Plasmakoagulationsfaktorer. Faktorer, der påvirker koagulation

BLODKOAGULATIONSFAKTORER

Moskva, 2009

2 Udarbejdet af:

direktør NPO "RENAM", doktor i biologiske videnskaber Kozlov Albert Anatolievich

hoved produktion af NPO "RENAM", seniorforsker, kandidat for biologiske videnskaber Berkovsky Aron Leonidovich

Leder af QCD NPO "RENAM", seniorforsker, kandidat for biologiske videnskaber Kachalova Natalya Dmitrievna

forsker i NPO "RENAM" Sergeeva Elena Vladimirovna

Førende forsker ved Statens Videnskabelige Center for Det Russiske Akademi for Medicinske Videnskaber, kandidat for biologiske videnskaber Prostakova Tatyana Mikhailovna

INTRODUKTION _________________________________________________ 4

Tab. 1. Blodkoagulationsfaktorer __________________________________________ 4

Faktor I. Fibrinogen________________________________________________ 7

Faktor I. Protrombin -_______________________________________________________ 7

Faktor III - vævstromboplastin __________________________________ 9

Faktor IV - calciumioner ______________________________________________ 9

Faktor V_______________________________________________________________________ 9

TESTSYSTEMER FOR VIRKSOMHEDEN "RENAM" _________________________________________________ 15

FIBRINOGEN____________________________________________ 19

BESTEMMELSE AF AKTIVITETEN AF VIII BLODKOAGULATIONSFAKTOREN _______________________________________________________ 21

BESTEMMELSE AF AKTIVITETEN AF IX BLODKOAGULATIONSFAKTOREN _________________________________________________ 22

FIBRINSTABILISERENDE FAKTOR XIII_________________________________________________ 22

PROTHROMBIN TID____________________________________________ 23

AKTIVERET DELVIS THROMBOPLASTIN TID (APTT)____________________________________________ 24

von Willebrand faktor 25

ReaPrC/FV test Reagenssæt til resistenstestning
aktiveret faktor V til protein C ______________________________________ 26

LITTERATUR________________________________________ 28

INTRODUKTION

Hæmostasesystemet har flere væsentlige funktioner: hold væske

tilstanden af ​​blodet, der cirkulerer i karrene; ophør af blødning på stedet for skade på karret og stop af blodtab ved dannelse af en fibrinprop; opløsning af denne prop efter genoprettelse af fartøjets integritet. At deltage i denne proces blodårer, blodplader, plasmakoagulationsfaktorer, koagulationsfaktorhæmmere, fibrinolysesystem.

Som reaktion på den skadelige virkning, spasmer af mikrokar, aktivering af endotelceller, aktivering af blodplader, sekretion fra disse celler af biologisk aktive stoffer, vedhæftning og aggregering af blodplader, dannelse af blodpladepropper. Samtidig indgår plasmaenzymsystemer i processen, som lavinelignende aktiverer hinanden og sikrer dannelsen af ​​en fibrinprop, der forhindrer blodtab, og dens efterfølgende lysering, når en sådan fare forsvinder. De antikoagulerende systemer af antithrombin III, protein C og en række andre proteiner finregulerer koagulations- og fibrinolysemekanismen, hvilket begrænser koagulering til skadestedet og forhindrer koagulationsprocessen i at blive systemisk.

Koagulationssystemets faktorer syntetiseres hovedsageligt i leverens hepatocytter og cirkulerer konstant i blodplasmaet i den inaktive form af proenzymer, og der kræves en skadelig virkning for deres aktivering.

Faktorerne er angivet med romertal; for at skelne det aktiverede enzym fra det ikke-aktiverede, tilføjes bogstavet "a" til tallet (se tabel 1).

Tab. I. Blodkoagulationsfaktorer

Koagulationsenzymer er serinproteaser, der gensidigt aktiverer hinanden. Samtidig er faktorer som II, VII, IX, X (samt proteinerne C og 3) vitamin K-afhængige. Det betyder, at disse glucoproteiner indeholder glutaminsyrerester, som ved aktivering undergår y-carboxylering under påvirkning af vitamin K. Dette danner en ny y-glutaminsyre, som spiller en væsentlig rolle i processen med enzymbinding til fosfolipider. I mangel af vitamin K dannes disse enzymer også, men de er funktionelt defekte (PIVKA). Brugen af ​​antikoagulantia er baseret på denne egenskab af vitamin K. indirekte handling(warfarin osv.).

Faktor IX er en anden blodfaktor, hvis mangel er forbundet med hæmofili. Det her arvelig sygdom Det har været kendt siden oldtiden, selvom det først blev professionelt beskrevet i 1803 af den tyske læge J.C. Otto, og selve navnet "hæmofili" blev foreslået af F. Hoppf i 1828.

Faktor IX eller antihæmofil faktor B er et blodplasmaglykoprotein, der er afhængig af vitamin K. Det syntetiseret i leveren, derfra kommer det ind i blodbanen. Utilstrækkelig aktivitet i blodet af denne faktor bestemmes genetisk og er enten forårsaget af dens totalt fravær, eller genmutation, hvilket fører til dets underlegenhed, hvilket forårsager forekomsten af ​​hæmofili B. Det andet navn på denne sygdom er julesygdom.

Norm for faktor IX i blodet. Resultatfortolkning (tabel)

Symptomerne på hæmofili B er ikke anderledes end dem, der optræder med hæmofili A. Julesygdommen kræver dog en fundamentalt anderledes tilgang til behandling. Derfor er det så vigtigt korrekt diagnose. En faktor IX-blodprøve bestilles normalt sammen med en faktor VIII-test for at forstå, hvilken type hæmofili en patient har. Som i tilfældet med hæmofili A overføres hæmofili B også gennem X-kromosomet gennem kvindelinjen.

Blod tages fra en vene om morgenen på tom mave.

Normen for faktor IX i blodet almindelige mennesker og gravide kvinder:

Hvis faktor IX er forhøjet, hvad betyder det?

Ingen data.

Hvis faktor IX er nede, hvad betyder det så?

Medfødt mangel på faktor IX fører til udvikling af hæmofili B eller Critmas sygdom. Det er karakteriseret ved forekomsten af ​​forskellige former for blødninger, både eksterne og interne, blødninger i væv, led, bughulen og til de organer, der er placeret her, maveblødning. I tilfælde af dannelse af store hæmatomer kan dette føre til sammenklemning af nerver og blodkar. Denne situation er ekstremt farlig ud fra det synspunkt, at et hæmatom kan afbryde blodforsyningen til det vitale vigtige organer, forårsage lammelse eller føre til udvikling af vævsnekrose, for eksempel tarmene. Cerebral blødning kan forårsage et slagtilfælde.

Hæmofili B har tre sværhedsgrader. Mild form - faktor IX-aktivitet reduceres til 24-6%, moderat - op til 5-2%, svær - op til 2-1%, ekstremt alvorlig - når faktor IX-aktivitet er 1% eller mindre.

Hvis aktiviteten af ​​faktor IX reduceres til 15 %, bliver det umuligt at stoppe blødningen under en skade. I disse tilfælde skal faktor IX administreres yderligere.

Hvis hastigheden af ​​faktor IX i blodet er lavere, kan manglen være erhvervet. Dette sker når forskellige sygdomme leveren, når den ikke længere kan syntetisere denne faktor tilstrækkeligt, med nefrotisk syndrom og med Gauchers sygdom, en af ​​de ret almindelige medfødte lysosomale sygdomme.

Referenceværdier for faktor IX-aktivitet i blodplasma er 60-140%.

Faktor K (julefaktor, antihæmofil globulin B) refererer til p-globuliner, tager en aktiv del i den første fase af plasmahæmostase. Faktor IX produceres i leveren. Derfor reduceres dets indhold i blodet hos patienter med hepatitis, levercirrhose, såvel som dem, der tager derivater af dicoumarin og indandiol. Produktionen af ​​faktor IX reguleres af et gen placeret på X-kromosomet, på et sted fjernt fra genet for nøglesynteseenzymet. faktor VIII. Dette gen muterer 7-10 gange sjældnere end faktor VIII-synteseenzymgenet. Som følge heraf observeres hæmofili A meget oftere (87-94% af alle patienter med hæmofili) end hæmofili B (medfødt faktor IX-mangel - julesygdom) (8-15% af patienterne).

Faktor IX indtages ikke under blodkoagulation.

Faktor IX definition spiller væsentlig rolle ved diagnosticering af hæmofili B. Faktor IX-mangel er forbundet med de fleste blødninger i akutte sygdomme lever.

Afhængigt af niveauet af faktor IX er følgende opdelt kliniske former hæmofili B: ekstremt alvorlig - koncentration af faktor IX op til 1%; svær form - 1-2%; moderat - 2-5%; mild form(subhæmofili) - 6-24%. Hos patienter mild form kliniske manifestationer af sygdommen opstår efter traumer og kirurgiske indgreb. Visse vanskeligheder er forårsaget af definitionen af ​​gruppen af ​​"bærere" af hæmofili B. Denne gruppe kan omfatte kvinder, som i gentagne undersøgelser har afsløret indholdet af faktor IX under 40 %, men over 24 %.

Det minimale hæmostatiske niveau af faktor IX-aktivitet i blodet til operationer er 20-25%, med en lavere aktivitet er risikoen for postoperativ blødning ekstrem høj. Det mindste hæmostatiske niveau af faktor IX i blodet for at stoppe blødning er 10-15 %, med et lavere indhold er det umuligt at stoppe blødning uden at administrere faktor IX til patienten.

normalt blod dens viskositet adskiller sig praktisk talt ikke fra vand. Det er denne tilstand af en vigtig komponent, for at den kan udføre sin hovedfunktion - overførsel til organer og væv næringsstoffer, ilt, sporstoffer. Når beskadiget karvæg eller tilstedeværelsen af ​​vævstromboplastin i blodbanen, mekanismen for øget blodkoagulation udløses, blodpropper begynder at dannes. Dårlig blodpropper hos en voksen og et barn er meget sjældnere. Ofte skyldes situationen div patologiske tilstande som udgør en fare for menneskeliv.

Normal blodpropper hos et barn

Blodpropper hos børn er noget anderledes end hos voksne. Dette skyldes alm fysiologiske processer kropsmodning. For at bestemme tilstanden af ​​hæmostasesystemet og risikoen langvarig blødning, test er ordineret - koagulogram, INR og andre. De giver dig mulighed for at bestemme sådanne indikatorer som koagulationstid, mængden af ​​fibrinogen, blodplader, for at identificere blodkoagulationsforstyrrelser hos børn.

De vigtigste kriterier for hæmostasesystemet hos børn, deres norm og fortolkning.

1. Protrombintid giver dig mulighed for at etablere patologier som hæmofili eller DIC. Normen for børn er 11-17 sekunder.
2. Trombintid - 14-21 sekunder. Resultaterne kan variere lidt ved bestemmelse af indikatoren i forskellige laboratorier.
3. Koagulationstid er den tid, det tager for en blodprop at dannes. Normen er 2-5 minutter.
4. Blødningstid - 2-4 minutter.
5. Fibrinogen hos børn 1-3 gram. Giver dig mulighed for at bestemme hæmostasesystemets funktionelle ydeevne.
6. protrombin indeks.
7. Antithrombin-3 er en regulator af blodkoagulation.

Funktioner af koagulation hos nyfødte

Hos nyfødte såvel som hos en baby eller et spædbarn er de normale værdier for alle ensartede elementer noget anderledes end for voksne. For eksempel kan hæmoglobin nå 160-220 g / l, og erytrocytter 5-7x10 12 / l. De har dog en lidt anden form og størrelse. Antallet af retikulocytter vokser op til 40%, og leukocytter op til 10-20x10 9 /l. Der er et skift i formlen mod myelocytter. Lignende ændringer er nogle gange noteret under graviditeten, fordi kvindekrop forbereder sig på muligt blodtab, selvom anæmi er mere almindelig.

I det første år af livet har alle blodparametre tendens til at være normale, hæmoglobin falder til 120-140 g / l, erytrocytter falder også, deres form og størrelse stabiliseres. Antallet af alle dannede elementer falder og forbliver noget forhøjet, leukocytformel viser lymfocytose og monocytose. Blodplader er på niveauet 200-300x10 9 /l.

Årsager til afvigelser fra normen

Hovedårsagerne til dårlig blodpropper hos børn ligger i patologiske processer. Langt de fleste af dem er arvelige, på andenpladsen er det autoimmune sygdomme, læsioner af hepato-galdesystemet. Når årsagen er fundet af lægen, bør behandlingen påbegyndes med det samme.

Reduceret koagulation

Reduceret eller lav aktivitet blodkoagulationssystem forekommer i følgende patologier.

1. Hæmofili. Denne sygdom indtager en førende position i at reducere effektiviteten af ​​hæmostase. Det er forårsaget af en mangel på 8, 9, 11 blodfaktorer, der er ansvarlige for koagulering. Resultatet af dette er et fald i alle punkter i koagulogrammet. Patologi er arvelig, det påvirker hovedsageligt mænd.
2. Willebrands sygdom. Nogle læger kalder patologien pseudohæmofili. Det er mindre farlig sygdom, mens det lige ofte rammer begge køn. Karakteriseret ved næseblod, blødning fra tandkødet, kan piger opleve livmoderblødninger.
3. trombocytopeni. Den udløsende faktor er den allergiske proces som reaktion på anti-inflammatorisk terapi, kemoterapi. Behandling af sygdommen er mulig ikke kun på grundlag af hæmatologisk afdeling, men også på det allergiske hospital.
4. Overdosis lægemidler. En af de mest almindelige årsager krænkelser af hæmostasesystemet. Her spiller stoffer som paracetamol eller aspirinholdige stoffer en rolle. Der er et fald i niveauet af blodplader, erytrocytter. Tilstanden manifesteres af subkutane blødninger, blødning af organer mavetarmkanalen. Hvis du ikke holder op med at tage disse stoffer, er blødninger i hjernen mulige, op til døden.
5. Leverdysfunktion. De fører til sygdomme som hepatitis, cirrose, som ikke kun forekommer hos voksne. Nedsat produktion af hepatiske koagulationsfaktorer.
6. DIC betragtes som en ekstrem farlig tilstand. Med det reduceres indflydelsen af ​​alle blodkoagulationsfaktorer, nogle gange er den helt fraværende. Denne patologi udvikler sig på baggrund af alvorlige infektiøse processer, blødning, kirurgiske indgreb, forbrændinger eller traumatiske skader.

Øget koagulering

Øget blodpropper hos børn er arvelig patologi. Oftere end andre forekommer trombose i følgende patologier.

1. Antiphospholipid syndrom. Børns blod indeholder de såkaldte antiphospholipid-antistoffer. Kliniske manifestationer patologier svarer til tromboembolier. Kvinder lider af infertilitet på grund af, at de ikke kan føde et barn.
2. Trobofili gruppe. Disse omfatter sygdomme som Leiden-faktoren, mangel på proteiner C, S, antitrombin. Patologierne i denne gruppe inkluderer også et overskud af faktorer 8, 11, lipoprotein og hyperhomocysteinæmi. Mutationer af prothrombin er også bemærket. Alle de ovennævnte trombofile processer fører til udvikling af trombose. Det er vigtigt at bemærke, at i barndom trombose er sjælden, blødning er meget mere almindelig. For udseendet af trombotiske patologier er visse forhold nødvendige - alvorlige patologier, alvorlig fysisk inaktivitet eller sengeleje, regelmæssige punkteringer af venerne.
3. Ondartede neoplasmer.
4. Sygdomme i venerne.

Med de pårørendes død fra trombotiske processer er der stor sandsynlighed for, at barnet arver muterede eller patologiske gener.

Hvilke tests udføres til barnet for at opdage patologi

Medicinske arbejdere udviklet en imponerende liste over tests, der skal udføres med dårlig koagulation. Alle ordineres efter samråd med en læge. Det menes, at hovedundersøgelsen er en blodprøve for evnen til at danne blodpropper, som kaldes et koagulogram. Det inkluderer mange indikatorer, men læger tager højde for varigheden og tidspunktet for blodkoagulation, blodpladeniveauer, INR. Prothrombin, thrombin, fibrinogen er også en vigtig del af analysen.

Fortolkning af resultater og deres kliniske betydning

Blodpladetælling er den nemmeste manipulation. Normen for nyfødte er 100-400x10 9 / l, men over tid indsnævres og falder grænserne for normen. Op til et år -150-350x10 9 / l, efter et år er normen den samme som hos voksne - 180-360x10 9 / l.

Med et fald under normen, bemærker lægerne høj risiko blødning, og med et udtalt fald er det ekstremt svært at stoppe blødningen uden intravenøs infusion blodplademasse.

Koagulationstiden anses også for tilstrækkelig informativ metode. Normalt er blødningens varighed 2-4 minutter, og tiden for koageldannelse er 2-5 minutter. Hvis de opnåede resultater ikke passer ind i rammerne angivet af laboratorierne, skal lægen udpege yderligere undersøgelse at finde ud af årsagerne til denne situation.

Protrombintid og protrombinindeks giver lægen information om tidlige stadier hæmostasesystemets funktion. Udførelse af disse test hjælper med at opdage DIC eller hæmofili. Normale værdier for alle aldersgrupper i gennemsnit svinger mellem 11 og 15 sekunder.

Introduceret for første gang

ægte monografi gælder for humant blodkoagulationsfaktor IX-præparater afledt af humant plasma til fraktionering.

Human blodkoagulationsfaktor IX er et præparat af en proteinfraktion af humant blod opnået fra plasma til fraktionering ved en metode, der effektivt adskiller faktor IX fra andre faktorer i prothrombinkomplekset (II, VII, X).

Lægemidlets aktivitet efter rekonstitution under de betingelser, der er angivet på etiketten, skal være mindst 20 IE faktor IX i 1 ml.

PRODUKTION

Til fremstilling af humane blodkoagulationsfaktor IX-præparater anvendes blodplasma fra raske donorer, der opfylder kravene.

Produktionsteknologien omfatter stadierne af fjernelse eller inaktivering smitsomme stoffer. Hvis kemiske forbindelser anvendes i produktionen til at inaktivere vira, bør deres koncentration reduceres til et niveau, der ikke påvirker lægemidlets sikkerhed for patienter.

Lægemidlet kan indeholde stabilisatorer (albumin, antithrombin III, polysorbat-80, natriumchlorid, natriumcitrat, glycin osv.). Specifik aktivitet (mindst 50 IE/mg totalt protein) bestemmes før tilsætning af stabiliserende protein.

Der anvendes ingen antimikrobielle konserveringsmidler i fremstillingsprocessen. Lægemiddelopløsningen pakkes aseptisk i primær emballage ved steriliseringsfiltrering, lyofiliseres og forsegles under vakuum eller i en inert gasatmosfære.

PRØVER

Beskrivelse

Hvidt eller bleggult pulver eller luftigt fast stof (hvis normativ dokumentation ingen andre instruktioner). Bestemmelsen udføres visuelt.

Autenticitet

artsspecificitet

Bekræft ved tilstedeværelsen af ​​kun humane serumproteiner. Testen udføres ved gelimmunoelektroforese under anvendelse af sera mod humane serumproteiner, store kvæg, heste og grise iflg. Det er tilladt at udføre en gel immundiffusionstest iht. Som et resultat af testen bør der påvises udfældningslinjer med kun serum mod humane serumproteiner.

Faktor IX

Bekræft ved tilstedeværelsen af ​​faktor IX-aktivitet. Bestemmelsen udføres ved den koagulometriske eller kromogene metode iht.

Tid til at modtage rekonstitueret lægemiddel

Ikke mere end 10 minutter (hvis der ikke er andre indikationer i den lovgivningsmæssige dokumentation). En beskrivelse af proceduren er givet med angivelse af det anvendte opløsningsmiddel, dets volumen og opløsningsbetingelser (opløsningsmiddeltemperatur, behov for blanding osv.).

Vand

Ikke mere end 2 %. Bestemmelsen udføres efter K. Fischer-metoden i overensstemmelse med (hvis der ikke er andre anvisninger i den forskriftsmæssige dokumentation). Bestemmelsesmetoden og mængden af ​​prøve, der kræves til testning, er angivet i den lovpligtige dokumentation.

Mekaniske indeslutninger

Synlige mekaniske indeslutninger bør være fraværende. Fastsættelsen udføres iht. Den lovgivningsmæssige dokumentation angiver navnet på opløsningsmidlet, beskriver genvindingsmetoden og (om nødvendigt) fremstilling af præparatet.

pH

Fra 6,5 ​​til 7,5. Bestemmelsen udføres ved den potentiometriske metode iht.

Osmolalitet

Ikke mindre end 240 mOsm/kg. Fastsættelsen udføres iht.

Protein

Det kvantitative indhold af protein pr. hætteglas eller ml af den rekonstituerede opløsning er angivet i den lovpligtige dokumentation. Definitionen er gennemført passende metode i overensstemmelse med .

koagulationsfaktor aktivitetIX

Aktiviteten af ​​blodkoagulationsfaktor IX pr. hætteglas eller ml af den rekonstituerede opløsning er angivet i den regulatoriske dokumentation. Bestemmelsen udføres ved den kromogene eller koagulometriske metode iht.

Aktiverede koagulationsfaktorer

Koagulationstiden for fortyndinger af lægemidlet 1:10 og 1:100 skal være mindst 150 s. Bestemmelsen udføres ved koagulometrisk metode iht.

Stabilisator(er)

Kvantitativ bestemmelse af den eller de stabilisatorer, der er indført i præparatet, udføres i overensstemmelse med og/eller, hvis der ikke er andre indikationer i den forskriftsmæssige dokumentation.

Den tilladte grænse for indholdet af stabilisatoren/stabilisatorerne skal angives i den forskriftsmæssige dokumentation.

Virusinaktiverende midler

Foretag en kvantitativ bestemmelse af restindholdet af det eller de virusinaktiverende midler i præparatet i overensstemmelse med og/eller, hvis der ikke er andre indikationer i den lovpligtige dokumentation. Den tilladte grænse for indholdet af det eller de virusinaktiverende midler bør angives i den lovgivningsmæssige dokumentation.

Sterilitet

Lægemidlet skal være sterilt. Testen udføres iht.

Pyrogenicitet eller bakterielle endotoksiner

Skal være pyrogenfri eller indeholde bakterielle endotoksiner i en mængde, der ikke overstiger 0,03 EU pr. 1 IE blodkoagulationsfaktor IX.

Testen udføres i overensstemmelse med (mindst 50 IE blodkoagulationsfaktor IX pr. 1 kg dyrevægt) eller i overensstemmelse med den metode, der er specificeret i den lovgivningsmæssige dokumentation.

Virussikkerhed

Hepatitis B overfladeantigen (HBsAg)

Lægemidlet må ikke indeholde overfladeantigen hepatitis B-virus. Bestemmelsen udføres enzymimmunoassay ved at bruge testsystemer, der er godkendt til brug i sundhedsvæsenet i Rusland og med en følsomhed på mindst 0,1 IE/ml i overensstemmelse med brugsanvisningen.

Antistoffer mod hepatitis C-virus

Antistoffer mod hepatitis C-virus bør være fraværende. Bestemmelsen udføres ved enzymimmunoassay ved hjælp af testsystemer, der er godkendt til brug i russisk sundhedspraksis og med 100 % sensitivitet og specificitet i overensstemmelse med brugsanvisningen.

Antistoffer mod humant immundefektvirus (HIV-1 og HIV-2)og HIV-1 p24-antigen

Lægemidlet bør ikke indeholde antistoffer mod det humane immundefektvirus (HIV-1 og HIV-2) og HIV-1 p24-antigenet. Bestemmelsen udføres ved enzymimmunoassay ved hjælp af testsystemer, der er godkendt til brug i russisk sundhedspraksis og med 100 % sensitivitet og specificitet i overensstemmelse med brugsanvisningen.

Pakkeog mærkning

I overensstemmelse med OFS " Medicin fra humant blodplasma.

x sår

Opbevares på et sted beskyttet mod lys ved en temperatur på 2 til 8 ° C, medmindre andet er angivet i den lovgivningsmæssige dokumentation.