Ühekihilised rakukultuurid. Rakukultuur

Rakukultuurid

Rakukultuuri tehnoloogia hõlmab rakkude kasvatamist väljaspool elusorganisme.

Taimerakukultuurid ei ole mitte ainult oluline samm transgeensete taimede loomisel, vaid ka keskkonnasõbralikud ja majanduslikult põhjendatud terapeutiliste omadustega looduslike toodete allikas, nagu paklitakseel, mida leidub jugapuu puidus ja mida turustatakse keemiaravi ravimina nimega Taxol. Taimerakukultuure kasutatakse ka toiduainetööstuses maitse- ja värvainetena kasutatavate ainete tootmiseks.

Putukate rakukultuurid

Putukarakukultuuride uurimine ja kasutamine avardab võimalusi arendada ja kasutada inimesel bioloogilisi mõjureid, mis hävitavad putukahjureid, kuid ei mõjuta kasulike putukate elujõulisust ega akumuleeru keskkonda. Vaatamata sellele, et eelised bioloogilised meetodid kahjuritõrje on tuntud juba pikka aega, selliste bioloogiliselt aktiivsete ainete ja patogeenide tootmine putukatele ja mikroorganismidele tööstuslikes kogustes on väga keeruline. Putukarakukultuuride kasutamine võib selle probleemi täielikult lahendada. Lisaks saab sünteesida, nagu taimerakke, kasutada ka putukarakke ravimid. Seda väljavaadet uuritakse praegu aktiivselt. Lisaks uuritakse võimalust kasutada putukarakke VLP-vaktsiinide (viirusetaoliste osakeste) tootmiseks selliste nakkushaiguste, nagu SARS ja gripp, raviks. See tehnika võib oluliselt vähendada kulusid ja kõrvaldada sellega seotud ohutusprobleemid traditsiooniline meetod kanamunade kasutamine.

Imetajate rakukultuurid

Imetajate rakukultuurid on aastakümneid olnud üks peamisi tööriistu, mida loomakasvatusspetsialistid on kasutanud. Laboritingimustes viljastatakse silmapaistvate omadustega lehmade munad vastavate pullide spermaga. Saadud embrüoid kasvatatakse in vitro mitu päeva, seejärel siirdatakse need surrogaatemade emakasse. Sama tehnika on ka inimeste kehavälise viljastamise aluseks.

Praegu ulatub imetajate rakukultuuride kasutamine kunstlikust viljastamisest palju kaugemale. Imetajarakud võivad täiendada ja võib-olla ühel päeval asendada loomade kasutamist uute ravimite ohutuse ja tõhususe testimiseks. Lisaks saab sarnaselt taime- ja putukarakkudega ka imetajate rakke kasutada ravimite sünteesimiseks, eriti mõningate loomsete valkude sünteesimiseks, mis on geneetiliselt muundatud mikroorganismide poolt sünteesimiseks liiga keerulised. Näiteks sünteesitakse monoklonaalseid antikehi spetsiifiliselt imetajate rakukultuurides.

Teadlased kaaluvad ka võimalust kasutada imetajate rakke vaktsiinide tootmiseks. 2005. aastal tervishoiuministeeriumi ja sotsiaalteenused USA sõlmis Sanofi Pasteuriga lepingu väärtusega 97 miljonit USA dollarit. Ettevõtte spetsialistide ülesanne on töötada välja meetodid imetajate rakkude kultiveerimiseks, et kiirendada gripivaktsiinide väljatöötamist ja vastavalt suurendada inimkonna valmisolekut pandeemiaks.

Kultuuripõhised teraapiad täiskasvanud tüvirakud, mida leidub mõnes kehakoes (luuüdis, rasvkoes, ajus jne), võtavad peagi ka oma õige koha kliinilises praktikas. Teadlased on leidnud, et organism saab tüvirakke kasutada kahjustatud koe parandamiseks. Täiskasvanute vereloome tüvirakke on siirdamistena kasutatud pikka aega luuüdi. Need on vajalikud igat tüüpi vererakkude küpsemise ja moodustumise protsesside taastamiseks. Selliseid rakke saab nabaväädiverest suurtes kogustes, kuid nende eraldamine on üsna keeruline protsess.

Teadlased töötavad praegu meetodite kallal, et isoleerida tüvirakud platsentast ja rasvkoest. Paljud spetsialistid tegelevad rakkude ümberprogrammeerimise meetodite väljatöötamisega - keha küpsete rakkude, näiteks naharakkude, diferentseerumata olekusse viimisega ja nende diferentseerumise stimuleerimisega vajaliku koetüübi rakkudeks.

Embrüonaalsed tüvirakud

Kasutamine embrüonaalsed tüvirakud peetakse ka paljude haiguste potentsiaalseks raviks. Nagu nimigi ütleb, saadakse embrüonaalsed rakud embrüotest, täpsemalt neist, mis arenevad in vitro viljastatud munarakkudest (in vitro viljastamise kliinikud) ja antakse doonori nõusolekul teadlastele teaduslikuks kasutamiseks. Tavaliselt kasutatakse blastotsüste – 4-5 päeva vanuseid embrüoid, mis mikroskoobi all näevad välja nagu pallikesed, mis koosnevad mitmesajast rakust.

Inimese embrüonaalsete tüvirakkude isoleerimiseks viiakse blastotsüsti sisemine rakumass toitainerikkasse söötmesse, kus rakud hakkavad aktiivselt jagunema. Mõne päeva jooksul katavad rakud kogu kultiveerimisplaadi pinna. Seejärel koguvad teadlased jagunevad rakud, jagavad need tükkideks ja asetavad uutele plaatidele. Rakkude uutesse plaatidesse teisaldamise protsessi nimetatakse uuesti külvamine ja seda saab korrata mitu korda mitme kuu jooksul. Rakkude subkultuuri tsüklit nimetatakse läbipääs. Embrüonaalseid tüvirakke, mis on kultuuris eksisteerinud kuus või enam kuud ilma diferentseerumiseta (st on säilinud pluripotentsed – on võimelised diferentseeruma mis tahes kehakoe rakkudeks) ja säilitavad normaalse geenikomplekti, nimetatakse nn. embrüonaalne tüviraku liin.

Kultiveerimisplaadi sisepind on sageli kaetud hiire embrüote naharakkudega, mida on geneetiliselt muundatud nii, et need ei ole võimelised jagunema. Need rakud moodustavad toitekihi - "toitainete substraadi", tänu millele kinnituvad embrüonaalsed rakud pinnale. Teadlased püüavad parandada olemasolev meetod ja kõrvaldada vajadus hiirerakkude kasutamise järele, kuna nende olemasolu toob alati kaasa viiruseosakeste ja hiirevalkude ohu, mis võivad põhjustada allergilist reaktsiooni inimrakkude kultuuri.

Tüvirakkude ja koetehnoloogia teraapiate maksimaalne väärtus on saavutatav, kui terapeutilised tüvirakud ja nendest kasvatatud koed on geneetiliselt identsed retsipientrakkudega. Seega, kui patsient ise ei ole nende allikas, tuleb tüvirakke modifitseerida, asendades nende geneetilise materjali retsipiendi geenidega ja alles seejärel diferentseerida kindlat tüüpi rakkudeks. Praegu saab geneetilise materjali asendamise ja ümberprogrammeerimise protseduuri edukalt läbi viia ainult embrüonaalsete tüvirakkudega.

Rakukultuur

Rakukultuur on protsess, mille käigus kasvatatakse kontrollitud tingimustes kunstlikult prokarüootide ja eukarüootide üksikuid rakke (või üksikuid rakke). Praktikas viitab mõiste "rakukultuur" peamiselt ühte koesse kuuluvate rakkude kultiveerimisele, mis on saadud mitmerakulistest eukarüootidest, enamasti loomadest. Ajalooline areng rakukultuuride kasvatamise tehnoloogiad ja tehnikad on lahutamatult seotud kasvavate koekultuuride ja tervete elunditega.

Lugu

19. sajandil arenes välja inglise füsioloog S. Ringer soolalahus, mis sisaldab naatrium-, kaaliumi-, kaltsium- ja magneesiumkloriide, et säilitada väljaspool keha olevat loomade südamelööke. 1885. aastal kehtestas Wilhelm Roux koekultuuri põhimõtte, eraldades kana embrüolt osa luuüdist ja hoides seda mitu päeva soojas soolalahuses. Ross Granville Harrison, kes töötas Johns Hopkinsi meditsiinikoolis ja seejärel Yale'i ülikoolis, avaldas oma katsete tulemused aastatel 1907–1910, luues koekultuuri metoodika. Rakukultuuritehnikad arenesid märkimisväärselt 1940. ja 1950. aastatel seoses viroloogia valdkonna uurimistööga. Viiruste kasvatamine rakukultuurides on võimaldanud saada puhast viirusmaterjali vaktsiinide tootmiseks. Poliomüeliidi vaktsiin oli üks esimesi rakukultuuritehnoloogia abil massiliselt toodetud ravimeid.

Kasvatamise põhiprintsiibid

Rakkude isoleerimine

Väljaspool keha kasvatamiseks saab elusrakke saada mitmel viisil. Rakke saab verest eraldada, kuid kultuuris on võimelised kasvama ainult leukotsüüdid. Mononukleaarseid rakke saab eraldada pehmetest kudedest, kasutades ensüüme nagu kollagenaas, trüpsiin, pronaas, mis hävitavad rakuvälist maatriksit. Lisaks võib toitekeskkonda asetada koetükke. Otse objektilt võetud rakke nimetatakse primaarseteks. Enamiku primaarsete rakkude eluiga, välja arvatud kasvajarakud, on piiratud. Pärast teatud arvu jagunemisi läbivad rakud vananemisprotsessi ja lõpetavad jagunemise, kuid ei kaota elujõulisust. On olemas "surematud" rakuliinid, mis võivad lõputult paljuneda. See võime on juhusliku mutatsiooni tulemus või kunstlikult omandatud telomeraasi geeni allasurumisel.

Kasvavad rakud

Rakke kasvatatakse spetsiaalses toitainekeskkonnas, kl püsiv temperatuur ja spetsiaalses gaasikeskkonnas rakukultuuri inkubaatoris. Erinevate rakukultuuride toitesöötmed erinevad koostise, pH, glükoosi kontsentratsiooni, kasvufaktorite koostise jms poolest. Kultuurisöötmes kasutatavad kasvufaktorid saadakse kõige sagedamini verest. Üheks riskiteguriks on sel juhul rakukultuuri nakatumise võimalus prioonide või viirustega. Kasvatamisel on üheks oluliseks ülesandeks saastunud koostisainete kasutamise välistamine või minimeerimine. Praktikas seda aga alati ei saavutata. Rakke võib kasvatada suspensioonina või kleepuvas olekus. Mõned rakud (nt vererakud) eksisteerivad loomulikult hõljuvas olekus. On ka rakuliine, mida on kunstlikult muudetud, et vältida nende kinnitumist pindadele, et suurendada rakutihedust kultuuris. Kleepuvate rakkude kasvatamiseks on vaja pinda, näiteks koekultuuri või plastikut, mis on kaetud rakuvälise maatriksi elementidega, et parandada adhesiivseid omadusi ning soodustada kasvu ja diferentseerumist. Enamik pehmete ja kõvade kudede rakke on kleepuvad. Liimitavast kultuurist eristatakse organotüüpset rakukultuuri tüüpi, mis erinevalt tavalistest laboriklaasidest esindab kolmemõõtmelist keskkonda. See kultiveerimissüsteem on füüsiliselt ja biokeemiliselt kõige sarnasem eluskudedega, kuid selle hooldamisel on mõningaid tehnilisi raskusi (näiteks nõuab difusiooni).

Rakuliinide ristsaastumine

Rakukultuuridega töötades võivad teadlased kokku puutuda ristsaastumise probleemidega. Uurimistulemuste põhjal otsustades võib oletada, et 15-20% juhtudest olid katsetes kasutatud rakud riknenud või saastunud teiste rakuliinide rakkudega.

Kasvavate rakkude omadused

Rakkude kasvatamisel võib pideva jagunemise tõttu neid kultuuris olla liiga palju. Selle tulemusena võivad tekkida järgmised probleemid:

Eritusproduktide, sealhulgas toksiliste, kogunemine toitainekeskkonda.
Surnud rakkude kogunemine kultuuris, mis on lakanud funktsioneerimast.
Suure hulga rakkude kogunemine on Negatiivne mõju peal rakutsükkel, kasv ja jagunemine aeglustuvad ning rakud hakkavad vananema ja surema (kontaktkasvu pärssimine).
Samal põhjusel võib alata rakkude diferentseerumine.

Rakukultuuride normaalse funktsioneerimise säilitamiseks ja ka negatiivsete nähtuste ärahoidmiseks vahetatakse perioodiliselt toitekeskkonda, kantakse üle ja transfekteeritakse rakke. Kultuuride bakterite, pärmi või muude rakuliinidega saastumise vältimiseks tehakse kõik manipulatsioonid tavaliselt aseptiliselt steriilses kapis. Mikrofloora pärssimiseks võib toitekeskkonnale lisada antibiootikume (penitsilliin, streptomütsiin) ja seenevastaseid ravimeid (amfoteritsiin B).

Inimese rakuliinid

Üks varasemaid inimese rakukultuure, saadud emakakaelavähki surnud Henrietta Lacksilt. Rakukultuuri tuumad on värvitud siniseks.

Inimese rakkude kultiveerimine on mõnevõrra vastuolus bioeetika reeglitega, kuna isoleeritult kasvatatud rakud võivad vanemorganismist kauem elada ja neid kasutatakse siis katsetamiseks või uute ravimeetodite väljatöötamiseks ja sellest kasu saamiseks. Esimese otsuse selles valdkonnas tegi California ülemkohus kohtuasjas John Moore vs California University, mis leidis, et patsientidel ei ole omandiõigust rakuliinidele, mis on saadud nende nõusolekul eemaldatud elunditest.

Rakuliin "hübridoom"

Biotehnoloogia tooted

Tööstuslikult saadakse rakukultuuridest selliseid tooteid nagu ensüümid, sünteetilised hormoonid, monoklonaalsed antikehad, interleukiinid, lümfokiinid ja kasvajavastased ravimid. Kuigi paljusid lihtsaid valke saab suhteliselt lihtsalt toota, kasutades rDNA-d bakterikultuurides, saab keerukamaid valke, näiteks glükoproteiine, praegu toota ainult loomarakkudest. Üks neist olulistest valkudest on hormoon erütropoetiin. Imetajate rakukultuuride kasvatamise hind on üsna kõrge, mistõttu praegu uuritakse võimalust toota kompleksvalke putukate või kõrgemate taimede rakukultuurides.

Koekultuur

Rakukultuur on koekultuuri ja koetehnoloogia tehnoloogia lahutamatu osa, kuna see määrab aluse rakkude kasvatamiseks ja nende elujõulises seisundis hoidmiseks ex vivo.

Vaktsiinid

Praegu toodetakse rakukultuuri tehnikaid kasutades vaktsiine lastehalvatuse, leetrite, mumpsi, punetiste ja tuulerõugete vastu. Gripipandeemia ohu tõttu rahastavad USA teadusuuringuid, et saada vaktsiini

K.K. - need on paljurakulise organismi rakud, mis elavad ja paljunevad väljaspool keha tehistingimustes.

Väljaspool keha elavaid rakke või kudesid iseloomustab terve hulk metaboolseid, morfoloogilisi ja geneetilisi tunnuseid, mis erinevad järsult elundite ja kudede rakkude omadustest in vivo.

Ühekihilisi rakukultuure on kahte peamist tüüpi: esmane ja pidev.

Esmane trüpsiniseeritud. Mõiste "esmane" viitab rakukultuurile, mis on saadud otse inimese või looma kudedest embrüonaalsel või postnataalsel perioodil. Selliste põllukultuuride eluiga on piiratud. Teatud aja möödudes tekivad neis mittespetsiifilise degeneratsiooni nähtused, mis väljenduvad tsütoplasma granuleerimises ja vakuolisatsioonis, rakkude ümardamises, sideme katkemises rakkude ja tahke substraadi vahel, millel neid kasvatati. Perioodilised söötme muutused, viimase koostise muutused ja muud protseduurid võivad esmase rakukultuuri eluiga vaid veidi pikendada, kuid ei suuda ära hoida selle lõplikku hävimist ja surma. Suure tõenäosusega on see protsess seotud kogu organismis toimivate neurohumoraalsete tegurite kontrolli alt eemaldatud rakkude metaboolse aktiivsuse loomuliku väljasuremisega.

Ainult populatsiooni üksikud rakud või rakurühmad võivad enamiku rakukihi degeneratsiooni taustal säilitada võime kasvada ja paljuneda. Need rakud, olles avastanud lõputu paljunemise potentsiaali in vitro, tekitavad pidevad rakukultuurid.

Siirdatud rakuliinide peamine eelis võrreldes mis tahes primaarse kultuuriga on potentsiaal piiramatuks paljunemiseks väljaspool keha ja suhteline autonoomia, mis lähendab neid bakteritele ja üherakulistele algloomadele.

Suspensioonikultuurid- üksikud rakud või rakurühmad, mida on kasvatatud suspensioonis vedel keskkond. Need on suhteliselt homogeenne rakupopulatsioon, mis puutuvad kergesti kokku kemikaalidega.

Suspensioonkultuure kasutatakse laialdaselt mudelsüsteemidena sekundaarsete metaboolsete radade, ensüümide induktsiooni ja geeniekspressiooni, võõrühendite lagunemise, tsütoloogiliste uuringute jms uurimiseks.

“Hea” joone märk on rakkude võime ainevahetust ümber korraldada ja suur kiirus paljundamine konkreetsetes viljelustingimustes. Selle liini morfoloogilised omadused:

· kõrge lagunemisaste (5-10 rakku rühma kohta);

· rakkude morfoloogiline ühtlus (väike suurus, sfääriline või ovaalne kuju, tihe tsütoplasma);

· trahheiditaoliste elementide puudumine.

Diploidsed rakutüved. Need on ühte tüüpi rakud, mis on võimelised in vitro läbima kuni 100 jagunemist, säilitades samal ajal esialgse rikke diploidne komplekt kromosoomid (Hayflick, 1965). Inimembrüotest saadud diploidseid fibroblastide tüvesid kasutatakse laialdaselt diagnostilises viroloogias ja vaktsiinide tootmisel ning neid kasutatakse ka eksperimentaalsetes uuringutes. Tuleb meeles pidada, et mõned viiruse genoomi võimalused realiseeritakse ainult rakkudes, mis säilitavad normaalne tase eristamist.

130. Bakteriofaagid. Morfoloogia ja keemiline koostis

Bakteriofaagid (faagid) (vanakreeka keelest φᾰγω - "ma õgin") on viirused, mis nakatavad valikuliselt bakterirakke. Kõige sagedamini paljunevad bakteriofaagid bakterite sees ja põhjustavad nende lüüsi. Reeglina koosneb bakteriofaag valgukestast ja ühe- või kaheahelalisest geneetilisest materjalist nukleiinhape(DNA või harvemini RNA). Osakeste suurus on ligikaudu 20 kuni 200 nm.

Erinevate bakteriofaagide osakeste – virioonide – struktuur on erinev. Erinevalt eukarüootsetest viirustest on bakteriofaagidel sageli erineva keerukusastmega paigutatud spetsiaalne kinnituselund bakteriraku pinnale ehk sabale, kuid mõnel faagil pole saba. Kapsiid sisaldab faagi geneetilist materjali, selle genoomi. Erinevate faagide geneetilist materjali võivad esindada erinevad nukleiinhapped. Mõned faagid sisaldavad geneetilise materjalina DNA-d, teised aga RNA-d. Enamiku faagide genoom on kaheahelaline DNA, samas kui mõnede suhteliselt haruldaste faagide genoom on üheahelaline DNA. Mõne faagi DNA molekulide otstes on "kleepuvad alad" (üheahelalised komplementaarsed nukleotiidjärjestused teistes faagides puuduvad kleepuvad alad). Mõnel faagil on DNA molekulides ainulaadsed geenijärjestused, samas kui teistel faagidel on geenipermutatsioonid. Mõnel faagil on lineaarne DNA, samas kui teistel on see rõngas suletud. Mõnel faagil on DNA molekuli otstes mitme geeni terminaalsed kordused, teistes faagides on selline terminaalne redundantsus tagatud suhteliselt lühikeste korduste olemasoluga. Lõpuks on mõnes faagis genoom esindatud mitme nukleiinhappefragmendi komplektiga.

Evolutsioonilisest vaatenurgast erinevad nii erinevat tüüpi geneetilist materjali kasutavad bakteriofaagid üksteisest palju suuremal määral kui ükski teine eukarüootsete organismide esindaja. Samal ajal, Vaatamata sellistele fundamentaalsetele erinevustele geneetilise teabe kandjate - nukleiinhapete - struktuuris ja omadustes, näitavad erinevad bakteriofaagid paljudes aspektides ühtsust, peamiselt raku metabolismi häirimise olemuses pärast tundlike bakterite nakatumist.

Bakteriofaagid, mis on võimelised tekitama rakkude produktiivset nakatumist, st. infektsioon, mille tulemusena moodustuvad elujõulised järglased, on määratletud kui mittedefektne. Kõiki mittedefektseid faagisid iseloomustavad kaks olekut: rakuvälise ehk vaba faagi seisund (mõnikord nimetatakse seda ka küpseks faagiks) ja vegetatiivse faagi seisund. Mõne nn parasvöötme faagi puhul on võimalik ka profaagi olek.

Ekstratsellulaarsed faagid on osakesed, millel on seda tüüpi faagile iseloomulik struktuur, mis tagab faagi genoomi säilimise infektsioonide ja selle järgmisse tundlikku rakku viimise vahelisel perioodil. Ekstratsellulaarne faag on biokeemiliselt inertne ja vegetatiivne faag on faagi aktiivne (“elus”) olek, mis tekib pärast tundlike bakterite nakatumist või pärast profaagi esilekutsumist.

Mõnikord ei põhjusta tundlike rakkude nakatumine mittedefektse faagiga elujõuliste järglaste moodustumist. See võib juhtuda kahel juhul: abortiivse infektsiooni ajal või raku lüsogeense seisundi tõttu parasvöötme faagiga nakatumise ajal.

Nakkuse abortiivse iseloomu põhjuseks võib olla teatud rakusüsteemide aktiivne sekkumine infektsiooni kulgu, näiteks bakterisse viidud faagi genoomi hävimine või mõne rakus vajaliku toote puudumine. faagi areng jne.

Faagid jagunevad üldiselt kolme tüüpi. Tüübi määrab produktiivse faagiinfektsiooni mõju olemus nakatunud raku saatusele.

Esimene tüüp– tõeliselt virulentsed faagid. Raku nakatumine virulentse faagiga põhjustab paratamatult nakatunud raku surma, selle hävimise ja järglasfaagi vabanemise (v.a abortiivse infektsiooni juhud). Selliseid faage nimetatakse tõeliselt virulentseteks, et eristada neid parasvöötme faagide virulentsetest mutantidest.

Teine tüüp- parasvöötme faagid. Raku produktiivse nakatumise ajal parasvöötme faagiga on selle arengu kaks põhimõtteliselt erinevat teed: lüütiline, üldiselt (oma tulemuselt) sarnane virulentsete faagide lüütilise tsükliga ja lüsogeenne, kui parasvöötme faagi genoom muundub eriseisundisse – profaagiks. Profaagi kandvat rakku nimetatakse lüsogeenseks või lihtsalt lüsogeeniks (kuna teatud tingimustel võib see läbi viia faagi lüütilise arengu). Parasvöötme faage, mis reageerivad profaagi olekus indutseeriva faktori kasutamisele, alustades lüütilist arengut, nimetatakse indutseeritavateks, ja faage, mis sel viisil ei reageeri, nimetatakse mitteindutseeritavateks. Virulentsed mutandid võivad tekkida parasvöötme faagides. Virulentsuse mutatsioonid põhjustavad muutusi nukleotiidjärjestuses operaatorpiirkondades, mille tulemuseks on afiinsuse kaotus repressori suhtes.

Kolmas faagitüüp on faagid, mille produktiivne nakatumine ei põhjusta bakterite surma. Need faagid suudavad nakatunud bakterist lahkuda, põhjustamata selle füüsilist hävitamist. Sellise faagiga nakatunud rakk on pideva (püsiva) produktiivse infektsiooni seisundis. Faagi areng põhjustab bakterite jagunemise kiiruse kerget aeglustumist.

Bakteriofaagid erinevad keemilise struktuuri, nukleiinhappe tüübi, morfoloogia ja bakteritega interaktsiooni olemuse poolest. Suuruse järgi bakteriaalsed viirused sadu ja tuhandeid kordi väiksemad kui mikroobirakud.

Tüüpiline faagiosake (virion) koosneb peast ja sabast. Saba pikkus on tavaliselt 2–4 korda suurem pea läbimõõdust. Pea sisaldab geneetilist materjali – üheahelalist või kaheahelalist RNA-d või DNA-d, mille ensüümi transkriptaas on inaktiivses olekus, ümbritsetud valgu- või lipoproteiini kestaga – kapsiidi, mis talletab genoomi väljaspool rakku.

Nukleiinhape ja kapsiid koos moodustavad nukleokapsiidi. Bakteriofaagidel võib olla ikosaeedriline kapsiid, mis on kokku pandud ühe või kahe spetsiifilise valgu mitmest koopiast. Tavaliselt on nurgad valmistatud valgu pentameeridest ja mõlema külje tugi on valmistatud sama või sarnase valgu heksameeridest. Lisaks võivad faagid olla sfäärilised, sidrunikujulised või pleomorfsed. Saba on valgutoru - pea valgukesta jätk saba põhjas on ATPaas, mis regenereerib energiat geneetilise materjali süstimiseks. Samuti on bakteriofaagid lühikese protsessiga, ilma protsessita ja filamentsed.

Faagide põhikomponendid on valgud ja nukleiinhapped. Oluline on märkida, et faagid, nagu ka teised viirused, sisaldavad ainult ühte tüüpi nukleiinhappeid – desoksüribonukleiinhapet (DNA) või ribonukleiinhapet (RNA). See omadus eristab viirusi mikroorganismidest, mis sisaldavad oma rakkudes mõlemat tüüpi nukleiinhappeid.

Nukleiinhape asub peas. Väike kogus valku (umbes 3%) leiti ka faagipea seest.

Seega on faagid oma keemilise koostise poolest nukleoproteiinid. Sõltuvalt nukleiinhappe tüübist jagatakse faagid DNA-ks ja RNA-ks. Valgu ja nukleiinhappe kogus on faagiti erinev. Mõnel faagil on peaaegu sama sisaldus ja igaüks neist komponentidest on umbes 50%. Teistes faagides võib nende põhikomponentide suhe olla erinev.

Lisaks nendele põhikomponentidele sisaldavad faagid väikeses koguses süsivesikuid ja mõningaid valdavalt neutraalseid rasvu.

Joonis 1: Faagiosakese struktuuri skeem.

Kõik teadaolevad teise morfoloogilise tüübi faagid on RNA. Kolmanda morfoloogilise tüübi faagide hulgas leidub nii RNA kui ka DNA vorme. Ülejäänud faagid morfoloogilised tüübid- DNA omad.

131. Interferoon. Mis see on?

Sekkuda O n(ladina keelest inter - vastastikku, üksteise ja ferio vahel - löön, löön), kaitsev valk, mida toodavad imetajate ja lindude kehas olevad rakud, samuti rakukultuurid vastusena viirustega nakatumisele; pärsib viiruste paljunemist (replikatsiooni) rakus. I. avastasid 1957. aastal inglise teadlased A. Isaacs ja J. Lindenman nakatunud kanade rakkudest; Hiljem selgus, et I. teket põhjustavad ka bakterid, riketsia, toksiinid, nukleiinhapped, sünteetilised polünukleotiidid. I. ei ole üksikaine, vaid rühm madala molekulmassiga valke (molekulmass 25 000-110 000), mis on stabiilsed laias pH tsoonis, resistentsed nukleaaside suhtes ja hävitatud proteolüütiliste ensüümide poolt. I. moodustumine rakkudes on seotud viiruse arenguga neis, see tähendab, et see kujutab endast raku reaktsiooni võõra nukleiinhappe tungimisele. Pärast nakatava viiruse kadumist rakust ei tuvastata viirust normaalsetes rakkudes. Toimemehhanismi järgi erineb I. põhimõtteliselt antikehadest: ei ole spetsiifiline viirusnakkustele (toimib erinevate viiruste vastu), ei neutraliseeri viiruse nakkavust, vaid pärsib selle paljunemist organismis, pärssides sünteesi. viiruse nukleiinhapetest. Kui see siseneb rakkudesse pärast viirusinfektsiooni tekkimist neis, ei ole I. efektiivne. Lisaks on I. reeglina spetsiifiline seda moodustavatele rakkudele; näiteks kanarakkude I. on aktiivne ainult nendes rakkudes, kuid ei pärsi viiruse paljunemist küüliku või inimese rakkudes. Arvatakse, et viiruseid ei mõjuta mitte viirus ise, vaid mõni teine selle mõjul toodetud valk. I. ennetamise ja ravi testimisel saadi julgustavaid tulemusi viirushaigused(herpeetiline silmainfektsioon, gripp, tsütomegaalia). Siiski laialt levinud kliiniline rakendus I. on piiratud ravimi kättesaamise raskusega, korduva organismi manustamise vajadusega ja selle liigispetsiifilisusega.

132. Disjunktiivne meetod. Mis see on?

1.Produktiivne viirusinfektsioon esineb kolmel perioodil:

· algperiood hõlmab viiruse rakule adsorptsiooni, rakku tungimise, viiruse lagunemise (deproteiniseerumise) või lahtiriietumise etappe. Viiruse nukleiinhape viidi sobivatesse rakustruktuuridesse ja lüsosomaalsete ensüümide toimel vabastati rakud kaitsvatest valkude kestadest. Selle tulemusena moodustub ainulaadne bioloogiline struktuur: nakatunud rakk sisaldab 2 genoomi (oma ja viiruslikku) ja 1 sünteetilist aparaati (rakuline);

Pärast seda see algab teine rühm viiruste paljunemisprotsessid, sealhulgas keskmine Ja viimased perioodid, mille käigus toimub raku represseerimine ja viiruse genoomi ekspressioon. Rakulise genoomi represseerimise tagavad madala molekulmassiga regulaatorvalgud nagu histoonid, mis sünteesitakse mis tahes rakus. Viirusnakkuse ajal see protsess intensiivistub, nüüd on rakk struktuur, milles geneetilist aparaati esindab viiruse genoom ja sünteetilist aparaati esindavad raku sünteetilised süsteemid.

2. Juhtub sündmuste edasine kulg rakusviiruse nukleiinhapete replikatsiooniks(uute virionide geneetilise materjali süntees) ja selles sisalduva geneetilise teabe rakendamine(valgukomponentide süntees uute virionide jaoks). DNA-d sisaldavates viirustes, nii prokarüootsetes kui ka eukarüootsetes rakkudes, toimub viiruse DNA replikatsioon rakulise DNA-st sõltuva DNA polümeraasi osalusel. Sel juhul tekivad esmalt üheahelalised DNA-d sisaldavad viirused täiendavad niit on nn replikatiivne vorm, mis toimib tütar-DNA molekulide mallina.

3. DNA-s sisalduva viiruse geneetilise teabe rakendamine toimub järgmiselt: DNA-sõltuva RNA polümeraasi osalusel sünteesitakse mRNA, mis siseneb raku ribosoomidesse, kus sünteesitakse viirusspetsiifilisi valke. Kaheahelalistes DNA viirustes, mille genoom transkribeeritakse peremeesraku tsütoplasmas, on see tema enda genoomne valk. Viirused, mille genoomid transkribeeritakse raku tuumas, kasutavad seal sisalduvat raku DNA-sõltuvat RNA polümeraasi.

U RNA viirused protsessid replikatsioon nende genoom, transkriptsioon ja geneetilise informatsiooni translatsioon viiakse läbi muul viisil. Viiruse RNA replikatsioon, nii miinus- kui ka plussahelad, toimub RNA replikatiivse vormi kaudu (komplementaarne originaalile), mille sünteesi tagab RNA-sõltuv RNA polümeraas - see on genoomne valk, mida kõik RNA-d sisaldavad. viirustel on. Miinusahelaga viiruste (plussahela) RNA replikatiivne vorm ei toimi mitte ainult viiruse RNA tütarmolekulide (miinusahelad) sünteesi mallina, vaid täidab ka mRNA funktsioone, st läheb ribosoomidesse. ja tagab viirusvalkude sünteesi (saade).

U pluss-ahela RNA-d sisaldavate viiruste puhul teostavad translatsioonifunktsiooni selle koopiad, mille süntees viiakse läbi replikatiivse vormi (miinusahela) kaudu viiruse RNA-st sõltuvate RNA polümeraaside osalusel.

Mõnedel RNA viirustel (reoviirused) on täiesti ainulaadne transkriptsioonimehhanism. Seda annab spetsiifiline viiruse ensüüm - revertaas (pöördtranskriptaas) ja seda nimetatakse pöördtranskriptsiooniks. Selle olemus seisneb selles, et esiteks moodustub viiruse RNA maatriksil pöördtranskriptsiooni osalusel transkript, mis on üks DNA ahel. Sellel sünteesitakse raku DNA-st sõltuva DNA polümeraasi abil teine ahel ja moodustub kaheahelaline DNA transkript. Sellest realiseerub tavapärasel viisil mRNA moodustumise kaudu viiruse genoomi teave.

Kirjeldatud replikatsiooni, transkriptsiooni ja translatsiooni protsesside tulemus on moodustumine tütarmolekulid viiruse nukleiinhape ja viiruslikud valgud, kodeeritud viiruse genoomis.

Pärast seda tuleb kolmas ja viimane periood viiruse ja raku vaheline interaktsioon. Raku tsütoplasmaatilise retikulumi membraanidel moodustuvad struktuurikomponentidest (nukleiinhapped ja valgud) uued virioonid. Rakk, mille genoom on represseeritud (supresseeritud), tavaliselt sureb. Äsja moodustunud virionid passiivselt(rakusurma tagajärjel) või aktiivselt(pungades) lahkuvad rakust ja satuvad selle keskkonda.

Seega viiruse nukleiinhapete ja valkude süntees ning uute virioonide kokkupanek esinevad teatud järjestuses (ajaliselt eraldatuna) ja erinevates rakustruktuurides (ruumiliselt eraldatud) ning seetõttu hakati viiruste paljunemise meetodit nn. disjunktiivne(lahtiühendatud). Aborduva viirusnakkuse ajal katkeb viiruse ja raku vaheline interaktsiooni protsess ühel või teisel põhjusel enne raku genoomi allasurumise tekkimist. Ilmselgelt sel juhul viiruse geneetiline informatsioon ei rakendu ja viirus ei paljune ning rakk säilitab oma funktsioonid muutumatuna.

Varjatud viirusnakkuse ajal toimivad rakus mõlemad genoomid samaaegselt ning viiruse poolt indutseeritud transformatsioonide käigus muutub viiruse genoom raku genoomi osaks, toimib ja pärandub koos sellega.

133. Kaameli rõugete viirus

Rõuged (Variola)- nakkuslik nakkushaigus, mida iseloomustab palavik ja papulaarne-pustuloosne lööve nahal ja limaskestadel.
Haiguse tekitajad kuuluvad rõugeviiruse perekonna (Poxviridae) erinevatesse perekondadesse ja liikidesse. Sõltumatud liigid on järgmised viirused: lehmarõuged, vaktsiinia (perekond Orthopoxvirus), lambarõuged, kitsed (perekond Carpipoxvirus), sead (perekond Suipoxvirus), linnud (perekond Avipoxvirus) kolme põhiliigiga (tuulerõugete, tuvide ja kanaarilindude patogeenid).
Rõugete patogeenid juures erinevat tüüpi loomad on morfoloogiliselt sarnased. Need on DNA-d sisaldavad viirused, mida iseloomustavad suhteliselt suured suurused (170 - 350 nm), epiteeliotroopia ja võime moodustada rakkudes elementaarseid ümmargusi inklusioone (Paschen, Guarnieli, Bollingeri kehad), mis on pärast Morozovi järgi värvimist nähtavad valgusmikroskoobi all. Kuigi eksisteerib fülogeneetiline Erinevate loomaliikide rõugete patogeenide vahel on tugev seos, ei ole patogeensuse spekter ühesugune ja immunogeensed seosed ei säili kõigil juhtudel. Lammaste, kitsede, sigade ja lindude variolaviirused on patogeensed ainult vastavatele liikidele ning looduslikes tingimustes põhjustab igaüks neist iseseisva (algse) rõuge. Variola- ja vaktsiiniaviirustel on lai patogeensus, sealhulgas veiste, pühvlite, lehmade, eeslite, muulade, kaamelite, küülikute, ahvide ja inimeste puhul.

KAAMELIRÕUGE VARIOLA CAMELINA nakkav haigus, mis tekib iseloomuliku sõlme-pustuloosse rõugelööbe tekkega nahal ja limaskestadel. Nimi Variola tuleb ladinakeelsest sõnast Varus, mis tähendab kõverat (pockmarked).

Haiguse epizootoloogia. Igas vanuses kaamelid on rõugetele vastuvõtlikud, kuid noorloomad haigestuvad sagedamini ja raskemini. Rõugetest puutumata statsionaarsetes piirkondades haigestuvad täiskasvanud kaamelid harva, kuna peaaegu kõik haigestuvad rõugetesse noores eas. Tiinetel kaamelitel võivad rõuged põhjustada aborte.

Teiste liikide loomad ei ole looduslikes tingimustes vastuvõtlikud algsele kaambelõugeviirusele. Lisaks lehmadele ja kaamelitele on lehmarõugetele ja vaktsiiniaviirusele vastuvõtlikud pühvlid, hobused, eeslid, sead, küülikud ja inimesed, kes pole rõugete suhtes immuunsed. Laboratoorsetest loomadest on merisead pärast viiruse kandmist karmistunud silma sarvkestale tundlikud lehmarõugete ja vaktsiinia viiruste suhtes (F.A. Petunia, 1958).

Rõugeviiruste peamisteks allikateks on rõugetesse haigestunud loomad ja lehmarõugeid põdevad inimesed, kes haigestuvad suurenenud tundlikkuse tagajärjel pärast vasikate rõugedetritiga vaktsiiniaviirusega immuniseerimist. Haiged loomad ja inimesed levitavad viirust väliskeskkonda peamiselt viirust sisaldava naha ja limaskestade äratõukunud epiteeliga. Väliskeskkonda satub viirus ka aborteerunud loodetega (K.N. Buchnev ja R.G. Sadykov, 1967). Rõugete tekitajat võivad mehaaniliselt levitada rõugete suhtes immuunsed kodu- ja metsloomad, sealhulgas kodulinnud, aga ka rõugete suhtes immuunsed inimesed vaktsiiniavaktsiiniga vaktsineeritud lastelt.

Looduslikes tingimustes nakatuvad terved kaamelid kokkupuutel haigete loomadega viirusega saastunud piirkonnas saastunud vee, sööda, ruumide ja hooldusvahendite kaudu, samuti aerogeenselt, kui haiged loomad pritsivad viirust sisaldavaid heitmeid. Sagedamini nakatuvad kaamelid viiruse sattumisel organismi läbi naha ja limaskestade, eriti kui nende terviklikkus on kahjustatud või A-vitamiini puudusega.

Episootia kujul esineb rõuge kaamelitel ligikaudu iga 20-25 aasta järel. Sel ajal on noorloomad eriti raskelt haiged. Episootiate vahelisel perioodil piirkondades, mis on kaamelite seas rõugetest püsivalt kahjustatud, esinevad rõuged enzootiliste ja sporaadiliste juhtudena, mis esinevad enam-vähem regulaarselt iga 3-6 aasta tagant, peamiselt 2-4-aastastel loomadel. Sellistel juhtudel haigestuvad loomad suhteliselt kergesti, eriti soojal aastaajal. Külma ilmaga on rõuged raskemad, kestavad kauem ja sellega kaasnevad tüsistused, eriti noortel loomadel. Väikestes farmides haigestuvad peaaegu kõik vastuvõtlikud kaamelid 2-4 nädala jooksul. Arvestada tuleb sellega, et kaamelite seas võivad rõugepuhanguid põhjustada nii kaamelite algviirus kui ka lehmarõugeviirus, mis üksteise vastu immuunsust ei loo. Seetõttu võivad erinevate rõugeviiruste põhjustatud puhangud üksteisele järgneda või ilmneda samaaegselt.

Patogenees määrab patogeeni väljendunud epiteliotroopia. Looma organismi sattudes viirus paljuneb ja tungib verre (vireemia), lümfisõlmedesse, siseorganitesse, naha ja limaskestade epiteelikihti ning põhjustab neis spetsiifiliste eksanteemide ja enanteemide moodustumist, mille raskusaste. sõltub organismi reaktsioonivõimest ja viiruse virulentsusest, selle organismi tungimise radadest ja epiteelikihi seisundist. Pockmarks arenevad järjestikku etappidena: sõlmekesega roseoolist kuni kooriku ja armide moodustumisega pustulini.

Sümptomid. Inkubatsiooniperiood, olenevalt kaamelite vanusest, viiruse omadustest ja kehasse tungimise viisidest, on 3–15 päeva: noorloomadel 4–7 päeva, täiskasvanutel 6–15 päeva. Immuunsuseta kaamelitest sündinud kaamelipojad võivad haigestuda 2-5 päeva pärast sündi. Lühim peiteaeg (2-3 päeva) esineb kaamelitel pärast seda, kui nad on nakatunud vaktsiiniaviirusega.

Prodromaalperioodil tõuseb haigetel kaamelitel kehatemperatuur 40-41°-ni, ilmneb letargia ja toitumisest keeldumine, sidekesta ning suu ja nina limaskestad on hüpereemilised. Kuid need märgid on sageli nähtavad, eriti haiguse alguses farmis.

Kaamelite rõugete kulg on olenevalt vanusest samuti erinev: noorloomadel, eriti vastsündinutel, on see sageli äge (kuni 9 päeva); täiskasvanutel - alaäge ja krooniline, mõnikord varjatud, sagedamini tiinetel kaamelitel. Kaamelite rõugete kõige iseloomulikum vorm on naha alaägeda kulgemisega (joon. 1).

Suust ja ninast eraldub alaägeda haiguse käigus selge, hiljem hägune hallikas-määrdunud lima. Loomad raputavad pead, nuusutavad ja nurruvad, paiskades välja viirusega nakatunud epiteeli koos viirust sisaldava limaga. Peagi tekib huulte, ninasõõrmete ja silmalaugude piirkonda turse, mis mõnikord levib lõualuudevahelisse piirkonda, kaela ja isegi rindkere piirkonda. Submandibulaarsed ja alumised emakakaela lümfisõlmed on laienenud. Loomade isu langeb, nad lamavad sagedamini ja kauem kui tavaliselt ning neil on suuri raskusi püsti tõusta. Selleks ajaks ilmuvad huulte, nina ja silmalaugude nahale, suu ja nina limaskestadele punakashallid laigud; Nende alla moodustuvad tihedad sõlmekesed, mis suurenedes muutuvad halliks papulideks ja seejärel herne- ja oasuurusteks mädavillideks, mille keskosa on sissevajunud ja äärtes on rullitaoline paksenemine.

Pustulid pehmenevad, lõhkevad ja neist eraldub kleepuv helehall vedelik. Pea turse kaob selleks ajaks. 3-5 päeva pärast kaetakse avatud pustulid koorega. Kui koresööt neid ei vigasta, siis haigus sellega ka lõpeb. Eemaldatud või mahakukkunud esmastel koorikutel on vastupidine kraatrikujuline pustuli kuju. Taskujälgede asemele jäävad armid. Kõik need nahakahjustused tekivad 8-15 päeva jooksul.

Haigetel kaamelitel tekivad täpid sageli esmalt peas. Ühe kuni nelja aasta vanused kaamelid haigestuvad tavaliselt kergesti. Kahjustused paiknevad peanahal, peamiselt huultel ja ninas. Kaamelitel on udar sageli kahjustatud. Mõni päev pärast esmaste pustulite avanemist peapiirkonnas tekivad nahale ja teistele õhukesekarvalistele kehapiirkondadele (rindkere, kaenlaalused, kõhukelme ja munandikotti, ümber anus, küünarvarre ja reie sisemine osa) ning kaamelitel ka tupe limaskestal. Sel ajal tõuseb kaameli kehatemperatuur tavaliselt uuesti, mõnikord kuni 41,5°-ni ning emased kaamelid sünnitavad viimasel tiinuskuul enneaegseid ja vähearenenud kaameleid, kes reeglina peagi surevad.

Mõnel loomal muutub silma sarvkest (okkas) häguseks, põhjustades ühest silmast ajutist pimedaksjäämist 5-10 päevaks ja kaamelitel sagedamini mõlemas silmas. Kaameli vasikatel, kes haigestuvad vahetult pärast sündi, tekib kõhulahtisus. Sellisel juhul surevad nad 3-9 päeva jooksul pärast haigust.

Rõugete suhteliselt healoomulise alaägeda kulgemise korral ja tavaliselt pärast vaktsiiniaviirusega nakatumist paranevad loomad 17–22 päeva jooksul.

Täiskasvanud kaamelitel limaskestal suuõõne avanevad pustulid sageli ühinevad ja veritsevad, eriti kui neid vigastada koresööda tõttu. See raskendab toidu söömist, loomad kaotavad kaalu, paranemisprotsess viibib kuni 30-40 päeva ja haigus muutub krooniliseks.

Rõugete protsessi üldistamisega tekib mõnikord püeemia ja tüsistused (kopsupõletik, gastroenteriit, nekrobakterioos jne) - Sellistel juhtudel kestab haigus kuni 45 päeva või kauem. On esinenud mao ja soolte talitlushäireid, millega on kaasnenud atoonia ja kõhukinnisus. Mõned haiged loomad kogevad jäsemete turset.

Varjatud rõugetega (ilma iseloomulike kliiniliste haigustunnusteta, ainult palaviku korral) kaamelitel tekivad abordid 1-2 kuud enne varssamist (kuni 17-20%).

Täiskasvanud kaamelite haiguse prognoos on soodne, on ebasoodne ägeda kulgemisega kaamelivasikatel, eriti alla 15-20 päeva vanustel ja kaamelitelt, kes pole rõugete suhtes immuunsed. Kaamelipojad haigestuvad raskelt ja kuni 30–90% neist sureb. 1-3-aastased kaamelid haigestuvad kergemini rõugetesse ja vanemas eas, kuigi nad on raskelt haiged, on väljendunud üldistatud protsessi tunnustega suremus madal (4-7%).

Patoloogilisi muutusi iseloomustavad ülalkirjeldatud naha, limaskestade ja silma sarvkesta kahjustused. Epikardil ja soole limaskestal on määrata täpselt hemorraagiad. Rinnaõõnes rannikualal on mõnikord näha ka hirsiterade kuni hallide ja hallikaspunaste kalgendatud sisuga läätsede suurused väikesed verejooksud ja sõlmekesed. Söögitoru limaskest on kaetud hirsiteradega sõlmekestega, mida ümbritsevad rullitaolised kõrgendused. Armi limaskestal (mõnikord põiel) on sarnased verejooksud ja sakiliste servadega sõlmekesed, samuti väikesed haavandid, mille keskosa on sissevajunud roosakas. Paapulides võib leida elementaarseid kehasid nagu Pascheni kehad, millel on diagnostiline väärtusäigepreparaadi mikroskoopial sukeldamisel läbi tavalise valgusmikroskoobi.

Diagnoos põhineb kliiniliste ja episootiliste andmete analüüsil (tuleb arvestada kaamelite nakatumise võimalusega inimestelt), patoloogilistel muutustel, positiivseid tulemusi mikroskoopia (värskete papulade määrde töötlemisel Morozovi hõbetamismeetodil) või elektronoskoopia, samuti rõugetele vastuvõtlike loomade biotestid. Viirust on võimalik isoleerida rõugetega kaamelite aborteerunud loodete elunditest. Rõugete diagnoosimisel on soovitatav kasutada ka difusioonisadestamise reaktsiooni agargeelis ja neutraliseerimisreaktsiooni aktiivsete spetsiifiliste seerumite või globuliinide juuresolekul.

Diferentsiaaldiagnostika viiakse läbi kahtlastel juhtudel (võttes arvesse kliinilisi ja episootilisi tunnuseid). Rõuged tuleb eristada nekrobakterioosist patoloogilisest materjalist saadud määrde mikroskoopia ja sellele vastuvõtlike valgete hiirte nakatumise teel; suu- ja sõrataudist - merisigade nakatumine patoloogilise materjali suspensiooniga tagajalgade naha tallapinnas; seennakkustest ja sügelistest - uuritud naha kahjustatud piirkondadelt võetud kaapimistest vastavate haigustekitajate leidmisega; brutselloosist abordi, nurisünnituse ja enneaegsete varssade ajal - RA ja RSK kaamelite vereseerumi uurimisega ning loodete bakterioloogilise uuringuga mikroobikultuuri eraldamisega toitesöötmel ja mikroskoopiaga (vajadusel kasutada merisigadel biotesti koos järgneva bakterioloogilise ja vere ja seerumi seroloogilised uuringud).

Rõugete diagnoosimisel kaamelitel on vaja välistada ka mittenakkav, kuid mõnikord laialt levinud haigus, mis esineb huulte ja nina piirkonna nahakahjustustega - Yantak-bash (Türkmeen), Dzhantak-bas ( kasahhi), mis tekib vigastusest, kui neile süüakse põõsaid, mida nimetatakse kaameli okasteks (yantak, jantak, Alhagi). Seda haigust võib tavaliselt täheldada sügisel noortel, peamiselt alla üheaastastel kaamelitel. Täiskasvanud kaameleid mõjutab kaameli okas vaid veidi. Yantak-bashi puhul ei esine erinevalt rõugetest suu limaskestal reeglina sõlmesid ega papulitaolisi kahjustusi. Yantak-bashi ajal tekkiv hallikas kate on suhteliselt kergesti eemaldatav. Siiski tuleb arvestada, et Yantak-bash soodustab rõugetega kaamelite haigust ja esineb sageli sellega samaaegselt.

Rõugeviiruse isoleerimisel on vaja määrata selle tüüp (originaal, lehmarõuge või vaktsiinia), kasutades meetodeid, mis on määratud NSVL Tervishoiuministeeriumi 1968. aasta juhendis lehmarõugete ennetamise kohta inimestel, andmed, mis on saadud pärast nakatumist (in. isoleeritud haigusseisundid) kaamelitel, kellel oli rõugevaktsiini viirus ja isoleeritud patogeenid.

Haigete kaamelite ravi on peamiselt sümptomaatiline. Mõjutatud piirkondi töödeldakse kaaliumpermanganaadi lahusega (1:3000) ja pärast kuivatamist määritakse 10% joodi ja glütseriini tinktuuri (1:2 või 1:3) seguga. Pärast täppide avamist töödeldakse neid süntomütsiini 5% emulsiooniga rikastatud kalaõlis, millele lisatakse vahekorras 1:15-1:20 joodi tinktuuri; salvid - tsink, ihtiool, penitsilliin jne. Vaseliiniga võib kasutada 2% salitsüül- või boorisalvi ja 20-30% taruvaigu salvi. Kuuma ilmaga on soovitatav kasutada 3% kreoliini salvi, tõrva ja heksakloraani tolmu. Mõjutatud piirkondi määritakse 2-3 korda päevas emulsioonides ja salvides leotatud tampoonidega.

Mõjutatud suu limaskesta pestakse 2-3 korda päevas 10% kaaliumpermanganaadi lahusega või 3% vesinikperoksiidi lahusega või salvei, kummeli ja muude desinfektsiooni- ja kokkutõmbavate ainete keetmisega. Konjunktiviidi korral pestakse silmi 0,1% tsinksulfaadi lahusega.

Vältimaks sekundaarse mikroobse infektsiooni teket ja võimalikud tüsistused, on soovitatav manustada penitsilliini ja streptomütsiini intramuskulaarselt. Üldise nõrkuse ja tüsistuste korral on näidustatud südameravimid.

Raskete haigusjuhtude spetsiifilise ravina võite kasutada rõugetest paranenud kaamelite seerumit või verd (subkutaanselt 1-2 ml 1 kg looma kaalu kohta). Süstekohad lõigatakse esmalt hoolikalt läbi ja pühitakse joodi tinktuuriga.

Haigetele ja taastuvatele kaamelitele antakse sageli puhast vett, klii- või odrajahu, pehmet sinirohu- või peent lutserniheina või odrajahuga maitsestatud puuvillakestasid. Külma ilmaga hoitakse haigeid loomi, eriti kaameleid puhtas, kuivas ja soojas ruumis või kaetakse tekiga.

Looduslikult rõugetest paranenud kaamelite immuunsus püsib kuni 20-25 aastat, s.o peaaegu kogu elu. Immuunsuse olemus on naha-humoraalne, mida tõendab viirust neutraliseerivate antikehade olemasolu taastunud loomade vereseerumis ja kaamelite immuunsus. uuesti nakatumine homoloogne rõugeviirus. Rõugeid põdenud kaamelitest sündinud kaamelipojad ei ole vastuvõtlikud seda tüüpi rõugetele, mis kaamelil olid, eriti esimesel kolmel aastal, st enne puberteeti. Episootilisel perioodil emaka all olevad kaamelipojad reeglina rõugetesse ei haigestu ega haigestu suhteliselt kergesti ja lühiajaliselt.

Ennetus- ja kontrollimeetmed on kõigi veterinaar-, sanitaar- ja karantiinimeetmete range järgimine, haiguse õigeaegne diagnoosimine ja viiruse tüübi määramine. Inimestel ei tohiks lubada vaktsineerimise ajal ja vaktsineerimisjärgsel perioodil kaameleid hooldada enne, kui neil (või nende lastel) on rõugete vastu vaktsineerimisel ilmnenud kliiniliselt oluline reaktsioon. Kõiki farmi sisenevaid kaameleid, lehmi ja hobuseid tuleb hoida 30 päeva isolatsioonis.

Rõugete ilmnemisel kaamelite, lehmade ja hobuste seas tunnistatakse rajooni täitevkomitee eriotsusega koht, asula või piirkond, karjamaa, kus see haigus avastati, rõugetest puutumatuks ning rakendatakse karantiin, piiravad ja tervisekaitsemeetmed.

Rõugete ilmnemisest teavitatakse viivitamatult kõrgemaid veterinaarorganisatsioone, naaberfarme ja ringkondi, et saaks rakendada asjakohaseid meetmeid haiguse edasise leviku tõkestamiseks.

Kaamelite lehmarõugetesse nakatumise vältimiseks on soovitatav kasutada meditsiiniline ravim- rõugete detritus, mida kasutatakse kõigi kliiniliselt tervete kaamelite immuniseerimiseks, olenemata nende vanusest, soost ja füsioloogiline seisund(tiined ja imetavad kaamelid). Selleks lõigatakse kaameli kaela alumises kolmandikus karvad ära, töödeldakse alkoholeetri või 0,5% karboolhappe lahusega, pühitakse vatiga kuivaks või kuivatatakse, nahk kooritakse ja tehakse 2-3 madalat paralleelset kriimustust. kantakse jämeda nõela, skalpelliotsa või -4 cm pikkusega. Kandke 3-4 tilka lahustunud vaktsiini värskelt kõvendatud nahapinnale ja hõõruge seda kergelt spaatliga. Lahustage vaktsiin ampullide ja ampullide karpide etiketil näidatud viisil. Lahjendatud ja kasutamata vaktsiin ja vaktsiiniampullid desinfitseeritakse keetmise teel ja hävitatakse. Vaktsineerimiseks kasutatavad instrumendid pestakse 3% karboolhappe lahusega või 1% formaldehüüdi lahusega ja steriliseeritakse keetmisega.

Kui kaamel ei olnud lehmarõugete suhtes immuunne, peaksid 5–7. päeval pärast vaktsineerimist skarifikatsiooni kohale ilmuma papulid. Kui neid pole, korratakse vaktsineerimist, kuid kaela vastaspoolel ja erineva seeria vaktsiiniga. Rõugete vastu immuunsed ja isikliku hügieeni reegleid tundvad isikud võivad hoolitseda immuniseeritud ja haigete kaamelite eest. Noored loomad, eriti nõrgemasse rühma kuuluvad loomad, võivad mõnikord vaktsineerimisele tugevalt reageerida ja haigestuda väljendunud rõugete tunnustega.

Haiged ja vaktsiinile raskelt reageerivad kaamelid isoleeritakse ja neid ravitakse (vt eespool). Loomahooned ja rõugeviirusega saastunud kohad on soovitatav desinfitseerida kuumade 2-4% seebikivi ja kaaliumi lahustega, 3% väävli-karboolsegu lahusega või 2-3% väävelhappe lahustega või selitatud valgendi lahustega. , mis sisaldavad 2-6% aktiivset kloori, mis inaktiveerivad rõugeviiruse 2-3 tunni jooksul (O. Trabaev, 1970). Võite kasutada ka 3-5% klooramiini ja 2% formaldehüüdi lahuseid. Sõnnik tuleb põletada või desinfitseerida biotermiliselt. Rõugete kliiniliste tunnustega surnud kaamelite korjused tuleb põletada. Haigete või rõugete kahtlusega kaameli piima, kui see ei sisalda mädalisandit ega ole muul põhjusel vastunäidustatud, võib tarbida alles pärast 5-minutilist keetmist või pastöriseerimist 85-30 minutit. Rõugemajanduse hädade perioodil hukkunud kaamelite villa ja nahka töödeldakse vastavalt loomse päritoluga tooraine desinfitseerimise juhistele.

Piirangud rõugetest mõjutatud farmides ja asulates on soovitatav kaotada mitte varem kui 20 päeva pärast kõigi rõugetesse haigestunud loomade ja inimeste paranemist ning lõpliku desinfitseerimise põhjalikku läbiviimist.

134. Viiruste keemiline koostis ja biokeemilised omadused

1.1 Virioonide struktuur ja keemiline koostis.

Suurimad viirused (rõugeviirused) on suuruselt lähedased väikesed suurused bakterid, väikseimad (entsefaliidi, lastehalvatuse, suu- ja sõrataudi tekitajad) kuni suurte valgu molekulideni, mis on suunatud vere hemoglobiini molekulidele. Teisisõnu, viirustel on oma hiiglased ja kääbused. Viiruste mõõtmiseks kasutatakse tavapärast väärtust, mida nimetatakse nanomeetriks (n1nm). Üks nm on miljondik millimeetrist. Erinevate viiruste suurused varieeruvad 20 kuni mitmesaja nm.

Lihtsad viirused koosnevad valgust ja nukleiinhappest. Viiruse osakese kõige olulisem osa, nukleiinhape, on geneetilise informatsiooni kandja. Kui inimese, looma, taime ja bakterirakud sisaldavad alati kahte tüüpi nukleiinhappeid, siis desoksüribonukleiinhappe DNA ja ribonukleiinne RNA, siis leidub erinevates viirustes ainult ühte tüüpi DNA-d või RNA-d, mis on nende klassifitseerimise aluseks. Teiseks vajalik komponent Virioni valgud erinevad viiruste vahel, mis võimaldab neid immunoloogiliste reaktsioonide abil ära tunda.

Keerulisema ehitusega viirused sisaldavad lisaks valkudele ja nukleiinhapetele süsivesikuid ja lipiide. Iga viiruste rühma iseloomustab oma valkude, rasvade, süsivesikute ja nukleiinhapete komplekt. Mõned viirused sisaldavad ensüüme. Virioonide igal komponendil on spetsiifilised funktsioonid: valgukest kaitseb neid kahjulike mõjude eest, nukleiinhape vastutab pärilike ja nakkavate omaduste eest ning mängib juhtivat rolli viiruste varieeruvuses ning ensüümid osalevad nende paljunemises. Tavaliselt asub nukleiinhape virioni keskel ja seda ümbritseb valgukest (kapsiid), justkui oleks sellesse riietatud.

Kapsiid koosneb kindlast viisist, kuidas asetatakse sama tüüpi valgumolekulid (kapsomeerid), mis moodustavad sümmeetrilised geomeetrilised kujundid koos viiruste nukleiinhappega (nukleokapsiid). Nukleokapsiidi kuubisümmeetria korral on nukleiinhappe ahel keritud palliks ja kapsomeerid on selle ümber tihedalt pakitud. Nii toimivad lastehalvatuse, suu- ja sõrataudi jne viirused.

Nukleokapsiidi spiraalse (pulgakujulise) sümmeetriaga on viiruse niit keerdunud spiraali kujul, iga pööre on kaetud kapsomeeridega, mis on üksteisega tumedalt külgnevad. Kapsomeeride struktuuri ja virioonide välimust saab jälgida elektronmikroskoopia abil.

Enamik viiruseid põhjustades infektsioone inimestel ja loomadel on sellel kuubikujuline sümmeetria. Kapsiidil on peaaegu alati korrapärase kahekümne heedri ikosaeedri kuju, millel on kaksteist tippu ja võrdkülgsete kolmnurkade tahke.

Paljudel viirustel on lisaks valgukapsiidile ka välimine ümbris. Lisaks viirusvalkudele ja glükoproteiinidele sisaldab see ka sealt laenatud lipiide plasmamembraan peremeesrakud. Gripiviirus on näide spiraalsest virionist kuupkujulise sümmeetriaga ümbrikus.

Viiruste kaasaegne klassifikatsioon põhineb nende nukleiinhappe tüübil ja kujul, sümmeetria tüübil ja välise ümbrise olemasolul või puudumisel.

Biokeemilised omadused – vt treeningjuhend!!!

135. Elundite tükid, mis säilitavad funktsionaalse ja vohava aktiivsuse in vitro

Rakukultuur

mis tahes loomse koe rakud, mis on võimelised kasvama monokihina tehistingimustes spetsiaalse toitekeskkonnaga täidetud klaas- või plastpinnal. Rakkude allikas on värskelt saadud loomkude - esmased rakud" laboratoorsed rakutüved - siirdatud to-ry. rakud. Loote- ja kasvajarakkudel on parim võime kasvada tehistingimustes. Inimeste ja ahvide diploidset rakuvahemikku läbitakse piiratud arv kordi, mistõttu seda mõnikord nimetatakse rakkude poolpidev lõikamine. Rakusortide saamise etapid: allika jahvatamine; trüpsiini ravi; vabanemine detritusest; antibiootikumidega toitekeskkonnas suspendeeritud rakkude arvu standardimine; lekkimine katseklaasidesse või pudelitesse, milles rakud settivad seintele või põhjale ja hakkavad paljunema; monokihi moodustumise kontroll. Rakutüüpe kasutatakse viiruse eraldamiseks uuringutest. materjal viiruse suspensiooni kogumiseks, St. Hiljuti on seda kasutatud bakterioloogias.

136. Parasteesia. Mis see on?

PARESTESIA(kreeka keelest para-about, vaatamata ja aisthesis-sensatsioon), mida mõnikord nimetatakse ka düsesteesiaks, tuimus-, kipitus-, hanenahk- (mürmetsiasis, mürmetsismus, formicatio), põletustunne, sügelus, valulik külmetus (s.o n. psühroesteesia), liigutused jne, aistingud näiliselt säilinud jäsemetel amputeeritutel (pseudomelia paraesthetica). P. põhjused võivad olla erinevad. P. võib tekkida lokaalsete muutuste tagajärjel vereringes, Renaudi tõvega, erütromelalgiaga, akroparesteesiaga, endarteriidiga jne. esialgne sümptom spontaanne gangreen. Mõnikord esinevad need närvisüsteemi kahjustuse, traumaatilise neuriidiga (vrd tüüpiline P. ulnaris'e verevalumiga sulcus olecrani piirkonnas), toksilise ja nakkusliku neuriidiga, radikuliidiga, seljaaju pahümeningiidiga (juurte kokkusurumine), ägeda ja kroonilise. müeliit, eriti toidurõhuga selgroog(seljaaju kasvajad) ja tabes dorsalisega. Nende diagnostiline väärtus on kõigil neil juhtudel sama mis valu, anesteesia ja hüperesteesia diagnostiline väärtus: esinedes teatud piirkondades, piki ühe või teise perifeerse närvi trakti või ühe või teise radikulaarse innervatsiooni piirkonnas, võivad nad esineda. annab väärtuslikku teavet patoloogia asukoha kohta. protsessi. P. on võimalikud ka ajukahjustuse ilminguteks. Seega algavad kortikaalse epilepsia korral krambid sageli P.-ga, mis paikneb jäsemetes, millest seejärel krambid algavad. Neid täheldatakse sageli ajuarterioskleroosi või aju süüfilise korral ja on mõnikord apoplektilise insuldi esilekutsujad - Eraldi positsioonil on nn. vaimne P., st psühhogeense, hüpohondriaalse päritoluga P., mida iseloomustab eriti asjaolu, et neil pole mitte elementaarne, nagu orgaaniline, vaid keeruline iseloom - "ussid roomavad peanaha all", "tõstavad palli kõhust". kaelani” (Oppenheim) jne. Nende diagnostiline väärtus on loomulikult täiesti erinev orgaanilise P omast

137. Viirust sisaldava materjaliga töötamise ja ohutusabinõude reeglid

138. Veiste nakkusliku rinotrahheiidi viirus

Nakkuslik rinotrahheiit(ladina keeles – Rhinotracheitis infectiosa bovum; inglise keeles – Infectious bovine rhinotracheites; RTI, villiline lööve, infectious vulvovaginitis, nakkuslik riniit, "punane nina", ülemiste hingamisteede nakkuslik katarr) on äge nakkav haigus veised, mida iseloomustavad valdavalt hingamisteede katarraal-nekrootilised kahjustused, palavik, üldine depressioon ja konjunktiviit, samuti pustuloosne vulvovaginiit ja abort.

IRT tekitaja on Herpesvirus bovis 1, kuulub herpesviiruste perekonda, DNA-d sisaldav, virioni läbimõõt 120... 140 nm. Selle viiruse üheksa struktuurset valku on eraldatud ja iseloomustatud.

IRT viirust saab kergesti kultiveerida erinevates rakukultuurides, põhjustades CPE-d. Viiruse paljunemisega kaasneb mitootilise rakkude jagunemise pärssimine ja tuumasiseste inklusioonide moodustumine. Sellel on ka hemaglutineerivad omadused ja tropism hingamis- ja suguelundite rakkude jaoks ning see võib migreeruda limaskestadelt kesknärvisüsteemi ning on võimeline nakatama loodet raseduse esimese ja teise poole lõpus.

-60...-70 "C juures elab viirus 7...9 kuud, 56 °C juures inaktiveerub 20 minuti pärast, 37 °C juures - 4...10 päeva pärast, 22 °C juures - 50 päeva pärast Kell 4 " Viiruse aktiivsus väheneb veidi. Külmutamine ja sulatamine vähendavad selle virulentsust ja immunogeenset aktiivsust.

Formaldehüüdi lahused 1:500 inaktiveerivad viiruse 24 tunni pärast, 1:4000 - 46 tunni pärast, 1:5000 - 96 tunni pärast Happelises keskkonnas kaotab viirus kiiresti aktiivsuse ja püsib kaua (kuni 9 kuud). ) pH 6,0...9,0 ja temperatuuril 4 °C. Viiruse ellujäämise kohta on andmeid kuivjää temperatuuril 4...12 kuud, vedelas lämmastikus 1 aasta hoitud pullispermas. Näidatud on viiruse inaktiveerimise võimalus pullide spermas, töödeldes seda 0,3% trüpsiini lahusega.

Nakkustekitaja allikad on haiged loomad ja varjatud viirusekandjad. Pärast virulentse tüvega nakatumist muutuvad kõik loomad viiruse varjatud kandjateks. Isapullid on väga ohtlikud, kuna pärast haigestumist eritavad nad viirust 6 kuud ja võivad lehmi paaritumisel nakatada. Väliskeskkonda satub viirus ninaeritise, eritise silmadest ja suguelunditest, piima, uriini, väljaheidete ja spermaga. Arvatakse, et Aafrika riikides on gnuud RTI viiruse reservuaariks. Lisaks võib viirus paljuneda puukides, millel on oluline roll veiste haiguse tekitamisel.

Viiruse leviku tegurid on õhk, toit, sperma, sõidukid, hooldustarbed, linnud, putukad, aga ka inimesed (talutöötajad). Nakkusviisid: kontakt, õhu kaudu leviv, ülekantav, toit.

Vastuvõtlikud loomad on veised, olenemata soost ja vanusest. Kõige raskem on haigus lihaveistel. Katses õnnestus nakatada lambaid, kitsi, sigu ja hirvi. Tavaliselt haigestuvad loomad 10...15 päeva pärast düsfunktsionaalsesse farmi sattumist.

RTI haigestumus on 30...100%, suremus 1...15%, see võib olla suurem, kui haigus on komplitseeritud muude hingamisteede infektsioonidega.

Esmastes fookustes mõjutab haigus peaaegu kogu elanikkonda, suremus ulatub 18% -ni. IRT esineb sageli tööstusfarmides erinevatest farmidest toodud loomarühmade värbamisel.

Hingamisteede või suguelundite limaskestadele sattudes tungib viirus epiteelirakkudesse, kus see paljuneb, põhjustades nende surma ja ketendust. Seejärel tekivad hingamisteede limaskesta pinnale haavandid, suguelunditesse tekivad sõlmed ja pustulid. Primaarsetest kahjustustest satub viirus õhuga bronhidesse ja ülemistest hingamisteedest sidekesta, kus põhjustab düstroofsed muutused mõjutatud rakkudes, mis kutsub esile põletikulise reaktsiooni organismis. Seejärel adsorbeerub viirus leukotsüütidele ja levib lümfisõlmedesse ning sealt edasi verre. Vireemiaga kaasneb looma üldine depressioon ja palavik. Vasikatel võib viirus verega kanduda parenhüümsetesse organitesse, kus see paljuneb, põhjustades degeneratiivseid muutusi. Kui viirus läbib hematoentsefaal- ja platsentaarbarjääri, ilmnevad patoloogilised muutused ajus, platsentas, emakas ja lootes. Patoloogiline protsess oleneb suuresti ka mikrofloorast tingitud tüsistustest.

Inkubatsiooniperiood on keskmiselt 2...4 päeva, väga harva pikem. Põhimõtteliselt on haigus äge. RTI-l on viis vormi: ülemiste hingamisteede kahjustus, vaginiit, entsefaliit, konjunktiviit ja artriit.

Hingamisorganite kahjustuse korral on võimalik krooniline seroos-mädane kopsupõletik, mille tagajärjel sureb umbes 20% vasikatest. Suguelundite vormis on kahjustatud välissuguelundid, lehmadel tekib mõnikord endometriit, pullidel orhiit, mis võib põhjustada viljatust. Kunstlikuks viljastamiseks kasutatavatel pullidel avaldub IRT korduva dermatiidina kõhukelmes, tuharatel, päraku ümbruses, mõnikord ka sabal ja munandikotti. Viirusega nakatunud spermatosoidid võivad lehmadel põhjustada endometriiti ja viljatust.

Aborte ja loote surma emakas täheldatakse 3 nädalat pärast nakatumist, mis langeb kokku antikehade tiitri tõusuga veres tiined lehmad- taastusravimid, mille olemasolu ei takista aborti ja loote surma emakas.

IRT tendentsi varjatud kulgemisele täheldati, kui suguelundite vorm. Tupe limaskesta epiteelis, selle vestibüülis ja häbemes moodustub arvukalt erineva suurusega pustuleid (pustuloosne vulvovaginiit). Nende asemele ilmuvad erosioonid ja haavandid. Pärast haavandiliste kahjustuste paranemist jäävad limaskestale pikaks ajaks hüpereemilised sõlmed. Haigete pullide puhul on protsess lokaliseeritud eesnahale ja peenisele. Iseloomulik on pustulite ja villide teke. Väike osa tiinetest lehmadest võib kogeda aborti, loote resorptsiooni või enneaegset poegimist. Aborditud loomad olid reeglina varem põdenud rinotrahheiiti või konjunktiviiti. Abordi lehmade hulgas pole välistatud surmad metriiti ja loote lagunemise tõttu. Siiski on sagedased abortide juhtumid puudumisel põletikulised protsessid lehma emaka limaskestal. RTI-ga on juhtumeid äge mastiit. Udar on järsult põletikuline ja suurenenud, palpatsioonil valulik. Piimatoodang väheneb järsult.

Kell meningoentsefaliit Koos depressiooniga täheldatakse motoorseid düsfunktsioone ja tasakaaluhäireid. Selle haigusega kaasnevad lihaste värinad, urisemine, hammaste krigistamine, krambid ja süljeeritus. See haigusvorm mõjutab peamiselt 2–6 kuu vanuseid vasikaid.

Hingamisteede vorm infektsioonile on iseloomulik kehatemperatuuri järsk tõus 41...42 °C-ni, nina limaskesta, ninaneelu ja hingetoru hüpereemia, depressioon, kuiv valulik köha, rohke seroos-limaskesta eritis ninast (nohu) ja vahune süljeeritus. Haiguse edenedes muutub lima paksuks, hingamisteedesse tekivad limakorgid ja nekroosikolded. raske kurss haigustel on asfiksia tunnused. Hüpereemia ulatub kuni nina täpp("Punane nina"). IRT viiruse etioloogiline roll noorveiste massilises keratokonjunktiviidis on tõestatud. Noortel loomadel avaldub haigus mõnikord vormis entsefaliit. See algab äkilisest erutusest, vägivallast ja agressiivsusest ning liigutuste koordinatsiooni puudumisest. Kehatemperatuur on normaalne. Noortel vasikatel põhjustavad mõned IRT-viiruse tüved ägedat seedetrakti haigust.

Üldiselt on haigetel loomadel hingamisvorm kliiniliselt selgelt määratletud, samas kui suguelundite vorm jääb sageli märkamatuks.

Ägeda respiratoorse vormi käigus hukkunud või surnud loomade lahkamisel leitakse tavaliselt seroosse konjunktiviidi, katarraal-mädase riniidi, larüngiidi ja trahheiidi tunnuseid, samuti aksessuaarõõnsuste limaskestade kahjustusi. Ninakarbi limaskest on paistes ja hüpereemiline, kaetud limaskestade mädasete ladestustega. Mõnes kohas paljastavad need erineva kuju ja suuruse erosiivsed kahjustused. Mädane eksudaat koguneb nina- ja lisaõõnsustesse. Kõri ja hingetoru limaskestadel on teravaid hemorraagiaid ja erosioone. Rasketel juhtudel toimub hingetoru limaskestal fokaalne nekroos ja surnud loomadel on võimalik bronhopneumoonia. Kopsudes leidub atelektaaside fookusalasid. Mõjutatud piirkondade alveoolide ja bronhide luumenid on täidetud seroos-mädase eksudaadiga. Interstitsiaalse koe tugev turse. Kui silmad on kahjustatud, on silmalau sidekesta hüpereemiline, ilmnevad tursed, mis ulatuvad konjunktiivini. silmamuna. Konjunktiiv on kaetud rasvase kattega. Sageli tekivad sellele umbes 2 mm suurused papillaarsed mugulad, väikesed erosioonid ja haavandid.

Suguelundite vormis on tupe ja häbeme tugevalt põletikulisel limaskestal näha erinevas arengujärgus mädapaiste, erosioone ja haavandeid. Lisaks vulvovaginiidile võib tuvastada seroos-katarraalset või mädast tservitsiiti, endometriiti ja palju harvem proktiiti. Tõupullidel kaasneb pustuloosse balanopostiidiga rasketel juhtudel fimoos ja parafimoos.

Värsked aborteeritud looted on tavaliselt tursed, väikeste autolüütiliste nähtustega. Limaskestadel ja seroossetel membraanidel on väikesed hemorraagiad. Pärast loote surma pikema aja möödumist on muutused rohkem raske tegelane; lihastevahelises sidekoe ja kehaõõnsustesse koguneb tumepunane vedelik, parenhümaalsed elundid- nekroosikolded.

Udara mõjutamisel avastatakse seroos-mädane difuusne mastiit. Lõikepind on turse, kahjustatud sagarate suurenemise tõttu selgelt teraline. Vajutades tilgub sealt hägust mädataolist eritist. Paagi limaskest on hüpereemiline, paistes, hemorraagiaga. Aju entsefaliidiga tuvastatakse vaskulaarne hüperemia, kudede turse ja väikesed hemorraagiad.

RTI diagnoositakse kliiniliste ja epidemioloogiliste andmete, elundite ja kudede patoloogiliste muutuste põhjal koos kohustusliku kinnitusega laboratoorsete meetoditega. Varjatud infektsiooni saab kindlaks teha ainult laboratoorsete testidega.

Laboratoorsed diagnostikad hõlmavad: 1) viiruse eraldamist patoloogilisest materjalist rakukultuuris ja identifitseerimist RN-is või RIF-is; 2) IRT viiruse antigeenide tuvastamine patoloogilises materjalis RIF-i abil; 3) antigeenide tuvastamine haigete ja tervenenud loomade vereseerumis (retrospektiivne diagnostika) RN-s või RIGA-s.

Sest viroloogilised uuringud haigetelt loomadelt võetakse lima ninaõõnest, silmadest, tupest, eesnahast; sunniviisiliselt tapetutelt ja langenutelt - nina vaheseina, hingetoru, kopsu, maksa, põrna, aju, piirkondliku tükid lümfisõlmed võtta hiljemalt 2 tundi pärast surma. Vere seerumit kogutakse ka retrospektiivse seroloogilise diagnoosi jaoks. Sest laboratoorne diagnostika IRT kasutada veiste IRT diagnostikakomplektide komplekti ja erütrotsüütide diagnostika komplektide komplekti infektsiooni serodiagnostikaks RIGA-s.

RTI diagnoosimine toimub paralleelselt paragripi-3, adenoviirusinfektsiooni, respiratoorse süntsütiaalse infektsiooni ja viirusliku kõhulahtisuse materjali uurimisega.

IRT esialgne diagnoos veistel tehakse patoloogilises materjalis leiduva antigeeni positiivsete tulemuste põhjal. REEF võttes arvesse epidemioloogilisi ja kliinilisi andmeid, samuti patoloogilised muutused. Lõplik diagnoos määratakse RIF-i tulemuste kokkulangevuse põhjal viiruse eraldamise ja tuvastamisega.

Kell diferentsiaaldiagnostika nakkav rinotrahheiit, tuleb välistada suu- ja sõrataudi, katarraalne palavik, paragripp-3, adenoviirus ja klamüüdia infektsioon, viiruslik kõhulahtisus, respiratoorne süntsütiaalne infektsioon, pastörelloos.

Haigusest paranemisega kaasneb püsiv ja pikaajaline immuunsus, mis võib ternespiima antikehadega järglastele edasi anda. Tervenenud loomade immuunsus püsib vähemalt 1,5...2 aastat, kuid isegi väljendunud humoraalne immuunsus ei takista viiruse püsimist taastuvatel loomadel ning neid tuleks käsitleda kui potentsiaalset teiste loomade nakkusallikat. Seetõttu tuleks kõiki loomi, kellel on IRT-vastased antikehad, pidada viiruse kandjateks latentsusseisundis.

139. Toitainete reservuaar sisse arenevad embrüod linnud on

Võttes arvesse lindude keerulist ja üsna pikka embrüogeneesi protsessi, on vaja moodustada spetsiaalsed ajutised embrüonaalsed ajutised elundid. Esimesena moodustub munakollane ja seejärel ülejäänud ajutised elundid: amnionimembraan (amnion), seroosmembraan, allantois. Enne seda leiti evolutsiooni käigus munakollast ainult tuurkaladel, kellel on selgelt teloletsiitrakk ja embrüogeneesi protsess on keeruline ja pikk. Moodustades munakollane kott munakollane kasvab lehtede osadega, mida me nimetame ekstraembrüonaalseteks lehtedeks või ekstraembrüonaalseks materjaliks. Kuid munakollase serv hakkab kasvama embrüovälise endodermiga. Ekstraembrüonaalne mesoderm on kihistunud kaheks kihiks: vistseraalne ja parietaalne, samas kui vistseraalne kiht külgneb ekstraembrüonaalse endodermiga ja parietaalne kiht külgneb ekstraembrüonaalse ektodermiga.

Ekstraembrüonaalne ektoderm tõukab eemale valkjas ja kasvab ka üle munakollase. Järk-järgult ümbritseb munakollane mass täielikult seinaga, mis koosneb ekstraembrüonaalsest endodermist ja ekstraembrüonaalse mesodermi vistseraalsest kihist - moodustub esimene ajutine organ - munakollane.

Munakollase funktsioonid. Rebukoti endodermirakud hakkavad eritama hüdrolüütilisi ensüüme, mis lagundavad munakollase massi. Lõhusaadused imenduvad ja liiguvad läbi veresoonte embrüosse. Nii tagab munakollane troofilise funktsiooni. Esimesed veresooned ja esimesed vererakud moodustuvad vistseraalsest mesodermist ning seetõttu täidab munakollane ka hematopoeetilist funktsiooni. Lindudel ja imetajatel avastatakse munakollase rakkude hulgas varakult reproduktiivse idu - gonoblasti - rakud.

140. Taasaktiveerimine. Mis see on?

Genotüübi muutuste põhjal jaotatakse mutatsioonid punktmutatsioonideks (lokaliseeritakse üksikutes geenides) ja geenimutatsioonideks (mõjutavad suuremaid genoomi alasid).
Tundlike rakkude nakatumine viirustega on oma olemuselt mitmekordne, s.t. Rakku siseneb korraga mitu virioni. Sel juhul võivad viiruse genoomid replikatsiooniprotsessis koostööd teha või segada. Viiruste vahelisi koostoimeid esindavad geneetiline rekombinatsioon, geneetiline taasaktiveerimine, komplementatsioon ja fenotüübiline segunemine.
Geneetiline rekombinatsioon on tavalisem DNA-viiruste või fragmenteeritud genoomiga RNA-viiruste puhul (gripiviirus). Geneetilise rekombinatsiooni käigus toimub vahetus viirusgenoomide homoloogsete piirkondade vahel.
Erinevate geenide mutatsioonidega seotud viiruste genoomide vahel täheldatakse geneetilist reaktivatsiooni. Geneetilise materjali ümberjaotusega moodustub terviklik genoom.
Komplementatsioon toimub siis, kui üks rakku nakatavatest viirustest sünteesib mutatsiooni tulemusena mittefunktsionaalse valgu. Mittemutantne viirus, mis sünteesib terviklikku valku, korvab selle puudumise mutantses viiruses.

Väljaspool keha kasvatatud organite alged (in vitro). Rakkude ja kudede kultiveerimine põhineb steriilsuse rangel järgimisel ning spetsiaalsete toitainete söötmete kasutamisel, mis tagavad kultiveeritud rakkude elulise aktiivsuse säilimise ning on võimalikult sarnased keskkonnaga, millega rakud organismis suhtlevad. Raku- ja koekultuuride saamise meetod on eksperimentaalbioloogias üks olulisemaid. Raku- ja koekultuure võib külmutada ja säilitada pikka aega vedela lämmastiku temperatuuril (-196°C). Loomarakkude kasvatamise fundamentaalse eksperimendi viis läbi Ameerika teadlane R. Garrison 1907. aastal, asetades konnaembrüo närvisüsteemi alge tüki lümfiklompi. Idurakud püsisid elus mitu nädalat ja kasvasid neist välja. närvikiud. Aja jooksul täiustasid meetodit A. Carrel (Prantsusmaa), M. Burroughs (USA), A. A. Maksimov (Venemaa) ja teised teadlased, kes kasutasid toitainekeskkonnana vereplasmat ja lootekoe ekstrakti. Hilisemaid edusamme raku- ja koekultuuride saamisel seostati teatud keemilise koostisega söötmete väljatöötamisega erinevat tüüpi rakkude kasvatamiseks. Need sisaldavad tavaliselt sooli, aminohappeid, vitamiine, glükoosi, kasvufaktoreid ja antibiootikume, mis takistavad kultuuri saastumist bakterite ja mikroskoopiliste seentega. Taimede rakkude ja kudede kasvatamise meetodi loomist (porgandifloemi tükil) alustas F. Steward (USA) 1958. aastal.

Rakke saab kasutada loomade ja inimeste rakkude kultiveerimiseks erinevat päritolu: epiteel (maks, kopsud, piimanäärmed, nahk, põis, neer), sidekude (fibroblastid), luustik (luud ja kõhred), lihased (skeleti-, südame- ja silelihased), närvisüsteem (gliiarakud ja neuronid), näärmed hormoone sekreteerivad rakud (neerupealised, hüpofüüs, Langerhansi saarekeste rakud), melanotsüüdid ja erinevat tüüpi kasvajarakud. Nende kasvatamisel on 2 suunda: rakukultuur ja elundikultuur (elundite ja kudede kultuur). Rakukultuuri – geneetiliselt homogeense, kiiresti prolifereeruva populatsiooni – saamiseks eemaldatakse kehast koetükid (tavaliselt umbes 1 mm 3), töödeldakse vastavate ensüümidega (rakkudevaheliste kontaktide hävitamiseks) ja saadud suspensioon asetatakse toitekeskkonda. . Embrüonaalsetest kudedest saadud kultuure iseloomustab parem ellujäämine ja aktiivsem kasv (tingituna madalast diferentseerumistasemest ja tüvi-eellasrakkude olemasolust embrüodes) võrreldes täiskasvanud organismist võetud vastavate kudedega. Normaalsetest kudedest tekivad piiratud elueaga kultuurid (nn Hayflicki piir), samas kui kasvajatest saadud kultuurid on võimelised vohama lõputult. Kuid isegi normaalsete rakkude kultuuris muutuvad mõned rakud spontaanselt surematuks, st muutuvad surematuks. Nad jäävad ellu ja tekitavad piiramatu elueaga rakuliine. Esialgu võib rakuliin tuletada rakkude populatsioonist või ühest rakust. Viimasel juhul nimetatakse liini klooniks või klooniks. Pikaajalisel kasvatamisel erinevate tegurite mõjul normaalsete rakkude omadused muutuvad, toimub transformatsioon, mille peamisteks tunnusteks on rakumorfoloogia häired, kromosoomide arvu muutused (aneuploidsus). Kell kõrge aste transformatsiooni, võib selliste rakkude sisestamine loomale põhjustada kasvaja moodustumist. Elundkultuuris säilib koe struktuurne organiseeritus, rakkudevahelised interaktsioonid ning toetatakse histoloogilist ja biokeemilist diferentseerumist. Hormoonidest sõltuvad koed säilitavad nende suhtes tundlikkuse ja iseloomulikud reaktsioonid, näärmerakud jätkavad spetsiifiliste hormoonide sekretsiooni jne. Selliseid kultuure kasvatatakse kultiveerimisnõus parvedel (paber, millipoor) või toitekeskkonna pinnal ujuval metallvõrgul.

Taimedes põhineb rakukultuur üldiselt samadel põhimõtetel kui loomadel. Kasvatusmeetodite erinevused on määratud taimerakkude struktuuriliste ja bioloogiliste omadustega. Enamik taimekoe rakke on totipotentsusega: ühest sellisest rakust võib teatud tingimustel areneda täisväärtuslik taim. Taimerakukultuuri saamiseks kasutatakse tükki mis tahes koest (näiteks kallus) või elundist (juur, vars, leht), milles elavad rakud. See asetatakse toitainekeskkonnale, mis sisaldab mineraalsoolad, vitamiinid, süsivesikud ja fütohormoonid (kõige sagedamini tsütokiinid ja auksiinid). Taimekultuure hoitakse temperatuuril 22–27 °C, pimedas või valguse käes.

Leitakse raku- ja koekultuure lai rakendus V erinevad valdkonnad bioloogia ja meditsiin. Somaatiliste rakkude (kõik elundite ja kudede rakud, välja arvatud sugurakud) kasvatamine väljaspool keha on määranud võimaluse töötada välja uusi geneetika uurimise viise. kõrgemad organismid kasutades koos klassikalise geneetika meetoditega molekulaarbioloogia meetodeid. Suurima arengu on saanud imetajate somaatiliste rakkude molekulaargeneetika, mis on seotud inimese rakkudega otseste katsete tekkiva võimalusega. Raku- ja koekultuuri kasutatakse selliste üldiste bioloogiliste probleemide lahendamiseks nagu geeniekspressiooni mehhanismide väljaselgitamine, varajane embrüo areng, diferentseerumine ja proliferatsioon, tuuma ja tsütoplasma koosmõju, rakud keskkonnaga, kohanemine erinevate keemiliste ja füüsikaliste mõjudega, vananemine, pahaloomuline transformatsioon jne seda kasutatakse diagnoosimiseks ja raviks pärilikud haigused. Katseobjektidena on rakukultuurid alternatiiviks loomade kasutamisele uute farmakoloogiliste ainete katsetamisel. Need on vajalikud transgeensete taimede saamiseks ja kloonide paljundamiseks. Tähtis roll Rakukultuurid mängivad biotehnoloogias rolli hübriidide loomisel, vaktsiinide ja bioloogiliselt aktiivsete ainete tootmisel.

Vaata ka Cellular engineering.

Lit.: Rakkude kasvatamise meetodid. L., 1988; Loomade rakukultuur. Meetodid / Toimetanud R. Freshni. M., 1989; Kultiveeritud rakkude bioloogia ja taimede biotehnoloogia. M., 1991; Freshney R. I. Loomarakkude kultiveerimine: põhitehnika käsiraamat. 5. väljaanne Hoboken, 2005.

O. P. Kisurina-Jevgenjeva.