Фактори на коагулација на плазмата. Фактори кои влијаат на коагулацијата

ФАКТОРИ ЗА КОАГУЛАЦИЈА НА КРВТА

Москва, 2009 година

2 Составен од:

извршен директорНПО „РЕНАМ“, доктор по биолошки науки Козлов Алберт Анатолиевич

главата производство на НПО „РЕНАМ“, виш истражувач, кандидат за биолошки науки Берковски Арон Леонидович

Раководител на QCD НПО „РЕНАМ“, виш истражувач, кандидат за биолошки науки Качалова Наталија Дмитриевна

истражувач на НПО „РЕНАМ“ Сергеева Елена Владимировна

Водечки истражувач на Државниот научен центар на Руската академија на медицински науки, кандидат за биолошки науки Простакова Татјана Михајловна

ВОВЕД _________________________________________________ 4

Таб. 1. Фактори на коагулација на крв ________________________________________________ 4

Фактор I. Фибриноген________________________________________________ 7

Фактор I. Протромбин -________________________________________________ 7

Фактор III - ткивен тромбопластин _________________________________ 9

Фактор IV - јони на калциум ________________________________________________ 9

Фактор V________________________________________________________________ 9

ТЕСТ СИСТЕМИ НА ФИРМАТА „РЕНАМ“ _____________________________________ 15

ФИБРИНОГЕН__________________________________________ 19

ОПРЕДЕЛУВАЊЕ НА АКТИВНОСТ НА VIII ФАКТОР НА КОАГУЛАЦИЈА НА КРВТА _________________________________________________ 21

ОПРЕДЕЛУВАЊЕ НА АКТИВНОСТА НА IX ФАКТОР НА КОАГУЛАЦИЈА НА КРВТА _______________________________________ 22

ФАКТОР НА ФИБРИНСТАБИЛИЗИРАЊЕ XIII_______________________________________ 22

ПРОТРОМБИНСКО ВРЕМЕ________________________________________________ 23

АКТИВИРАНО ПАРЦИЈАЛНО ВРЕМЕ НА ТРОМБОПЛАСТИН (АПТТ)________________________________________________ 24

фон Вилебранд фактор 25

ReaPrC/FV тест Комплет со реагенс за тестирање на отпор
активиран фактор V до протеин Ц ______________________________________ 26

ЛИТЕРАТУРА________________________________________ 28

ВОВЕД

Системот за хемостаза има неколку суштински функции: чувајте течност

состојбата на крвта што циркулира во садовите; престанок на крварење на местото на оштетување на садот и запирање на загубата на крв со формирање на фибрински приклучок; распуштање на овој приклучок по обновувањето на интегритетот на садот. Учество во овој процес крвни садови, тромбоцити, фактори на коагулација на плазмата, инхибитори на факторот на коагулација, систем за фибринолиза.

Како одговор на штетното дејство, спазам на микросадови, активирање на ендотелните клетки, активирање на тромбоцитите, секреција од овие клетки на биолошки активни супстанции, адхезија и агрегација на тромбоцити, формирање на тромбоцитни приклучоци. Во исто време, плазма ензимските системи се вклучени во процесот, активирајќи се меѓусебно слични на лавина и обезбедувајќи формирање на згрутчување на фибрин што го спречува губењето на крв и негово последователно лизирање кога таквата опасност исчезнува. Антикоагулантните системи на антитромбин III, протеинот Ц и голем број други протеини фино го регулираат механизмот на коагулација и фибринолиза, ограничувајќи го формирањето на згрутчување на местото на повредата и спречувајќи го процесот на коагулација да стане системски.

Факторите на системот за коагулација се синтетизираат главно во хепатоцитите на црниот дроб и постојано циркулираат во крвната плазма во неактивна форма на проензими, а за нивно активирање е потребен штетен ефект.

Факторите се означени со римски бројки; за да се разликува активираниот ензим од неактивираниот, на бројот се додава буквата „а“ (види Табела 1).

Таб. I. Фактори на згрутчување на крвта

Коагулационите ензими се серински протеази кои меѓусебно се активираат. Во исто време, факторите како што се II, VII, IX, X (како и протеините Ц и 3) се зависни од витамин К. Ова значи дека овие глукопротеини содржат остатоци од глутаминска киселина, кои, кога се активираат, подлежат на y-карбоксилација под дејство на витамин К. Ова формира нова y-глутаминска киселина, кој игра суштинска улога во процесот на ензимско врзување за фосфолипидите. Во отсуство на витамин К, се формираат и овие ензими, но тие се функционално неисправни (ПИВКА). Употребата на антикоагуланси се заснова на ова својство на витаминот К. индиректно дејство(варфарин, итн.).

Факторот IX е уште еден крвен фактор чиј недостаток е поврзан со хемофилија. тоа наследна болестПознато е уште од античко време, иако првпат професионално е опишан дури во 1803 година од германскиот лекар J.C. Otto, а самото име „хемофилија“ го предложил Ф. Хопф во 1828 година.

Фактор IX или антихемофилен фактор Б е гликопротеин во крвната плазма зависен од витамин К. се синтетизира во црниот дроб, од таму влегува во крвотокот. Недоволната активност во крвта на овој фактор се одредува генетски и е предизвикана или од нејзиниот целосно отсуство, или генска мутација, што доведува до нејзина инфериорност, што предизвикува појава на хемофилија Б. Второто име на оваа болест е Божиќна болест.

Норма на фактор IX во крвта. Толкување на резултатите (табела)

Симптомите на хемофилија Б не се разликуваат од оние што се појавуваат кај хемофилија А. Сепак, Божиќната болест бара фундаментално различен пристап кон лекувањето. Затоа е толку важно правилна дијагноза. Тест на крвта за фактор IX обично се нарачува заедно со тест за фактор VIII за да се разбере каков тип на хемофилија има пациентот. Како и во случајот со хемофилија А, хемофилија Б исто така се пренесува преку Х-хромозомот преку женската линија.

Се зема крв од вена, наутро, на празен стомак.

Норма на фактор IX во крвта обичните луѓеи бремени жени:

Ако факторот IX е покачен, што значи тоа?

Нема податок.

Ако факторот IX е намален, што значи тоа?

Вроден недостаток на фактор IX доведува до развој на хемофилија Б или Critmas болест. Се карактеризира со појава на различни видови на крварење, надворешно и внатрешно, хеморагии во ткивата, зглобовите, абдоминална празнинаи на органите лоцирани овде, стомачно крварење. Во случај на формирање на големи хематоми, ова може да доведе до стегање на нервите и крвните садови. Оваа ситуација е крајно опасна од гледна точка дека хематом може да го прекине снабдувањето со крв до виталното важни органи, предизвикуваат парализа или доведуваат до развој на ткивна некроза, на пример, цревата. Мозочното крварење може да предизвика мозочен удар.

Хемофилија Б има три степени на сериозност. Блага форма - активноста на фактор IX е намалена на 24-6%, умерена - до 5-2%, тешка - до 2-1%, исклучително тешка - кога активноста на факторот IX е 1% или помалку.

Ако активноста на факторот IX се намали на 15%, станува невозможно да се запре крварењето за време на повреда. Во овие случаи, факторот IX треба дополнително да се администрира.

Ако стапката на фактор IX во крвта е помала, тогаш недостатокот може да се стекне. Ова се случува кога разни болестицрниот дроб, кога веќе не може доволно да го синтетизира овој фактор, со нефротски синдром и со Гошеова болест, една од прилично честите вродени лизозомални заболувања.

Референтните вредности на активноста на факторот IX во крвната плазма се 60-140%.

Фактор К (Божиќен фактор, антихемофилен глобулин Б) се однесува на p-глобулини, зема активно учество во првата фаза на плазма хемостаза. Фактор IX се произведува во црниот дроб. Поради тоа, неговата содржина во крвта на пациентите со хепатитис, цироза на црниот дроб, како и оние кои земаат деривати на дикумарин и индандиол е намалена. Производството на фактор IX е регулирано со ген кој се наоѓа на Х-хромозомот, на локус оддалечен од генот за клучниот синтеза ензим. фактор VIII. Овој ген мутира 7-10 пати поретко од ензимскиот ген за синтеза на фактор VIII. Како резултат на тоа, хемофилија А е забележана многу почесто (87-94% од сите пациенти со хемофилија) отколку хемофилија Б (вроден недостаток на фактор IX - Божиќна болест) (8-15% од пациентите).

Фактор IX не се конзумира за време на згрутчување на крвта.

Дефиниција на фактор IX игра суштинска улогаво дијагнозата на хемофилија Б. Дефицитот на фактор IX е поврзан со повеќето крварења кај акутни заболувањацрниот дроб.

Во зависност од нивото на фактор IX се делат следните клинички формихемофилија Б: исклучително тешка - концентрација на фактор IX до 1%; тешка форма - 1-2%; умерено - 2-5%; блага форма(субхемофилија) - 6-24%. Кај пациентите блага формаклиничките манифестации на болеста се јавуваат по траума и хируршки интервенции. Одредени потешкотии се предизвикани од дефиницијата на групата „носители“ на хемофилија Б. Оваа група може да вклучува жени кои, во повторените студии, откриле содржина на фактор IX под 40%, но над 24%.

Минималното хемостатско ниво на активност на фактор IX во крвта за операции е 20-25%, со помала активност, ризикот од постоперативно крварење е исклучително висок. Минималното хемостатско ниво на фактор IX во крвта за да се запре крварењето е 10-15%, со помала содржина, запирање на крварење без давање на фактор IX на пациентот е невозможно.

нормална крвнеговата вискозност практично не се разликува од водата. Тоа е оваа состојба на важна компонента за да може да ја изврши својата главна функција - пренос на органи и ткива хранливи материи, кислород, елементи во трагови. Кога се оштетени васкуларен ѕидили присуство на ткивен тромбопластин во крвотокот, се активира механизмот на зголемено згрутчување на крвта, почнуваат да се формираат згрутчување на крвта. Слабото згрутчување на крвта кај возрасен и дете е многу поретко. Често ситуацијата се должи на различни патолошки состојбикои претставуваат опасност за човечкиот живот.

Нормално згрутчување на крвта кај дете

Згрутчувањето на крвта кај децата е малку поинакво од она кај возрасните. Ова се должи на нормалното физиолошки процесисозревање на телото. Со цел да се утврди состојбата на системот за хемостаза и ризикот продолжено крварење, се пропишуваат тестови - коагулограм, INR и други. Тие ви овозможуваат да ги одредите индикаторите како време на згрутчување, количината на фибриноген, тромбоцити, за да ги идентификувате нарушувањата на коагулацијата на крвта кај децата.

Главните критериуми на системот за хемостаза кај децата, нивната норма и толкување.

1. Протромбинското време ви овозможува да воспоставите патологии како што се хемофилија или ДИК. Нормата за деца е 11-17 секунди.
2. Време на тромбин - 14-21 секунди. Резултатите може малку да се разликуваат при одредување на индикаторот во различни лаборатории.
3. Времето на згрутчување е времето потребно за формирање на згрутчување на крвта. Нормата е 2-5 минути.
4. Време на крварење - 2-4 минути.
5. Фибриноген кај деца 1-3 грама. Ви овозможува да ги одредите функционалните перформанси на системот за хемостаза.
6. протромбински индекс.
7. Антитромбин-3 е регулатор на коагулацијата на крвта.

Карактеристики на коагулација кај новороденчиња

Кај новороденчињата, како и кај бебе или новороденче, нормалните вредности на сите униформни елементи се малку различни од оние за возрасните. На пример, хемоглобинот може да достигне 160-220 g / l, а еритроцитите 5-7x10 12 / l. Сепак, тие имаат малку поинаква форма и големина. Бројот на ретикулоцити расте до 40%, а леукоцитите до 10-20x10 9 /l. Постои промена во формулата кон миелоцитите. Слични промени понекогаш се забележуваат и за време на бременоста, бидејќи женско телосе подготвува за можна загуба на крв, иако анемијата е почеста.

Во првата година од животот, сите параметри на крвта имаат тенденција да се нормализираат, хемоглобинот се намалува на 120-140 g / l, еритроцитите исто така паѓаат, нивната форма и големина се стабилизираат. Бројот на сите формирани елементи се намалува и останува малку покачен, формула за леукоцитипокажува лимфоцитоза и моноцитоза. Тромбоцитите се на ниво од 200-300x10 9 /l.

Причини за отстапување од нормата

Главните причини за лошо згрутчување на крвта кај децата лежат во патолошки процеси. Огромното мнозинство од нив се наследни, на второ место се автоимуни болести, лезии на хепато-билијарниот систем. Откако лекарот ќе ја открие причината, веднаш треба да се започне со третман.

Намалено згрутчување

Намалени или ниска активностсистем за коагулација на крв се јавува во следните патологии.

1. Хемофилија. Оваа болест зазема водечка позиција во намалувањето на ефикасноста на хемостазата. Тоа е предизвикано од недостаток на 8, 9, 11 крвни фактори кои се одговорни за згрутчување. Резултатот од ова е намалување на сите точки на коагулограмот. Патологијата е наследна, влијае главно мажи.
2. Вилебрандова болест. Некои лекари ја нарекуваат патологијата псевдохемофилија. Помалку е опасна болест, додека подеднакво често ги погодува двата пола. Се карактеризира со крварење од носот, крварење од непцата, девојчињата може да доживеат крварење на матката.
3. тромбоцитопенија. Предизвикувачкиот фактор е алергискиот процес како одговор на антиинфламаторната терапија, хемотерапијата. Третманот на болеста е возможен не само врз основа на хематолошкиот оддел, туку и во алерголошката болница.
4. Предозирање лекови. Еден од повеќето заеднички причиниповреди на системот за хемостаза. Лековите како парацетамол или лекови кои содржат аспирин играат улога овде. Има намалување на нивото на тромбоцити, еритроцити. Состојбата се манифестира со поткожни хеморагии, крвавење на органи гастроинтестиналниот тракт. Доколку не престанете да ги земате овие лекови, можни се хеморагии во мозокот, до смрт.
5. Дисфункција на црниот дроб. Тие доведуваат до болести како што се хепатитис, цироза, која се јавува не само кај возрасните. Намалено производство на фактори на коагулација на црниот дроб.
6. DIC се смета за исклучително опасна состојба. Со него се намалува влијанието на сите фактори на коагулација на крвта, понекогаш целосно отсуствува. Оваа патологија се развива во позадина на тешка инфективни процеси, крварење, хируршки интервенции, изгореници или трауматска повреда.

Зголемено згрутчување

Зголемено згрутчување на крвта кај децата е наследна патологија. Почесто од другите, тромбозата се јавува кај следните патологии.

1. Антифосфолипиден синдром. Крвта на децата содржи таканаречени антифосфолипидни антитела. Клинички манифестациипатологиите одговараат на тромбоемболи. Женките страдаат од неплодност поради фактот што не можат да носат дете.
2. Група тробофилија. Тие вклучуваат болести како што се факторот Лајден, недостаток на протеини Ц, С, антитромбин. Патологиите на оваа група, исто така, вклучуваат вишок на фактори 8, 11, липопротеини и хиперхомоцистеинемија. Забележани се и мутации на протромбин. Сите горенаведени тромбофилни процеси доведуваат до развој на тромбоза. Важно е да се напомене дека во детствототромбозата е ретка, крварењето е многу почесто. За појава на тромботични патологии неопходни се одредени состојби - тешки патологии, тешка физичка неактивност или одмор во кревет, редовни пункции на вените.
3. Малигни неоплазми.
4. Болести на вените.

Со смртта на најблиските од тромботични процеси, постои голема веројатност детето да наследи мутирани или патолошки гени.

Какви тестови се прават на детето за да се открие патологија

Медицински работнициразви импресивна листа на тестови кои треба да се направат со слаба коагулација. Сите тие се препишуваат по консултација со лекар. Се верува дека главната студија е тест на крвта за способноста да се формираат згрутчување на крвта, што се нарекува коагулограм. Вклучува многу индикатори, но лекарите го земаат предвид времетраењето и времето на згрутчување на крвта, нивото на тромбоцити, INR. Протромбин, тромбин, фибриноген се исто така важен дел од анализата.

Интерпретација на резултатите и нивното клиничко значење

Броењето на тромбоцитите е најлесната манипулација. Нормата за новороденчиња е 100-400x10 9 / l, но со текот на времето, границите на нормата се стеснуваат и се намалуваат. До една година -150-350x10 9 / l, по една година нормата е иста како кај возрасните - 180-360x10 9 / l.

Со намалување под нормата, забележуваат лекарите висок ризиккрварење, а со изразено намалување, крајно е тешко да се запре крварењето без интравенска инфузијатромбоцитна маса.

Времето на згрутчување исто така се смета за доволно информативен метод. Нормално, времетраењето на крварењето е 2-4 минути, а времето за формирање на згрутчување е 2-5 минути. Ако добиените резултати не се вклопуваат во рамката наведена од лабораториите, тогаш лекарот мора да назначи дополнително испитувањеда ги дознае причините за ваквата состојба.

Протромбинското време и протромбинскиот индекс му даваат на лекарот информации за раните фазифункционирање на системот за хемостаза. Спроведувањето на овие тестови помага да се открие DIC или хемофилија. Нормални вредностиза сите возрасни групиво просек флуктуираат помеѓу 11 и 15 секунди.

Воведен за прв пат

вистински монографијасе однесува на препарати со фактор IX за коагулација на човечка крв добиени од човечка плазма за фракционирање.

Факторот на коагулација на човечка крв IX е препарат од протеинска фракција на човечка крв добиена од плазма за фракционирање со метод што ефикасно го одвојува факторот IX од другите фактори на протромбинскиот комплекс (II, VII, X).

Активноста на лекот по реконституцијата под условите наведени на етикетата мора да биде најмалку 20 IU фактор IX во 1 ml.

ПРОИЗВОДСТВО

За производство на препарати за коагулационен фактор IX на хумана крв, се користи крвна плазма на здрави дарители која ги исполнува условите.

Технологијата на производство ги вклучува фазите на отстранување или деактивирање инфективни агенси. Доколку во производството се користат хемиски соединенија за да се инактивираат вирусите, нивната концентрација треба да се намали на ниво што нема да влијае на безбедноста на лекот за пациентите.

Лекот може да содржи стабилизатори (албумин, антитромбин III, полисорбат-80, натриум хлорид, натриум цитрат, глицин, итн.). Специфичната активност (најмалку 50 IU/mg вкупен протеин) се одредува пред да се додаде кој било протеин за стабилизирање.

Не се користат антимикробни конзерванси во процесот на производство. Растворот на лекот е асептички пакуван во примарно пакување со стерилизирање на филтрација, лиофилизиран и затворен под вакуум или во атмосфера на инертен гас.

ТЕСТОВИ

Опис

Бел или бледо жолт прав или меки цврст (ако нормативна документацијанема други упатства). Определувањето се врши визуелно.

Автентичност

специфичност на видот

Потврдете со присуство на само човечки серумски протеини. Тестот се спроведува со гел имуноелектрофореза користејќи серуми против човечки серумски протеини, големи говеда, коњи и свињи според . Дозволено е да се спроведе тест за имунодифузија на гел во согласност со. Како резултат на тестот, треба да се откријат линии на таложење само со серум против човечки серумски протеини.

Фактор IX

Потврдете со присуство на активност на фактор IX. Определувањето се врши со коагулометриска или хромогена метода во согласност со.

Време е да се прими реконституиран лек

Не повеќе од 10 минути (ако нема други индикации во регулаторната документација). Даден е опис на постапката, означувајќи го употребениот растворувач, неговиот волумен и условите на растворање (температура на растворувачот, потреба за мешање итн.).

Вода

Не повеќе од 2%. Определувањето се врши со методот K. Fischer во согласност со (ако нема други упатства во регулаторната документација). Начинот на определување и количината на мостра потребна за тестирање се наведени во регулаторната документација.

Механички подмножества

Треба да отсуствуваат видливи механички подмножества. Утврдувањето се врши во согласност со. Регулаторната документација го означува името на растворувачот, го опишува начинот на обновување и (доколку е потребно) подготовка на лекот.

pH вредност

Од 6,5 до 7,5. Определувањето се врши со потенциометриски метод во согласност со.

Осмоларност

Не помалку од 240 mOsm/kg. Утврдувањето се врши во согласност со.

Протеини

Квантитативната содржина на протеини по вијала или ml од реконституираниот раствор е наведена во регулаторната документација. Дефиницијата е спроведена соодветен методво согласност со .

активност на факторот на коагулацијаIX

Активноста на факторот на коагулација на крвта IX по вијала или ml од реконституираниот раствор е наведена во регулаторната документација. Определувањето се врши со хромогена или коагулометриска метода во согласност со.

Активирани фактори на коагулација

Времето на згрутчување на разредувањето на лекот 1:10 и 1:100 треба да биде најмалку 150 секунди. Определувањето се врши со коагулометриска метода во согласност со.

Стабилизатор(и)

Квантитативното определување на стабилизатор(ите) внесени во препаратот се врши во согласност со и/или, доколку нема други индикации во регулаторната документација.

Дозволената граница на содржината на стабилизаторот(ите) мора да биде наведена во регулаторната документација.

Средства за активирање на вируси

Направете квантитативно определување на резидуалната содржина на агенсот(ите) за инактивирање на вирусот во препаратот во согласност со и/или, доколку нема други индикации во регулаторната документација. Дозволената граница за содржината на агенсот(ите) што го инактивираат вирусот треба да се наведе во регулаторната документација.

Стерилност

Лекот мора да биде стерилен. Тестот се спроведува во согласност со.

Пирогеност или бактериски ендотоксини

Мора да биде без пироген или да содржи бактериски ендотоксини во количина што не надминува 0,03 ЕУ на 1 IU фактор IX за коагулација на крвта.

Тестот се спроведува во согласност со (најмалку 50 IU фактор на коагулација на крв IX на 1 kg животинска тежина) или во согласност со методот наведен во регулаторната документација.

Безбедност од вируси

површински антиген за хепатитис Б (HBsAg)

Лекот не смее да содржи површински антигенвирус на хепатитис Б. Утврдувањето се врши ензимска имуноанализакористење на тест системи одобрени за употреба во здравствената пракса во Русија и имаат чувствителност од најмалку 0,1 IU / ml во согласност со упатствата за употреба.

Антитела на вирусот на хепатитис Ц

Треба да отсуствуваат антитела на вирусот на хепатитис Ц. Определувањето се врши со ензимска имуноанализа со помош на тест системи одобрени за употреба во руската здравствена пракса и имаат 100% чувствителност и специфичност во согласност со упатствата за употреба.

Антитела на вирусот на хумана имунодефициенција (ХИВ-1 и ХИВ-2)и ХИВ-1 p24 антиген

Лекот не треба да содржи антитела на вирусот на хумана имунодефициенција (ХИВ-1 и ХИВ-2) и ХИВ-1 p24 антигенот. Определувањето се врши со ензимска имуноанализа со помош на тест системи одобрени за употреба во руската здравствена пракса и имаат 100% чувствителност и специфичност во согласност со упатствата за употреба.

Пакети етикетирање

Во согласност со OFS " Лековиод човечката крвна плазма.

X рана

Да се ​​чува на место заштитено од светлина на температура од 2 до 8 ° C, освен ако не е поинаку наведено во регулаторната документација.