- en”.

Als er een monster van een gerecht uit het serveerstation wordt genomen, wordt de hele portie van het bord naar de pot overgebracht; als in de keuken een monster wordt genomen van een grote massa product (uit een pan, van een groot stuk vlees), wordt een monster van ongeveer 200 g genomen (vloeibare gerechten - na grondig mengen; dichte gerechten - van verschillende plaatsen in de diepte van het stuk). Minerale dranken, frisdranken en bier worden geselecteerd in de hoeveelheid van 1 fles fabrieksverpakking of 200 ml drank geproduceerd in de onderneming.

Wanneer een monster wordt genomen van een product met een complexe consistentie, moeten alle componenten in dezelfde verhouding zitten als in het originele product. Indien nodig wordt elk onderdeel afzonderlijk geselecteerd.

Bulkproducten worden vóór het nemen van monsters grondig gemengd, of het monster bestaat uit spotmonsters.

10. Alle monsters zijn voorzien van etiketten waarop, naast het monsternummer en de productnaam, de datum en het tijdstip van monstername, de datum en het uur van productie en de houdbaarheid van het product moeten worden vermeld. De monsters zijn verzegeld of verzegeld.

11. Tijdens het monsternemingsproces wordt een monsternemingsprotocol en een verwijzing voor onderzoek opgesteld, waarin de reden van monsterneming (gepland, ongepland, epidemiologisch onderzoek etc.) wordt aangegeven en het doel van de conformiteitstoets wordt aangegeven:

Uniforme sanitair-epidemiologische en hygiënische eisen voor goedgekeurde goederen. 28-05-2010 voor nr. 299

TR CU 02\2011 “over voedselveiligheid”

SanPiN 2.3.2.1078-01 “Hygiënische eisen voor de veiligheid en voedingswaarde van voedingsmiddelen”

Federale wet technische voorschriften voor melk- en zuivelproducten nr. 88-FZ van 12 juni 2008

Federale wettelijke technische voorschriften voor olie- en vetproducten

Federale wet technische voorschriften voor sapproducten uit fruit en groenten nr. 178-FZ van 27 oktober 2008

Instructies voor de procedure voor het onderzoeken, registreren en uitvoeren van laboratoriumtests in instellingen van de sanitaire en epidemiologische dienst voor voedselvergiftiging nr. 1135-73 g

Er werden uniforme sanitair-epidemiologische en hygiënische eisen ontwikkeld voor goederen die onderworpen zijn aan sanitair-epidemiologisch toezicht (controle) om de bepalingen van de douane-unieovereenkomst inzake sanitaire maatregelen van 11 december 2009 te implementeren.

Spoelt.

Volgens MU nr. 2657 van 31 december 1982 “Over sanitaire en bacteriologische controle bij openbare catering en voedselhandel.”

In de praktijk van het huidige sanitaire toezicht op de cateringeenheden van kinder-, kleuter- en jeugdinstellingen, evenals buffetten, wordt de uitwasmethode veel gebruikt om de effectiviteit van de sanitaire verwerking van apparatuur, uitrusting, keukengerei, maandverband en personeel te controleren handen. De swab-methode maakt het mogelijk om op objectieve wijze het sanitaire onderhoud van de onderzochte instellingen te beoordelen.

Bij het uitvoeren van wasbeurten wordt speciale aandacht besteed aan het monitoren van apparatuur en apparaten die worden gebruikt tijdens het technologische proces van het bereiden van producten die geen verdere warmtebehandeling ondergaan (koelkast).

Bacteriologische bestrijding met behulp van de methode van het wassen van de oppervlakken van inventaris, uitrusting, handen en sanitaire kleding van personeel kan twee doelen nastreven:

a) de effectiviteit van de ontsmetting vaststellen; voor dit doel worden de uitrusting, handen en sanitaire kleding van het personeel afgewassen voordat met het werk wordt begonnen, of, als dit niet mogelijk is, tijdens pauzes, nadat de handen en de uitrusting zijn ontsmet, d.w.z. wattenstaafjes zijn gemaakt van schone voorwerpen.

b) bepalen van de rol van apparatuur en handen van personeel bij de bacteriële besmetting van een product of kant-en-klaar gerecht tijdens het productieproces, waarbij bijzondere aandacht wordt besteed aan de productie van producten en kant-en-klaar gerechten die een warmtebehandeling hebben ondergaan of zonder voorbehandeling worden gegeten -behandeling (sommige groenten, gastronomische producten, salades, vinaigrettes, enz.). Om dit probleem op te lossen, worden gelijktijdig met het nemen van wattenstaafjes herhaaldelijk monsters van voedselproducten genomen (uitstrijkjes worden genomen van onbehandelde handen en oppervlakken).

Het spoelen wordt vanaf het oppervlak uitgevoerd met een bevochtigd steriel wattenstaafje, gemonteerd op een glazen of metalen houder, gemonteerd in een katoenen gaasstop van de reageerbuis. De reageerbuis bevat een steriel medium. Direct vóór het wassen wordt het wattenstaafje bevochtigd door het wattenstaafje in de vloeistof te laten zakken. Bij het nemen van uitstrijkjes moeten de volgende aanbevelingen in acht worden genomen:

• Qua uitrusting moet u letten op snijplanken, vleesmolens en productietafels voor eindproducten.
• Handwas, maandverband en handdoeken worden afgenomen van werknemers die producten hanteren die niet aan verdere hittebehandeling zijn onderworpen.
• Uitspoelingen van grote apparatuur worden van een oppervlak van 100 vierkante meter genomen. Een stencil van 25 vierkante cm wordt op 4 verschillende plaatsen op het oppervlak van het gecontroleerde object aangebracht.

Bij het nemen van wattenstaafjes van kleine voorwerpen wordt het hele oppervlak afgewassen. Spoelingen worden genomen:

• één wattenstaafje van 3 items met dezelfde naam (borden, lepels, enz.). De glazen worden van het binnenoppervlak en de bovenste buitenrand 2 cm naar beneden afgeveegd.
• Wanneer u uitstrijkjes van de handen neemt, veegt u de palmaire oppervlakken van beide handen af ​​met een wattenstaafje, waarbij u minstens vijf keer over elke handpalm en vingers veegt, en veeg vervolgens de interdigitale ruimtes, nagels en subunguale ruimtes af.
• Wanneer u sanitaire kleding wast, veegt u 4 gebieden van 25 vierkante cm af - het onderste deel van elke mouw en 2 gebieden vanaf de bovenste en middelste delen van de voorste verdiepingen. Handdoeken – 4 gebieden van 25 m².

Noteer bij het afnemen van een uitstrijkje het monsternummer en de locatie waar het uitstrijkje is afgenomen. Een handeling van het afnemen van wattenstaafjes wordt in 2 exemplaren opgemaakt.

Levertijd - niet meer dan 2 uur. Als de tijd langer wordt, levering in thermische containers.

Bemonstering van water voor microbiologisch onderzoek

Selectie, conservering, opslag en transport van watermonsters worden uitgevoerd:

Volgens GOST R 53415-2009 “Water. Bemonstering voor microbiologische analyse";

Volgens GOST 31942-2012 “Water. Bemonstering voor microbiologische analyse";

Volgens GOST R 51592-2000 “Water. Algemene eisen voor bemonstering”, wordt al het water geselecteerd en ter test aan het microbiologisch laboratorium geleverd;

Volgens GOST R 51593-2000 “Drinkwater. Bemonstering” is alleen van toepassing op leidingwater uit gecentraliseerde watervoorzieningssystemen;

In overeenstemming met de eisen van normen en andere normatieve documenten voor bepalingsmethoden;

Specifieke indicatoren en bedoeld voor bepaalde soorten water.

Waterbemonstering uit gecentraliseerde drinkwatervoorzieningssystemen wordt bijvoorbeeld uitgevoerd volgens drie regelgevende documenten:

- GOST R 51593-2000 “Drinkwater. Bemonstering",
- MUK 4.2.1018-01 “Sanitaire en microbiologische analyse van drinkwater.”

De omstandigheden waaronder watermonsters worden genomen voor microbiologisch onderzoek moeten vrijwel aseptisch zijn, dat wil zeggen: vergeet niet de kraan in brand te steken, laat het water uit deze kraan 10 minuten lopen en verzamel daarna pas het water in een steriele bak. De container wordt onmiddellijk vóór de bemonstering geopend door de stop en de steriele dop te verwijderen. Tijdens de bemonstering mogen de stop en de randen van de container niets raken. Momenteel worden wegwerpzakken voor watermonstername met en zonder natriumthiosulfaattablet gebruikt. Spoel de vaat niet af. Het monster wordt rechtstreeks uit de kraan genomen, zonder rubberen slangen, waterverdeelnetten of andere opzetstukken. Als er een constante waterstroom door de bemonsteringskraan is, wordt de bemonstering uitgevoerd zonder voorafgaand bakken, zonder de waterdruk en de bestaande structuur te veranderen (als er siliconen- of rubberen slangen zijn).

Watermonsters van gecentraliseerde en niet-gecentraliseerde watervoorzieningsbronnen worden genomen in overeenstemming met GOST R 51592-2000 “Water. Algemene vereisten voor bemonstering."

Water uit de zwembadkom wordt geselecteerd volgens de volgende documenten:

GOST R 51592-2000 “Water. Algemene eisen voor bemonstering",
- SanPiN 2.1.2.1188-03 “Zwembaden. Hygiënische eisen voor ontwerp, bediening en waterkwaliteit. Kwaliteitscontrole."

Watermonsters voor analyse worden op minimaal 2 punten genomen: een oppervlaktelaag van 0,5–1,0 cm dik en op een diepte van 25–30 cm vanaf het wateroppervlak. Het monitoren van de waterkwaliteit in een zwembadbad volgens basismicrobiologische indicatoren moet 2 keer per maand worden uitgevoerd.

Monsteranalyse in het laboratorium moet vanaf het moment van afname zo snel mogelijk worden uitgevoerd. Als er geen koeling is, wordt de analyse uiterlijk 2 uur na de bemonstering uitgevoerd en bij afkoeling tot 4-10˚ C wordt de opslagperiode van het monster verlengd tot 6 uur. Daarom is het noodzakelijk om de monsters in thermische containers naar het laboratorium te vervoeren (vermijd bevriezing, aangezien het invriezen van een monster meer dan 99% van de bacteriën doodt).

Omdat het aantal micro-organismen in het monster in minder dan 20 minuten met de helft kan worden verminderd door de werking van resterende hoeveelheden desinfectiemiddelen (chloor in enkele seconden), worden ze gebruikt in een container met natriumthiosulfaat (in een verhouding van 10 mg per 500 ml water) om gechloreerd en gebromeerd water te neutraliseren.

Het monstervolume wordt bepaald afhankelijk van het aantal te bepalen indicatoren en het type analyse conform de ND voor de wijze van bepaling van indicatoren. Het monstervolume bij het analyseren van kraanwater en bronwater op indicatormicro-organismen is bijvoorbeeld 350 ml water, en voor indicatormicro-organismen en pathogene flora - 1350 ml, het volume van zwembadwatermonsters is respectievelijk 500 ml en 1500 ml.

SanPiN 2.1.4.1116-02 “Drinkwater. Hygiënische eisen voor de kwaliteit van water verpakt in containers. Kwaliteitscontrole", MU 2.1.4.1184-03 "Richtlijnen voor de implementatie en toepassing van sanitaire en epidemiologische regels en voorschriften SanPiN 2.1.4.1116-02 "Drinkwater. Hygiënische eisen voor de kwaliteit van water verpakt in containers. Kwaliteitscontrole"

Drinkwater, verpakt in containers, wordt ingenomen in een volume van 2,5 liter, omdat Alleen voor de bepaling van Pseudomonas aeruginosa en colifagen is 1,0 liter water nodig.

Bodembemonstering wordt uitgevoerd in overeenstemming met GOST 17.4.3.01-83 "Algemene eisen voor bodembemonstering", GOST 17.4.4.02-84 "Bemonsteringsmethoden en voorbereiding van monsters voor chemische, bacteriologische, helminthologische analyse".

Een proeflocatie maakt deel uit van het studiegebied en wordt gekenmerkt door vergelijkbare omstandigheden (topografie, uniformiteit van bodemstructuur en vegetatiebedekking, aard van economisch gebruik).

De testlocatie moet zich op een typische locatie voor het studiegebied bevinden. Op een oppervlakte van 100 m2 wordt één proefveld van 25 m2 aangelegd.

Puntmonster - materiaal genomen van één plek in de horizon of één laag van het bodemprofiel, typisch voor die horizon of laag.

Puntmonsters worden op een monsterplot genomen uit één of meerdere lagen of horizonten met behulp van de envelopmethode. Graaf een kuil van 0,3 x 0,3 meter en een diepte van 0,2 meter. Het oppervlak van een van de wanden van de put wordt gereinigd met een steriel mes. Vervolgens wordt uit deze muur een grondmonster gesneden, waarvan de grootte wordt bepaald door het gegeven monster, dus als het nodig is om 200 g grond te selecteren, is de afmeting van het monster 20 cm x 3 cm x 3 cm, 500 g - 20 cm x 5 cm x 3 cm.

Puntmonsters worden genomen met een mes, spatel of grondboor.

Het samengevoegde monster wordt bereid door puntmonsters uit één bemonsteringsgebied te mengen.

Voor bacteriologisch onderzoek worden op één monsterlocatie 10 gecombineerde monsters genomen. Elk gecombineerd monster bestaat uit drie puntmonsters met een gewicht van elk 200 tot 250 g, laag voor laag geselecteerd op een diepte van 0 tot 5 cm, van 5 tot 20 cm.

Om secundaire besmetting te voorkomen, moeten grondmonsters bestemd voor bacteriologische analyse worden genomen in overeenstemming met de regels van asepsis: met steriele instrumenten, gemengd op een steriel oppervlak, geplaatst in een steriele container. De tijd vanaf de bemonstering tot het begin van hun onderzoek mag niet langer zijn dan 1 dag.

Bij het monitoren van de sanitaire toestand van de bodem in de gebieden van kinderinstellingen en speelplaatsen wordt de bemonstering afzonderlijk van zandbakken en van het algemene grondgebied uitgevoerd vanaf een diepte van 0 - 10 cm.

Uit elke sandbox wordt één gecombineerd monster genomen, bestaande uit vijf puntmonsters. Indien nodig is het mogelijk om één gecombineerd monster te nemen uit alle zandbakken van elke leeftijdsgroep, bestaande uit 8-10 puntmonsters.

Er worden bodemmonsters genomen uit de speelgebieden van elke groep (één gecombineerd van ten minste vijf puntmonsters), of één gecombineerd monster uit een totaal gebied van 10 punten, en er moet rekening worden gehouden met de meest waarschijnlijke plaatsen van bodemverontreiniging.

Bij het monitoren van bodems in het gebied van puntbronnen van verontreiniging (beerputten, afvalbakken etc.) worden op verschillende afstanden van de bron en op een relatief schone plaats monsterpercelen aangelegd die niet groter zijn dan 5 x 5 m. ).

Bij het bestuderen van bodemverontreiniging door transportsnelwegen worden proeflocaties aangelegd op bermenstroken, waarbij rekening wordt gehouden met het terrein, de vegetatiebedekking en de meteorologische en hydrologische omstandigheden.

Er worden bodemmonsters genomen uit smalle stroken van 200–500 m lang op een afstand van 0–10, 10–50, 50–100 m van het wegdek. Eén mengmonster bestaat uit 20-25 puntmonsters genomen op een diepte van 0-10 cm.

Bij het beoordelen van bodems in landbouwgebieden worden 2 keer per jaar (lente, herfst) bodemmonsters genomen op een diepte van 0-25 cm. Per 0-15 hectare wordt minimaal 1 terrein van 100-200 m2 aangelegd, afhankelijk van het terrein en de landgebruiksomstandigheden.

Om een ​​gemiddeld monster met een volume van 0,5 kg te bereiden, wordt de grond van alle monsters uit één gebied op een steriel, dik vel papier gegoten, grondig gemengd met een steriele spatel, stenen en andere vaste voorwerpen worden weggegooid. Vervolgens wordt de grond in een gelijkmatige dunne laag in de vorm van een vierkant op het vel verdeeld.

De grond wordt met behulp van diagonalen in 4 driehoeken verdeeld en de rest wordt opnieuw gemengd, opnieuw in een dunne laag verdeeld en door diagonalen verdeeld totdat er ongeveer 0,5 kg grond overblijft.

Vervolgens wordt het monster met een instructie en een monsterafnamecertificaat bij het laboratorium afgeleverd.

lettergrootte

METHODEN VOOR MICROBIOLOGISCHE CONTROLE VAN DE BODEM - METHODOLOGISCHE AANBEVELINGEN (goedgekeurd door de Chief State Sanitary Doctor van de Russische Federatie... Relevant in 2018

4. Bemonstering voor bacteriologische analyse

Bij de controle van bodemverontreiniging in bevolkte gebieden wordt rekening gehouden met de functionele zones van de stad. De monsterlocaties worden vooraf gemarkeerd op een kaart die de structuur van het stedelijke landschap weerspiegelt. De bemonstering wordt uitgevoerd in overeenstemming met GOST 17.4.4.01-83 "Algemene eisen voor bodembemonstering"; GOST 17.4.4.02-84 "Bemonsteringsmethoden en voorbereiding van monsters voor chemische, bacteriologische, helminthologische analyse." Er wordt een beschrijving opgesteld van het te monitoren gebied, met vermelding van het adres, het bemonsteringspunt, de algemene topografie van het microdistrict, de locatie van de bemonsteringslocaties en bronnen van vervuiling, de vegetatiebedekking, de aard van het landgebruik, het grondwaterniveau, het bodemtype en andere gegevens noodzakelijk voor de juiste beoordeling en interpretatie van testresultatenmonsters.

Bemonstering voor bacteriologisch onderzoek vindt minimaal één keer per jaar plaats op plaatsen waar mensen en dieren aanwezig kunnen zijn, en op plaatsen waar sprake is van verontreiniging met organisch afval. Bij het bestuderen van de dynamiek van de zelfzuivering van de bodem wordt gedurende de eerste maand wekelijks bemonstering uitgevoerd, en vervolgens maandelijks tijdens het groeiseizoen totdat de actieve fase van zelfzuivering is voltooid.

Een proeflocatie maakt deel uit van het studiegebied en wordt gekenmerkt door vergelijkbare omstandigheden (reliëf, uniformiteit van bodemstructuur en vegetatiebedekking, aard van economisch gebruik).

De testlocatie moet zich op een voor het studiegebied typische locatie bevinden. Op een oppervlakte van 100 m². m, er wordt één proeflocatie van 25 m aangelegd. Als het reliëf heterogeen is, worden de locaties geselecteerd op basis van de reliëfelementen.

Puntmonster - materiaal genomen van één plek in de horizon of één laag van het bodemprofiel, typisch voor die horizon of laag.

Puntmonsters worden genomen op een monsterplot uit één of meerdere lagen of horizonten met behulp van de envelopmethode. Er wordt een put gegraven van 0,3 m x 0,3 m en 0,2 m diep. Het oppervlak van een van de wanden van de put wordt schoongemaakt met een steriel mes. Vervolgens wordt uit deze muur een grondmonster gesneden, waarvan de grootte wordt bepaald door het gegeven monster, dus als het nodig is om 200 g grond te selecteren, is de monstergrootte 20 cm x 3 cm x 3 cm, 500 g - 20 cm x 5 cm x 3 cm.

Puntmonsters worden genomen met een mes, spatel of grondboor.

Het samengevoegde monster wordt bereid door puntmonsters uit één bemonsteringsgebied te mengen.

Voor bacteriologisch onderzoek worden op één monsterlocatie 10 gecombineerde monsters genomen. Elk gecombineerd monster bestaat uit drie puntmonsters met een gewicht van elk 200 tot 250 g, laag voor laag geselecteerd op een diepte van 0 tot 5 cm, van 5 cm tot 20 cm.

Om secundaire besmetting te voorkomen, moeten grondmonsters bestemd voor bacteriologische analyse worden genomen in overeenstemming met de aseptische regels: genomen met steriele instrumenten, gemengd op een steriel oppervlak, geplaatst in een steriele container. De tijd vanaf de bemonstering tot het begin van hun onderzoek mag niet langer zijn dan 1 dag.

Bij onderzoek naar de effecten van pesticiden en andere chemicaliën op microflora en zelfzuiveringsprocessen in diepere grondlagen wordt gebruik gemaakt van een put tot 1 meter diep. Elke keer worden er met een steriel instrument monsters uit de wand van de put genomen 10 cm.

Om de sanitaire toestand van de bodem in voorschoolse, school- en medische instellingen, speeltuinen en recreatiegebieden te controleren, wordt er minstens 2 keer per jaar bemonstering uitgevoerd - in de lente en de herfst. De grootte van het testgebied mag niet groter zijn dan 5 x 5 m.

Bij het monitoren van de sanitaire toestand van de bodem in de gebieden van kinderinstellingen en speelplaatsen wordt de bemonstering afzonderlijk van zandbakken en van het algemene grondgebied uitgevoerd vanaf een diepte van 0 - 10 cm.

Uit elke sandbox wordt één gecombineerd monster genomen, bestaande uit vijf puntmonsters. Indien nodig is het mogelijk om één gecombineerd monster te nemen uit alle zandbakken van elke leeftijdsgroep, bestaande uit 8 - 10 puntmonsters.

Er worden bodemmonsters genomen uit de speelgebieden van elke groep (één gecombineerd van ten minste vijf puntmonsters), of één gecombineerd monster uit een totaal gebied van 10 punten, en er moet rekening worden gehouden met de meest waarschijnlijke plaatsen van bodemverontreiniging.

Bij het monitoren van bodems in het gebied van puntbronnen van vervuiling (beerputten, vuilstortplaatsen, enz.) worden monsterpercelen van niet meer dan 5 x 5 m groot aangelegd op verschillende afstanden van de bron en op een relatief schone plaats (controle ).

Bij het bestuderen van bodemverontreiniging door transportsnelwegen worden proeflocaties aangelegd op bermenstroken, waarbij rekening wordt gehouden met het terrein, de vegetatiebedekking en de meteorologische en hydrologische omstandigheden.

Er worden bodemmonsters genomen uit smalle stroken van 200 - 500 m lang op een afstand van 0 - 10, 10 - 50, 50 - 100 m van het wegdek. Eén mengmonster bestaat uit 20 - 25 puntmonsters genomen op een diepte van 0 - 10 cm.

Bij de beoordeling van de bodems van landbouwgebieden worden 2 keer per jaar (lente, herfst) bodemmonsters genomen op een diepte van 0 - 25 cm. Voor elke 0 - 15 hectare wordt minimaal 1 terrein van 100 - 200 vierkante meter aangelegd. m afhankelijk van het terrein en de landgebruiksomstandigheden.

In grote steden met talrijke bronnen van vervuiling worden geochemische karteringen uitgevoerd met behulp van een testnetwerk. Om besmettingshaarden te identificeren wordt een bemonsteringsdichtheid van 1 - 5 monsters per vierkante meter aanbevolen. km met een afstand tussen bemonsteringspunten van 400 - 1000 m. Om het gebied met de maximale verontreinigingsgraad verder te identificeren, wordt het testnetwerk gecondenseerd tot 25 - 30 monsters per vierkant. km met een afstand tussen de monsterpunten van ongeveer 200 m. Monsters worden genomen op een diepte van 0 - 5 cm.

De genomen monsters moeten worden genummerd en geregistreerd in een journaal, met vermelding van de volgende gegevens: volgnummer en plaats van monsterneming, terrein, bodemtype, doel van het gebied, soort verontreiniging, datum van monsterneming.

Monsters moeten voorzien zijn van een etiket waarop de plaats en datum van bemonstering, het nummer van de bodemsectie, het bodemverschil, de horizon en diepte van bemonstering en de naam van de onderzoeker zijn vermeld.