Plasmakoagulasjonsfaktorer. Faktorer som påvirker koagulasjon

BLODKOJULERINGSFAKTORER

Moskva, 2009

2 satt sammen av:

administrerende direktør NPO "RENAM", doktor i biologiske vitenskaper Albert Anatolyevich Kozlov

hode produsert av NPO "RENAM", seniorforsker, kandidat for biologiske vitenskaper Aron Leonidovich Berkovsky

Leder for kvalitetskontrollavdelingen for NPO "RENAM", seniorforsker, kandidat for biologiske vitenskaper Natalya Dmitrievna Kachalova

Forsker ved NPO "RENAM" Sergeeva Elena Vladimirovna

Ledende forsker ved Statens forskningssenter ved det russiske akademiet for medisinske vitenskaper, kandidat for biologiske vitenskaper Tatyana Mikhailovna Prostakova

INTRODUKSJON__________________________________________________________ 4

Bord 1. Blodkoagulasjonsfaktorer__________________________________________ 4

Faktor I. Fibrinogen________________________________________________ 7

Faktor I. Protrombin -_____________________________________________________ 7

Faktor III - vevstromboplastin__________________________________ 9

Faktor IV - kalsiumioner_____________________________________________ 9

Faktor V_________________________________________________________________ 9

TESTSYSTEMER TIL RENAM-SELSKAPET_________________________________________________ 15

FIBRINOGEN_______________________________________ 19

BESTEMMELSE AV BLODKOJULERINGSFAKTOR VIII AKTIVITET______________________________________________________ 21

BESTEMMELSE AV AKTIVITETEN TIL BLODKOJULERINGSFAKTOR IX_______________________________________________________ 22

FIBRINSTABILISERINGSFAKTOR XIII_____________________________________________________ 22

PROTROMBINTID_____________________________________________ 23

AKTIVER DELVIS TROMBOPLASTINTID (aPTT)_____________________________________________________ 24

VILLEBRAND FACTOR______________________________________________________ 25

ReapRgC/FV-test Sett med reagenser for å bestemme resistens
aktivert faktor V til protein C ______________________________________ 26

LITTERATUR________________________________________ 28

INTRODUKSJON

Det hemostatiske systemet har flere essensielle funksjoner: opprettholde væske

tilstanden til blodsirkulasjon i karene; stoppe blødning på stedet for karskade og stoppe blodtap ved å danne en fibrinplugg; oppløsning av denne pluggen etter gjenoppretting av fartøyets integritet. Deltar i denne prosessen blodårer, blodplater, plasmakoagulasjonsfaktorer, koagulasjonsfaktorhemmere, fibrinolysesystem.

Som svar på en skadelig effekt oppstår mikrovaskulær spasmer, endotelcelleaktivering, blodplateaktivering og biologisk sekresjon fra disse cellene. aktive stoffer, adhesjon og aggregering av blodplater, dannelse av en blodplateplugg. Samtidig er plasmaenzymsystemer inkludert i prosessen, som skredaktig aktiverer hverandre og sikrer dannelsen av en fibrinpropp som forhindrer blodtap, og dens påfølgende lysis når denne faren forsvinner. Antikoagulasjonssystemene til antitrombin III, protein C og en rekke andre proteiner utfører finregulering av koagulasjons- og fibrinolysemekanismen, begrenser dannelsen av en blodpropp til skadestedet og forhindrer at koagulasjonsprosessen blir systemisk.

Faktorer av koagulasjonssystemet syntetiseres hovedsakelig i leverhepatocytter og sirkulerer konstant i blodplasmaet i den inaktive formen av proenzymer, og deres aktivering krever en skadelig effekt.

Faktorer er betegnet med romertall; for å skille et aktivert enzym fra et inaktivert, legges bokstaven "a" til tallet (se tabell 1).

Bord I. Blodkoagulasjonsfaktorer

Koagulasjonsenzymer er serinproteaser som gjensidig aktiverer hverandre. Samtidig er faktorer som II, VII, IX, X (samt proteinene C og 3) vitamin K-avhengige. Dette betyr at disse glukoproteinene inneholder glutaminsyrerester, som når de aktiveres, gjennomgår γ-karboksylering under påvirkning av vitamin K. I dette tilfellet er en ny y-glutaminsyre, som spiller en betydelig rolle i prosessen med enzymbinding til fosfolipider. I fravær av vitamin K dannes også disse enzymene, men de er funksjonelt defekte (PIVKA). Bruken av antikoagulantia er basert på denne egenskapen til vitamin K. indirekte handling(warfarin, etc.).

Faktor IX er en annen blodfaktor hvis mangel er assosiert med hemofili. Dette arvelig sykdom har vært kjent siden antikken, selv om det først ble profesjonelt beskrevet først i 1803 av den tyske legen J.C. Otto, og selve navnet "hemofili" ble foreslått av F. Hoppf i 1828.

Faktor IX eller antihemofil faktor B er et blodplasmaglykoprotein som er avhengig av vitamin K. Det syntetisert i leveren, derfra går den inn i blodet. Utilstrekkelig aktivitet av denne faktoren i blodet bestemmes genetisk og kan være forårsaket enten av dens fullstendig fravær, eller genmutasjon, som fører til sin underlegenhet, noe som forårsaker forekomsten av hemofili B. Det andre navnet på denne sykdommen er julesykdom.

Normalt nivå av faktor IX i blodet. Forklaring av resultatet (tabell)

Symptomene på hemofili B er ikke forskjellige fra de symptomene som vises med hemofili A. Julesykdom krever imidlertid en fundamentalt annen tilnærming til behandling. Derfor er det så viktig riktig diagnose. En blodprøve for faktor IX bestilles vanligvis sammen med en faktor VIII-test for å forstå hvilken type hemofili en pasient har. Som med hemofili A, overføres hemofili B også gjennom X-kromosomet gjennom kvinnelinjen.

Blod tas fra en vene om morgenen på tom mage.

Normalt nivå av faktor IX i blodet vanlige folk og gravide:

Hvis faktor IX er forhøyet, hva betyr dette?

Ingen data.

Hvis faktor IX er lav, hva betyr det?

Medfødt mangel på faktor IX fører til utvikling av hemofili B eller Critmas sykdom. Det er preget av forekomsten av ulike typer blødninger, både ytre og indre, blødninger i vev, ledd, bukhulen og til organene som ligger her, mageblødning. Hvis det dannes store hematomer, kan dette føre til kompresjon av nerver og blodårer. Denne situasjonen er ekstremt farlig fra det synspunkt at hematomet kan kutte av den vitale blodtilførselen viktige organer, forårsake lammelse eller føre til utvikling av vevsnekrose, for eksempel tarm. Cerebral blødning kan forårsake hjerneslag.

Hemofili B har tre alvorlighetsgrader. Mild form - aktiviteten til faktor IX reduseres til 24-6%, moderat - til 5-2%, alvorlig - til 2-1%, ekstremt alvorlig - når aktiviteten til faktor IX er 1% eller mindre.

Hvis faktor IX-aktiviteten synker til 15 %, blir det umulig å stoppe blødning fra skade. I disse tilfellene må faktor IX administreres i tillegg.

Hvis nivået av faktor IX i blodet er lavere, kan mangelen oppstå. Dette skjer når ulike sykdommer leveren, når den ikke lenger kan syntetisere denne faktoren tilstrekkelig, i nefrotisk syndrom og Gauchers sykdom - en av de ganske vanlige medfødte lysosomale sykdommer.

Referanseverdier for faktor IX-aktivitet i blodplasma er 60-140%.

Faktor K (julefaktor, antihemofil globulin B) tilhører p-globuliner og tar aktivt del i fase I av plasmahemostase. Faktor IX produseres i leveren. Derfor reduseres innholdet i blodet til pasienter med hepatitt, levercirrhose, så vel som de som tar dikumarin og indandiolderivater. Produksjonen av faktor IX reguleres av et gen lokalisert på kromosom X, på et sted fjernt fra genet for nøkkelsynteseenzymet faktor VIII. Dette genet muterer 7-10 ganger sjeldnere enn genet for enzymet som syntetiserer faktor VIII. Som et resultat observeres hemofili A mye oftere (87-94% av alle pasienter med hemofili) enn hemofili B (medfødt mangel på faktor IX - julesykdom) (8-15% av pasientene).

Faktor IX konsumeres ikke under blodpropp.

Bestemmelse av faktor IX-spill viktig rolle ved diagnostisering av hemofili B. Faktor IX-mangel er assosiert med de fleste blødninger i akutte sykdommer lever.

Avhengig av nivået på faktor IX, er følgende delt inn: kliniske former hemofili B: ekstremt alvorlig - konsentrasjon av faktor IX opptil 1%; alvorlig form - 1-2%; moderat alvorlighetsgrad - 2-5%; lett form(subhemofili) - 6-24%. Hos pasienter mild form kliniske manifestasjoner av sykdommen oppstår etter skader og kirurgiske inngrep. Å bestemme gruppen av "bærere" av hemofili B forårsaker visse vanskeligheter. Denne gruppen kan inkludere kvinner hvis gjentatte studier viste et faktor IX-nivå under 40 %, men over 24 %.

Det minste hemostatiske nivået av faktor IX-aktivitet i blodet for å utføre operasjoner er 20-25 %; med lavere aktivitet er risikoen for å utvikle postoperativ blødning ekstremt høy. Det minste hemostatiske nivået av faktor IX i blodet for å stoppe blødning er 10-15 %; med et lavere innhold er det umulig å stoppe blødningen uten å administrere faktor IX til pasienten.

Normalt blod dens viskositet er praktisk talt ikke forskjellig fra vann. Det er denne tilstanden som er en viktig komponent for at den skal utføre sin hovedfunksjon - overføring til organer og vev næringsstoffer, oksygen, mikroelementer. Hvis skadet vaskulær vegg eller tilstedeværelsen av vevstromboplastin i blodet, utløses mekanismen for økt blodpropp, og blodpropper begynner å dannes. Dårlig blodpropp hos voksne og barn er mye mindre vanlig. Ofte skyldes situasjonen ulike patologiske forhold som utgjør en fare for menneskeliv.

Normal blodpropp hos et barn

Blodpropp hos barn er noe annerledes enn hos voksne. Dette er på grunn av normalen fysiologiske prosesser modning av kroppen. For å bestemme tilstanden til det hemostatiske systemet og risikoen langvarig blødning, tester er foreskrevet - koagulogram, INR og andre. De gjør det mulig å bestemme indikatorer som koaguleringstid, mengden fibrinogen, blodplater, og å identifisere blodproppforstyrrelser hos barn.

Hovedkriteriene for det hemostatiske systemet hos barn, deres norm og tolkning.

1. Protrombintid gjør det mulig å etablere patologier som hemofili eller DIC-syndrom. Normen for barn er 11-17 sekunder.
2. Trombintiden er 14-21 sekunder. Resultatene kan variere noe ved bestemmelse av indikatoren i forskjellige laboratorier.
3. Koagulasjonstiden er perioden hvor en blodpropp dannes. Normen er 2-5 minutter.
4. Blødningstiden er 2-4 minutter.
5. Fibrinogen hos barn er 1-3 gram. Lar deg bestemme den funksjonelle ytelsen til hemostasesystemet.
6. Protrombinindeks.
7. Antitrombin-3 er en regulator av blodkoagulasjonsfunksjonen.

Funksjoner av koagulasjon hos nyfødte

Hos nyfødte, så vel som hos spedbarn eller spedbarn, er de normale verdiene for alle formede elementer noe forskjellig fra de for voksne. For eksempel kan hemoglobin nå 160-220 g/l, og røde blodlegemer 5-7x10 12/l. Imidlertid har de litt forskjellige former og størrelser. Antall retikulocytter øker til 40%, og leukocytter til 10-20x10 9 / l. Det er et skifte i formelen mot myelocytter. Lignende endringer er noen ganger notert under graviditet fordi kvinnekropp forbereder seg på mulig blodtap, selv om anemi er mer vanlig.

I det første leveåret har alle blodparametre en tendens til å være normale, hemoglobinet synker til 120-140 g/l, røde blodlegemer faller også, deres form og størrelse stabiliseres. Mengden av alle dannede elementer reduseres og forblir litt økt, leukocyttformel viser lymfocytose og monocytose. Blodplater er på nivået 200-300x10 9 /l.

Årsaker til avvik fra normen

Hovedårsakene til dårlig blodpropp hos barn ligger i patologiske prosesser. De aller fleste av dem er arvelige, på andre plass er det autoimmune sykdommer, lesjoner i hepato-gallesystemet. Når legen oppdager årsaken, bør behandlingen startes umiddelbart.

Redusert koagulering

Redusert eller lav aktivitet blodkoagulasjonssystemet oppstår i følgende patologier.

1. Hemofili. Denne sykdommen inntar en ledende posisjon i å redusere effektiviteten av hemostase. Det er forårsaket av en mangel på blodfaktorer 8, 9, 11, som er ansvarlige for koagulering. Resultatet av dette er en reduksjon i alle punkter i koagulogrammet. Patologien er arvelig og rammer hovedsakelig menn.
2. Von Willebrands sykdom. Noen leger kaller patologien pseudohemofili. Det er mindre farlig sykdom, og det rammer like ofte mennesker av begge kjønn. Neseblod og blødning fra tannkjøttet er typiske, og livmorblødninger kan forekomme hos jenter.
3. Trombocytopeni. Den utløsende faktoren anses å være en allergisk prosess som respons på terapi med antiinflammatoriske legemidler og kjemoterapi. Behandling av sykdommen er mulig ikke bare i hematologiavdelingen, men også på allergisykehuset.
4. Overdose medisiner. En av de mest vanlige årsaker forstyrrelser i hemostasesystemet. Legemidler som paracetamol eller aspirinholdige legemidler spiller en rolle her. Det er en reduksjon i nivået av blodplater og røde blodlegemer. Tilstanden manifesteres av subkutane blødninger, blødning av organer mage-tarmkanalen. Hvis du ikke slutter å ta disse medisinene, er blødninger i hjernen, til og med død, mulig.
5. Leverdysfunksjon. De er forårsaket av sykdommer som hepatitt og skrumplever, som ikke bare forekommer hos voksne. Produksjonen av hepatiske koagulasjonsfaktorer reduseres.
6. DIC-syndrom anses som ekstremt farlig tilstand. Med det reduseres påvirkningen av alle blodkoagulasjonsfaktorer, noen ganger er den helt fraværende. Denne patologien utvikler seg på bakgrunn av alvorlig smittsomme prosesser, blødning, kirurgiske inngrep, brannskader eller traumatiske skader.

Økt koagulering

Økt blodpropp hos barn er arvelig patologi. Trombose forekommer oftest i følgende patologier.

1. Antifosfolipidsyndrom. Barns blod inneholder såkalte antifosfolipidantistoffer. Kliniske manifestasjoner patologier tilsvarer tromboembolisme. Kvinner lider av infertilitet på grunn av at de ikke kan få barn.
2. Trobophilia gruppe. Disse inkluderer sykdommer som Leiden-faktor, mangel på proteiner C, S og antitrombin. Patologier i denne gruppen inkluderer også et overskudd av faktor 8, 11, lipoprotein og hyperhomocysteinemi. Protrombinmutasjoner er også notert. Alle de ovennevnte trombofile prosessene fører til utvikling av trombose. Det er viktig å merke seg at i barndom trombose er et sjeldent fenomen, blødning er mye mer vanlig. For utseendet av trombotiske patologier er visse forhold nødvendige - alvorlige patologier, alvorlig fysisk inaktivitet eller sengeleie, regelmessige venepunkteringer.
3. Ondartede neoplasmer.
4. Venøse sykdommer.

Hvis nære slektninger dør av trombotiske prosesser, er det stor sannsynlighet for at barnet vil arve muterte eller patologiske gener.

Hvilke tester gjøres på et barn for å identifisere patologi?

Medisinske arbeidere har utviklet en imponerende liste over tester som må gjøres ved dårlig koagulering. Alle er foreskrevet etter konsultasjon med lege. Det antas at hovedtesten er en blodprøve for evnen til å danne blodpropp, som kalles et koagulogram. Det inkluderer mange indikatorer, men leger tar hensyn til varigheten og tidspunktet for blodpropp, blodplatenivåer og INR. Protrombin, trombin, fibrinogen er også en viktig del av analysen.

Tolkning av resultater og deres kliniske betydning

Blodplatetelling er den enkleste prosedyren. Normen for nyfødte er 100-400x10 9 /l, men over tid smalner og avtar grensene for normen. Før et år -150-350x10 9 /l, etter et år er normen den samme som for voksne - 180-360x10 9 /l.

Hvis nedgangen er under normalen, bemerker legene høy risiko blødning, og med en uttalt nedgang er det ekstremt vanskelig å stoppe blødningen uten intravenøs infusjon blodplatemasse.

Blodkoaguleringstid anses også som tilstrekkelig informativ metode. Normalt er blødningens varighet 2-4 minutter, og koageldannelsestiden er 2-5 minutter. Hvis de oppnådde resultatene ikke passer inn i rammen angitt av laboratoriene, må legen foreskrive tilleggsundersøkelse for å finne ut årsakene til denne tilstanden.

Protrombintid og protrombinindeks gir legen informasjon om innledende stadier drift av hemostasesystemet. Å utføre disse testene hjelper til med å oppdage DIC eller hemofili. Normale verdier for alle aldersgrupper i gjennomsnitt svinge mellom 11 og 15 sekunder.

Introdusert for første gang

Ekte farmakopémonografi gjelder human koagulasjonsfaktor IX-preparater hentet fra humant plasma for fraksjonering.

Human blodkoagulasjonsfaktor IX er et preparat av proteinfraksjonen av humant blod, hentet fra plasma for fraksjonering ved en metode som effektivt skiller faktor IX fra andre faktorer i protrombinkomplekset (II, VII, X).

Aktiviteten til legemidlet etter rekonstituering under forholdene spesifisert på etiketten må være minst 20 IE faktor IX per 1 ml.

PRODUKSJON

For å produsere humane blodkoagulasjonsfaktor IX-preparater brukes blodplasma fra friske givere som oppfyller kravene.

Produksjonsteknologien inkluderer stadier av fjerning eller inaktivering smittestoffer. Hvis kjemiske forbindelser brukes til å inaktivere virus i produksjonen, bør konsentrasjonen reduseres til et nivå som ikke påvirker sikkerheten til legemidlet for pasienter.

Legemidlet kan inneholde stabilisatorer (albumin, antitrombin III, polysorbat-80, natriumklorid, natriumsitrat, glycin, etc.). Spesifikk aktivitet (minst 50 IE/mg totalt protein) bestemmes før tilsetning av stabilisatorprotein.

Ingen antimikrobielle konserveringsmidler brukes i produksjonsprosessen. Medikamentløsningen pakkes aseptisk i primæremballasje ved bruk av steriliseringsfiltrering, frysetørkes og forsegles under vakuum eller i en inertgassatmosfære.

TESTER

Beskrivelse

Hvitt eller blekgult pulver eller sprøtt fast stoff (hvis i forskriftsdokumentasjon ingen andre indikasjoner). Bestemmelsen utføres visuelt.

Autentisitet

Artsspesifisitet

Bekreftet av tilstedeværelsen av kun humane serumproteiner. Testen utføres ved immunelektroforese i en gel ved bruk av sera mot serumproteiner fra humant blod, store kveg, hester og griser iht. Det er akseptabelt å utføre gel-immundiffusjonstesten iht. Testen skal kun påvise utfellingslinjer med serum mot humane serumproteiner.

Faktor IX

Bekreftet av tilstedeværelsen av faktor IX-aktivitet. Bestemmelse utføres ved koagulometrisk eller kromogen metode iht.

På tide å motta rekonstituert medikament

Ikke mer enn 10 minutter (med mindre det er andre instruksjoner i forskriftsdokumentasjonen). En beskrivelse av fremgangsmåten er gitt, med angivelse av løsningsmidlet som brukes, dets volum og oppløsningsbetingelser (temperaturen til løsningsmidlet, behovet for omrøring, etc.).

Vann

Ikke mer enn 2 %. Bestemmelsen utføres etter K. Fischers metode i henhold til (med mindre det er andre instruksjoner i forskriftsdokumentasjonen). Bestemmelsesmetoden og prøvemengden som kreves for testing er angitt i forskriftsdokumentasjonen.

Mekaniske inneslutninger

Det skal ikke være noen synlige mekaniske inneslutninger. Fastsettelsen utføres iht. Den regulatoriske dokumentasjonen angir navnet på løsemidlet, beskriver metoden for utvinning og (om nødvendig) tilberedning av legemidlet.

pH

Fra 6,5 ​​til 7,5. Bestemmelsen utføres ved potensiometrisk metode iht.

Osmolalitet

Ikke mindre enn 240 mOsm/kg. Fastsettelsen utføres iht.

Protein

Det kvantitative proteininnholdet per flaske eller ml rekonstituert oppløsning er angitt i forskriftsdokumentasjonen. Bestemmelsen gjennomføres passende metode i samsvar med .

KoagulasjonsfaktoraktivitetIX

Aktiviteten til blodkoagulasjonsfaktor IX per flaske eller ml rekonstituert oppløsning er angitt i forskriftsdokumentasjonen. Bestemmelsen utføres ved bruk av en kromogen eller koagulometrisk metode iht.

Aktiverte koagulasjonsfaktorer

Koagulasjonstiden for medikamentfortynninger på 1:10 og 1:100 bør være minst 150 s. Bestemmelsen utføres ved bruk av koagulometermetoden iht.

Stabilisator(er)

Kvantitativ bestemmelse av stabilisatoren(e) som er tilsatt legemidlet, utføres i henhold til og/eller, dersom det ikke finnes andre instruksjoner i forskriftsdokumentasjonen.

Den tillatte grensen for innhold av stabilisator(er) skal spesifiseres i forskriftsdokumentasjonen.

Virusaktiverende midler

Kvantitativ bestemmelse av restinnholdet av virusinaktiveringsmiddel(ene) i preparatet utføres i henhold til og/eller, dersom det ikke er andre anvisninger i forskriftsdokumentasjonen. Den tillatte grensen for innhold av virusinaktiverende middel(er) må spesifiseres i forskriftsdokumentasjonen.

Sterilitet

Legemidlet må være sterilt. Testen utføres iht.

Pyrogenisitet eller bakterielle endotoksiner

Må være pyrogenfri eller inneholde bakterielle endotoksiner i en mengde på ikke mer enn 0,03 EU per 1 IE blodkoagulasjonsfaktor IX.

Testen utføres i henhold til (minst 50 IE blodkoagulasjonsfaktor IX per 1 kg dyrevekt) eller i henhold til metoden spesifisert i forskriftsdokumentasjonen.

Virussikkerhet

Hepatitt B virus overflateantigen (HBsAg)

Legemidlet må ikke inneholde overflateantigen hepatitt B-virus. Bestemmelse utføres enzymimmunanalysemetode bruke testsystemer godkjent for bruk i russisk helsepraksis og med en sensitivitet på minst 0,1 IE/ml i henhold til bruksanvisningen.

Antistoffer mot hepatitt C-virus

Antistoffer mot hepatitt C-viruset må være fraværende. Bestemmelsen utføres ved hjelp av enzymimmunoanalysemetoden ved bruk av testsystemer godkjent for bruk i russisk helsepraksis og med 100 % sensitivitet og spesifisitet i henhold til bruksanvisningen.

Antistoffer mot humant immunsviktvirus (HIV-1 og HIV-2)og HIV-1 p24-antigen

Legemidlet skal ikke inneholde antistoffer mot humant immunsviktvirus (HIV-1 og HIV-2) og HIV-1 p24-antigen. Bestemmelsen utføres ved hjelp av enzymimmunoanalysemetoden ved bruk av testsystemer godkjent for bruk i russisk helsepraksis og med 100 % sensitivitet og spesifisitet i henhold til bruksanvisningen.

Pakkeog merking

I samsvar med den generelle farmakopéen " Medisiner fra humant blodplasma."

X sår

Oppbevares på et sted beskyttet mot lys ved en temperatur på 2 til 8 ° C, med mindre annet er angitt i forskriftsdokumentasjonen.