Скрининг на донатори. Имунохематолошки лабораториски тестови Антигени (Ag) на еритроцитите

Вкупнокрвни протеини 60-80 g/l. Постојат неколку протеински фракции кои вршат специфични функции.

1. Албумините (40-60 g/l) имаат висока колоидна осмотска активност.

2. Создаваат глобулини a, b, g (20-40 g/l). хуморалниот имунитет, формирајќи различни антитела наречени имуноглобулини (IgM, IgG).

3. Фибриногенот (2-4 g/l) е главниот фактор во механизмот на коагулација на крвта.

АНТИГЕНИ(грчки ànti - против, genos - создаваат) - супстанции кои имаат способност да предизвикаат формирање на антитела во телото и да реагираат со нив. Голем број специфични полисахариди се вградени во мембраната на еритроцитите - аминокиселински комплекси со антигенски својства. Овие комплекси се нарекуваат аглутиногени.

До денес, повеќе од 400 антигени локализирани во мембраната на еритроцитите се пронајдени во човечките еритроцити, од кои 140 се комбинирани во 20 генетски контролирани системи. Останатите антигени се вообичаени или индивидуални. За клиничка праксанајважни се системот ABO и Rh системот (Rh систем). Исто така, постојат групи на Кел-Челано, Кид, Лутеран, Дафи, Диего, итн. Овие вториве се важни само со чести трансфузии на крв или за време на бременост некомпатибилни со некој од овие аглутиногени. Затоа, не се препорачува постојано трансфузија на крв од ист дарител.

РБЦ антигените се појавуваат во вториот месец ембрионски развој, сепак, до моментот на раѓањето на детето, нивната аглутинирачка активност е ниска и изнесува 1/5 од активноста на возрасните.

АНТИТЕЛАСупстанции кои реагираат со антиген. Природните антитела се секогаш присутни во крвната плазма и припаѓаат на фракцијата на гама глобулините. Тие вклучуваат антитела на АБО системот - а и б аглутинини, кои се појавуваат кај луѓето во првите месеци по раѓањето и достигнуваат максимален бројна возраст од 5-10 години.

РЕАКЦИЈА НА АГЛУТИНАЦИЈА- лепење и таложење на еритроцити под дејство на специфични антитела - аглутинини. Се верува дека молекулата на антителото формира мост помеѓу два еритроцити со две места за врзување. Секој од овие еритроцити, пак, се врзува за други еритроцити и, како резултат на тоа, тие се држат заедно. При трансфузија некомпатибилна крваглутинацијата доведува до хемолиза на еритроцитите и ослободување на факторите на коагулација. Добиените згрутчувања ги затнуваат малите садови и со тоа ја нарушуваат капиларната циркулација.

Аглутинацијата настанува кога се спојуваат истоимените аглутиногени на донаторот и аглутинини на примачот.

Тестови за компатибилност на трансфузирана крв

Лекарот што врши трансфузија на крв е должен да ја спречи нејзината можна некомпатибилност со крвта на пациентот со спроведување контролни студии, вклучително и тестови за компатибилност со крвните групи AB0 ​​и со факторот Rh.

Тестовите за компатибилност се вршат непосредно пред трансфузијата. За да го направите ова, користете го крвниот серум на пациентот и крвта на донаторот од вијалата подготвена за трансфузија.

„Системите на човечка крвна група и
компликации од трансфузија на крв“, М.А.Умнова

Крвните групи се одредуваат со тест за аглутинација на собна температура на порцеланска или друга бела плоча со површина што може да се навлажнува. Постојат два начини за одредување на крвната група: користење на стандардни серуми за да се одреди која група аглутиногени (А или Б) се наоѓаат во еритроцитите на крвта што се проучува; истовремено со користење на стандардни серуми и стандардни еритроцити (вкрстен метод). При што…

Во епрувета се ставаат 2 капки од серумот на пациентот, 1 капка крв од дарител и 1 капка 33% раствор полиглуцин, специјално подготвен за лабораториски цели. Цевката се протресува за да се измеша содржината, а потоа се навалува речиси до хоризонтална положбатака што содржината се истури преку нејзините ѕидови и полека се врти околу 5 минути вертикална оска, воспоставувајќи контакт со мешавина од серумот на пациентот ...

Реакцијата на хемаглутинација во секоја капка може да биде позитивна или негативна. Со позитивна реакција, обично во првите 10-30 секунди од почетокот на мешањето, во смесата се појавуваат ситни црвени зрна (аглутинати) видливи со голо око, составени од залепени еритроцити. Малите аглутинати постепено се спојуваат во поголеми, а понекогаш и во снегулки. неправилна форма. Во исто време, серумот е целосно ...

Крвта на донаторот мора да се измие двапати во епрувета со волумен од 8-10 пати изотоничен растворнатриум хлорид со центрифугирање, потоа отстранете ја крпата и искористете го седиментот од измиените еритроцити за истражување. Една мала (0,01 ml) капка измиени еритроцити се префрла во друга епрувета, во неа се додаваат 3 капки од серумот на пациентот, се мешаат со еритроцитите на донаторот и епрувета се става во ...

I. Под претходно направени ознаки, една голема капка (0,1 ml) стандардни серуми од групите 0αβ (I), Aβ (II) и Bα (III) се нанесува на плочата. Бидејќи се користат стандардни серуми од две различни порции од секоја група, се добиваат вкупно 6 капки, кои формираат два реда од 3 капки по следниот редослед од лево кон десно: 0αβ(I), Aβ(II) и Bα(III ). II. На дното на чинијата ...

Резултатите се толкуваат со евалуација и споредување на добиените резултати со стандардни серуми (горните два реда) и со стандардни еритроцити (долниот ред). Резултатите од реакциите добиени со користење на стандардни серуми II на стандардни еритроцити треба да се совпаѓаат, т.е., да укажуваат на содржината на аглутиногени и аглутинини кои одговараат на истата крвна група. Овие резултати може да се изразат ...

За да се утврди припадноста на Rh, односно да се открие присуството или отсуството на антигени на Rh системот во крвта на луѓето, се користат стандардни анти-Резус серуми (реагенси), кои се различни по специфичност, т.е. содржат антитела во однос на различни антигени на овој систем. За одредување на Rh0 (D) антигенот, најчесто се користи серум против резус со додавање на 10% раствор од желатин или се користи стандарден антирезус реагенс подготвен однапред ...

I. Во 2 епрувети, една капка (0,05 ml) од испитуваните еритроцити и 2 капки 10% раствор од желатин загреан до втечнување во топла вода(46 - 48 ° C). II. Во една од овие цевки, 2 капки анти-Rh серум се додаваат во мешавината од еритроцити и желатин. Овој серум не се додава во друга туба, тој служи како контролен ...

Епруветите се гледаат наспроти светлината со голо око или преку лупа со двојно зголемување. Резултатот се толкува во зависност од присуството или отсуството на аглутинација на еритроцитите. Со позитивен резултат, аглутинатите лесно се разликуваат во форма на црвени зрна или снегулки на транспарентна, речиси обезбојувана позадина на течноста. Ако резултатот е негативен во епрувета, еднакво обоена розова боја, малку опалесцентна течност. Примероци…

I. Една капка (0,05 ml) од испитуваната крв или еритроцити се инјектира во епрувета (не можете да ја измиете од конзервансот), додадете 1-2 капки од стандардниот универзален анти-резус реагенс и измешајте ги еритроцитите со реагенс со тресење на цевката. II. Епрувета е навалена речиси во хоризонтална положба така што содржината се шири по нејзините ѕидови, а потоа полека се врти во оваа положба ...

Изборот на дарители се врши според единствени медицински критериуми, со што се обезбедува безбедност, висока активност и ефективност на крвта и нејзините компоненти.

Секој дарител е подложен на преглед пред да донира крв: собираат анамнеза, вршат темелен медицински преглед и посебен прегледда се идентификуваат контраиндикации за дарување крв и да се исклучи можноста за пренесување на патогени на заразни болести со крв. Се вршат серолошки, виролошки и бактериолошки испитувања на донаторска крв.

Напредокот во клиничката трансфузиологија го намалува ризикот од пренесување на патогени на заразни болести (ХИВ инфекција, хепатитис Б и Ц, сифилис, цитомегаловирусна инфекција итн.) со крв и неговите компоненти.

Главните антигенски системи на крвта

Утврдено е дека антигенската структура на човечката крв е сложена, сите крвни зрнца и плазма протеини на различни луѓе се разликуваат во антигени. Веќе се познати околу 500 крвни антигени, кои формираат повеќе од 40 различни антигенски системи.

Антигенски систем се подразбира како збир на крвни антигени наследени (контролирани) од алелни гени.

Сите крвни антигени се поделени на клеточни и плазма. Клеточните антигени се од примарна важност во трансфузиологијата.

Клеточни антигени

Клеточните антигени се сложени јагленохидратно-протеински комплекси (гликопептиди), структурни компоненти на мембраната на крвните клетки. Од другите компоненти клеточната мембранатие се разликуваат по имуногеност и серолошка активност.

имуногеност -способноста на антигените да индуцираат синтеза на антитела доколку навлезат во организам кој ги нема овие антигени.

Серолошка активност -способноста на антигените да се врзуваат за антителата со исто име.

Молекулата на клеточниот антиген се состои од две компоненти:

Schlepper (протеинскиот дел од антигенот лоциран во внатрешните слоеви на мембраната), кој ја одредува имуногеноста;

Хаптен (полисахарид дел од антигенот, кој се наоѓа во површинските слоеви на клеточната мембрана), кој ја одредува серолошката активност.

На површината на хаптенот се наоѓаат антигенски детерминанти (епитопи) - молекули на јаглени хидрати на кои се прикачени антитела. Познатите крвни антигени се разликуваат едни од други по епитопи.

На пример, хаптените на антигени од системот AB0 го имаат следниот сет на јаглени хидрати: епитопот на антигенот 0 е фукоза, антигенот А е N-ацетилгалактозамин и антигенот Б е галактоза. Групните антитела се поврзани со нив.

Постојат три типа на клеточни антигени:

еритроцити;

Леукоцити;

Тромбоцити.

RBC антигени

Познати се повеќе од 250 еритроцитни антигени, кои формираат над 20 антигенски системи. 11 системи се од клиничко значење: AB0, Rh-Hr, MNSs, Kell, Lutheran, Kidd, Diego, Duffy, Dombrock, ензимски групи на еритроцити.

Кај луѓето, антигени на неколку антигенски системи се истовремено присутни во еритроцитите.

Главните антигенски системи во трансфузиологијата се АБ0 и Резус. Другите антигенски системи на еритроцитите моментално немаат значајно значење во клиничката трансфузиологија.

Антигенски систем AB0

Системот AB0 е главниот серолошки систем кој ја одредува компатибилноста или некомпатибилноста на трансфузирана крв. Се состои од два генетски определени аглутиногени (антигени А и Б) и два аглутинини (антитела α и β).

Аглутиногените А и Б се содржани во стромата на еритроцитите, а аглутинините α и β се наоѓаат во крвниот серум. Аглутинин α е антитело против аглутиноген А, а аглутинин β е против аглутиноген Б. Во еритроцитите и крвниот серум на едно лице, не може да има аглутиногени и аглутинини со исто име. Кога се спојуваат антигени и антитела со исто име, се јавува реакција на изохемаглутинација. Токму оваа реакција е причина за некомпатибилност на крвта при трансфузија на крв.

Во зависност од комбинацијата на антигени А и Б во еритроцитите (и, соодветно, во серумот на антитела α и β), сите луѓе се поделени во четири групи.

Резус антигенски систем

Rh факторот (Rh фактор), така наречен затоа што првпат бил откриен кај мајмуните Резус, е присутен кај 85% од луѓето, а 15% е отсутен.

Сега е познато дека системот Резус е прилично сложен и е претставен со пет антигени. Улогата на Rh факторот во трансфузијата на крв, како и за време на бременоста, е исклучително висока. Причини за грешки кои водат до развој на резус конфликт тешки компликацииа понекогаш и смрт на пациентот.

Мали антигенски системи

Системите на секундарните еритроцитни групи се претставени со голем број антигени. Познавањето на ова мноштво системи е важно за решавање на некои прашања во антропологијата, форензичките истражувања, како и за спречување на развој на посттрансфузиски компликации и одредени болести кај новороденчињата.

MNS системвклучува фактори M, N, S, s. Докажано е присуство на два тесно поврзани гени локуси MN и Ss. Последователно, беа идентификувани други различни варијанти на антигени на системот MNSs. Според хемиската структура, МНС се гликопротеини.

R систем.Системот на P антиген има одредено клиничко значење. Имаше случаи на рани и доцни спонтани абортуси предизвикани од изоантитела. анти-Р.Опишани се неколку случаи на посттрансфузиски компликации поврзани со некомпатибилноста на донаторот и примателот според системот на P антиген.

Кел системпретставена со три пара антигени. Антигените Kell (K) и Cellano (k) имаат највисока имуногена активност. Антигените на системот Кел може да предизвикаат сензибилизација на телото за време на бременоста и за време на трансфузија на крв, да предизвикаат компликации при трансфузија на крв и развој на хемолитична болест кај новороденчето.

Лутерански систем.Еден од донаторите, по име Лутеран, имал некој претходно непознат антиген во еритроцитите на крвта, што довело до имунизација на примачот. Антигенот беше назначен Lu a. Неколку години подоцна, вториот антиген на овој систем, Лу б, беше откриен. Нивната фреквенција: Лу а - 0,1%, Лу б - 99,9%. Анти-Луб антителата се изоимуни, што е потврдено и со извештаите за значењето на овие антитела во потеклото на хемолитичката болест кај новороденчето. Клиничкото значење на антигените на лутеранскиот систем е мало.

Кид систем.Антигените и антителата на Кидовиот систем имаат специфична практична вредност. Тие можат да бидат причина за развој на хемолитичко заболување кај новороденчето и посттрансфузиски компликации со повторени трансфузии на крв кои се некомпатибилни со антигените на овој систем. Фреквенцијата на антигени е околу 75%.

Диего систем.Во 1953 година, во Венецуела, во семејството на Диего се роди дете со знаци на хемолитичка болест. При утврдување на причината за оваа болест, кај детето беше откриен претходно непознат антиген, назначен со факторот Диего (Ди). Во 1955 година, спроведените студии открија дека антигенот Диего е расна особина карактеристична за народите од монголоидната раса.

Дафи системсе состои од два главни антигени - Fy a и Fy b. Анти-Fy a антителата се нецелосни антитела, тие го покажуваат својот ефект само во индиректниот антиглобулин Coombs тест. Подоцна беа откриени антигените Fy x, Fy 3, Fy 4, Fy 5. Фреквенцијата зависи од расата на личноста, која има големо значењеза антрополозите. Кај негроидните популации, фреквенцијата на факторот Fy a е 25%, кај кинеската популација, ескимите и австралиските Абориџини - скоро 100%, кај кавкаските луѓе - 60-82%.

Домброк систем.Во 1973 година, беа идентификувани антигените Do a и Do b. Факторот Do a се наоѓа во 55-60% од случаите, а факторот Do b - во 85-90%. Оваа фреквенција го става овој серолошки крвен систем на петтото место во однос на информативноста во однос на форензичкото утврдување на татковството (систем Резус, МНС, АБ0 и Дафи).

Ензимски групи на еритроцити.Од 1963 година, стана познат значителен број генетски полиморфни ензимски системи на човечки еритроцити. Овие откритија одиграа значајна улога во развојот на општата серологија на човечките крвни групи, како и во аспект на судско-медицинскиот преглед на спорното татковство. Ензимските системи на еритроцитите вклучуваат фосфат глукомутаза, аденозин деаминаза, глутамат-пируват трансаминаза, естераза-D итн.

Во сегашната фаза е докажано дека хемолитична болестфетус и новороденче е вид на алоимуна цитопенија предизвикана од имунизација на мајката со фетални крвни клетки кои носат антигени на мембраните кои ги нема кај трудницата. Овој процес може да се должи на различни антигени лоцирани на мембраната на еритроцитите и другите крвни зрнца (тромбоцити, неутрофили) на фетусот, кои трансплацентарно влегуваат во крвотокот на мајката и предизвикуваат формирање на антитела кај неа. Најчесто се забележуваат алоимуни еритропенија, поради некомпатибилноста на крвта на фетусот и мајката за антигени на АБО и Резус системите.

Природата на анемијата што се развива кај фетусот (хемолитична, апластична) зависи од антигенот или антигените што ја предизвикуваат. Во исто време, кај фетуси со еритропенија разновидна генеза, слично клинички манифестацииболести достапни за неинвазивни и инвазивни методи за верификација.

Алоимуна еритропенија, вклучително и хемолитичко заболување, на фетусот/новороденчето (HDFN) е болест која се карактеризира со хемолиза на еритроцитите и/или инхибиција на хематопоезата под влијание на антителата формирани кај мајката кон антигените на феталните еритроцити, кои меѓусебно продираат низ бариерата. , манифестирана кај фетусот/новороденчето со анемија, зголемување на крвните експлозивни форми на еритроцити и, често, билирубин.

Бидејќи разликите во крвта на мајката и фетусот во однос на антигените на еритроцитите се од примарна важност во патогенезата на болеста, неопходно е да се земат предвид нивните имунохематолошки карактеристики.

Во сегашната фаза на развој на имунохематологијата, познати се повеќе од 250 еритроцитни антигени, кои обично се дистрибуирани во 29 генетски независни системи. Секој систем е кодиран од еден или повеќе гени. Антигени на еритроцити се протеини (на пример, Резус систем), гликопротеини или гликолипиди (АБО систем).

Од 1980 година до денес, Меѓународното здружение за трансфузија на крв (ISBT) продолжи да работи на класификацијата на познати Медицинска наукаеритроцитни антигени. Според моментално користената номенклатура, сите еритроцитни антигени се поделени на системи, колекции и серии.

Табела 1 претставува листа на познати 29 системи на еритроцитни антигени, комбинирани во нив според принципот на присуство на заеднички гени кои ги кодираат нивните производи. Вообичаено е да се означат системите на антигени по редослед на нивното откривање со трицифрени броеви во растечки редослед, почнувајќи од 001. Во системот, секој антиген има и трицифрен број. Така, секој антиген обично се означува со шестцифрен број.

Колекциикомбинираат антигени кои се биохемиски и серолошки поврзани на ниво на фенотип, но немаат заеднички гени кои ги кодираат нивните производи и затоа не ги исполнуваат барањата за антигенски системи.

Антигени за кои сè уште не се проучени гените кои ги кодираат се групирани во серијаод две групи - со ниски и Висока фреквенцијапојава.

RBC алоантигениконвенционално поделено со заеднички антигени,антигени просечна фреквенција на појавувањеи реткиантигени. Заеднички антигени се наоѓаат кај скоро сите луѓе, па затоа ретко се формираат антитела на таквите антигени. Меѓутоа, доколку е неопходно да се изврши трансфузија на крв кај пациенти со присуство на антитела на често појавуваните антигени, по правило се јавуваат потешкотии со изборот на донатори. Во случај антигенот да се дистрибуира со фреквенција помала од 1%, тогаш тој се класифицира како група на ретки антигени.

Табела 1

Системи на антигенски еритроцити

Кај пациенти со изоимунизација на ретки антигени, во повеќето случаи, тешко е да се спроведе имунохематолошки преглед за верификација на антитела, бидејќи овој процес бара долга, скапа студија со користење на голем број примероци и системи за тестирање.

Бидејќи клинички значајни формиХемолитичките болести главно се предизвикани од антитела формирани на антигените на системот Резус, неопходно е да се задржиме на класификациите предложени за антигените на овој систем. Постојат неколку такви класификации. Еден од нив е Резус класификација на антигени на Винер.Се заснова на претпоставката дека има само едно место на Rh-хромозомот што може да го заземе еден од осумте алеломорфни гени. Секој ген шифрира за производство на аглутиноген, кој е комплекс од антигени. Означувањето на антигени според Винер е сложено и во моментов не е широко користено во имунохематологијата. Сепак, вообичаено е да ја назначат специфичноста на антителата во имуноглобулинот против Резус - "Rho (D)".

Препорачано од Експертскиот комитет за биолошки стандарди на СЗО за употреба Фишер-Рајс класификација на резус антигени.Се заснова на претпоставката дека има три места на Rh-хромозомот за три гени. Покрај тоа, секој генски комплекс се состои од три антигенски детерминанти: D или негово отсуство - d, C или c, E или e во различни комбинации.

Во истражувањето последниве годинипокажани се само два гена (RHDи RHCE), одговорен за производство на антигени на еритроцитите на системот Резус. Така, производството на антигенот Д е контролирано од генот rhd,додека антигените C, c, E, e - геномот RHCE.При што голем број наантигени кои го сочинуваат системот Резус (48 антигени) се објаснуваат со мутации во овие два гена. Нема податоци за присуство на антиген d, бидејќи не постои ген одговорен за синтезата на овој антиген.

Хемолитичката болест на фетусот и новороденчето може да биде предизвикана и од антигени на системот Резус различни од Д, како и од други таканаречени „неправилни“ антигени на други системи или комбинација од неколку антигени на еден систем. Во овој случај, терминот "еритроцитна алоимунизација" најчесто се користи во литературата за да се карактеризира алоимуниот процес.

Алоимунизацијата за антигени на еритроцитите е главната причина за развој на анемичен синдром кај фетусот. Така, според американскиот Центар за контрола и превенција на болести (година), и покрај спроведената програма за имунопрофилакса, Rh сензибилизација се јавува во 6,7 случаи на 1000 живородени деца. Ако на нив се додадат случаи на развој на алоимунизација под влијание на антигени на еритроцити од други групи (Кел, Кид, Дафи), тогаш во САД годишно се регистрираат повеќе од 30.000 фетуси со ризик од развој на алоимуна анемија. За жал, таква целосна статистика на Руска Федерацијасè уште не е достапно поради недоволното спроведување на детално имунохематолошко тестирање на пациентите во ризик.

Така, за адекватна проценка на присуството на изоимунизација, неопходно е, пред сè, да се бараат и да се идентификуваат антителата на еритроцитите кои циркулираат во крвта на бремената жена.

Улогата на еритроцитните антигени во појавата на хемолитична болест на фетусот и новороденчето е различна и се определува со способноста на алоантителата формирани на одредена класа на антигени да ги уништат еритроцитите или да ги нарушат процесите на нивното формирање кај фетусот. Процесот на формирање на имунолошки антитела на антигените на феталните еритроцити зависи од присуството на антиген кој е отсутен кај мајката, неговата имуногеност, како и од бројот на фетални еритроцити кои влегуваат во крвотокот на трудницата.

Антителата на еритроцитните антигени (алоантитела) се природни (редовни) и имуни (неправилни). Значи, во крвниот серум на луѓето (освен индивидуите со крвна група АБ), постојано се присутни вродени природни антитела на антигените А и/или Б од системот АБО, составен од четири антигени.

Болеста кај фетусот и, последователно, кај новороденчето, се должи на некомпатибилноста на еритроцитите на мајката и фетусот според антигенскиот систем АБО во 10-20% од сите случаи. Во исто време, хемолитичката болест на фетусот / новороденчето се развива 40 пати почесто кај жени со крвна група 0 (I) и брачен другар со различна крвна група. Меѓутоа, кога ќе се појави овој тип на изоимунизација тешки формиболести кај фетусот и новороденчето се забележани само во изолирани случаи - 1:3000 раѓања.

Метод на гел аглутинација за одредување на еритроцитни антигени и анти-еритроцитни антитела

Вовед

Технологијата на гел во микроцевки (GTM) беше предложена од Y. Lapierre во 1989 година. Методот се заснова на аглутинација на еритроцити во Sephadex агар гел сместен во микроцевки. Типично, системот е пластична картичка која содржи микроцевки исполнети со гел (патент DiaMed AG, Швајцарија). Имунохематолошките студии засновани на реакцијата на хемаглутинација обично се изведуваат во системи со течна фаза.

Еден од повеќето важни условидобивањето точни податоци за реакцијата на аглутинација е евалуација на резултатот. Слабиот одговор може погрешно да се протолкува, особено од неискусен персонал. Лажни слаби или негативни резултати од индиректен антиглобулински тест може да се појават поради неутрализација на антиглобулинскиот реагенс со траги од серумот поради недоволно ефикасно миење на црвените крвни зрнца. Несоодветното мешање на црвените крвни зрнца и елуцијата на слабо фиксирани антитела за време на процесот на миење може да предизвикаат грешки во индиректниот антиглобулински тест.

Техниката на аглутинација со гел беше развиена за да се стандардизираат реакциите на хемаглутинација и да се добијат сигурни резултати. Технологијата на гел обезбедува раздвојување на еритроцитите за време на центрифугирањето, додека неаглутинираните еритроцити поминуваат низ гелот и се таложат на дното на цевките ( негативен резултат), додека аглутинираните се задржуваат на површината или во дебелината на гелот ( позитивен резултат). Центрифугирањето со гел може да биде последната фаза од секој серолошки тест заснован на хемаглутинација, освен методите кои бараат дисперзија за да се оцени резултатот.

Опсегот на извршени тестови вклучува фенотипирање на RBC (вклучувајќи слаби варијанти на антигени), тестирање на антиглобулин, скрининг и идентификација на антитела, тестови за компатибилност и неколку други.

Принцип на тест за гел

Пуферираниот декстран гел Sephadex TM G 100 суперлинија може да биде или неутрален или да содржи специфични антисеруми или антиглобулински реагенс на гел матрица. На гелот се нанесуваат црвени крвни зрнца или мешавина од црвени крвни зрнца и серум. Клетките секогаш се нанесуваат пред серумот - за разлика од стандардните серолошки техники - за да не дојде во контакт со серумот со гелот, што е особено важно при изведување на антиглобулински тест. По инкубацијата, следи центрифугирање во строго дефиниран режим. Ако не се исполнети условите за центрифугирање (центрифугацијата не е доволно долга или премногу мека), може да се појават лажни позитивни резултати. Лажно-негативни резултати може да се појават и доколку се прекршат условите (форсирањето) на центрифугирање. Употребата на автоматска ID-центрифуга (Diamed) ги елиминира овие проблеми. За тестирање најчесто се користат три типа на гел:

1. неутрален, кој не содржи специфични антитела (се користи за пребарување и идентификација на антитела со солени и ензимски методи, студената фаза на тестот за компатибилност на крвта на донаторот и примателот);
2. специфични, кои содржат антитела (моноклонални или поликлонални) на антигени на човечки еритроцити (се користат за типизација на еритроцитни антигени на системите ABO, Rhesus, Kell итн.)
3. антиглобулин, кој содржи антитела (полиспецифични или моноспецифични) на човечки имуноглобулини и компоненти на системот на комплементот (кој се користи за директен и индиректен антиглобулински тест (реакција Coombs) при пребарување и идентификација на авто- и алоимуни антитела, тест за компатибилност на донаторот и примателот крв).

Проверената крв се додава на горен делмикроцевки од дијагностички картички, а за време на центрифугирањето, аглутинираните и неаглутинираните еритроцити се одвојуваат на следниов начин: неаглутинираните еритроцити имаат големина споредлива со големината на честичките од гел и слободно поминуваат низ нив под дејство на центрифугална сила, формирајќи компактна црвена талог на дното на микроцевката - негативен резултат; аглутинираните еритроцити, поради нивната голема големина, се задржуваат на површината на гелот или во нејзината дебелина - позитивен резултат.

Фиксната аглутинација во гелот го олеснува оценувањето на резултатот од реакцијата, а присуството на контролна микроцевка во дијагностичката табела ја потврдува веродостојноста на добиените податоци.

Во зависност од јачината на реакцијата на аглутинација во медиумот за гел, беше прифатена следната проценка на добиените резултати:

• силно позитивен (++++) - формираниот еритроцит аглутинира се задржа на површината на гелот;
• позитивни (+++) - аглутинатите се наоѓаат во горната третина од колоната за гел;
• слабо позитивни (++) - аглутинатите се фиксираат во горните две третини од гелот;
• многу слабо позитивен (+) - аглутинатите се наоѓаат во долната третина од гелот;
• негативно (-) - еритроцитите формираат компактен талог на дното на микроцевката.

Опрема и реагенси

• лични карти за определување на еритроцитни антигени и анти-еритроцитни антитела;
• ИД центрифуга за центрифугирање на картички;
• термостат на +37°С;
• стојат за епрувети и картички;
• епрувети со капацитет од 5 и 10 ml;
• полуавтоматски едноканални пипети (10, 25, 50 µl);
• гумени хируршки ракавици;
• раствор за разредување 1 (раствор на бромелаин);
• раствор за разредување 2 (раствор со мала јонска јачина - LISS, RNIS);
• 0,9% раствор на натриум хлорид;
• стандардни типизирани човечки еритроцити за детекција на антитела и вкрстена реакција.

Карактеристики на личните карти

Идентификациски картички (ID-cards) Dia-Med се пластични картички во кои се вградени шест микроцевки. Пет епрувети содржат мешавина од гел и антисеруми. Секоја картичка има шеста контролна цевка која содржи неутрален гел без антитела (ctl). Цевките се означени во личната карта според откриените антигени, на пример: A-B-AB-D-CDE-ctl или C-c-E-e-K-ctl. Картичките за идентификација за откривање антитела на антигени на еритроцитите имаат одредени разлики, на пример, картичките „Coombs / Enzyme Test“: три цевки лоцирани лево содржат гел што содржи антитела на човечки глобулини (моноспецифичен анти-IgD или полиспецифичен - на имуноглобулини од различни класи ) - реакција на Кумбс. Следните три цевки содржат само неутрален гел дизајниран да детектира антитела на антигени на еритроцитите во солен медиум.

Општи правила за користење на лични карти

1. Идентификациските карти треба да се чуваат на суво, темно место на температура од 18-25°C. Датумот на истекување е означен во делот за пасош на секоја картичка и на кутиите за пакување.
2. Растворите за подготовка на суспензија на еритроцити, како и стандардните серуми и стандардните ИД-еритроцити кои се користат во поединечни студии, треба да се чуваат на суво, темно место на температура од 2-8°C. Датумот на истекување е означен на етикетата на секоја вијала и на кутијата за пакување.
3. За да избегнете добивање лажни резултатистудии, не користете никакви реагенси и картички на кои им е истечен рокот на траење, како и исушени, кои содржат меурчиња од гас или ако лушпата е оштетена.
4. Крвта се бере со помош на современи техники на флеботомија, а погодна е и артериска, капиларна и папочна (без миење) крв. И примероците од целосна крв (земени во чиста, сува епрувета) и примероците од крв земени на конзерванси и стабилизатори се погодни за истражување.

Типирање на еритроцитни антигени

DiaMed ID-картичките се наменети за истовремено одредување на крвната група ABO и Rh-припадност на еритроцитите на донаторот и примателот (вклучувајќи ги и нивните слаби варијанти на антигени), како и за типизација на други еритроцитни антигени. DiaMed ID-картичките може да се користат наместо или паралелно со изохемаглутинирачките серуми, анти-D, анти-DCE реагенси, анти-А, анти-Б, анти-Д и анти-Д Супер коликони.

• [прикажи] .

  Почетната фаза се изведува на различни начини, во зависност од видот на употребените лични карти, кои содржат поликлонални (види став 1а подолу) или моноклонални (види став 16) антитела:

  1а)Подгответе суспензија од проучуваните еритроцити во Растворот за разредување на ICID-картичките што содржат поликлонални антитела) за што:

  • чувајте го растворот за разредување 1 додека не достигне собна температура;
  • Подгответе 5% суспензија од тест еритроцити во раствор за разредување 1 со ставање 0,5 ml раствор за разредување 1 и 50 µl од целата крв што треба да се тестира или 25 µl еритроцитна маса во епрувета;
  • нежно измешајте и инкубирајте 10 минути на собна температура;
  • користете најдоцна 15 минути по инкубацијата.

  16) Подгответе суспензија на тест еритроцити во раствор за разредување 2 (карти за лична карта што содржат моноклинални антитела) за која:

  • чувајте го растворот за разредување 2 додека не достигне собна температура;
  • означете чисти епрувети;
  • подгответе 5% суспензија од тест еритроцити во раствор за разредување 2 со ставање 0,5 ml раствор за разредување 1 и 50 µl од целата крв што треба да се тестира или 25 µl еритроцитна маса во епрувета.
• Понатамошни активности [прикажи] .
  1. Обележете ја личната карта (N на примерокот од тест серумот или целосното име на пациентот).
  2. Отстранете ја заштитната фолија од цевките за лична карта.
  3. Додадете 10 µl тест еритроцити, подготвени во согласност со точка 1а, или 50 µl тест еритроцити, подготвени во согласност со точка 16, на секоја епрувета од личната карта.
  4. Инсталирајте ги личните карти во роторот на ID-центрифугата (со задолжително балансирање со други лични карти, можеби неискористени).
  5. ИД-карти за центрифугирање (времето и брзината на центрифугирање се константни и се поставуваат автоматски).
  6. Оценете го резултатот од тестот: Резултатот во контролната микроцевка - "ctl" - секогаш мора да биде негативен. Позитивна реакција во „контролата“ може да се должи на присуството на автоантитела и неспецифични плазма протеини. Ако „контролата“ е позитивна - определувањето е несигурно, мора да се повтори по еднократно миење на примерокот од еритроцитите со 0,9% раствор на натриум хлорид или раствор за разредување 2.
  7. Внесете ги резултатите од определувањето на секој антиген во соодветната колона од личната карта (на белото поле под секој антиген).
  8. Идентификувајте го резултатот според следнава шема (Табела 18.7-18.9)

  Табела 18.7. Резултатите од студијата на антигените на крвната група ABO и Rh-припадноста во личната карта ABO/Rh
  Антигени што може да се детектираат					Заклучок
  НО	AT	АБ	Д	CDE
  +	+	+	+	+	AB Rh+
  +	+	+	-	-	AB Rh-
  +	-	+	+	+	A Rh +
  +	-	+	-	-	И Rh-
  -	+	+	+	+	Во Rh +
  -	+	+	-	-	Во Rh-
  -	-	-	+	+	0 Rh+
  -	-	-	-	-	0 Rh-
  Забелешка: Специфичноста на студијата се потврдува со негативен резултат во контролната цевка со лична карта.

  Табела 18.8 Определување на антигени на еритроцитите на АБО системот
  Крвна група
  	анти-А	анти-Б	анти-AB
  0(1)	-	-	-
  А1(II)	++++	-	++++
  А2 (II)	++++	-	++++
  А3 (II)	++/+++	-	++/++++
  A x (II)*	-/++	-	+/++
  Б(II)	-	++++	++++
  В3 (III)	-	+/+++	+/+++
  B x (III)*	-	-/++	-/++
  A1B(IV)	++++	++++	++++
  A2B(IV)	+++/++++	++++	++++
  Забелешка: * - определување на многу слаби варијанти на антигени А и Б бара дополнително истражување.

  Табела 18.9 Дефиниција на Rh-припадност (D, CDE)
  Резус припадност	Резултати од студијата за серум
  	Анти-Д	Анти-CDE
  Д-позитивен	++++	++++
  Д-негативен	-	-
  Д-негативен, Ц	Е-позитивни*	-
  Слаб позитивен (D u)	од ± до +++	од +++ до ++++
  Забелешка: * - Позитивна реакција со анти-CDE серум кај повратна реакцијасо анти-D серум укажува на присуство на C, E антигени и бара дополнително пишување со помош на лични карти: C-c-E-e-K-stl или C-C w -c-E-e-K

Користени лични карти

При одредување на крвни групи и припадност на Rh, се користат поликлонални (Табела 18.10 [прикажи] ) и моноклонални (Табела 18.11 [прикажи] ) реагенси. Најчеста примена во пракса поради економска изводливостнајдете моноклонални серуми.

Од страна на модерна класификацијаиндивидуите со ослабена варијанта на антигенот Д способни да произведуваат анти-Д антитела спаѓаат во седум категории. Категоријата VI има најголема фреквенција на појавување и практично значење, чии еритроцити го носат само Z епитопот на антигенот D. Лицата од категорија VI (Rh-негативни приматели, но Rh-позитивни донатори!) можат да произведат антитела на непроменетиот D и делумна Г од сите други категории. За да се потврди крвната група, се користат различни лични карти: D (IV -) - за приматели, D (IV +) - за дарители.

Одредувањето на крвната група ABO и Rh додатоците се врши со идентификување на специфични антигени и антитела (двојна или вкрстена реакција) (Табела 18.12 [прикажи] ).

За длабинско испитување, се користат други карти (Табела 18.13-18.14 [прикажи] ).

Откривање на анти-еритроцитни антитела

Принцип на метод

Тест серумот и стандардните еритроцити за откривање на антитела се додаваат на врвот на микроцевките. По инкубацијата и центрифугирањето, аглутинираните еритроцити остануваат во горниот дел од цевката, бидејќи тие не поминуваат низ гелот поради голема величинааглутинира (позитивен резултат). Во отсуство на антитела на антигени на тест еритроцити, аглутинатите не се формираат. Неаглутинираните еритроцити лесно минуваат низ гелот и се таложат на дното на цевката (негативен резултат). Природата на аглутинација при откривање на антитела на еритроцитите зависи од титарот на антителата, нивната активност и се проценува од ++++ до +.

• Алгоритам за истражување [прикажи] .

  Внесените еритроцити пред студијата мора прво да се измијат двапати од конзервансот со 0,9% раствор на натриум хлорид, а потоа да се извршат следните чекори:

  • чувајте го разредувачот 2 додека не се постигне собна температура;
  • цевки за етикети;
  • подгответе 0,8% суспензија од типизирани еритроцити во раствор за разредување 2 со ставање 1,0 ml раствор за разредување 2 и 10 µl крв во епрувета;
  • извадете ја заштитната фолија од личната карта;
  • означете ја личната карта (број на примерокот од серумот за тестирање или полно име на пациентот);
  • додадете 50 µl стандардни еритроцити во микроцевки;
  • додадете 25 µl серум или плазма од примерокот за тестирање на секоја микроцевка;
  • инкубирајте 15 минути на температура од +37 "C;
  • центрифуга ID-карти во ID-центрифуга (времето и брзината на центрифугирање се константни и се поставуваат автоматски).

  Забелешка: стандардните еритроцити на панелот ID-DiaCell I-II-III и ID-DiaCell I-Ii-III P од DiaMed се подготвени за употреба без претходно миење и третман со раствор за разредување 2.

• Толкување на резултатите [прикажи] .

  Позитивна реакција значи присуство на имунолошки антитела во тест примерокот.

  Ако има позитивна реакцијасо сите еритроцити од панелот ID-DiaCell, се препорачува да се изврши автоконтрола за да се исклучат автоантитела во примерокот за тестирање.

  Ако реакцијата остане негативна со еден или повеќе еритроцити од ID-DiaCell панелот, специфичноста на антителата може да се одреди со помош на придружниот лист за антигенско профилирање испорачан со сите пакувања ID-DiaCell. Кога го правите ова, проверете дали се совпаѓаат броевите на панелот ID-DiaCell1 и придружниот лист.

  Доколку овој панел не дозволува одредување на специфичноста на антителата, се препорачува да се продолжи со идентификација со помош на напредната еритроцитна табла ID-DiaPanel и/или ID-DiaPanel P (во зависност од првично користениот метод).

Скрининг и идентификација на антитела

Скрининг на антитела се изведува и во неутрален гел и во гел што содржи антиглобулински реагенс (Табела 18.15-18.16 [прикажи] ). Во првиот случај, за студијата се користат еритроцити третирани со ензим, во вториот случај се користи суспензија на еритроцити во раствор со мала јонска јачина. Скрининг и идентификација на антитела се врши со користење на стандарден панел на еритроцити. При евалуација на ефективноста на гел-тестот за скрининг и идентификација на антитела, беше откриена неговата поголема чувствителност во споредба со традиционалните методи.

Методи за проучување на антитела на антигени на еритроцитите

• Антиглобулин тест (индиректен Coombs тест) [прикажи] .

  Индиректниот антиглобулински тест (NAT) се користи за откривање на анти-RBC антитела. Вообичаено, NAT се изведува во два чекори:

  1. инкубација на еритроцити и серум (фиксација на антитела) проследена со миење за отстранување на неврзаните глобулини; за поставување индиректен антиглобулин тест во гел тест не бара миење на еритроцитите!
  2. инкубација на измиени еритроцити со анти-хуман глобулин (AHG). Аглутинацијата укажува на присуство во серумот на антитела кои се врзуваат за антигени на еритроцитите in vitro.

  NAT се користи за:

  1. определување во серумот на примачот на антитела на еритроцитите на донаторот - кога се поставува тест за компатибилност;
  2. при скрининг на „неочекувани“ анти-еритроцитни антитела;
  3. во студијата на анти-еритроцитни антитела кај бремени жени;
  4. во студијата на антитела во серумот на пациенти со автоимуна хемолитична анемија.

  Напредок во дефиницијата:

  • додадете 50 µl суспензија од типизирани еритроцити во три епрувети од личната карта што се наоѓа лево;
  • додадете 25 µl од тест серумот во епруветите;
  • центрифуга лични карти за 10 мин;
  • оцени го резултатот од студијата. Внесете го резултатот во личната карта.

  Резултати од дефиниција:

  • позитивен резултат укажува на присуство на имунолошки (ало) антитела во тест серумот или плазмата (за да се одреди специфичноста на антителата, користете ја табелата прикачена на стандардните еритроцити);
  • негативен резултат укажува на отсуство на имунолошки антитела во тест серумот или плазмата.
• ензимски метод [прикажи] .

  Третманот со протеолитички ензими ја зголемува аглутинабилноста на црвените крвни зрнца.

  Напредок во дефиницијата:

  • додадете 50 µl суспензија од стандардни типизирани еритроцити во трите цевки од личната карта што се наоѓаат десно;
  • додадете 25 µl раствор за разредување 1 во цевките;
  • додадете 25 µl од тест серумот во епруветите.

  Забелешка: Растворот за разредување 1 не се додава ако за тестирање се користат стандардни типизирани еритроцити претходно третирани со протеолитички ензим (на пр. ID-DiaCell I-II-III P од DiaMed).

  • инкубирајте 15 минути на +37°C;
  • центрифуга лични карти во W-центрифуга за 10 минути (параметрите се поставуваат автоматски);
  • внесете го резултатот во личната карта.

  Резултати од истражувањето:

  • позитивен резултат укажува на присуство на алоантитела во тест серумот или плазмата (за да се одреди специфичноста на антителата, користете ја табелата прикачена на стандардните еритроцити);
  • негативен резултат укажува на отсуство на алоантитела во тест серумот или плазмата.
• Метод на ладна аглутинација [прикажи] .

  Напредок во дефиницијата:

  • инкубирајте Раствор за разредување 2, типизирани еритроцити и лични карти 30 минути на температура од 2-8°C;
  • третирајте ги типизираните еритроцити со раствор за разредување 2, за што:
    • означете ја епрувета;
    • подгответе 0,8% суспензија од типизирани еритроцити во разредувач 2 со ставање 1,0 ml од разредувачот 2 и 10 µl крв во епрувета.

  Забелешка: Стандардните ID-DiaCell RBC (DiaMed) се подготвени за употреба и не треба да се разредуваат;

  • додадете 50 µl суспензија од типизирани еритроцити третирани со раствор за разредување 2 во три епрувети од личната карта што се наоѓа на десната страна;
  • додадете 25 µl од тест серумот на овие епрувети;
  • инкубирајте 30 минути на температура од 2-8 C;
  • центрифугирајте ги личните карти во ИД-центрифугата 10 минути (параметрите се поставуваат автоматски);
  • оцени го резултатот од студијата;
  • внесете го резултатот во личната карта. Резултати од истражувањето:
  • позитивен резултат укажува на присуство на ладни антитела во тест серумот или плазмата (за да се одреди специфичноста на антителата, користете ја табелата прикачена на стандардните еритроцити);
  • негативен резултат укажува на отсуство на ладни антитела во тест серумот или плазмата.

  Во присуство на ладни или топли автоантитела во тест серумот, лажно позитивни резултати. За да ги исклучите, треба да поставите автоматска контрола:

  • Подгответе 0,8% суспензија на еритроцити за испитување на крвта во раствор за разредување 2 со додавање 10 µl полна крв на 1,0 ml раствор за разредување 2;
  • додадете 50 µl од подготвената суспензија на еритроцити во цевката со лична карта која се наоѓа лево (за реакцијата на Кумбс) или во цевката со лична карта која се наоѓа десно (за ензимски метод и ладна аглутинација);
  • додадете 25 µl од тест серумот во епруветите од личната карта (за ензимскиот метод потребно е да се додадат уште 25 µl раствор за разредување 1 во епруветите);
  • инкубирајте ги картичките 15 минути на +37°C (за реакцијата на Кумбс и ензимскиот метод) или на 2-8°C (за автоконтрола на ладна аглутинација).

  Позитивен резултат во автоконтролата укажува на присуство на автоантитела во тест серумот.

Утврдување на компатибилноста на крвта на донаторот и примателот

Целта на тестот за индивидуална компатибилносте да се спречи трансфузија на хемокомпоненти некомпатибилни со антигени на еритроцитите. Тестирањето на серумот на примачот со црвените крвни зрнца на наменетиот донор е најмногу сигурен начиноткривање на антитела кои можат да предизвикаат оштетување на трансфузираните еритроцити, посттрансфузиони реакции и компликации од хемолитички тип. Овој тест ви овозможува:

1. потврди ABO компатибилноста на донаторот и примателот;
2. откривање на антитела во серумот на примателот насочени против антигените на еритроцитите на донаторот.

Тестирање за индивидуална компатибилност на крвта на донаторот и примателот со антигени на еритроцитите (Табела 18.17 [прикажи] ) не го заменува задолжителното имунохематолошки преглед (типирање на еритроцитни антигени на системите ABO, Rhesus, Kell, детекција на антиеритроцитни антитела, пребарување и идентификација на алоанти-еритроцитни антитела), туку само го надополнува.

Поради фактот што сензибилизација може да се случи дури и по трансфузија на индивидуално избрани хемокомпоненти, за тестирање за компатибилност, неопходно е секој пат да се користи свеж серум за пациенти добиен по последната трансфузија на хемокомпоненти.

Мора да се направи тест за компатибилност за секој примерок од крв од дарител!

• Прогрес во дефиницијата [прикажи]
  • чувајте го разредувачот 2 додека не се постигне собна температура (20-24°C);
  • означете лични карти и епрувети (полно име на донаторот и примателот);
  • Подгответе 0,8% суспензија од еритроцитите од донорот и примачот во Растворот за разредување 2, за што додадете 1 ml раствор за разредување 2 во две означени епрувети, додадете 10 µl крв од донаторот и примателот, соодветно;
  • измешајте;
  • извадете ја заштитната фолија од соодветната лична карта;
  • додадете 50 µl од подготвената суспензија на донаторски еритроцити во микроцевки со лични карти 1, 2, 3, 4, 5;
  • додадете 50 µl од подготвената суспензија на примачот на еритроцитите во микроцевките со лични карти 4, 5, 6;
  • додадете 25 µl од серумот или плазмата на примачот во микроцевки со лични карти 1, 2, 3, 6;
  • додадете 25 µl разредувач 1 во микроцевката 4 со лична карта (ензимски тест);
  • инкубирајте 15 минути на температура од +37°C;
  • центрифуга (времето и брзината на центрифугирање се константни и се поставуваат автоматски);
  • оцени го резултатот од студијата. Компатибилност за антигени A, B, D (1, 2, 3 микроцевки):
  • јасен позитивен или негативен резултат укажува на кореспонденција на антигените A, B, O на крвните еритроцити на донаторот и примателот;
  • ако се забележи двојна популација на еритроцити (позитивен и негативен резултат во една микроцевка), антигените A, B, D на донаторот и примателот не се идентични!
  • определување на компатибилност за антигени A, B, D важи само со негативна реакција во 6-та микроцевка (автоконтрола).
• Резултати од тестот за компатибилност (4, 5 микроцевки) [прикажи]
  • Позитивен резултат во микроцевки од лични карти 4, 5 со негативна контрола (микроцевка 6) укажува на некомпатибилност на крвта на донаторот и примателот во однос на еритроцитните антигени;
  • Негативен резултат во микроцевките на лични карти 4, 5, 6 укажува на компатибилност на крвта на донаторот и примачот во однос на еритроцитните антигени;
  • позитивната реакција во ID-картичката 6 на микроцевката (автоконтрола) бара дополнително определување на авто- и алоантитела во серумот (плазмата) на примачот.
• Ограничувања [прикажи]
  • одредени лековиможе да предизвика лажно позитивна реакцијаКумбс;
  • со некои патолошки состојбипациентите може да имаат позитивна Coombs реакција;
  • бактериска или друга контаминација на употребениот материјал може да предизвика лажно позитивен или лажно негативен резултат;
  • остатоците од фибрин во примероците за тестирање можат да ги врзат неаглутинираните клетки и, по центрифугирањето, да формираат тенка розова линија на површината на гелот, додека повеќето клетки ќе бидат локализирани на дното на микроцевката;
  • суспензии на црвените крвни зрнца кои се претерано концентрирани може да предизвикаат лажно позитивни реакции.
• Услови за чување и работа [прикажи]

  DiaMed ID-картичките треба да се чуваат на собна температура (+18-25°C) на суво место во текот на целиот рок на траење.

  Картичките важат 18 месеци. Рок на траење на реагенсите е 2 години.

  Резултатите од студијата на картата се зачувани непроменети:

  • 48 часа на собна температура;
  • три недели во фрижидер (на +2-8°C) со горниот дел од личната карта затворен со селотејп.

  Долното поле на личната карта може да се излупи или отсече и да се користи како документ во медицинска историја или во кабинетот со датотеки.

  Не е дозволено користење лични карти со знаци на сушење на гелот, меурчиња во неговата дебелина или оштетување на заштитната фолија.

  Мострите и реагенсите мора да се доведат на собна температура пред употреба.

Заклучок

Тестот со гел е едноставен, репродуктивен, брз и многу чувствителен метод кој овозможува итно откривање на слаби варијанти на еритроцитни антигени. Тестот се оценува само макроскопски. По кратка обука на персоналот кој се бара да правилно извршувањетест, го минимизира времето поминато и грешките што се среќаваат при користење на традиционални методи.

Тестот за гел ви овозможува да ги стандардизирате лабораториските методи, да дадете објективна проценка на резултатите од реакцијата на хемаглутинација. Стабилноста на резултатите од тестот ви овозможува двојно да ги проверите добиените податоци, кои се неопходни за контрола. Резултатите од тестот може да се фотокопираат за архивирање или за едукативни цели во тешки случаи за дијагностицирање. Тестот користи мала количина на серум или црвени крвни зрнца, што е исклучително важно за детските клиники.

Употребата на системот за гел го намалува ризикот од инфекција на персоналот дури и кога се ракува со потенцијално инфицирани примероци. Тестот со гел може да се користи за тестирање на компатибилноста на еритроцитниот антиген пред трансфузија на крв. За ова се користи индиректен антиглобулин тест и ензимски метод во еден чекор.

Тестот со гел се врши и оценува според горенаведените правила. Отсуството на чекори за миење на еритроцитите при изведување на индиректен антиглобулински тест овозможува поефикасна употреба работно време, а исто така и поради стабилноста на резултатите од тестот да се контролираат сите добиени резултати.

Извор: Медицински лабораториска дијагностика, програми и алгоритми. Ед. проф. Карпишченко А.И., Санкт Петербург, Интермедика, 2001 година